豐香草莓葉片離體再生不定芽的研究

摘要：本試驗以豐香草莓組培苗葉片為試材，研究了離體再生過程中激素配比、葉齡、放置方式、暗培養(yǎng)等對不定芽再生效率的影響。

關鍵詞：草莓；葉片離體再生；不定芽

中圖分類號：S668.4 文獻標識碼：A 文章編號：1674-0432（2012）-12-0037-1

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料為MS培養(yǎng)基上生長健壯、大小一致的繼代試管苗，品種為豐香。選取株高3～4cm的無菌苗上剛展開的幼嫩葉片制備外植體。

1.2 接種方法

將葉片剪成3～4mm寬的小條作為外植體。每瓶接8個外植體，每個處理3瓶，2次重復。

1.3 培養(yǎng)條件

培養(yǎng)溫度25℃，光照強度2000Lux，光周期12h/d條件下。

2 調(diào)查內(nèi)容與結果分析

2.1 培養(yǎng)基中激素的影響

培養(yǎng)基中的激素種類和濃度是影響葉片再生的重要因子，為了篩選適宜的激素濃度和配比，本實驗以MS為基本培養(yǎng)基，附加4類激素組合，即6-BA分別與IBA和NAA，TDZ分別與IBA和NAA。

2.1.1 6-BA 為主要細胞分裂素對葉片再生的影響 培養(yǎng)基中6-BA濃度在0.5～2.0mg·L-1的范圍內(nèi)，草莓葉片的再生芽數(shù)隨著6-BA濃度的增加而增多，且再生頻率也隨著6-BA濃度增加而增加（附表略）。生長素中IBA對草莓再生不定芽的效果要好于NAA。綜合看來，2.0mg·L-1 6-BA與0.2mg·L-1IBA組合，再生效果均最好。

2.1.2 TDZ為主要細胞分裂素對葉片再生的影響 將葉片接種在含有不同濃度TDZ的MS培養(yǎng)基上，試驗結果（附表略）表明：隨著TDZ濃度的增加，再生頻率及每個外植體平均再生芽數(shù)均有提高的趨勢；但隨著TDZ濃度都增加，玻璃化現(xiàn)象也開始嚴重?？傮w來看，1.5mg·L-1 TDZ與0.2、0.4mg·L-1 IBA組合都效果最好。

在以TDZ為主要細胞分裂素的培養(yǎng)基上，草莓葉片的再生頻率最高可達98.66%，再生芽數(shù)最高可達到10.84，表明用TDZ代替6-BA能夠明顯提高草莓葉片再生不定芽的效率。

2.2 不同葉齡的影響

分別選取0、20、30及40d葉齡的葉片，接種培養(yǎng)50d后進行觀察。結果表明（表1）葉齡對不定芽誘導有明顯影響。葉齡在30d時，葉片再生能力最強，葉片再生頻率最高，在60%以上。當葉齡超過30d，再生率開始下降，大部分外植體，逐漸黃化變黑，乃至枯死。

2.3 葉片不同放置方式的影響

設置葉片正面和反面接觸培養(yǎng)基兩個處理，兩種方式的再生頻率分別為60.42%和75%，而兩處理外植體的再生芽分別平均為4.31顆和4.39顆，草莓的葉片再生培養(yǎng)以葉正面向上放置為好。

2.4 暗培養(yǎng)的影響

本試驗對外植體分別進行0、7、14、21d的暗培養(yǎng)，從表2中可以看出，草莓葉片材料經(jīng)暗培養(yǎng)處理后再置于光下培養(yǎng)，隨著暗培養(yǎng)時間的增加，不定芽的再生率和再生芽數(shù)逐漸提高，暗培養(yǎng)21d，有利于葉片不定芽分化。

作者簡介：馮波（1974-），男，遼寧阜新人，阜新市農(nóng)業(yè)廣播電視學校高級農(nóng)藝師，研究方向：農(nóng)業(yè)。