百里香揮發(fā)油的提取及應(yīng)用研究

摘要：文章以百里香為材料，采用水蒸氣蒸餾法提取百里香揮發(fā)油，并對其揮發(fā)油的主要應(yīng)用進行研究。在提取揮發(fā)油的過程中分別考察了蒸餾時間和加水量兩種因素對揮發(fā)油提取率的影響。然后在接種了大腸桿菌的平板中分別放入沾了四個不同濃度揮發(fā)油和無菌水的濾紙片，放置在30℃溫箱中培養(yǎng)24小時。實驗證明，百里香揮發(fā)油對大腸桿菌具有抑菌作用。

關(guān)鍵詞：百里香揮發(fā)油；水蒸氣蒸餾法；抑菌性

中圖分類號：TQ461 文獻標識碼：A 文章編號：1674-0432（2012）-12-0033-1

百里香屬唇形科，是常用中藥，傳統(tǒng)藥理認為百里香具有抗菌、抗痙攣、抗昆蟲毒液、殺菌、強身、促結(jié)疤的作用。百里香含揮發(fā)油含量高，品質(zhì)優(yōu)，在醫(yī)藥、食品加工、精細化工及日常生活中被廣泛應(yīng)用[1]。本實驗采用水蒸氣蒸餾法從百里香中提取揮發(fā)油[2]，分別考察了蒸餾時間和加水量兩種因素對揮發(fā)油提取率的影響，并進行了體外抑菌作用的研究[3]。

1 材料與方法

1.1 材料

百里香、大腸桿菌、濾紙。藥品：蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉、瓊脂、無水乙醇等。儀器：恒溫水浴鍋、高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫振蕩培養(yǎng)箱等。

1.2 實驗方法

1.2.1 百里香揮發(fā)油的提取 分別取經(jīng)粉碎、過40目篩后的百里香樣品，稱取50g，設(shè)蒸餾時間分別為150min、180min、210 min、240min和270min。而加水量分別為250mL、300mL、500mL、600ml，各進行重復試驗，觀察結(jié)果并記錄[5]。

1.2.2 接種培養(yǎng)基的制備 將保存的大腸桿菌置于30℃溫箱中培養(yǎng)1天，在超凈臺里將菌種試管斜面注入適量無菌水（約5mL），接種環(huán)輕刮菌落，搖晃混勻制成菌懸液，分別用移液器取0.1mL菌懸液注入平板，用三角耙涂布均勻，涂三個平板，放入30℃溫箱中，2天后觀察是否有菌落生長。

1.2.3 濾紙片實驗法 由于百里香揮發(fā)油難溶于水，故先用無水乙醇按照1：1的比例稀釋后，再用無菌水依次稀釋成濃度為5%、2.5%、1.25%、0.625%，備用。分別配置不同濃度的乙醇溶液作為對照，在超凈工作臺里將平板劃分成五個區(qū)，每兩張濾紙片（直徑0.6cm）為一帖，用鑷子夾著濾紙片在不同濃度的揮發(fā)油中和無菌水中輕輕粘一下后，取出貼在平板的指定位置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30℃，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 出油率按以下公式計算：出油率（%）=揮發(fā)油得率/供試品量×100%，重復測定3次取其平均值。計算公式：生長率=（對照組菌落直徑-給藥組菌落內(nèi)徑）/對照組菌落直徑×100%，抑制率=1-生長率

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蒸餾時間對揮發(fā)油的提取結(jié)果

由表1可知，蒸餾時間為210分鐘時出油率最高。所以確定最佳蒸餾時間為210min。

2.2 不同加水量對揮發(fā)油的提取結(jié)果

由表2可看出，百里香揮發(fā)油出油率的多少與加水量有很大的關(guān)系。若投料量為50克時，加水量以10倍左右出油率最高。

2.3 百里香揮發(fā)油對大腸桿菌的抑菌作用

由表3可看出，接有大腸桿菌的實驗組培養(yǎng)基中都產(chǎn)生了抑菌圈且直徑隨揮發(fā)油濃度的增加而增大。

3 討論

本實驗通過采用水蒸氣提取法對百里香揮發(fā)油進行提取，操作簡便安全，而且不污染環(huán)境[9]。提取揮發(fā)油時，不同的外界因素，如提取過程中投料量、加水量及蒸餾時間等對揮發(fā)油的提取都有很大的影響。多次的實驗結(jié)果證明：百里香揮發(fā)油提取時，最佳的加水量應(yīng)為投料量的10倍左右，最佳蒸餾時間為210分鐘。通過抑菌試驗表明，百里香對大腸桿菌具有抑制性且抑菌圈直徑的大小隨著百里香揮發(fā)油濃度的提高而增大。

參考文獻

[1] 彭夢俠，劉小玲，黃思敏，陳惠.水蒸氣蒸餾實驗的改進.嘉應(yīng)學院化學與環(huán)境學院，2009，13（6）.

[2] 謝捷，曹銘希，朱興一，王平.閃式輔助水蒸氣蒸餾提取陳皮揮發(fā)油工藝的優(yōu)化研究.浙江工業(yè)大學藥學院制藥工程教育部重點實驗室，2008.

[3] 劉曉輝.四種香料植物揮發(fā)油的提取及應(yīng)用研究[碩士學位論文].吉林農(nóng)業(yè)大學，2008.

[4] 張抒.百里香精油成分含量及組分的比較研究.東北林業(yè)大學園林植物與觀賞園藝，2007.

[5] 趙秋堂，施健，丁亞明.玫瑰精油的實驗提取.無錫衛(wèi)生高等職業(yè)技術(shù)學院，2010.

作者介紹：王紅濤（1981-），女，吉林白山人，通化師范學院生命科學學院助教，研究方向：分子生物學、蛋白質(zhì)與基因工程、環(huán)境微生物學研究。