HS-SPME／GC-MS法分析黑莓（薩尼）果實(shí)中揮發(fā)性成分

王佳佳，王金梅，陳 龍，許啟泰，康文藝

（河南大學(xué) 中藥研究所，河南 開封475004）

黑莓（Rubus spp.blackberry）屬于薔薇科（Rasaceae）懸鉤子屬聚合果類植物，其果實(shí)含有大量的維生素C、維生素E、SOD等物質(zhì)，有改善人體新陳代謝、清除自由基、延緩衰老、增強(qiáng)免疫力等功能，特別具有降低血液中膽血固醇含量、防治心臟疾病、抗癌（降低化療引起的毒副作用）和抗血栓的功效［1－5］。果實(shí)除鮮食外大部分制成速凍果實(shí)、果汁、果酒和果醬等食品，是國內(nèi)近年興起的第三代水果之一［6］。

國外對(duì)黑莓揮發(fā)物的研究較早［7］，而國內(nèi)的研究報(bào)道較少。李維林等［8］在1998年采用水蒸氣蒸餾和乙醚萃取法提取黑莓果實(shí)中的揮發(fā)油，經(jīng)氣質(zhì)聯(lián)用分離和鑒定黑莓果實(shí)揮發(fā)性成分主要是烯烴類物質(zhì)。邊磊等［4］在2010年采用頂空固相微萃取與氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)黑莓品種寶森與赫爾成熟果實(shí)的香氣成分進(jìn)行分析。但不同品種和地域的黑莓香氣成分有差異，且國內(nèi)外未見對(duì)黑莓品種薩尼（Shawnee）果實(shí)揮發(fā)性成分的研究，為此我們利用該技術(shù)對(duì)來源于河南省封丘縣的黑莓品種薩尼果實(shí)揮發(fā)性成分進(jìn)行研究。

1 儀器與材料

美國安捷倫公司GC6890NGC-5975MS氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀；美國Supelco公司手動(dòng)固相微萃?。⊿PME）裝置，萃取頭為100μm 聚二甲基硅氧烷（PDMS-DVB）；C6～C26正構(gòu)烷烴（Alfa Aesar）。

黑莓（薩尼）采集于河南省新鄉(xiāng)市封丘縣，由河南大學(xué)中藥研究所生藥教研室李昌勤副教授鑒定為黑莓（薩尼）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

先將SPME的萃取纖維頭在氣相色譜的進(jìn)樣口老化10min，老化溫度為250℃，載氣體積流量為1.0mL／min。取20℃左右3mL樣品，置于5mL進(jìn)樣瓶中，插入100μm PDMS-DVB萃取纖維頭，于50℃下頂空取樣30min，取出后立即插入色譜儀進(jìn)樣口（溫度250℃）脫附1min。

3 GC-MS分析條件

氣相色譜條件：HP-5MS石英彈性毛細(xì)管柱（0.25μm×250μm，30.0m）；載 氣 為 高 純 氦 氣（99.999%）；流速1.0mL／min；進(jìn)樣口溫度250℃；色譜柱初始溫度50℃（保持2.0min），以4℃／min升溫至120℃（保持2min），最后以6℃／min升溫至230℃（保持5min）；分流進(jìn)樣，分離比為10∶1。

質(zhì)譜條件：電離源為EI，電離能量70eV；離子源溫度為230℃；四極桿溫度150℃；傳輸線溫度為280℃；電子倍增器電壓1 588V；質(zhì)量掃描范圍m／z30～400，譜圖檢索采用 RTLPEST3.L 和NIST05.L進(jìn)行檢索。

4 保留指數(shù)測(cè)定

按照文獻(xiàn)［9－10］，將色譜正構(gòu)烷烴樣品（C6～C26）各取等量混合后，按上述GC-MS條件進(jìn)行色譜分析，測(cè)定各正構(gòu)烷烴的保留時(shí)間，再在完全相同的條件下，對(duì)樣品進(jìn)行分析，測(cè)定各組分的保留時(shí)間，計(jì)算出各組分的Kovats保留指數(shù)。KI＝100n＋100［tR（x）－tR（n）］／［tR（n＋1）－tR（n）］，式中，KI 為Kovats保留指數(shù)；tR為被測(cè)組分的保留時(shí)間；下標(biāo)x為被測(cè)組分符號(hào)；下標(biāo)n和n＋1為分別具有n和n＋1個(gè)碳原子的正構(gòu)烷烴符號(hào)；且tR（n＋1）＞tR（x）＞tR（n）。

5 結(jié)果與討論

5.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

HS-SPME／GC-MS法從黑莓（薩尼）果實(shí)中鑒定出23種揮發(fā)性成分，相對(duì)含量占揮發(fā)性成分總峰面積的77.78%。具體結(jié)果見表1。

表1 黑莓果實(shí)的揮發(fā)性成分及相對(duì)百分含量

5.2 實(shí)驗(yàn)討論

結(jié)果顯示，黑莓（薩尼）果實(shí)中共鑒定出23種揮發(fā)性成分，相對(duì)含量占揮發(fā)性成分總峰面積的77.78%。主要揮發(fā)性成分為2－庚醇、α，α，4-三甲基苯甲醇、1-（1-丁炔）環(huán)戊醇、4-甲基-1-（1-甲基乙基）-3-環(huán)己烯-1-醇等醇類成分，此外還有（1S）-α－蒎烯、壬醛、乙酸乙酯、9-乙基十六碳烯酸酯等烯類、醛類、酯類成分，這些成分是該黑莓品種中的主要香氣成分。與邊磊等在2010年采用頂空固相微萃取與氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)黑莓品種寶森與赫爾成熟果實(shí)的香氣成分分析對(duì)比可知，2-庚醇、乙酸乙酯、己醛為3種黑莓共有的香氣成分，但3個(gè)黑莓品種的主要香氣成分存在差異，寶森品種為芳樟醇、2-庚醇、α－松油醇、甲酸己酯、2－己醇等，赫爾品種為2－庚醇、甲酸己酯、乙酸乙酯、己醛、丁酸乙酯等，可見不同黑莓品種揮發(fā)性成分差別較大。

［1］Turemis N，Kafkas E，Kafkas S，et al.Determination of Aroma Compounds In Blackberry by GC／MS Analysis［J］.Chemistry of Natural Compounds，2003，39（2）：174－176.

［2］吳文龍，顧姻.新經(jīng)濟(jì)植物黑莓的引種［J］.植物資源與環(huán)境，1994，3（3）：45－48.

［3］王學(xué)勇，張均營.樹莓和黑莓的研究進(jìn)展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（10）：5 070－5 073.

［4］邊磊，馬永昆，沈凱嬌，等.頂空固相微萃?。瓪赓|(zhì)聯(lián)用分析黑莓的香氣成分［J］.江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2010，26（1）：178－181.

［5］宋建強(qiáng)，王華，胡勁光，等.黑莓起泡酒香氣成分的GC／MS分析研究［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2008，34（8）：145－149.

［6］劉孟軍.中國野生果樹［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998：227－231.

［7］Georgilopoulos D N，Gallois A N.Aroma compounds of fresh blackberries（Rubus laciniata L.）［J］.Z Lebensm Unters Forsch，1987，184（5）：374－380.

［8］李維林，賀善安，顧姻，等.黑莓果實(shí)揮發(fā)油化學(xué)成分的研究［J］.中國藥學(xué)雜志，1998，33（6）：335－336.

［9］KANG W Y，JI Z Q，WANG J M.Composition of the essential oil of Adiantum flabellulatum ［J］.Chem Nat Compd，2009，45（4）：575－577.

［10］田璞玉，顧雪竹，王金梅，等.HS-SPME-GC-MS分析茸毛木藍(lán)地上部分和根揮發(fā)性成分 ［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（6）：86－88.