膽木總生物堿提取工藝研究

楊衛(wèi)麗 賴偉勇 高靖淋 劉俠

[摘要] 目的 探討膽木總生物堿的提取分離方法。 方法 采用單因素考察法，對提取溶劑、提取時間、提取方法、提取溶液濃度及物料比進行考察。 結(jié)果 最終確定提取工藝為：70%乙醇回流40 min，料液比為100∶1，提取率4.17%。 結(jié)論 該方法分離總生物堿是一種經(jīng)濟簡便、效率較高的方法。

[關(guān)鍵詞] 膽木；總生物堿；提取工藝

[中圖分類號] R917???[文獻標識碼] A???[文章編號] 2095-0616（2012）15-35-02

Study on the extraction of total alkaloids from nauclea officinalis

YANG?Weili??LAI?Weiyong??GAO?Jinglin??LIU?Xia

Department of Pharmacy, Hainan Medical College, Key Laboratory of Hainan Institute for Research and Development of Topical Plant Medical,Haikou 571101,China

[Abstract] Objective To establish a method for the extraction, separation of the total alkaloids from Nauclea officinalis. Methods Using single factor method to investigate the extraction solvent, extraction time,extraction method, concentration of the solution and so on. Results The extraction process as follows:70% ethanol backward flowing for 40 minutes, liquid ratio is 100∶1.The extraction rate is 4.17%. Conclusion The methods of extraction of alkaloids with alcohol are economy, convenient and highly efficient.

[Key words] Nauclea officinalis;Total alkaloids;Extraction

膽木（Nauclea officinalis Pierre ex Pitard）又名烏檀、藥烏檀、黃羊木，性味苦、寒，具有清熱解毒、消腫止痛之功效[1]。用于感冒發(fā)熱、急性扁桃體炎、咽喉炎、支氣管炎、肺炎、泌尿系感染、腸炎、痢疾、膽囊炎；外用治乳腺炎、癰癤膿腫。膽木的主要成份為吲哚類生物堿[2-3]。本研究采用單因素考察法對其所含的總生物堿提取工藝進行考察，確定了其最佳提取工藝。

1?儀器與試藥

1.1?儀器

HH-W420三用恒溫水浴箱；賽多利斯BS210電子天平。

1.2?試藥

膽木采于海南省五指山地區(qū)，由興隆植物所李榮濤鑒定。甲醇、無水乙醇、三氯甲烷、乙酸乙酯均為分析純，蒸餾水自制。

2?提取工藝考察

2.1?提取溶劑的考察

精密稱取5 g干燥至恒重的膽木樣品粉末6份，分別加70%乙醇、氯仿、甲醇溶液100 mL，密封，稱量，超聲提取1 h，放涼，用各自的溶劑補足失重，將提取的溶液過濾，收集濾液?；厥?，稱重，計算浸膏量。見表1。

2.2?提取方法的考察

精密稱定5 g樣品粉末6份，分別加入70%乙醇溶液500 mL，稱重，超聲，回流和冷浸提取40 min。放涼，補足失重，搖勻，靜置。吸取上清液于222 nm波長下測定其吸光度值，計算膽木總生物堿含量。見表2。

2.3?提取溶劑濃度的確定

精密稱樣品粉末8份，每份5 g，分為4組，每組2份，每組分別加入30%、50%、70%、90%的乙醇溶液各500 mL，稱重，回流提取40 min，放涼，補足失重，搖勻，靜置。吸取上清液于222 nm波長下測定其吸光度值，計算膽木總生物堿含量。見表3。

2.4?提取時間的確定

精密稱定樣品粉末10份，每份5 g，分為5組，每組2份，分別加入70%的乙醇溶液各500 mL，稱重，分別回流提取40、60、80、100、120 min，放涼，補足失重，搖勻，靜置。測定各樣品提取液在222 nm波長下的吸光度值，經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)70%乙醇回流提取40 min，提取膽木總生物堿含量較高。見圖1。

2.5?料液比的確定

精密稱定5 g樣品粉末14份，分為7組，每組2份，分別加入70%乙醇溶液250、500、750、1 000、1 250、1 500、1 750 mL，稱重，分別回流提40 min，放涼，補足失重，搖勻，靜置。分別測定各樣品提取液在222 nm波長下的吸光度值。見圖2。

2.6?樣品含量測定

精密稱取干燥至恒重的膽木樣品粉末5份，每份0.5 g，根據(jù)以上提取工藝進行提取，并測定其含量。見表4。

3?結(jié)論

根據(jù)以上實驗結(jié)果，最終確定的膽木總生物堿最佳提取工藝為：70%乙醇溶液，以100倍的料液比（0.5 g樣品50 mL乙醇），于100℃水浴回流提取40 min。并測得膽木總生物堿含量為4.17%。該提取工藝得到的生物堿提取率高、穩(wěn)定性好，可為以后的此類研究奠定基礎(chǔ)、提供依據(jù)。

本實驗同時也對樣品提取采方法進行了考察，考察了70%乙醇回流提取以及酸提堿沉法，但由于膽木內(nèi)所含的總生物堿吲哚類生物堿，分子結(jié)構(gòu)中存在苯胺型和酰胺型共軛效應(yīng)，異長春花苷內(nèi)酰胺不但沒有堿性，還呈現(xiàn)一定的酸性，因此應(yīng)用常規(guī)的酸提堿沉法無法提取得到膽木內(nèi)總生物堿，故采用了70%乙醇回流提取膽木能總生物堿。

目前有“膽木注射液”和“膽木浸膏片”兩種制劑，臨床用于急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性結(jié)膜炎及上呼吸道感染，療效確切[4-5]。本實驗的研究有助于對膽木有效部位的進一步研究，為以后的研究提供依據(jù)。

[參考文獻]

[1] 國家中醫(yī)藥管理局.中華本草[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1998：417.

[2] 宣偉東，卞俊，陳海生.中藥膽木的化學(xué)成分[J].中國天然藥物，2005，5 （3）：3.

[3] 宣偉東，卞俊，陳海生.大孔樹脂法分離純化膽木中短小蛇根草苷[J].中藥材，2007，10（10）：30.

[4] 李備，朱毅，鄭霞，等.膽木注射液的部分毒理觀察[J].中國新藥與臨床雜志，2007，10（10）：740.

[5] 韓振新.膽木注射液治療小兒急性上呼吸道感染觀察[J].實用中醫(yī)藥雜志，2004，12（20）：701.

（收稿日期：2012-05-24）