乙酰甲胺磷及代謝物在銀耳及培養(yǎng)料中消解殘留規(guī)律*

秦福龍 ，蔡春平，王 琪，王 華，藍(lán)錦昌

(1.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；2.福建出入境檢驗(yàn)檢疫局，福建 福州 350001)

自2007年1月1日起，我國全面禁止使用甲胺磷等5種高毒有機(jī)磷農(nóng)藥，乙酰甲胺磷作為高毒農(nóng)藥的替代品種，在農(nóng)業(yè)種植過程中廣泛使用。乙酰甲胺磷是一種高效、低毒、內(nèi)吸、廣譜的有機(jī)磷類殺蟲劑，具有胃毒和觸殺作用，有-定的熏蒸作用，是緩效型殺蟲劑。但使用乙酰甲胺磷會(huì)產(chǎn)生甲胺磷殘留的風(fēng)險(xiǎn)。這是因?yàn)閲倚袠I(yè)標(biāo)準(zhǔn)允許乙酰甲胺磷原藥中含有一定量的雜質(zhì)甲胺磷；乙酰甲胺磷在貯存過程中也會(huì)產(chǎn)生甲胺磷[2-3]；國內(nèi)外許多相關(guān)研究也表明：乙酰甲胺磷在蔬菜、水果、谷物等栽培過程會(huì)代謝產(chǎn)生甲胺磷[4-7]。

1 材料與方法

1.1 田間試驗(yàn)材料

1.1.1 供試農(nóng)藥：40%乙酰甲胺磷乳油 （浙江嘉化集團(tuán)股份有限公司）；

1.1.2 施藥器械：工農(nóng)-16型背負(fù)式噴霧器；

1.1.3 試驗(yàn)時(shí)間及地點(diǎn)：2011年4月~5月，福建古田縣鳳埔鄉(xiāng)極樂村益泰隆食品公司食用菌基地；

1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)

我國現(xiàn)階段沒有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范銀耳栽培用藥。本試驗(yàn)的施藥劑量及施藥方式參考農(nóng)戶實(shí)際栽培用藥情況并結(jié)合農(nóng)藥的使用說明以及GB 4285-1989《農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的乙酰甲胺磷在青菜和白菜上的安全使用標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.1 農(nóng)藥在銀耳子實(shí)體上的消解規(guī)律

處理一：當(dāng)銀耳子實(shí)體直徑達(dá)到2 cm~4 cm時(shí)，按推薦劑量低濃度125 mL/667 m21000倍液直接對(duì)子實(shí)體均勻噴霧。共設(shè)3個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)20個(gè)菌袋。分別于施藥后2h以及 1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、19 d采集銀耳樣，采用隨機(jī)多點(diǎn)取樣法。每次250 g。儲(chǔ)存于-20℃冰箱中，待測(cè)。

處理二：菌袋擴(kuò)穴后，按推薦劑量高濃度125 mL/667m2 500倍液直接對(duì)菌袋均勻噴霧。共設(shè)三個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)20個(gè)菌袋。當(dāng)銀耳子實(shí)體直徑達(dá)到2 cm~4 cm時(shí)開始采集銀耳樣，開始采樣為第1天，分別于1 d、3d、5 d、7 d、10 d、14 d、19 d，采用隨機(jī)多點(diǎn)取樣法采樣，每次250g。儲(chǔ)存于-20℃冰箱中，待測(cè)。

1.2.2 農(nóng)藥在培養(yǎng)料中的消解規(guī)律

滅菌后的培養(yǎng)料10袋，將培養(yǎng)料倒出、平鋪約十厘米厚，按推薦劑量高濃度125 mL/667m2500倍液均勻噴霧，然后混合均勻。分別于施藥后2 h以及1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d，19 d，28 d采集培養(yǎng)料樣，每次500g。儲(chǔ)存于-20℃冰箱中，待測(cè)。

1.2.3 培養(yǎng)料經(jīng)高溫殺菌對(duì)農(nóng)藥殘留的影響

將銀耳培養(yǎng)料平鋪約10 cm厚，按推薦劑量高濃度125 mL/667m2500倍液均勻噴霧，然后混合均勻，裝袋殺菌。殺菌條件：100℃，15 h~18 h時(shí)。殺菌后直接取樣，儲(chǔ)存于-20℃冰箱中，待測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 儀器設(shè)備：Agilent 6890N氣相色譜儀，配有FPD檢測(cè)器；HY-2調(diào)速多用振蕩器，國華電器有限公司；HGC-36A氮?dú)獯蹈蓛x，天津天津市恒奧科技發(fā)展有限公司；Milli-Q System超純水制備器，美國-Milipor公司；飛鴿高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠。

1.3.2 樣品制備：按GB／T 5009.103-2003操作；

1.3.3 檢測(cè)方法：參照GB／T 5009.103-2003；

本試驗(yàn)所有檢測(cè)均在福建出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳子實(shí)體中的消解規(guī)律

2.1.1 對(duì)銀耳子實(shí)體直接施藥，乙酰甲胺磷及甲胺磷在銀耳子實(shí)體中的消解規(guī)律

乙酰甲胺磷在銀耳子實(shí)體上的原始附著量為100.43 mg·kg-1，一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程式為Ct=58.43e-0.15 t，半衰期為4.5 d，r=0.9308；甲胺磷在銀耳子實(shí)體上的原始附著量為 9.34 mg·kg-1g，一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程式為 Ct=6.43e-0.33 t，r=0.9430， 半衰期為 2.1 d。GB 4285-1989《農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，乙酰甲胺磷在蔬菜上的安全間隔期為7天，試驗(yàn)結(jié)果表明，施藥7天后乙酰甲胺磷的殘留量為17.65 mg·kg-1，采收時(shí)乙酰甲胺磷的殘留量為2.26 mg·kg-1，都遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過我國規(guī)定的乙酰甲胺磷在蔬菜上的MRL值 （0.2 mg·kg-1）；銀耳采收時(shí)甲胺磷的殘留量0.25 mg·kg-1，我國規(guī)定甲胺磷在蔬菜中不得檢出；因此，在出菇期間對(duì)銀耳子實(shí)體直接施藥，乙酰甲胺磷和甲胺磷殘留的風(fēng)險(xiǎn)大。乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳子實(shí)體中的消解曲線見圖1。

圖1 乙酰甲胺磷、甲胺磷在銀耳子實(shí)體中的消解曲線

2.1.2 菌袋擴(kuò)穴后施藥，乙酰甲胺磷及甲胺磷在銀耳子實(shí)體中消解規(guī)律，

試驗(yàn)結(jié)果表明：開始采樣時(shí)銀耳子實(shí)體中乙酰甲胺磷的原始附著量為8.05 mg·kg-1，一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程式為Ct=6.54e-0.12 t，r=0.9664，半衰期為5.6 d；甲胺磷的原始附著量為0.42 mg·kg-1，一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程式為Ct=-0.42e-0.08 t，r=0.9913，半衰期為8.9 d，與子實(shí)體直接施藥相比，乙酰甲胺磷與甲胺磷的原始附著量降低，降解半衰期增長。所以，在銀耳子實(shí)體中，乙酰甲胺磷和甲胺磷降解半衰期與其濃度成反比。銀耳采收時(shí)，乙酰甲胺磷的殘留量為0.74 mg·kg-1，超過我國規(guī)定的乙酰甲胺磷在蔬菜上的MRL值 （0.2 mg·kg-1）； 甲胺磷的殘留量為0.1 mg·kg-1，我國規(guī)范甲胺磷在蔬菜中不得檢出。因此，菌袋擴(kuò)穴后，直接對(duì)菌袋施藥，乙酰甲胺磷和甲胺磷在銀耳子實(shí)體中有殘留的風(fēng)險(xiǎn)。乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳子實(shí)體中的消解曲線見圖2。

圖2 乙酰甲胺磷、甲胺磷在銀耳子實(shí)體中的消解曲線

2.2 乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳培養(yǎng)料中的消解規(guī)律

乙酰甲胺磷在培養(yǎng)料中的原始附著量為107.13mg·kg-1，一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程式為Ct=101.66e-1.07 t，半衰期為T1／2=0.7 d，r=0.9935；施藥后2 h甲胺磷的含量為6.94 mg·kg-1，甲胺磷的一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程式為Ct=6.96e-1.10t，半衰期為0.6 d，r=0.9980。施藥28 d后乙酰甲胺磷的殘留量為1.99 mg·kg-1，甲胺磷的殘留量為0.13 mg·kg-1。菌袋擴(kuò)穴后施藥，農(nóng)藥會(huì)附著在銀耳培養(yǎng)料上。菌袋擴(kuò)穴25 d左右，銀耳采收。在銀耳采收時(shí)，附著在銀耳培養(yǎng)料中的乙酰甲胺磷與甲胺磷不能完全降解，會(huì)造成銀耳中乙酰甲胺磷和甲胺磷殘留。乙酰甲胺磷和甲胺磷在培養(yǎng)料中的消解曲線見圖3.

圖3 乙酰甲胺磷、甲胺磷在銀耳培養(yǎng)料中的消解曲線

2.3 培養(yǎng)料經(jīng)高溫殺菌對(duì)農(nóng)藥殘留的影響

對(duì)40%乙酰甲胺磷乳油進(jìn)行檢測(cè)，乙酰甲胺磷的含量為34%，甲胺磷的含量為2.6%；對(duì)農(nóng)戶裝袋前的銀耳培養(yǎng)料進(jìn)行檢測(cè)，乙酰甲胺磷、甲胺磷均未被檢出；培養(yǎng)料高濃度施藥、裝袋、高溫殺菌后，隨機(jī)抽取5袋進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如表1所示。乙酰甲胺磷未被檢出，這是因?yàn)橐阴＜装妨仔再|(zhì)不穩(wěn)定，在高溫下極易分解。由于乙酰甲胺磷原藥中含有甲胺磷，同時(shí)乙酰甲胺磷高溫分解也會(huì)產(chǎn)生甲胺磷，甲胺磷均有檢出。此時(shí)檢出的甲胺磷濃度相對(duì)較低，對(duì)銀耳中甲胺磷的最終殘留的貢獻(xiàn)可以忽略。

3 討論

3.1 乙酰甲胺磷在銀耳中消解規(guī)律的特殊性

在乙酰甲胺磷的原始附著量基本相同的情況下 （100 mg·kg-1左右），賀敏等[4]報(bào)道，乙酰甲胺磷在青油菜上降解半衰期分別為1.84 d，；尹君等[8]報(bào)道，乙酰甲胺磷在雞毛菜上降解半衰期分別為1.95 d；洪文英等[9]報(bào)道，乙酰甲胺磷在白菜中降解半衰期為2.06 d；本試驗(yàn)中乙酰甲胺磷在銀耳中的降解半衰期為4.5 d。乙酰甲胺磷在銀耳中的降解速率明顯低于其在蔬菜中的降解速率。銀耳對(duì)生長環(huán)境條件要求比較苛刻，銀耳生長所需的溫度、濕度、光照、酸堿度與蔬菜相比有很大的差異，這些環(huán)境條件都有可能影響乙酰甲胺磷的降解速率。Nannipieri等[10]報(bào)道，微生物能利用和降解農(nóng)藥。銀耳種植時(shí)，所有制種及栽培過程都要要求無菌操作，所以微生物對(duì)銀耳中乙酰甲胺磷的降解和利用率較低。Zabik等[11]報(bào)道，光解是農(nóng)藥降解的重要途徑之一。在銀耳子實(shí)體階段，只需照射一定量的散射光，而蔬菜則是強(qiáng)烈的陽光直射，所以乙酰甲胺磷在蔬菜中的光降解速率可能較銀耳中快。

3.2 乙酰甲胺磷在銀耳中的安全性評(píng)價(jià)

農(nóng)藥乙酰甲胺磷存在的問題主要是有效成分含量不足和雜質(zhì)甲胺磷超標(biāo)。有效成分含量過低，達(dá)不到預(yù)定殺蟲、殺菌等效果，農(nóng)戶因而會(huì)加大施藥量，造成甲胺磷最終殘留的風(fēng)險(xiǎn)增大。雜質(zhì)甲胺磷含量超標(biāo)，會(huì)產(chǎn)生藥害，污染環(huán)境。

表1 殺菌后培養(yǎng)料中農(nóng)藥殘留量

乙酰甲胺磷在銀耳培養(yǎng)料及銀耳子實(shí)體中會(huì)代謝產(chǎn)生甲胺磷；銀耳中乙酰甲胺磷和甲胺磷的殘留不是源于殺菌前的培養(yǎng)料；無論是菌袋擴(kuò)穴后直接對(duì)菌袋施用乙酰甲胺磷，還是出菇期間直接對(duì)銀耳子實(shí)體施用乙酰甲胺磷，銀耳中都存在乙酰甲胺磷和甲胺磷殘留超標(biāo)的風(fēng)險(xiǎn)，且后一種施藥方式乙酰甲胺磷和甲胺磷殘殘留的風(fēng)險(xiǎn)更大。

本試驗(yàn)參照國標(biāo)中蔬菜的施藥劑量及安全間隔期，并結(jié)合農(nóng)戶實(shí)際施藥情況用藥，試驗(yàn)結(jié)果表明參照蔬菜的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)施藥，產(chǎn)生農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)較大。食用菌雖然是蔬菜的一類，但其種植方式、生長環(huán)境與蔬菜差別很大，我國現(xiàn)階段沒有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范食用菌栽培用藥。施藥的種類、劑量、方式，不同的種植戶之間差異很大。所以建立相關(guān)農(nóng)藥在食用菌中的使用規(guī)范迫在眉睫。

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