HPLC法測定復(fù)方新諾明的含量

夏河山，程 萍

(鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 鄭州 450052)

復(fù)方新諾明是磺胺甲噁唑(SMZ)和甲氧芐啶(TMP)的復(fù)方制劑，為抗菌藥，臨床主要用于生殖、尿路、呼吸道、胃腸道及皮膚感染等的治療。復(fù)方磺胺甲噁唑片含量的測定方法很多，有雙波長薄層掃描法、高效毛細(xì)管電泳法、HPLC法、一階導(dǎo)數(shù)光譜法等。本文采用HPLC法對其兩種成分的含量進(jìn)行測定，結(jié)果準(zhǔn)確，方法簡便。

1 儀器與試劑

島津LC—20AB型高效液相色譜儀，AG204電子天平(瑞士METTLER—TOLEDO公司)，容量瓶，吸量管。

甲氧芐啶對照品(中國藥品生物檢定所提供);磺胺甲噁唑?qū)φ掌?中國藥品生物檢定所提供);復(fù)方磺胺甲噁唑片(吉林恒河藥業(yè)股份有限公司);輔料均為藥用;乙腈為色譜純;氫氧化鈉，鹽酸，三乙胺，試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件

色譜柱:十八烷基硅烷鍵合硅膠柱4．6mm×25cm。流動相:水—乙腈—三乙胺(799∶200∶1，配制方法:2000ml容量瓶中，加入1400ml水，400ml乙腈，2ml三乙胺，平衡至室溫，用稀冰醋酸溶液調(diào)節(jié)溶液的pH為5．9±0．1，再用水稀釋至刻度)。檢測波長:240nm，流速:1．2ml/min，柱溫:40℃，進(jìn)樣量:20μl。

首先記錄空白基線，再記錄色譜圖。基線無任何波動，理論板數(shù)按甲氧芐啶計算不低于4000，兩種成分峰分離度應(yīng)符合規(guī)定。

2．2 溶液的制備

2．2．1 對照儲備液的制備

取甲氧芐啶40mg，磺胺甲噁唑200mg，精密稱定，同置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，備用。

2．2．2 對照品溶液的配制

精密量取上述儲備液2ml，置50ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，得濃度約為0．032mg/ml的甲氧芐啶和濃度約為0．16mg/ml的磺胺甲噁唑?qū)φ掌啡芤骸?/p>

2．2．3 供試品溶液的配制

取樣品10片，精密稱定，得其平均片重，粉碎，精密稱取此粉末適量(約相當(dāng)于磺胺甲噁唑44mg)，置100ml容量瓶中，加適量甲醇，振搖，使充分溶解，再加入甲醇至刻度，搖勻，得供試品溶液。

2．3 線性關(guān)系

精密量取對照品儲備液 0．2ml、0．4ml、0．6ml、0．8ml、1．0ml，分別置 10ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，分別進(jìn)樣20μl，按上述色譜條件測定樣品峰的面積。結(jié)果表明，甲氧芐啶對照品溶液濃度在3～15μg/ml范圍內(nèi)與峰面積呈線性關(guān)系，r=0．9995;磺胺甲噁唑?qū)φ掌啡芤簼舛仍?5～75μg/ml范圍內(nèi)與峰面積呈線性關(guān)系，r=0．9993。

2．4 回收率實驗

精密稱取磺胺甲噁唑?qū)φ掌?50mg和甲氧芐啶對照品30mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別量取對照品溶液和輔料溶液(按處方量精密稱取混合輔料17．25mg，置50ml量瓶中，加甲醇適量，超過10min使溶解，加甲醇稀釋至刻度搖勻，過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得)，取0．5、1．0、1．5、2．0ml分別置 50ml量瓶中，加流動相置刻度，搖勻(每個濃度取2份)，分別進(jìn)樣20μl。另取上述對照品溶液2．5ml，置50ml量瓶中，加流動相置刻度，搖勻。作為對照品溶液，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。測定結(jié)果:磺胺甲噁唑平均回收率為 99．1%，RSD=0．58(n=8)，甲氧芐啶平均回收率為 98．9%，RSD=0．34%(n=8)。

2．5 重復(fù)性試驗

精密稱取同一批號(20090529)的樣品6份，按“2．7”項下的方法對樣品測定，結(jié)果磺胺甲噁唑與甲氧芐啶的含量平均值分別為97．4%和96．2%，RSD分別為 0．47%和 0．61%(n=6)。

2．6 穩(wěn)定性試驗

取對照品溶液與供試品溶液于室溫下立即測定與放置4、6、8、10、12、24h 測定，其峰面積幾乎無變化。對照品溶液磺胺甲噁唑峰面積的積分值的RSD為0．15%(n=6)、甲氧芐啶峰面積的積分值的RSD為0．42%(n=6)，供試品溶液磺胺甲噁唑峰面積的積分值的RSD為0．24%(n=6)、甲氧芐啶峰面積的積分值的RSD為0．49%(n=6)。說明本品的測定溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2．7 供試品測定結(jié)果

取復(fù)方磺胺甲噁唑片3批，分別進(jìn)行含量測定，測得3批樣品中甲氧芐啶的含量分別為98．7%，97．9%，99．3%;磺胺甲噁唑的含量分別為 99．8%，100．6%，99．0%。

3 討論

該法準(zhǔn)確、簡便、快速、專屬性強(qiáng)，靈敏度高，適用于復(fù)方磺胺甲噁唑片的含量測定。但在測定中配制的流動相的pH值對分離效果有一定的影響，使用前須測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值至5．9±0．1。