利濕保肝健脾湯對大鼠非酒精性脂肪肝影響的研究

王春田，李敏，李然

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽 110847)

非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一種常見的脂肪肝疾病，是指以無過量飲酒史的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞脂肪變性和脂肪貯積為特征的臨床病理綜合征［1］。隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的變化，該病的發(fā)病率逐年增加，正逐步成為我國的第一大肝病，對人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。大量研究表明，高脂肪飲食攝入過量成為誘發(fā)非酒精性脂肪肝的重要因素之一。本實(shí)驗(yàn)對利濕保肝健脾湯治療高脂飲食所致大鼠非酒精性脂肪肝的作用機(jī)理進(jìn)行了初步探討，以期為其在臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動物 健康雄性Wistar大鼠40只，由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。

1.2 藥物 利濕保肝健脾湯:白術(shù)12g，姜黃9g，橘皮12g，山楂25g，茵陳蒿 12g，柴胡 9g，澤瀉 12g等 14 味中藥購自遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥局，以傳統(tǒng)方法制成煎劑。非諾貝特膠囊(力平之，法國利博福尼制藥公司，用生理鹽水溶解制成混濁液)。

1.3 試劑 膽固醇、蛋黃粉、蔗糖、膽鹽(北京科奧協(xié)力飼料有限公司);甘油三酯(TG)檢測試劑盒、總膽固醇(TC)測定試劑盒(R＆D公司)。

1.4 儀器 離心機(jī)(C－412型，法國捷安);分光光度計(4752型，上海第三分析儀器廠);電熱恒溫培養(yǎng)箱(HHB11500型，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠);實(shí)驗(yàn)器械及其他相關(guān)試劑均由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動物分組 40只Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對照組、NAFLD模型組、利濕保肝健脾湯組、非諾貝特組，每組10只。

2.2 模型制備及給藥 空白對照組給予普通飼料和飲水，其他各組給予普通飼料的同時給予高脂飼料(10%豬油+1%膽固醇+5%蛋黃粉+5%蔗糖+0.1%膽鹽);灌胃于造模7周后，每次1ml/100g體重，每天1次。利濕保肝健脾湯組給予利濕保肝健脾湯灌胃，非諾貝特組給予非諾貝特溶液灌胃，空白對照組和NAFLD模型組給予等體積的生理鹽水灌胃，連續(xù)用藥3周。

2.3 檢測指標(biāo) 末次灌藥后各組大鼠隔夜禁食，麻醉后腹主動脈取血，取上層血清1ml，酶法檢測甘油三酯和總膽固醇的含量。各組大鼠處死后，剖開腹腔，肉眼觀察肝臟變化。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，檢測數(shù)據(jù)以(±s)表示，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用單因素方差分析的統(tǒng)計方法。

3 結(jié)果

3.1 實(shí)驗(yàn)大鼠肝臟情況 空白對照組大鼠肝臟呈紅褐色，外形正常，被膜光滑，質(zhì)地柔軟;NAFLD模型組大鼠肝臟泛黃，體積增大，質(zhì)地柔軟，切面油膩，呈奶黃色;利濕保肝健脾湯組大鼠肝臟色澤較暗，表面光滑，質(zhì)地柔軟，無明顯腫大，切面無明顯油膩;非諾貝特組大鼠肝臟色澤較暗，邊緣鈍圓，表面光滑，質(zhì)地柔軟，有輕微腫大，切面無明顯油膩。

3.2 血脂含量的變化 見表1。

表1 各組大鼠TG和TC含量的比較(mmol/l，±s)

表1 各組大鼠TG和TC含量的比較(mmol/l，±s)

注:與空白對照組比較，▲P＜0.01;與NAFLD模型組比較，★P＜0.05;與非諾貝特組比較，△P ＜0.05。

空白對照組10 1.49 ±0.14 1.58 ±0.15 NAFLD 模型組 10 3.44±0.28▲ 3.04±0.46▲利濕保肝健脾湯組 10 1.56±0.35★△ 1.73±0.30★非諾貝特組 10 1.74 ±0.40★ 1.81 ±0.32★

從表1可以看出，與空白對照組比較，NAFLD模型組TG、TC含量均顯著升高(P＜0.01)，表明高脂飲食所致大鼠非酒精性脂肪肝模型成立;與NAFLD模型組比較，利濕保肝健脾湯組及非諾貝特組TG、TC含量均明顯降低(P＜0.05)，與非諾貝特組比較，利濕保肝健脾湯能有效降低TG含量(P＜0.05)。

4 討論

中醫(yī)學(xué)將脂肪肝歸屬于“積聚”、“脅痛”、“痰濁”、“濕阻”、“肥氣病”等范疇，本病多因飲食不節(jié)，起居無常、情志失暢等導(dǎo)致肝失疏泄、脾失健運(yùn)，而致肝郁脾虛、濕結(jié)痰凝、瘀阻血絡(luò)［2－3］，治療上多以健脾化濕、疏肝理氣、活血化瘀、補(bǔ)益肝腎、消積導(dǎo)滯為原則［4］，利濕保肝健脾湯正是根據(jù)此理論組方。方中白術(shù)健脾益氣，燥濕利尿，保肝利膽;橘皮理氣健脾，燥濕化痰，利膽、降膽固醇;姜黃活血行氣降脂;柴胡疏肝解郁，保肝利膽，降膽固醇;澤瀉利水滲濕，抗脂肪肝;大黃逐瘀通經(jīng)，降膽固醇;蒲公英、茵陳蒿、梔子利濕通淋，保肝利膽;酸棗仁養(yǎng)心益肝，降血脂;山楂消食化積，促進(jìn)脂肪消化，降血脂。諸藥合用，共奏利濕保肝健脾之功。

本實(shí)驗(yàn)采用高脂飲食的方法建立大鼠非酒精性脂肪肝動物模型，并應(yīng)用利濕保肝健脾湯對其進(jìn)行治療。結(jié)果顯示，利濕保肝健脾湯能夠降低模型大鼠血脂水平，改善肝功能，減輕脂肪肝的程度，證實(shí)了該方在治療非酒精性脂肪肝方面有著確切的療效。

［1］王俊麗，劉汶.非酒精性脂肪肝病中醫(yī)藥研究現(xiàn)狀［J］.北京中醫(yī)藥，2010，29(1):72－75.

［2］付之光，王巖.速效消脂湯治療脂肪肝的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報，2009，37(2):10－12.

［3］謝晶日，王海強(qiáng)，李賀薇.保肝消脂顆粒對非酒精性脂肪肝大鼠肝組織SREBP－1 SREBP－2的影響［J］.中醫(yī)藥學(xué)報，2011，39(4):34－35.

［4］宓余強(qiáng)，曹武奎，徐亮，等.健肝降脂丸治療非酒精性脂肪肝臨床療效研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2010，37(1):97－100.