李丹,鄒偉,王瓏,孫曉偉,滕偉
(1.北京中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院,北京 100029;2.黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150040)
腦出血是常見病、多發(fā)病,是嚴重威脅著人類的生活質(zhì)量和健康的一類疾病。本實驗的研究從針刺調(diào)控內(nèi)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達,探討針刺促進神經(jīng)修復的腦保護作用機制。本研究探討針刺對腦出血大鼠腦內(nèi)bFGF蛋白表達的影響,將結果報告如下。
1.1 實驗試劑
bFGF兔抗大鼠多克隆抗體(美國Santa Cruz公司);BCA蛋白定量試劑盒(碧云天);茴拉西坦(憶立福,山西亞寶藥業(yè)集團有限公司,50mg/片)。
1.2 實驗方法 實驗動物設備及方法參考本課題組前期研究成果[1]。
由表1可見,各組大鼠腦內(nèi)bFGF蛋白表達的Western印跡結果:空白組有少量表達。模型組在腦出血后6h表達量開始明顯增加,蛋白陽性信號持續(xù)增強,于3天達高峰,7天時仍有表達,與空白組比較,P<0.01;針刺組各個時相點與模型組比較,具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);針刺組與西藥組比較,各個時相點具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
表1 各組大鼠不同時相點血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達相對含量比較(s)
表1 各組大鼠不同時相點血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達相對含量比較(s)
注:針刺組與模型組比較,▲P<0.01;針刺組與西藥組比較,●P<0.05;西藥組與模型組比較,#P<0.05;模型組與空白組比較,★P<0.01。
組別 n 6h 1天 2天 3天 7天空白組 6 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02模型組 30 0.27 ±0.02★ 0.31 ±0.02★ 0.38 ±0.02★ 0.48 ±0.02★ 0.33 ±0.02★西藥組 30 0.29 ±0.02 0.32 ±0.02 0.39 ±0.01 0.49 ±0.03 0.36 ±0.02#針刺組 30 0.31±0.02▲● 0.35 ±0.02▲● 0.46±0.04▲● 0.55±0.02▲● 0.39 ±0.02▲●
bFGF是一種廣譜的有絲分裂原,具有廣泛的細胞增殖效應,它對廣泛的來源于中胚層和神經(jīng)外胚層的細胞具有明顯的促增殖作用,其靶細胞有成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞、神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞等。bFGF是神經(jīng)營養(yǎng)因子,可促進神經(jīng)元的存活及突起生長,對神經(jīng)起保護作用[2-3]。bFGF是一種具有多種生物活性的神經(jīng)營養(yǎng)因子,它的基本生物學作用是促進細胞分裂增殖,可增強有絲分裂活性。bFGF可促進的神經(jīng)元的存活及突起生長,對神經(jīng)保護的作用。其與相關聯(lián)的受體結合導致廣泛的細胞反應,包括細胞增殖和分化、血管形成和抑制凋亡等。研究表明,bFGF在體內(nèi)、外對多種神經(jīng)元有維持生存和促進生長的作用,并能促進受損神經(jīng)元的修復和再生。在培養(yǎng)的胎鼠海馬神經(jīng)元中加入bFGF可使神經(jīng)元成活時間增加和軸突延長[4],bFGF及其受體FGFR濃度的變化調(diào)節(jié)著膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元的生長[5]。正常腦組織中bFGF表達很少,腦組織缺血損傷后bFGF表達明顯增強。bFGF能改善血供,對抗缺血缺氧,減少腦水腫,促進成纖維細胞和神經(jīng)細胞的分裂和增殖,促進新生血管和突觸形成,改善新生神經(jīng)元突起的生長,有助于神經(jīng)元抵御缺血性損傷;外源性給予bFGF可降低腦缺血后的腦梗死體積[6]。bFGF對早期神經(jīng)細胞發(fā)育分化的影響主要表現(xiàn)在促使神經(jīng)干細胞存活、增殖并分化[7]。
通過本實驗的研究發(fā)現(xiàn),各組大鼠不同時間點血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達的Western blot檢測結果:在腦出血后6h模型組表達量顯著增加,蛋白陽性信號增強,于3天達高峰,7天時仍有表達;針刺可上調(diào)腦出血后bFGF的水平,針刺組與模型組比較,具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);針刺組與西藥組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。通過實驗結果我們可以看到,在腦出血的過程中,針刺可能通過bFGF表達的增強,進而保護神經(jīng)元,營養(yǎng)膠質(zhì)細胞,從而實現(xiàn)了其促進神經(jīng)修復的腦保護作用。而且bFGF與腦出血后的缺血性損傷、神經(jīng)元的修復有密切關系[8]。綜上所述,“百會”透“曲鬢”針刺法可能通過促進腦出血后bFGF蛋白表水平,從而減輕神經(jīng)元損傷并促進神經(jīng)修復與再生。
[1]李丹,鄒偉,王瓏,等.針刺對實驗性腦出血急性期大鼠腦組織Nestin表達的影響[J].中醫(yī)藥學報,2010,38(2):60-62.
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[8]鄒偉,王瓏,孫曉偉,等.頭針透刺對腦出血大鼠腦組織IL-6表達影響的研究[J].中醫(yī)藥學報,2012,40(1):81 -83.