9種殺菌劑對(duì)刺槐心材腐朽菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

祁金玉，高國平，信雯，王月

(沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，遼寧沈陽 110866)

刺槐Robinia pseudoacacia因具有速生性和用途多樣性被許多國家廣泛引種栽培，與桉樹、楊樹一起被稱為世界上引種最為成功的三大樹種之一。當(dāng)前刺槐在中國已經(jīng)鄉(xiāng)土化，而且形成很多地方類型，是非常重要的城市綠化樹種;但是近年來在遼寧沈陽棋盤山等地區(qū)發(fā)現(xiàn)刺槐心材腐朽病造成樹木死亡或風(fēng)折后死亡［1］。

刺槐心材腐朽病由槐生多年臥孔菌Perenniporia robiniophila(Murr.)Ryv.引起，屬于臥孔菌屬真菌。在我國臥孔菌有11種，南、北方均有分布。寄生在活立木上的臥孔菌多為多年生，長(zhǎng)在樹干基部，也寄生在倒木和枯立木上，造成針葉樹和闊葉樹白色腐朽?。?］。槐生多年臥孔菌以前僅作為一種腐生菌在國內(nèi)的分布加以報(bào)道，且描述簡(jiǎn)單［3－4］。戴玉成等［1］首次將槐生多年臥孔菌確定為樹木病原菌，并描述其形態(tài)特征—子實(shí)體、菌絲結(jié)構(gòu)、菌肉、孢子的大小，形態(tài)、顏色，臥孔菌發(fā)病的癥狀。

由于刺槐心材腐朽病防治的研究國內(nèi)外還沒有切實(shí)可行防治措施的報(bào)道，本試驗(yàn)使用9種殺菌劑對(duì)刺槐心材腐朽菌進(jìn)行毒力測(cè)定，以期為防治的藥劑選擇提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 2008年10月在沈陽市棋盤山風(fēng)景區(qū)人工刺槐純林30～40年生病株上采集新鮮子實(shí)體，通過分離純化、鑒定得到槐生多年臥孔菌［5］。

采用的以下9種藥劑應(yīng)用普遍，除退菌特毒性中等，其它均為低毒。

70%甲基硫菌靈可濕性粉劑(WP)，保定農(nóng)藥廠;80%代森鋅WP，沈陽豐收農(nóng)藥有限公司;75%百菌清WP，四川省廣漢市利邦生化廠;50%多菌靈WP，山東德州大成農(nóng)藥有限公司;50%退菌特WP，天津市捷康化學(xué)品有限公司;77%可殺德WP，美國杜邦公司;15%三唑酮WP，四川國光農(nóng)化有限公司;45%石硫合劑結(jié)晶粉，宜賓川安高科農(nóng)藥有限公司;70%代森錳鋅WP，利民化工有限公司。

1.2 方法

1.2.1 藥劑的初步篩選 采用室內(nèi)菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定。在無菌條件下，把9種藥劑分別配成不同的藥劑濃度PDA培養(yǎng)基。將菌餅接于含藥劑培養(yǎng)基中央，置于25℃恒溫箱中培養(yǎng)，加入清水培養(yǎng)基作為對(duì)照，每處理5次重復(fù)。培養(yǎng)3 d后采用生長(zhǎng)速率法測(cè)量菌落直徑。連續(xù)4 d測(cè)量菌落直徑，然后根據(jù)5次重復(fù)的結(jié)果，算出各處理菌絲生長(zhǎng)的平均直徑［6－8］。根據(jù)測(cè)得的數(shù)據(jù)算出相對(duì)抑制率。

1.2.2 對(duì)初篩藥劑的毒力測(cè)定 在藥劑初步篩選的基礎(chǔ)上，用菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行測(cè)定。

根據(jù)測(cè)得的數(shù)據(jù)算出相對(duì)抑制率，求出毒力方程及其相關(guān)系數(shù)R值，y為相對(duì)抑制率對(duì)應(yīng)的機(jī)率值，x為濃度對(duì)數(shù)值。利用毒力方程求出抑制中濃度EC50。

2 結(jié)果與分析

2.1 藥劑的初步篩選 9種藥劑中，三唑酮、代森錳鋅、代森鋅抑菌作用明顯。15%三唑酮的抑制作用最明顯，在10 000倍液時(shí)，菌絲仍無法生長(zhǎng)。70%代森錳鋅在5 000倍液時(shí)平均抑菌率為100%，8 000倍液時(shí)平均抑菌率為97.29%。80%代森鋅在3 000倍液時(shí)平均抑菌率為100%，5 000倍液時(shí)平均抑菌率為93.79%。其他6種藥劑對(duì)病原菌也有一定抑制作用，但效果不明顯。其中多菌靈對(duì)病原菌的抑制作用最差，50倍液時(shí)平均抑菌率僅為42.65%。其他4種藥劑50倍液時(shí)抑菌率在82%～97%之間。

2.2 初篩藥劑的毒力測(cè)定 已篩選的3種藥劑抑制作用測(cè)定結(jié)果見表1。三唑酮在20 000～40 000倍液時(shí)菌落不生長(zhǎng)，抑菌率為100%，50 000倍液平均抑菌率為99.01%;代森錳鋅7 000倍液平均抑菌率為99.16%，其后隨著倍數(shù)的增加，抑菌率下降;代森鋅4 000倍液平均抑菌率為99.23%，隨著藥劑倍數(shù)的增加，抑菌效果下降。

表1 3種藥劑對(duì)槐生多年臥孔菌抑制作用的測(cè)定結(jié)果

對(duì)表1進(jìn)行回歸統(tǒng)計(jì)分析，以平均菌落直徑為基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，擬合出各藥劑濃度對(duì)數(shù)值(x)與抑菌率幾率值(y)的毒力回歸方程(表2)。根據(jù)毒力回歸方程算得3種藥劑的抑制中濃度EC50。15%三唑酮的EC50最小，為2.8 mg/L，80%代森鋅EC50最大，為62.7 mg/L。

表2 不同殺菌劑對(duì)槐生多年臥孔菌的毒力方程

綜合抑制率和抑制中濃度分析，3種藥劑中15%三唑酮對(duì)病原菌的抑菌效果最好，平均抑菌率達(dá)到99%，且用藥量最小，說明槐生多年臥孔菌對(duì)三唑酮最敏感，其次代森錳鋅。

3 結(jié)論與討論

經(jīng)對(duì)9種藥劑室內(nèi)毒力的初步篩選，三唑酮、代森錳鋅和代森鋅對(duì)槐生多年臥孔菌相對(duì)防效較好;進(jìn)一步試驗(yàn)證明，15%三唑酮對(duì)刺槐心材腐朽菌的抑制效果較好，40 000倍液平均抑菌率還為100%，EC50為2.8 mg/L;其次是70%代森錳鋅，7 000倍液平均抑菌率為99.16%，EC50為42.21 mg/L。

刺槐心材腐朽病的防治，國內(nèi)外還沒有切實(shí)可行的防治措施的報(bào)道。及早清除受害木上的子實(shí)體是減少病害進(jìn)一步擴(kuò)展的途徑之一。另外，在有條件的地區(qū)及時(shí)清除受害木也是減少病害擴(kuò)展的有效方法。本研究只是針對(duì)刺槐心材腐朽菌作為活立木病原菌進(jìn)行室內(nèi)藥物防治試驗(yàn)，室外防治時(shí)藥劑的施用時(shí)期、施用方式、氣候、環(huán)境條件以及樹木自身的耐藥性等因素都會(huì)影響藥劑的使用和藥效的發(fā)揮，所以野外施用的效果，還有待于野外進(jìn)一步驗(yàn)證。

［1］ 戴玉成，高強(qiáng)．刺槐心材腐朽病初報(bào)［J］．東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，33(1):88 －90．

［2］ Allen E A．，Morrison D J，Wallis G W．Common tree diseases of British Columbia［M］．Canadian Forest Service，1996:1 －48．

［3］ 戴玉成，秦國夫，徐梅卿．中國東北地區(qū)的立木腐朽菌［J］．林業(yè)科學(xué)研究，2000，13(1):15 －22．

［4］ Zhao J D，Zhang X Q．The Polyporus of China［J］．Bibl Mycol，1992，145:510 －524．

［5］ 高國平，信雯，鄭雅楠，等．刺槐心材腐朽菌鑒定及生物學(xué)特性研究［J］．東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，38(8):60 －62．

［6］ 任小杰．草莓炭疽病病原鑒定、生物學(xué)特性及藥劑毒力測(cè)定［D］．浙江揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué)，2007:27 －28．

［7］ 張勇，李曉軍，曲健祿，等．扁桃流膠病病原鑒定及藥劑毒力研究［J］．山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008(1):74－77．

［8］ 李赤，于莉，陳永欽，等．9種殺菌劑對(duì)香蕉枯萎病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定［J］．中國南方果樹，2008，37(2):44 －45．