高效液相色譜法測定安乃近片中安乃近的含量*

蘇志剛，孫東凱，劉廣川

(天津市寶坻區(qū)藥品檢驗(yàn)所，天津 301800)

1 儀器與試藥

LC-2010AHT色譜儀，LC Solution色譜工作站，安乃近對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號100002-200605)，安乃近片(市售品，批號070103、080714、080308)，甲醇(色譜純)，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件 以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)pH值至4.5±0.5)70∶30為流動相，流速：1.0 ml/min，檢測波長：265 nm，進(jìn)樣量20 μl。理論板數(shù)按安乃近峰計(jì)不得低于1 500。

2.2溶液制備

2．2．1對照品溶液的制備 精密稱取安乃近對照品100 mg，置100 ml量瓶中加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2．2供試品溶液的制備 取樣品10片，精密稱定，研細(xì)，取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于安乃近100 mg)，置100 ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10 ml,置100 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2．2．3陰性對照溶液液備 按處方取不含安乃近的原料依“2.2.2”項(xiàng)下方法制備即得。取上述3種溶液20 μl依“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，見圖1。

2.3線性關(guān)系考查 精密稱定安乃近對照品100 mg，置100 ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。依次精密吸取溶液20、60、100、140、150和200 μl注入液相色譜儀，依法測定，以安乃近進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。得回歸方程Y=634 228X+756 065(r=0.999 9)。結(jié)果表明，濃度在20～200 μg/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4精密度試驗(yàn) 精密吸取安乃近對照品溶液20 μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測定，測得峰面積RSD為1.07%。

2.5重復(fù)性試驗(yàn) 取批號為070103的安乃近片樣品共5份，依法測定，測得峰面積RSD為0.3%。

2.6穩(wěn)定性試驗(yàn) 對照品溶液分別于配制后1、2、8、12和24 h，依法測定安乃近峰面積，結(jié)果RSD為0.8%。

2.7回收率試驗(yàn) 采用加樣回收方法，精取已知含量的安乃近片的細(xì)粉 0.05 g，置100 ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液50 ml,置100 ml量瓶中，分別精密加入安乃近對照品溶液25 ml，按供試品溶液的制備方法及上述色譜條件測定。平均回收率為100.2%，RSD為0.4%，見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.8樣品測定 對3批樣品按上述色譜條件及《中國藥典》方法進(jìn)行含量測定，比較結(jié)果見表2。

表2 兩種含量測定方法結(jié)果比較

1.安乃近

3 討論

3.1溶液的選擇 分別以甲醇-水(60∶40)、乙腈-水(20∶80)；甲醇-0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)PH值至4.5±0.5)70∶30為流動相，分別注入對照品溶液，結(jié)果以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)PH值至4.5±0.5)70∶30為流動相時色譜圖最好。

3.2波長選擇 以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)pH值至4.5±0.5)70∶30為溶劑，取安乃近對照品溶液在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果其最大吸收波長分別為265 nm和245 nm。故選取265 nm為檢測波長。

《中國藥典》中安乃近片含量測定只有碘量法，本文參考有關(guān)文獻(xiàn)采用高效液相色譜法，兩方法結(jié)果基本一致。