HPLC法測定復(fù)方雷尼替丁膠囊中鹽酸雷尼替丁的含量

姜鋒衛(wèi)，陳玉璞

（河南省焦作市食品藥品檢驗所，河南焦作 454000）

復(fù)方雷尼替丁膠囊為組胺H2受體阻滯藥，主要用于胃潰瘍及十二指腸潰瘍、幽門螺桿菌感染的治療?，F(xiàn)行國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中，測定復(fù)方雷尼替丁膠囊中鹽酸雷尼替丁含量的方法為紫外分光光度法。本實驗欲用高效液相色譜法測定其中鹽酸雷尼替丁的含量，作為復(fù)方雷尼替丁膠囊質(zhì)量控制指標(biāo)之一，為控制該藥品質(zhì)量，提供一種簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確的檢測方法。

1 儀器與試藥

UVIKONXL型紫外分光光度計；AE-240雙量程電子天平 （梅特勒公司），島津高效液相色譜儀 （LC-10ADVP泵、SPD-10AVP紫外檢測器、CS-Light Potrun Analysis數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)）；鹽酸雷尼替丁對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：100163-200405，供含量測定用）；復(fù)方雷尼替丁膠囊（天津藥業(yè)焦作有限公司，批號：10041131、10041206、10041312）；水為純凈水，甲醇為色譜純，醋酸銨為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Shim-Paok CLC ODS 柱（6.0 mm×200 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.77%醋酸銨溶液（80∶20）；流速：1.0 ml/min；檢測波長：315 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20 μl。

2.2 檢測波長的選擇

對照品適量，加水制成含量約為30 μg/ml的溶液，在200～400nm的波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果對照品溶液在315nm波長處有最大吸收，故選用315 nm為本法的檢測波長。

2.3 對照品溶液的制備

精取鹽酸雷尼替丁對照品38.6 mg，置200 ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得鹽酸雷尼替丁對照品貯備液（193 μg/ml）。

2.4 供試品溶液的制備

取供試品，按《中國藥典》方法求出平均裝量，將內(nèi)容物混勻，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于鹽酸雷尼替丁150mg），置100 ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液2 ml，置100 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.5 陰性對照品溶液的制備

按復(fù)方雷尼替丁膠囊的處方工藝，不加鹽酸雷尼替丁，制成陰性對照樣品，照“2.4”項下方法制得陰性對照溶液。

2.6 干擾試驗

分別取供試品溶液、陰性對照溶液和“2.2”項下的對照品溶液各20 μl進(jìn)樣，在保留時間4.1 min處，供試品和對照品溶液中均出現(xiàn)雷尼替丁色譜峰，而陰性對照溶液未見此色譜峰，表明在本實驗條件下，鹽酸雷尼替丁的測定不受其他雜質(zhì)峰的干擾。見色譜圖1。

2.7 線性關(guān)系考察

精密量取鹽酸雷尼替丁對照品貯備液（193 μg/ml）適量，分別制成濃度為 3.86、7.72、19.3、38.6、77.2 μg/ml的對照品溶液。按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖。以鹽酸雷尼替丁濃度（μg/ml）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，線性方程：Y=37 518X+181 0（r=0.999 9）。 結(jié)果表明，鹽酸雷尼替丁的進(jìn)樣濃度在3.86～77.2 μg/ml范圍內(nèi)，與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.8 精密度試驗

取濃度為38.6 μg/ml的對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，分別測定峰面積，結(jié)果RSD=0.43%（n=6），結(jié)果表明本法精密度良好。

2.9 穩(wěn)定性試驗

取“2.8”項下的對照品溶液分別于 0、2、6、8 和 12 h 測定峰面積，結(jié)果鹽酸雷尼替丁的RSD＝0.53%。結(jié)果表明樣品至少在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.10 重復(fù)性試驗

取樣品（批號：10041131）適量，照“2.4”項下方法制備供試品溶液，平行測定6次，結(jié)果RSD=0.57%。結(jié)果表明本法重現(xiàn)性較好。

2.11 加樣回收率試驗

取樣品（批號：10041131）適量，按《中國藥典》方法求出平均裝量，將內(nèi)容物混勻，研細(xì)，分別精取0.26 g，共6份，分置50 ml量瓶中，另取鹽酸雷尼替丁對照品適量，加流動相制成每毫升含鹽酸雷尼替丁20.0 mg的溶液100 ml，分別精密量取該對照品溶液10 ml加入6份樣品中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液1 ml，置100 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。按“2.1”色譜條件測定，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗（n=6）Tab.1 Results of recovery test(n=6)

2.11 樣品含量測定

取3批樣品，各20粒，求出平均裝量，將內(nèi)容物混勻，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于鹽酸雷尼替丁150 mg），置100 ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 ml，置50 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；另取鹽酸雷尼替丁對照品30.0 mg，置100 ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10 ml，置100 ml量瓶中，加流動相至刻度，作為對照品溶液。按“2.1”項下色譜條件測定，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=3)

3 討論

筆者查閱了許多文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)許多流動相中含有乙腈。筆者認(rèn)為，乙腈價格較貴且有毒，故棄用。筆者通過多次試驗，發(fā)現(xiàn)選用甲醇-0.77%醋酸銨溶液（80∶20）為流動相，在檢測波長315 nm處，雜質(zhì)和輔料對鹽酸雷尼替丁的含量測定幾乎無影響，且色譜峰形好，陰性對照無干擾；試驗結(jié)果理想，方法簡便，靈敏，準(zhǔn)確，可用于復(fù)方雷尼替丁膠囊中鹽酸雷尼替丁的含量測定。

[1]國家藥典委員會.中國藥典[S].二部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄ⅤD,28-30584-585.

[2]美國藥典委員會.美國藥典[S].27版.NewYork:UnitedStatesPharmacopeial Convention,2004:918.

[3]美國藥典委員會.國家藥品標(biāo)準(zhǔn):新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)[S].36冊.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2004:189-190,

[4]趙素珍,宋衛(wèi)云.高效液相色譜法測定清熱止瀉合劑中葛根素的含量[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2007,4(30):87-88,

[5]王艷芝.HPLC法測定雷公藤片中雷公藤甲素的含量[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2010,7(30):44-45.

[6]冷文君.HPLC法測定鹽酸雷尼替丁膠囊的含量[J].海峽藥學(xué),2005,17(4):54-55.