頂空氣相色譜法測定乙基纖維素中有機溶劑殘留量

李 春，孫 悅

（1.天津市北辰區(qū)藥品檢驗所，天津 300400； 2.天津市藥品檢驗所，天津 300070）

乙基纖維素又稱纖維素乙醚，是纖維素中羥基被乙基醚化的一種纖維素高聚物，在藥品生產領域應用廣泛，主要用作片劑的黏合劑、薄膜包衣材料，片劑、丸劑的緩釋材料，膏、栓、洗劑的增稠劑，并用作食品添加劑和化工助劑。由于生產過程中不可避免地要引入并殘留一定量的有機溶劑，對人體有不同程度的傷害，必須加以控制。本試驗建立了頂空氣相色譜法，用于測定乙基纖維素中殘留有機溶劑二氯甲烷的含量，報道如下。

1 儀器與試藥

島津GC-14B型氣相色譜儀；CR-7Ae plus數(shù)據(jù)處理機。二氯甲烷（國產分析純）；二甲基亞砜（美國天地公司）；乙基纖維素（天津愛勒易醫(yī)藥材料科技有限公司，批號為20061201，20061202，20061203）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：DB-624型（6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷）石英毛細管柱（30 m ×0.3 mm，1.8 μm）；柱溫：90 ℃ ；氣化室：200 ℃；檢測器：FID，250 ℃；載氣：氮氣；柱前壓：45 kPa；Range：1；記錄儀衰減：1；頂空瓶加熱溫度：85℃；加熱時間：30 min；進樣量：1 mL。在此條件下，理論塔板數(shù)按二氯甲烷峰計算不得低于10 000，二氯甲烷峰與相鄰組分峰的分離度應符合規(guī)定（圖1）。

2.2 溶液制備

精密量取二氯甲烷33.9 μL（相當于 45 mg），置100 mL量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備溶液。精密量取對照品貯備溶液 5 mL，置50 mL量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取樣品約0.75 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，加二甲基亞砜使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

圖1 供試品溶液氣相色譜圖

2.3 方法學考察

線性關系考察：精密量取對照品貯備溶液0.5，1.0，3.0，5.0，7.0，10.0 mL，分別置50 mL量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，制成系列質量濃度的對照品溶液，分別精密量取5 mL，置頂空瓶中，依法測定，以對照品溶液質量濃度為橫坐標（X）、對照品色譜峰與內標峰峰面積之比為縱坐標（Y）進行線性回歸，回歸方程為Y=14.24 X+9.793 6，r=0.999 6（n=6）。結果表明，二氯甲烷質量濃度在4.5～90 μg/mL范圍內與峰面積比值線性關系良好。

最低檢測限確定：精密量取對照品貯備溶液，逐步稀釋，按上述色譜條件進樣測定。結果二氯甲烷的最低檢出限（S/N=3）為0.9 μg/mL 。

精密度試驗：精密量取對照品貯備溶液5 mL，置50 mL量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，精密量取6份各5 mL，分別置頂空瓶中，依法測定。結果平均峰面積為673，RSD=1.4%（n=6）。

穩(wěn)定性試驗：取對照品溶液及供試品溶液，考察溶液8 h內的穩(wěn)定性。結果對照品溶液及供試品溶液中主成分二氯甲烷的峰面積基本不變，RSD=0.3%（n=5），表明溶液在8 h內穩(wěn)定。

回收率試驗：精密稱取樣品0.25 g，共9份，分別置10 mL量瓶中；另精密量取對照品貯備溶液4.0，5.0，6.0 mL各3份，分別置25 mL量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，精密量取溶液各5 mL置上述10 mL量瓶中，加二甲基亞砜使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率測定溶液。另取樣品約0.25 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，加二甲基亞砜使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率測定的空白溶液。同時配制相應質量濃度的對照品溶液。精密量取以上測定溶液各5 mL，置頂空瓶中，依法測定，按外標法計算實測量。結果見表1。

2.4 樣品含量測定

取對照品溶液和供試品溶液各5 mL，置頂空瓶中，密封，搖勻，85℃加熱30 min，取上層氣體1 mL，注入氣相色譜儀，按外標法以峰面積計算，含二氯甲烷不得過 0.06%。批號為 20061201，20061202，20061203的 3批樣品中二氯甲烷的含量分別為0.008%，0.008% ，0.003%。

表1 二氯甲烷回收率試驗（n=9）

3 討論

頂空進樣存在測定結果重復性較差的問題，特別是同一瓶樣品連續(xù)進樣時問題更明顯，其原因是沒有找到切實的平衡溫度和時間。決定平衡溫度和時間的因素[1]有很多，包括樣品量、待測組分沸點、頂空瓶體積等，其中樣品的種類與數(shù)量對那些在樣品基質中溶解度大（分配系數(shù)大）的組分有很大影響，這也就是標準品不能僅用待測物的標準品配制且必須有與原樣品相同或相似的基質的原因，否則，定量誤差將會很大。這兩項參數(shù)對于最終進樣氣體的組分能否完全反映凝聚相（液相或固相）的組成至關重要。根據(jù)頂空進樣的基本理論[2]：Cg=K′C0，其中 Cg為氣相中樣品質量濃度，C0為凝聚相（液相或固相）樣品初始質量濃度，K′為平衡常數(shù)。只有在一定的平衡溫度和時間下，達到氣液平衡時，此公式才成立。因此在先后試驗了多種平衡溫度和時間后，確定平衡溫度為85℃，平衡時間為30 min。在此條件下，樣品峰面積比較穩(wěn)定。

本試驗主要考察了100%二甲基聚硅氧烷、5%-二苯基-95%二甲基聚硅氧烷及DB-624 3種非極性至中等極性的毛細管柱[3]，結果以DB-624毛細管柱的分離效果及靈敏度較高，因此選其作為本試驗的色譜柱。

[1]秦 立，胡昌勤，劉文英.頂空氣相色譜法測定藥品中殘留溶劑的影響因素考察[J]. 藥物分析雜志，2005，25（7）：823.

[2]王永華，王保強.改變相比/頂空氣相色譜法測定水中苯的分配常數(shù)及其含量[J]. 色譜，2003，21（6）：614.

[3]高 靜，管 斐，高 申.避蚊胺乙基纖維素微球的制備及其性質考察[J]. 第二軍醫(yī)大學學報，2004，25（11）：1 235.