• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    茶葉中茶多酚和生物堿的測(cè)定及聚類和線性判別分析

    2010-03-23 02:05:11肖俊松袁英髦張愛雪曹雁平
    食品科學(xué) 2010年22期
    關(guān)鍵詞:烏龍茶白茶兒茶素

    肖俊松,袁英髦,張愛雪,曹雁平,*

    (1.北京工商大學(xué)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院,北京 100048;2.食品添加劑與配料北京高校工程研究中心,北京 100048)

    茶葉中茶多酚和生物堿的測(cè)定及聚類和線性判別分析

    肖俊松1,2,袁英髦1,張愛雪1,曹雁平1,2,*

    (1.北京工商大學(xué)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院,北京 100048;2.食品添加劑與配料北京高校工程研究中心,北京 100048)

    目的:建立一種反相高效液相色譜方法,測(cè)定綠茶、烏龍茶、紅茶、白茶和普洱茶中兒茶素[(+)-catechin,C]、表兒茶素[(-)-epicatechin,EC]、表兒茶素沒食子酸脂[(-)-epicatechin gallate,ECG]、表沒食子兒茶素[(-)-epigallocatechin,EGC]、表沒食子兒茶素沒食子酸脂[(-)-epigallocatechin gallate,EGCG]、沒食子酸(gallic acid,GA)、咖啡因(caffeine,CAF)、可可堿(theobromine,THEO)的水平。以這8種組分為指標(biāo)對(duì)茶葉進(jìn)行聚類分析和線性判別分析,建立區(qū)分綠茶、紅茶和烏龍茶的方法。方法:茶葉提取后采用HPLC法測(cè)定兒茶素和生物堿含量,色譜柱為C18柱,流動(dòng)相由甲醇(A)、2%的乙酸(B)等度洗脫,A、B相的體積比為25:75,流速為1mL/min,柱溫30℃。采用PDA檢測(cè)器在278nm檢測(cè),參考波長(zhǎng)為210nm。采用SPSS 14.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行了聚類分析和線性判別分析。結(jié)果:在選擇的分析條件下,樣品中的8種組分獲得了理想分離,加標(biāo)回收率在87%~112.8%之間,并采用外標(biāo)法對(duì)8種組分進(jìn)行定量。以這8種組分的含量為指標(biāo),聚類分析和線性判別分析能對(duì)39種茶葉樣品進(jìn)較好的區(qū)分。

    茶多酚;咖啡堿;茶葉;高效液相色譜;聚類分析;線性判別分析

    茶葉由茶樹(Camellia sinensis)的葉子加工而成,是我國(guó)傳統(tǒng)的飲料之一,也是世界三大飲料之一,按照發(fā)酵程度的不同,分為綠茶、黃茶、白茶、青茶(烏龍茶)、紅茶、黑茶(普洱茶)等。綠茶為不發(fā)酵的茶,含有大量茶多酚及一定量的生物堿,如咖啡因、可可堿等(圖1),大約占干質(zhì)量的30%[1]。烏龍茶為半發(fā)酵茶,而紅茶則是全發(fā)酵的茶,兒茶素的含量相比綠茶偏低,而咖啡因含量則有所增加。兒茶素類物質(zhì)賦予茶湯苦、澀味以及特有的收斂性。此外,茶多酚具有抗氧化,抗動(dòng)脈粥樣硬化,降低血液膽固醇,抑制癌細(xì)胞增殖等多種生理活性[2-5]??Х纫?、可可堿是茶葉中的生物堿類,可賦予茶湯苦味,并具有祛除疲勞,興奮神經(jīng)的作用[6]。因此,茶多酚和咖啡因是茶葉品質(zhì)的重要因子。

    圖1 茶多酚和咖啡因、可可堿的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structures of catechin, caffeine and theobromine

    本實(shí)驗(yàn)擬建立一種反相高效液相色譜方法,快速測(cè)定茶葉中兒茶素[(+)-catechin,C]、表兒茶素[(-)-epicatechin,EC]、表兒茶素沒食子酸脂[(-)-epicatechin gallate,ECG]、表沒食子兒茶素[(-)-epigallocatechin, EGC]、表沒食子兒茶素沒食子酸脂[(-)-epigallocatechin gallate, EGCG]、沒食子酸(gallic acid,GA)、咖啡因(caffeine,CAF)、可可堿(theobromine,THEO)的水平。在此基礎(chǔ)上,調(diào)查目前北京茶葉市場(chǎng)上茶葉中茶多酚,咖啡因和可可堿的含量,并采用聚類分析和線性判別分析對(duì)茶葉進(jìn)行區(qū)分,為茶葉的真?zhèn)舞b定提供技術(shù)參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    茶葉購自北京馬連道茶葉市場(chǎng),未注明的均為新茶,存儲(chǔ)于-18℃冰箱待測(cè),共計(jì)39種,其中綠茶21種,烏龍茶8種,紅茶4種(其中立頓速溶紅茶1種),白茶3種,黑茶2種,花茶1種。

    兒茶素、表兒茶素、表沒食子兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、沒食子酸 美國(guó)Sigma公司;咖啡因、可可堿 中國(guó)藥品生物制品檢定所;甲醇、乙腈(均為色譜純) 美國(guó)Fisher公司;乙酸(優(yōu)級(jí)純) 北京精細(xì)化工廠;VC、EDTA均為分析純。1.2儀器與設(shè)備

    2695高效液相色譜系統(tǒng)(配有可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器和Empower 2色譜工作站) 美國(guó)Waters公司。

    1.3 方法

    1.3.1 茶多酚和生物堿的提取

    參照GB/T 8313—2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法》,取適量茶葉樣品于研缽,將其研碎至直徑小于1mm,精確稱取樣品200mg至于10mL離心管中,用移液管移取5mL經(jīng)70℃水浴預(yù)熱的70%甲醇溶液,注入其中,用玻璃棒充分?jǐn)嚢杈鶆驖?rùn)濕,立即移入70℃水浴鍋中,浸提10min。每隔5min攪拌一次取出,浸提后冷卻至室溫,轉(zhuǎn)入離心機(jī)在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心10min,將上清液轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶,殘?jiān)儆?mL的70%甲醇溶液提取一次,重復(fù)以上操作,合并提取液定容至10mL。用移液管取上述溶液2mL于10mL容量瓶中,用穩(wěn)定液定容,待測(cè)。

    穩(wěn)定液配制:稱取250mg EDTA于燒杯中,加入少量pH值為8的NaOH溶液,用玻璃棒攪拌,溶解,再加入50mL乙腈后再加入250mg VC,待其溶解,轉(zhuǎn)移至容量瓶中,定容至500mL。

    1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

    精確稱取2.9mg C、3.0mg EC、2.5mg ECG、3.7mg EGC、2.9mg EGCG、2.4mg CAF、1.0mg THEO,用70%

    甲醇溶液溶解,定容至10mL,然后逐級(jí)稀釋得到一系列不同質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。0.45μm膜過濾,進(jìn)樣10μL,進(jìn)行HPLC分析。以進(jìn)樣化合物質(zhì)量m(μg)為橫坐標(biāo)、色譜峰面積A為縱坐標(biāo),做標(biāo)準(zhǔn)曲線,得各標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.3.3 色譜條件

    色譜柱為迪馬Inertsil ODS-3 C18柱(4.6mm×150mm,5μm)。流動(dòng)相A為100%甲醇,流動(dòng)相B為2%乙酸溶液,采用等度洗脫,流動(dòng)相由甲醇(A),2%的乙酸(B),體積比為25:75,流速1mL/min,柱溫30℃。二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè),檢測(cè)波長(zhǎng)2 7 8 n m,參考波長(zhǎng)210nm。

    1.3.4 茶多酚和生物堿的HPLC測(cè)定

    茶葉樣品如1.3.1節(jié)處理后,采用1.3.2節(jié)同樣的色譜條件進(jìn)行HPLC分析。根據(jù)各化合物的峰面積,計(jì)算其含量,并根據(jù)稀釋度,計(jì)算茶多酚和生物堿的含量。

    稱取200mg茶葉樣品6份,其中3份測(cè)定8種化合物的質(zhì)量,另外3份加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)品后,測(cè)定8種化合物的質(zhì)量,然后計(jì)算其加標(biāo)回收率。

    1.3.5 數(shù)據(jù)分析

    以C、EC、ECG、EGC、EGCG、GA、CAF和THEO這8種成分為指標(biāo),用SPSS 14.0 進(jìn)行聚類分析和線性判別分析[7]。聚類分析計(jì)算歐氏距離,線性判別分析則采用逐步判別法。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 同時(shí)測(cè)定茶多酚和生物堿的HPLC方法建立

    混合標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)過HPLC分析,等度洗脫,得到HPLC圖譜見圖2??梢钥闯?,這6種茶多酚和2種生物堿得到了較好的分離,僅有EGCG和CAF基線部分有重疊。8種化合物的保留時(shí)間分別為GA 2.629min、THEO 3.294min、EGC 3.998min、C 4.573min、EGCG 6.611min、CAF 7.233min、EC 8.060min、ECG 15.111min。

    圖2 茶多酚和生物堿的HPLC圖譜Fig.2 HPLC chromatogram of tea polyphenols and alkaloids

    從表1可以看出,8種化合物的回歸方程的R2均大于0.9999,說明在線性范圍內(nèi),線性關(guān)系良好。

    表1 茶葉中C、EC、ECG、EGC、EGCG、GA、CAF和THEO的標(biāo)準(zhǔn)曲線Table1 Regression equations of 8 compounds (C, EC, ECG, EGC, EGCG, GA, CAF and THEO) in tea samples

    這8種化合物的加標(biāo)回收率如表2所示,回收率在87.0%~112.8%之間,說明該提取和測(cè)定方法能準(zhǔn)確的反應(yīng)茶葉樣品中這8種化合物的準(zhǔn)確含量。

    表2 茶葉中C、EC、ECG、EGC、EGCG、GA、CAF和THEO的回收率(n=3)Table2 Recovery rates of spiked compounds (C, EC, ECG, EGC, EGCG, GA, CAF and THEO) in tea samples (n=3)

    2.2 茶葉中茶多酚和生物堿水平

    圖3 綠茶、白茶、烏龍茶和紅茶中C、E C、E C G、E G C、EGCG、GA、CAF、THEO、總生物堿和總茶多酚的平均含量Fig.3 Average contents of 8 compounds (C, EC, ECG, EGC, EGCG, GA, CAF and THEO), total alkaloids (TA) and total polyphenols (TPP) in green, white, oolong and black tea samples from Beijing market

    39種茶葉樣品經(jīng)過如上方法提取,HPLC測(cè)定,并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算得到其中C、EC、ECG、EGC、EGCG、GA、CAF和THEO的含量,如表3所示。計(jì)算綠茶、白茶、烏龍茶、紅茶的8個(gè)指標(biāo),外加T A (CAF和THEO之和),TPP(其他6指標(biāo)之和)的平均水平,并采用SPSS14.0進(jìn)行Duncan多重比較,得到圖3。

    表3 茶葉中C、EC、ECG、EGC、EGCG、GA、CAF和THEO的含量Table3 Contents of 8 compounds (C, EC, ECG, EGC, EGCG, GA, CAF and THEO) in tea samples

    綠茶為非發(fā)酵茶,白茶、烏龍茶和紅茶的發(fā)酵程度逐漸加重,發(fā)酵方式也不一樣。從圖3可以看出,北京市場(chǎng)茶葉中總生物堿的含量在0.694%~3.454%之間,平均含量2.395%。單因素方差分析顯示,綠茶,白茶,烏龍茶和紅茶的總生物堿含量在α=0.05水平上無顯著差別,Duncan多重比較顯示4類茶葉的總生物堿也無顯著差別。這說明發(fā)酵對(duì)茶葉中生物堿的水平基本無影響。

    總茶多酚含量在2.815%~19.808%之間,平均含量11.205%,含量從高到低依次為綠茶,白茶,烏龍茶和紅茶。單因素方差分析顯示茶葉種類對(duì)TPP水平有極顯著影響(P<0.001),Duncan多重比較顯示,在α=0.05水平上,綠茶和烏龍茶TPP水平無顯著差異,和白茶,紅茶有顯著差異,這說明發(fā)酵方式對(duì)茶葉中茶多酚的含量有極顯著影響。

    茶葉中茶多酚以EGCG、EC、ECG為主,C和EGC含量較低,GA含量則是在綠茶,白茶中較高,烏龍茶,紅茶中含量較低。單因素方差分析顯示茶葉種類對(duì)茶葉中C、EC、ECG、EGC、EGCG和GA的含量

    都有顯著影響(P<0.005)。Duncan多重比較顯示,在α=0.05水平上,烏龍茶的EGCG含量與其他3類茶葉有顯著差異,E C含量只有白茶和烏龍茶之間有顯著差異,綠茶的ECG含量則與白茶和紅茶之間有顯著差異。

    2.3 茶葉的聚類分析

    采用SPSS 14.0軟件包中聚類分析程序,計(jì)算39種茶葉樣品之間的歐氏距離,進(jìn)行聚類分析聚類結(jié)果見圖4。

    圖4 39個(gè)茶葉樣品系統(tǒng)聚類分析圖Fig.4 Hierarchical cluster analysis of 39 tea samples

    從圖4可看出,當(dāng)臨界值為20時(shí),39個(gè)茶葉樣品分別聚為三類。第一類中包含19個(gè)綠茶,1個(gè)花茶1個(gè)烏龍茶和1個(gè)白茶。第二類中包含7個(gè)烏龍茶、2個(gè)綠茶、1個(gè)黑茶。第三類中包含3個(gè)紅茶、2個(gè)白茶、1個(gè)黑茶和1個(gè)立頓紅茶。這三類茶葉按發(fā)酵度逐漸遞增分類,分別是不發(fā)酵,半發(fā)酵和全發(fā)酵茶。第一類茶均為不發(fā)酵或低發(fā)酵度的茶。第二類茶主要是烏龍茶等半發(fā)酵茶,還含有少量綠茶。第三類茶主要為紅茶和黑茶,為全發(fā)酵的茶。有趣的是,33w和34w兩種白茶是輕度發(fā)酵的茶也聚到第三類中,其原因可能是33w和34w分別是07年春和08年春的茶。由于茶葉放置的時(shí)間過長(zhǎng),導(dǎo)致茶葉中的兒茶素類成份發(fā)生降解,所以被聚入第三類。因此,按照C、EC、ECG、EGC、EGCG、GA、CAF、THEO組分含量進(jìn)行分類是合理的。

    2.4 茶葉的判別分析

    用SPSS 14.0軟件包,采用Wilk sλ法對(duì)茶葉樣品進(jìn)行逐步線性判別分析,得到2個(gè)典則判別函數(shù)(Y),分別為Y1=1.169+0.535EGCG+1.285ECG-5.523CAF、Y2=-2.897-0.349EGCG+1.82ECG+1.058CAF。計(jì)算各茶葉樣品的得分,以Y1為橫坐標(biāo)、Y2為縱坐標(biāo),得到茶葉樣品線性判別圖(圖5)。82.9%的茶葉樣品分類正確,綠茶,紅茶和烏龍茶完全區(qū)分,白茶區(qū)分不太好,可能原因是其為往年陳茶,其中的茶多酚有一定程度的氧化聚合。

    圖5 綠茶、白茶、烏龍茶和紅茶的線性判別分析Fig.5 Linear discrimination analysis of green, white, oolong and black tea samples

    3 討 論

    本實(shí)驗(yàn)建立的提取及HPLC方法,可同時(shí)測(cè)定茶葉中咖啡因,可可堿以及6類茶多酚含量。雖然采用了等度洗脫,但8種化合物基本實(shí)現(xiàn)了基線分離(EGCG和CAF峰有少部分重合),基線平,能在18min內(nèi)完成測(cè)定,且8種化合物回收率均達(dá)到要求。Ferandez等[8]采用梯度洗脫方式,6種兒茶素流出需要20min,而且基線漂移嚴(yán)重;康海寧等[9]采用梯度洗脫,則需要左右;唐根源等[10]采用等度洗脫,需要30min左右;Mitsuaki等[11]采用等度洗脫,分析12種茶多酚需要時(shí)間大概110min。

    采用此方法對(duì)39個(gè)茶葉樣本中的上述8中化合物進(jìn)行了測(cè)定??偵飰A含量平均為2.395%,茶多酚總量平均為11.205%,以EGCG、EC、ECG為主。綠茶、白茶、烏龍茶和紅茶中咖啡因、可可堿的含量并無顯著差別,說明發(fā)酵處理,并不能將其有效去除。4種茶葉茶多酚含量有顯著性區(qū)別,說明發(fā)酵對(duì)兒茶素類物質(zhì)具有很大影響。發(fā)酵過程中,兒茶素類物質(zhì)氧化聚合,形成茶黃素和茶紅素,形成烏龍茶、紅茶的獨(dú)特風(fēng)味與茶湯顏色。隨著發(fā)酵程度的增加,綠茶、烏龍茶和紅茶中茶多酚的含量逐漸減少。這與Ferandez等[8]和朱勤艷等[12]研究結(jié)果一致。但是白茶作為一種發(fā)酵程度低于烏龍茶的茶葉,其總多酚低于烏龍茶,其原因可能是本實(shí)驗(yàn)選擇的白茶樣本為往年陳茶,其中的茶多酚已發(fā)生氧化聚合所致,有研究證明,綠茶在90%相對(duì)濕度,40℃條件下貯藏45d兒茶素下降了31%[13],說明茶多酚在貯藏條件下會(huì)氧化聚合,從而含量下降。

    聚類分析將茶葉分為了3大類,基本符合實(shí)際情況。通過逐級(jí)線性判別分析,利用EGCG、ECG和CAF構(gòu)成的判別方程,將茶葉分為了4大類,綠茶、烏龍茶和紅茶完全區(qū)分,白茶區(qū)分效果不好。雖然白茶樣

    品選擇不當(dāng),干擾了分類方法的表現(xiàn),但是利用這2種方法,用于茶葉種類的區(qū)分、鑒別是可能的。

    [1]DALLUGE J J, NELSON B C. Determination of tea catechins[J]. J Chromatogr A, 2000, 881: 411-424.

    [2]FUJIKI H, SUGANUMA M, IMAI K, et al. Green tea: cancer preventive beverage and/or drug[J]. Cancer Lett, 2002, 188(1/2): 9-13.

    [3]SHUKLA Y. Tea and cancer chemoprevention: a comprehensive review [J]. Asian Pacific J Cancer Prev, 2007, 8: 155-166.

    [4]YANG C S, LANDAU J M. Effects of tea consumption on nutrition and health[J]. J Nutr, 2000, 130: 2409-2412.

    [5]DAVID J M, GUO P L, NAI S C. Cholesterol-lowering effect of a theaflavin-enriched green tea extract[J]. Arch Intern Med, 2003, 163: 1448-1453.

    [6]HIGDON J V, FREI B. Coffee and health: a review of recent human research[J]. Crit Reviews in Food Sci Nutr, 2006, 46(2): 101-123.

    [7]高祥寶, 董寒青. 數(shù)據(jù)分析與SPSS應(yīng)用[M]. 北京: 清華大學(xué)出版社, 2007: 1-9; 311-364.

    [8]FERANDEZ P L, MARTIN M J, GONZALEZ A G, et al. HPLC determination of catechins and caffeine in tea. differentiation of green, black and instant teas[J]. Analyst, 2000, 125: 421-425.

    [9]康海寧, 陳波, 韓超, 等. HPLC法測(cè)定茶葉水提液中五種兒茶素和咖啡堿及其用于茶葉分類的研究[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào), 2007, 26(2): 211-215.

    [10]唐根源, 吳紅京, 吳棱. 等度反相高效液相色譜法測(cè)定茶多酚中的兒茶素和咖啡因[J]. 色譜, 2001, 19(3): 233-235.

    [11]MITSUAKI S, MICHIKO T, MASAZUMI S. Simultaneous determination of twelve tea catechins by high performance liquid chromatography with electrochemical detection[J]. Analyst, 2001, 126: 816-820.

    [12]朱勤艷, 陳振宇. 茶中茶多酚的高效液相色譜法分離分析[J]. 分析實(shí)驗(yàn)室, 1999, 18(4): 16-18.

    [13]崔峰. 綠茶在貯藏過程中品質(zhì)變化規(guī)律及影響因素研究[D]. 杭州: 浙江大學(xué), 2008.

    Determination of Polyphenols and Alkaloids in Tea and Cluster-Linear Discrimination Analysis

    XIAO Jun-song1,2,YUAN Ying-hao1,ZHANG Ai-xue1,CAO Yan-ping1,2,*
    (1. School of Chemical and Environmental Engineering, Beijing Technology and Business University, Beijing 100048, China;2. Beijing Higher Institution Engineering Research Center of Food Additives and Ingredients, Beijing 100048, China)

    Objective: To establish a HPLC method for the determination of (+)-catechin, (-)-epicatechin (EC), (-)-epicatechin gallate (ECG), (-)-epigallocatechin (EGC), (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), gallic acid (GA), caffeine (CAF) and theobromine (THEO) in green, oolong and black tea samples, and to develop a discrimination method for green, oolong and black tea by cluster analysis and linear discrimination analysis on the basis of determined chemical components. Methods: Tea samples were extracted by 70% aqueous methanol. Totally 200 mg of grinded tea samples was extracted with 5 mL of 70% aqueous methanol for 10 min in 70 ℃water bath. The extract was centrifuged at 3500 r/min for 10 min, and the supernatant was collected. Then the precipitate was extracted with 5 mL of 70% methanol under the same conditions. The supernatants were combined in a volumetric flask and diluted to 10 mL. A total of 2 mL of such solution was diluted by 5 times with stabilizing solution, filtrated with 0.45 μm membrane, and then used for HPLC analysis. Eight compounds were separated by a C18 column using a mobile phase containing methanol-2% aqueous acetic acid at a ratio of 25:75 (V/V) in an isocratic elution at 30 ℃, and detected using a photodiode array detector at 278 nm with the reference wavelength at 210 nm. The cluster and linear discrimination analyses were performed using SPSS 14.0 software. Results: Eight compounds in all tea samples were well separated under the proposed conditions. The recovery rates of spiked samples were in the range of 87%-112.8%. The contents of 8 compounds determined by an external standard method were used to conduct cluster analysis and linear discrimination analysis. The good differentiation of green, oolong and black tea samples were achieved. Conclusion: This established method is feasible to discriminate green, oolong and black tea.

    tea polyphenol;caffeine;tea;high performance liquid chromatography (HPLC);cluster analysis;linear discrimination analysis

    TS255.36

    A

    1002-6630(2010)22-0343-06

    2010-07-08

    “十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2006BAD27B03);北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(3062007)

    肖俊松(1980—),男,講師,博士,主要從事天然產(chǎn)物化學(xué)研究。E-mail:waq0012@hotmail.com

    *通信作者:曹雁平(1961—),男,教授,碩士,主要從事天然產(chǎn)物化學(xué)與物理場(chǎng)強(qiáng)化技術(shù)研究。E-mail:caoyp@th.btbu.edu.cn

    猜你喜歡
    烏龍茶白茶兒茶素
    超高效液相色譜法測(cè)定茶葉中的兒茶素
    繪本
    這只貓說得好有道理
    意林(2019年10期)2019-06-03 16:37:12
    ANIMATING ‘IP’
    烏龍茶秋季采摘時(shí)期調(diào)節(jié)技術(shù)研究
    ANIMATING ‘IP’COMICS AND EMOJIS BECOME ENTERTAINMENT BRANDS
    漢語世界(2017年4期)2017-03-07 06:21:20
    近年烏龍茶做青工藝的發(fā)展研究
    烏龍茶連續(xù)自動(dòng)化初制生產(chǎn)線的現(xiàn)狀與展望
    全甲基化沒食子兒茶素沒食子酸酯的制備
    鐵觀音等三個(gè)烏龍茶品種綠茶適制性研究
    茶葉通訊(2014年4期)2014-02-27 07:55:52
    日产精品乱码卡一卡2卡三| 蜜臀久久99精品久久宅男| 3wmmmm亚洲av在线观看| 黄色怎么调成土黄色| 国产精品久久久久成人av| 美女视频免费永久观看网站| 欧美97在线视频| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲国产av新网站| 日日摸夜夜添夜夜爱| 韩国av在线不卡| 日本欧美视频一区| 日本黄色日本黄色录像| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久ye,这里只有精品| 久久久久网色| 久久婷婷青草| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 一区二区av电影网| 国产高清有码在线观看视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 有码 亚洲区| 婷婷色综合www| av线在线观看网站| 亚洲av二区三区四区| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚州av有码| 丝袜美足系列| 久热久热在线精品观看| av有码第一页| 国产成人91sexporn| 午夜福利视频精品| 久久精品国产a三级三级三级| 国产又色又爽无遮挡免| 日韩人妻高清精品专区| 国产高清三级在线| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 插阴视频在线观看视频| 国产色婷婷99| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 国产高清不卡午夜福利| 99久久人妻综合| 亚洲av成人精品一区久久| 丝袜在线中文字幕| 少妇丰满av| av福利片在线| 夫妻性生交免费视频一级片| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成色77777| 美女主播在线视频| 精品亚洲成国产av| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 69精品国产乱码久久久| 久久韩国三级中文字幕| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 曰老女人黄片| 天天影视国产精品| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 有码 亚洲区| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲国产精品专区欧美| 色婷婷久久久亚洲欧美| 热99久久久久精品小说推荐| 五月伊人婷婷丁香| 午夜老司机福利剧场| 高清在线视频一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 又大又黄又爽视频免费| 婷婷色综合www| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 插逼视频在线观看| 夫妻午夜视频| 韩国av在线不卡| 人妻一区二区av| 久久精品人人爽人人爽视色| 精品亚洲成国产av| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 国产日韩欧美亚洲二区| 高清午夜精品一区二区三区| 嘟嘟电影网在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 成人免费观看视频高清| 伊人久久精品亚洲午夜| 黄色一级大片看看| 国产精品久久久久久久电影| 国产精品 国内视频| 草草在线视频免费看| 婷婷色综合大香蕉| 精品午夜福利在线看| 有码 亚洲区| 国产免费一区二区三区四区乱码| 老司机影院成人| 18禁观看日本| 久久精品国产亚洲av涩爱| 男人操女人黄网站| 天美传媒精品一区二区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲三级黄色毛片| 在线观看一区二区三区激情| 免费黄频网站在线观看国产| 欧美97在线视频| 日韩一区二区视频免费看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 欧美xxⅹ黑人| 成人手机av| 亚洲av男天堂| 免费av中文字幕在线| 国产精品久久久久久av不卡| 97精品久久久久久久久久精品| 夜夜爽夜夜爽视频| av女优亚洲男人天堂| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 免费高清在线观看视频在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品久久久久成人av| 午夜免费观看性视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 久久久久人妻精品一区果冻| 久久精品国产a三级三级三级| 精品熟女少妇av免费看| 视频中文字幕在线观看| 日本91视频免费播放| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 一区二区三区乱码不卡18| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产一区二区在线观看日韩| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日韩电影二区| 成人国产麻豆网| 午夜91福利影院| 日本与韩国留学比较| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品一区二区三卡| 最新中文字幕久久久久| 日韩亚洲欧美综合| 18+在线观看网站| 观看av在线不卡| 精品国产国语对白av| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| a级毛片在线看网站| 黄片播放在线免费| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 日韩av在线免费看完整版不卡| 午夜免费鲁丝| 日韩电影二区| 下体分泌物呈黄色| 蜜桃在线观看..| 美女主播在线视频| 国产亚洲精品久久久com| 成人午夜精彩视频在线观看| a级毛片在线看网站| 天美传媒精品一区二区| av在线app专区| 国产成人精品久久久久久| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲精品456在线播放app| 欧美日韩综合久久久久久| 一级片'在线观看视频| 国产日韩欧美视频二区| 99视频精品全部免费 在线| 国产精品免费大片| 九九爱精品视频在线观看| 两个人的视频大全免费| av国产精品久久久久影院| 亚洲少妇的诱惑av| 日韩av不卡免费在线播放| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲精品,欧美精品| 国产黄色免费在线视频| 婷婷色综合www| a级片在线免费高清观看视频| 男人操女人黄网站| 一本一本综合久久| 成年人免费黄色播放视频| 日韩大片免费观看网站| 国产精品蜜桃在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 日本欧美视频一区| 亚洲美女视频黄频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久久国产精品麻豆| 国产成人精品婷婷| 亚洲av在线观看美女高潮| 人成视频在线观看免费观看| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品人妻久久久影院| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 免费日韩欧美在线观看| 五月开心婷婷网| 大片电影免费在线观看免费| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 精品人妻偷拍中文字幕| av电影中文网址| 亚洲无线观看免费| 国产日韩欧美亚洲二区| av网站免费在线观看视频| 亚洲精品色激情综合| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 波多野结衣一区麻豆| 久久热在线av| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品亚洲成国产av| 亚洲熟妇熟女久久| 免费人妻精品一区二区三区视频| svipshipincom国产片| 怎么达到女性高潮| 欧美久久黑人一区二区| 国产精品1区2区在线观看. | 亚洲中文日韩欧美视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| www.999成人在线观看| 后天国语完整版免费观看| 午夜日韩欧美国产| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 老司机福利观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产成人影院久久av| 午夜福利视频精品| 十八禁网站免费在线| 国产亚洲欧美精品永久| 日本五十路高清| 青草久久国产| 国产精品欧美亚洲77777| 悠悠久久av| 亚洲黑人精品在线| 欧美大码av| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 高清av免费在线| 一级毛片精品| 午夜福利影视在线免费观看| 午夜激情av网站| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久这里只有精品19| 淫妇啪啪啪对白视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 麻豆乱淫一区二区| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 男女午夜视频在线观看| 大香蕉久久网| 成年人黄色毛片网站| 一级毛片电影观看| 亚洲伊人色综图| 亚洲人成77777在线视频| 正在播放国产对白刺激| 精品国产一区二区三区四区第35| 99热国产这里只有精品6| 精品福利观看| 一夜夜www| 国产1区2区3区精品| 18禁国产床啪视频网站| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 另类精品久久| 免费看十八禁软件| 国产精品一区二区精品视频观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产片内射在线| 国产野战对白在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 一二三四在线观看免费中文在| 丝袜美腿诱惑在线| 久久精品国产综合久久久| 久久精品91无色码中文字幕| 91九色精品人成在线观看| 一二三四社区在线视频社区8| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 国产成人影院久久av| 国产精品熟女久久久久浪| 午夜福利免费观看在线| e午夜精品久久久久久久| 国产精品久久久久久精品电影小说| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产av一区二区精品久久| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产欧美亚洲国产| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产一区有黄有色的免费视频| 99久久国产精品久久久| 日本av手机在线免费观看| 黄色怎么调成土黄色| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 成人国产一区最新在线观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 色94色欧美一区二区| 丰满迷人的少妇在线观看| 啦啦啦免费观看视频1| 99热网站在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| tocl精华| 亚洲精品中文字幕在线视频| 欧美成狂野欧美在线观看| 久热爱精品视频在线9| 免费观看av网站的网址| 一区二区三区乱码不卡18| 五月开心婷婷网| 高潮久久久久久久久久久不卡| 欧美午夜高清在线| 久久久久精品国产欧美久久久| 精品国产一区二区三区四区第35| 十分钟在线观看高清视频www| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 精品国产乱码久久久久久小说| 另类精品久久| 免费人妻精品一区二区三区视频| 黑丝袜美女国产一区| 欧美成人免费av一区二区三区 | 国产主播在线观看一区二区| 欧美中文综合在线视频| 人妻 亚洲 视频| 中文字幕色久视频| tube8黄色片| 99久久精品国产亚洲精品| 18禁观看日本| 国产麻豆69| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 欧美日韩视频精品一区| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲熟女毛片儿| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久 成人 亚洲| 国产在线视频一区二区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 老汉色av国产亚洲站长工具| 天堂8中文在线网| 国产精品免费一区二区三区在线 | 真人做人爱边吃奶动态| 国产成人精品在线电影| 成人精品一区二区免费| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲色图综合在线观看| www.999成人在线观看| 人人澡人人妻人| 亚洲av美国av| 精品国内亚洲2022精品成人 | 大陆偷拍与自拍| 国产免费视频播放在线视频| 国产一区二区激情短视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产熟女午夜一区二区三区| 免费在线观看影片大全网站| 免费观看a级毛片全部| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲黑人精品在线| 超碰成人久久| 国产在线免费精品| av天堂久久9| 欧美 日韩 精品 国产| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美人与性动交α欧美软件| 久久毛片免费看一区二区三区| 女警被强在线播放| 色综合婷婷激情| 久久狼人影院| 最新的欧美精品一区二区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 一个人免费看片子| 久久久久久久久久久久大奶| xxxhd国产人妻xxx| 日韩视频在线欧美| 狠狠狠狠99中文字幕| 精品国产乱子伦一区二区三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 嫁个100分男人电影在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 岛国在线观看网站| 精品少妇黑人巨大在线播放| 欧美中文综合在线视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲人成电影免费在线| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 婷婷丁香在线五月| 国产又爽黄色视频| 一级毛片电影观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 精品人妻在线不人妻| 成人18禁在线播放| 99国产精品免费福利视频| 窝窝影院91人妻| 色94色欧美一区二区| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲av日韩在线播放| 国产精品久久久久成人av| 男女下面插进去视频免费观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 这个男人来自地球电影免费观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 99热国产这里只有精品6| 99久久人妻综合| 首页视频小说图片口味搜索| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产成人啪精品午夜网站| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 99久久精品国产亚洲精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 一级片'在线观看视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 嫁个100分男人电影在线观看| 超碰97精品在线观看| 99热国产这里只有精品6| 午夜免费成人在线视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 成人国产一区最新在线观看| 中文字幕色久视频| 欧美黑人精品巨大| 欧美久久黑人一区二区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 制服诱惑二区| 国产精品影院久久| 高清av免费在线| 国产不卡av网站在线观看| 精品第一国产精品| 午夜福利免费观看在线| 757午夜福利合集在线观看| 男女边摸边吃奶| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99久久国产精品久久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 成人18禁在线播放| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 成年动漫av网址| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 99在线人妻在线中文字幕 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产成人欧美在线观看 | 99久久国产精品久久久| 国产高清视频在线播放一区| 99riav亚洲国产免费| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲av第一区精品v没综合| 中文字幕高清在线视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲国产中文字幕在线视频| 免费看a级黄色片| 99久久国产精品久久久| 丰满饥渴人妻一区二区三| 欧美在线一区亚洲| 香蕉久久夜色| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 亚洲国产看品久久| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲少妇的诱惑av| 午夜老司机福利片| 99在线人妻在线中文字幕 | 黑人猛操日本美女一级片| 欧美在线黄色| 777米奇影视久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲免费av在线视频| 亚洲伊人色综图| 午夜激情久久久久久久| 欧美黄色片欧美黄色片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 黄频高清免费视频| 亚洲欧美激情在线| 国产一区二区在线观看av| 久久狼人影院| 久久青草综合色| 欧美激情高清一区二区三区| 国产视频一区二区在线看| 女警被强在线播放| 国产又色又爽无遮挡免费看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 99国产综合亚洲精品| 精品一区二区三区四区五区乱码| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 最新的欧美精品一区二区| 午夜精品国产一区二区电影| 成人三级做爰电影| 国产一卡二卡三卡精品| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产福利在线免费观看视频| 国产亚洲一区二区精品| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲av电影在线进入| 下体分泌物呈黄色| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 精品久久久久久久毛片微露脸| 97人妻天天添夜夜摸| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 丁香欧美五月| 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲欧洲日产国产| 亚洲精品美女久久av网站| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 成年动漫av网址| 国产不卡av网站在线观看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 欧美午夜高清在线| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产深夜福利视频在线观看| av一本久久久久| 国产成人精品在线电影| 又紧又爽又黄一区二区| 日本vs欧美在线观看视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 一区二区三区国产精品乱码| 欧美在线一区亚洲| 中文字幕制服av| 美女扒开内裤让男人捅视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 美女国产高潮福利片在线看| 日韩有码中文字幕| 国产激情久久老熟女| 亚洲精品一二三| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲精品自拍成人| 97在线人人人人妻| 正在播放国产对白刺激| 亚洲九九香蕉| 久久久精品区二区三区| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 高清视频免费观看一区二区| 超碰成人久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产不卡一卡二| 国产1区2区3区精品| 日韩人妻精品一区2区三区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久久久久精品国产欧美久久久| 老司机影院毛片| 午夜两性在线视频| 亚洲成国产人片在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美性长视频在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 考比视频在线观看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 一区二区三区精品91| 男女午夜视频在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 黄色视频,在线免费观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| av免费在线观看网站| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产精品免费一区二区三区在线 | 日韩一区二区三区影片| 99热网站在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 美女国产高潮福利片在线看| 一区二区av电影网| 免费在线观看完整版高清| 欧美国产精品va在线观看不卡| 欧美日韩福利视频一区二区| 午夜福利乱码中文字幕| 黑人操中国人逼视频| 青草久久国产| av在线播放免费不卡| 午夜日韩欧美国产| 中文欧美无线码| 欧美av亚洲av综合av国产av| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 一本综合久久免费| 69精品国产乱码久久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 一本久久精品| tocl精华| 人妻 亚洲 视频| 一本综合久久免费| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美成狂野欧美在线观看| 成年动漫av网址| 精品国产国语对白av| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 精品国产国语对白av| 国产av又大| 国产主播在线观看一区二区| 欧美乱码精品一区二区三区| 久9热在线精品视频| 另类亚洲欧美激情| 高清欧美精品videossex| 一区在线观看完整版| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 亚洲三区欧美一区| 大片电影免费在线观看免费| 久久国产精品大桥未久av| 欧美亚洲日本最大视频资源| 成人18禁在线播放| 免费观看av网站的网址| 亚洲 国产 在线| 青青草视频在线视频观看|