豬流行性腹瀉診斷與防控

豬流行性腹瀉（Porcineepidemicdiarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的一種高度傳染性豬腸道疾病，臨床以水樣腹瀉、嘔吐和嚴(yán)重脫水為主要特征[1]。20世紀(jì)70年代歐洲的荷蘭和英國(guó)率先報(bào)道了該病。2010年末PEDV發(fā)生變異，導(dǎo)致亞洲、美洲和歐洲大范圍暴發(fā)PED疫情。有研究表明[2-5]，近年來我國(guó)PEDV毒株不斷變異，以G2a、G2b基因亞型為代表的變異毒株成為主要流行毒株，其抗原表位區(qū)域與CV777、LZC等國(guó)內(nèi)早期G1基因型經(jīng)典毒株存在較大差異，現(xiàn)有疫苗對(duì)新變異毒株不能提供完全保護(hù)。豬場(chǎng)一旦暴發(fā)PED，哺乳仔豬尤其是新生哺乳仔豬發(fā)病速度快、病程短、發(fā)病率和死亡率高，防控難度極大且防控效果差，損失極為慘重。本文剖析了一例規(guī)模化豬場(chǎng)暴發(fā)PED緊急防控策略，為科學(xué)防控豬流行性腹瀉提供借鑒。

1材料與方法

1.1臨床調(diào)查

疫情暴發(fā)期，豬場(chǎng)產(chǎn)房A區(qū)、B區(qū)共存欄母豬470頭，A區(qū)產(chǎn)房存欄14日齡哺乳仔豬2219頭，B區(qū)產(chǎn)房新出生仔豬2026頭。

A區(qū)產(chǎn)房：母豬首先出現(xiàn)腹瀉癥狀，隨后仔豬出現(xiàn)水樣腹瀉癥狀，部分仔豬伴有嘔吐情況，但大部分仔豬體況較好，脫水不嚴(yán)重，能正常哺乳（圖1左）。哺乳仔豬腹瀉率100% ，死亡率為 6.85% （152/2219），弱豬淘汰率為 5.99% （133/2219），合計(jì)死淘率為 12.84%₉₀

B區(qū)產(chǎn)房：仔豬新出生當(dāng)天開始腹瀉，腹瀉和脫水癥狀嚴(yán)重（圖1右），病程短，死亡快，沒有有效的治療措施，出生72h內(nèi)死淘率高達(dá) 100% 。

圖1產(chǎn)房發(fā)病期狀態(tài)（左為A區(qū)，右為B區(qū)）

1.2快速診斷

采集腹瀉仔豬糞便、母豬糞便、乳汁等樣品25份，使用熒光定量PCR方法對(duì)豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（PRoV）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室快速鑒別診斷。同時(shí)采集發(fā)病豬肛拭子、血液以及病死豬淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、肺臟、肝臟、腦等樣品15份，使用熒光定量PCR方法進(jìn)行非洲豬瘟病毒（ASFV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒（PRV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）4種重要豬病毒檢測(cè)，評(píng)估混合感染情況。

1.3返飼感染

采集典型患病24～36h哺乳仔豬的腸道及其內(nèi)容物、新鮮腹瀉糞便進(jìn)行剪碎、磨漿與混合，作為備用返飼物。返飼物投喂前進(jìn)行ASFV、CSFV、PRV、PRRSV的4種重要豬病毒以及PEDV熒光定量PCR檢測(cè)，將4種重要豬病毒均為陰性，且PEDV陽性，CT值在20以下的樣品作為確認(rèn)返飼物。根據(jù)返飼物病毒濃度、母豬體況和耐受程度，將確認(rèn)返飼物按1：5～1：10兌水混勻，以 25～50mL （次·頭）投喂給無腹瀉癥狀產(chǎn)房母豬（腹瀉母豬視為已自然感染）以及其它欄舍的全部母豬（妊娠母豬、空懷母豬和后備母豬），2次/d，連續(xù)2d進(jìn)行返飼。返飼物病毒濃度和投喂量以母豬出現(xiàn)輕微腹瀉癥狀且腹瀉持續(xù)2～3d后能逐步恢復(fù)正常。

返飼評(píng)估：投喂之日起4d內(nèi)母豬出現(xiàn)腹瀉或明顯厭食減料癥狀的母豬，做好標(biāo)記，視為感染。投喂之后第4d仍未出現(xiàn)腹瀉、減料癥狀的產(chǎn)房母豬群、其它母豬群分別隨機(jī)采集10份和15份肛拭子檢測(cè)PEDV，進(jìn)行排毒和感染比例評(píng)估。返飼后4d內(nèi)全群母豬總感染率達(dá)到 80% 以上，視為返飼成功。返飼期間禁止帶豬消毒，以免影響返飼效果。

1.4藥物救治

返飼結(jié)束后7d，使用衛(wèi)可1：400進(jìn)行全場(chǎng)環(huán)境和豬體噴灑消毒。對(duì)豬場(chǎng)各棟進(jìn)行封鎖，每棟?rùn)谏嵊蓪Ｈ素?fù)責(zé)。進(jìn)出豬欄換鞋，洗手消毒，避免交叉污染。每天清掃欄舍兩次以上，保持產(chǎn)床清潔。地面和墻面撒石灰粉，保持環(huán)境干燥。提高舍溫，嚴(yán)防冷刺激。所有病死豬進(jìn)行無害化處理。

關(guān)注并解決病豬脫水、電解質(zhì)紊亂問題并補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。通過灌服含有多肽、短鏈脂肪酸的藥物，腹腔注射葡萄糖生理鹽水，飲水給予電解速補(bǔ)。

1.5疫苗免疫

應(yīng)急期間（緊急返飼當(dāng)天至返飼后100d內(nèi)），一部分批次生產(chǎn)母豬不注射疫苗，另一部分批次生產(chǎn)母豬在產(chǎn)前3周注射腹瀉三聯(lián)活疫苗 +. 二聯(lián)滅活疫苗，觀察返飼效果，并根據(jù)產(chǎn)房仔豬臨床腹瀉發(fā)病率、仔豬成活率等情況調(diào)整免疫程序。

疫情穩(wěn)定控制后，實(shí)施常態(tài)化免疫，免疫方案為：每年6～9月份高溫季節(jié)不免疫腹瀉疫苗，入秋后于10月份全場(chǎng)母豬普免豬腹瀉三聯(lián)活疫苗 + 二聯(lián)滅活疫苗，12月至次年5月分娩的母豬在產(chǎn)前3周跟胎免疫二聯(lián)滅活疫苗。

疫苗免疫方案：疫苗選擇豬流行性腹瀉一豬傳染性胃腸炎一豬輪狀病毒三聯(lián)活疫苗，豬流行性腹瀉-豬傳染性胃腸炎二聯(lián)滅活疫苗。應(yīng)急期間和普免期間，母豬頸部肌肉注射三聯(lián)活疫苗2頭份/頭，同時(shí)后海穴注射二聯(lián)滅活疫苗 /頭。懷胎期間，母豬產(chǎn)前3周后海穴注射二聯(lián)滅活疫苗4mL/頭。

1.6持續(xù)監(jiān)測(cè)

在返飼后第30天、40天、60天、70天、80天、100天抽檢糞便樣品進(jìn)行PEDV含量檢測(cè)。100d后繼續(xù)監(jiān)測(cè)，每季度抽樣監(jiān)測(cè)PEDV。

2結(jié)果與分析

2.1實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果

采用混樣方式檢測(cè)樣品40份，在腹瀉仔豬糞便、腹瀉母豬糞便、腹瀉母豬乳汁、無腹瀉母豬糞便中均檢出PEDV，CT值在19.35～33.26（見表1），表明PEDV病毒含量較高。糞便樣品及乳汁TGEV、PRoV為陰性，發(fā)病豬肛拭子、血液和組織ASFV、CSFV、PRV、PRRSV為陰性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合臨床發(fā)病情況，可以確定該豬場(chǎng)此次腹瀉疫情由PEDV引起。

表1疫情暴發(fā)時(shí)樣品熒光PCR檢測(cè)結(jié)果

備注：“—”代表該項(xiàng)目未檢測(cè)，重要豬病為ASFV、CSFV、PRV、PRRSV。

2.2返飼感染結(jié)果

使用腹瀉仔豬腸道病料返飼感染母豬2036頭，連續(xù)觀察4d，結(jié)果累計(jì)有1214頭母豬出現(xiàn)腹瀉或厭食減料癥狀，表明已發(fā)生人工感染。對(duì)返飼后第4天仍未出現(xiàn)癥狀的產(chǎn)房母豬、其它欄舍母豬分別隨機(jī)采集10份和15份肛拭子進(jìn)行PEDV檢測(cè)，結(jié)果產(chǎn)房母豬群和其它母豬群PEDV陽性率分別為 70% （7/10）和 166.67% （10/15）。根據(jù)表2的數(shù)據(jù)估測(cè)出返飼后母豬群總感染率為 86.74% （見表2），超過感染率評(píng)判指標(biāo)（ 80% ），表明豬群返飼成功。

表2母豬返飼感染結(jié)果

備注：其它欄舍母豬包括妊娠、空懷和后備母豬。總感染數(shù) Σ=Σ 有癥狀母豬數(shù)量 + 估測(cè)無癥狀母豬感染數(shù)量。

2.3臨床防治效果

PED集中暴發(fā)期，采用補(bǔ)充鹽水和平衡電解質(zhì)的救治措施。此疫情暴發(fā)期間，A區(qū)產(chǎn)房仔豬已達(dá)到14日齡，通過積極救治，斷奶仔豬成活率為 87.16% ；而由于B區(qū)產(chǎn)房為0日齡新生仔豬，出生后幾個(gè)小時(shí)即開始拉稀，無有效的治療措施，死亡率高達(dá) 100% 。說明在PED病例中，日齡是影響仔豬成活率的重要因素。經(jīng)病料返飼母豬后15d、29d、51d、65d、 83d 、100d生產(chǎn)的6個(gè)批次0～7日齡仔豬疑似PED腹瀉率為 0%～92.49% ，斷奶成活率為 63.96%～95.67% （見表3），說明返飼發(fā)揮了保護(hù)仔豬作用，但隨著返飼間隔時(shí)間延長(zhǎng)保護(hù)作用下降，需要在產(chǎn)前注射免疫疫苗增強(qiáng)免疫力。100d后豬場(chǎng)實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定生產(chǎn)，常態(tài)化免疫期間仔豬成活率達(dá)到 95.76% 。

表3仔豬發(fā)病和批次生產(chǎn)情況

2.4持續(xù)監(jiān)測(cè)結(jié)果

母豬返飼后對(duì)母豬及仔豬糞便排毒進(jìn)行了持續(xù)監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示返飼30d、 40d 、60d、70d、80d后母豬及仔豬糞便樣品的PEDV陽性率從 100% 降至 40% ，且糞便樣品CT值從19.55逐漸升至34.21，表明仔豬糞便中病毒載量逐漸下降（見表4）。返飼100d擴(kuò)大樣品檢測(cè)數(shù)量，發(fā)現(xiàn)仔豬糞便PEDV陽性率已降為0，此后歷經(jīng)穩(wěn)定生產(chǎn)期，持續(xù)監(jiān)測(cè)從未檢測(cè)出PEDV陽性樣品。

表4PEDV持續(xù)監(jiān)測(cè)結(jié)果

3討論

返飼感染是一種古老而傳統(tǒng)的人工主動(dòng)免疫方式。有研究表明，母豬返飼PED病料可以降低暴發(fā)期仔豬腹瀉率、死亡率和腹瀉峰值，縮短腹瀉持續(xù)時(shí)間。本案例的豬場(chǎng)暴發(fā)PED時(shí)，疫情迅猛，哺乳仔豬發(fā)病率高達(dá) 100% ，稍大日齡仔豬和小日齡仔豬的死淘率分別達(dá)到 12.84% （A區(qū)產(chǎn)房）和 100% （B區(qū)產(chǎn)房），預(yù)測(cè)常規(guī)防控方法難以在短時(shí)間內(nèi)控制疫情。為盡快撲滅疫情，采用母豬返飼方法，在2d內(nèi)使母豬群PEDV野毒人工感染率達(dá)到 186.74% ，快速建立相對(duì)整齊的基礎(chǔ)種群免疫力，為帶毒生產(chǎn)提供母源抗體保護(hù)。

母豬返飼后第15天分娩的第一批仔豬（A區(qū)產(chǎn)房）腹瀉率降至 9.18% ，斷奶成活率為 91.77% ，證明返飼野毒可以為仔豬提供保護(hù)力。返飼后第29天分娩第二批仔豬（B區(qū)產(chǎn)房，母豬產(chǎn)前3周免疫PED活疫苗和滅活苗），腹瀉率仍高達(dá) 86.02% ，這可能與疫情暴發(fā)后B區(qū)產(chǎn)房病毒載量高（CT值19.55）有關(guān)，但仔豬斷奶成活率仍達(dá)到 89.59% ，說明母豬產(chǎn)生的抗體對(duì)拉稀仔豬是有保護(hù)作用。而返飼后第51天、65天分娩的第三、第四批仔豬腹瀉率又上升至 90% 以上，成活率降低至 83.18% 和 63.69% ，說明豬群野毒感染產(chǎn)生的免疫力隨著返飼時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸下降，與病毒載量較高（CT值約26）、母豬產(chǎn)前未免疫有關(guān)。返飼后第83天、100天分娩第五、第六批仔豬（母豬產(chǎn)前3周免疫PED活疫苗和滅活苗），仔豬腹瀉率降低至 2.84% 和 10% ，成活率提高至 95.67% 和 95.18% ，說明野毒感染的母豬經(jīng)過產(chǎn)前疫苗免疫能更好的激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生更高的保護(hù)性抗體。

結(jié)語

研究表明，母豬返飼可以使PEDV野毒在豬群長(zhǎng)期存在，返飼15d帶毒生產(chǎn)起效，80d左右野毒載量明顯下降（CT值34.21）且臨床腹瀉率降低至正常水平（ 2.84% ），100d后能夠清除PEDV對(duì)豬場(chǎng)的影響，通過疫苗免疫可以長(zhǎng)期穩(wěn)定防控PED。需要注意的是，嚴(yán)格篩選病料是返飼成功的前提條件，本研究通過鑒別診斷確定疫情為PEDV感染，并排除TGEV、PRoV、ASFV、CSFV、PRV和PRRSV，避免返飼導(dǎo)致重要豬病的傳播。同時(shí)，返飼物PEDV含量要適度，應(yīng)根據(jù)母豬耐受度和恢復(fù)力來調(diào)整返飼用量，確保豬群整體安全。此外，建議返飼后盡快全面實(shí)施PED疫苗免疫，降低豬群病毒載量，以便縮短疫情持續(xù)時(shí)間。

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收稿日期：2025-06-05

作者簡(jiǎn)介：梁小梅（1974一），女，漢族，助理獸醫(yī)師。研究方向：基層動(dòng)物疫病防控。*通信作者：秦毅斌（1983—），男，漢族，碩士，高級(jí)獸醫(yī)師。研究方向：動(dòng)物傳染病綜合防控。