1羊腸毒血癥病原及臨床癥狀分析
1.1病原
羊腸毒血癥的病原是D型產(chǎn)氣莢膜梭菌也叫魏氏梭菌,屬于芽孢桿菌科梭菌屬的成員,是革蘭氏陽性大桿菌,其菌體長度在 2~8μm ,寬度為 1~1.5μm ,大多單個存在或者排列成短鏈且兩端呈現(xiàn)鈍圓狀,還具有莢膜結(jié)構(gòu)。D型產(chǎn)氣莢膜梭菌屬于嚴格厭氧菌且對營養(yǎng)要求并不高,在普通厭氧培養(yǎng)基中會呈現(xiàn)涵涌發(fā)酵狀生長,這一特性使其在實驗室檢測中比較容易識別。菌在土壤、污水以及動物腸道中廣泛存在,羊一般是因為采食了被芽孢污染的飼草或者飲水才感染。在健康羊的腸道當(dāng)中,D型菌會受到正常菌群的抑制,僅僅少量繁殖并且產(chǎn)生微量的毒素,然而當(dāng)飼料突然發(fā)生改變,特別是從干草轉(zhuǎn)變?yōu)楦咛妓衔镲暳蠒r,比如谷物或者青嫩多汁、富含蛋白質(zhì)的牧草,瘤胃微生物群落就會失衡,消化功能出現(xiàn)紊亂,D型菌便得以突破抑制,在腸道內(nèi)大量增殖并且產(chǎn)生ε前毒素。ε前毒素經(jīng)胰蛋白酶激活轉(zhuǎn)化為具有生物活性的ε毒素,該毒素是羊腸毒血癥的主要致病因子。 εε 毒素通過與腸道內(nèi)皮細胞受體結(jié)合,形成跨膜孔道,導(dǎo)致腸黏膜通透性增加,引發(fā)腸道炎癥與出血[]。
1.2臨床癥狀
羊腸毒血癥臨床癥狀特點是急性經(jīng)過,病程一般不會超過 24h ,部分病例能短到 1~4h 按照臨床表現(xiàn),可分為最急性型、急性型以及亞急性型。最急性型病例通常沒有任何前驅(qū)癥狀,會突然倒地死亡,死前或許會有短暫抽搐或者鳴叫;急性型病例初期表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減退且腹部膨脹,還伴有腹痛癥狀,病羊常離群呆立、臥地不起或者獨自奔跑,隨著病情不斷進展,會出現(xiàn)劇烈腹瀉,糞便呈現(xiàn)黃綠色水樣,其中混有黏液或血液,還散發(fā)著惡臭氣味。瀕死期病羊全身肌肉顫抖、眼球轉(zhuǎn)動、磨牙且流涎,頭頸后仰呈角弓反張姿勢,四肢像游泳一樣劃動,最終昏迷死亡;亞急性型病例病程能夠延長到12h或者2~3d,初期表現(xiàn)為興奮不安、空嚼以及有異食癖(比如采食泥土),隨后出現(xiàn)步態(tài)不穩(wěn)、肌肉痙攣以及昏迷等癥狀,部分病例在病程當(dāng)中可反復(fù)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,像咬牙、眨眼、甩耳等。
2羊腸毒血癥的診斷方法
2.1臨床診斷技術(shù)
臨床診斷在羊腸毒血癥防控中是首要環(huán)節(jié),需要依靠流行病學(xué)調(diào)查與癥狀觀察建立初步判斷。羊腸毒血癥病大多發(fā)生在6月齡到2歲的綿羊身上,山羊患病情況比較少見,呈現(xiàn)出地方性流行或者散發(fā)的特征;發(fā)病季節(jié)主要集中在春末到秋初,尤其和氣候突然變化、飼草發(fā)生霉變或者飼料進行更換密切相關(guān)。如果養(yǎng)殖場存在圈舍環(huán)境潮濕、通風(fēng)條件不良、飼養(yǎng)密度過高等管理方面的缺陷,就會顯著增加羊發(fā)病的風(fēng)險。臨床癥狀表現(xiàn)為急性發(fā)病過程,潛伏期一般是 12~24h ,病羊剛開始會出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退、腹部出現(xiàn)膨脹等前驅(qū)癥狀,之后會迅速發(fā)展成劇烈腹瀉,糞便呈現(xiàn)黃綠色水樣還混有黏液或者血液;同時伴有磨牙、鳴叫等神經(jīng)方面的癥狀,羊死亡之前常常會出現(xiàn)四肢做劃水樣運動、體溫下降到正常體溫以下等典型特征。
臨床診斷需注意與羊快疫、羊猝狙等梭菌性疾病進行區(qū)分,后者雖同屬梭菌感染,但羊快疫以真胃出血性炎癥為主,羊猝狙則以骨骼肌出血為特征性病變。此外,需排除大腸埃希菌病、沙門氏菌病等細菌性腹瀉疾病,此類疾病雖可引起腹瀉,但病程相對緩慢且神經(jīng)癥狀不明顯。
2.2實驗室檢測技術(shù)
實驗室檢測是確診羊腸毒血癥的核心重要手段,要通過病原分離、毒素檢測以及血清學(xué)試驗綜合驗證。首選檢測方法是腸道內(nèi)容物細菌分離培養(yǎng),取病死羊回腸末端黏膜及內(nèi)容物劃線接種到血液瓊脂平板,在37℃厭氧環(huán)境下培養(yǎng)18~24h,能夠觀察到圓形、灰白色、半透明且邊緣整齊的菌落,鏡檢可看到革蘭氏陽性大桿菌呈鏈狀排列的狀態(tài)。進一步通過牛乳培養(yǎng)基爆裂試驗,能夠鑒定產(chǎn)氣莢膜梭菌,陽性反應(yīng)表現(xiàn)為培養(yǎng)基凝固后重新液化,并產(chǎn)生大量氣體;毒素檢測可采用小鼠體內(nèi)試驗或者酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),前者通過腹腔注射病料濾液觀察小鼠死亡情況,后者利用特異性抗體檢測糞便或腸道內(nèi)容物中的 ε 毒素;血清學(xué)檢測推薦使用中和試驗或者瓊脂擴散試驗,檢測病羊血清中抗毒素抗體效價,若雙份血清效價呈4倍以上增長則具有診斷意義2。
2.3現(xiàn)場快速檢測技術(shù)
基層診療時,可以采用簡便快速的檢測方法提高診斷效率。其中,膠體金免疫層析技術(shù)已經(jīng)開發(fā)出針對產(chǎn)氣莢膜梭菌ε毒素的檢測卡,該檢測卡操作簡便,能在 15min 內(nèi)完成檢測,適用于養(yǎng)殖場現(xiàn)場篩查;PCR技術(shù)通過設(shè)計特異性引物擴增毒素基因片段,能夠從腸道內(nèi)容物或者糞便中直接檢測病原DNA(檢測流程如圖1所示),靈敏度可YL10?2CFU/g ,但是需要配備便攜式PCR儀;乳膠凝集試驗可用于檢測糞便中的毒素抗原,其試劑盒包含致敏乳膠顆粒與病料混合后,會出現(xiàn)肉眼可見凝集塊,即可判斷為陽性。現(xiàn)場檢測需要注意樣本采集規(guī)范,腸道內(nèi)容物應(yīng)該取自回腸末端5~10cm段以避免采集自大腸來減少污染風(fēng)險。
圖1羊腸毒血癥PCR技術(shù)檢測流程
3羊腸毒血癥的治療方案
3.1緊急救治措施
羊腸毒血癥發(fā)病急驟,病程短促,多數(shù)病羊未治療即死亡,但針對病程稍緩的病例需立即采取緊急救治措施。發(fā)現(xiàn)病羊后應(yīng)第一時間隔離至安靜、干燥的圈舍,避免應(yīng)激刺激。立即肌肉注射抗毒素血清,按每千克體重 5~10mI 劑量使用,以中和體內(nèi)游離的ε毒素。同時靜脈注射 5% 葡萄糖生理鹽水 500~1000mL ,加入 10% 安鈉咖注射液 10~20mL ,補充體液并糾正酸中毒。對于出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病羊,可肌肉注射硫酸鎂注射液 20~30mL ,緩解肌肉痙攣。若病羊體溫正常但食欲廢絕,需灌服 10% 石灰水溶液,大羊劑量為200mL 、羔羊劑量為 50~80mL ,以調(diào)節(jié)腸道pH值并抑制毒素產(chǎn)生。緊急救治過程中需每2h觀察一次病羊狀態(tài),記錄體溫、呼吸頻率及糞便性狀變化,為后續(xù)治療提供依據(jù)。
3.2抗菌藥物治療
抗菌藥物是控制羊腸毒血癥繼發(fā)感染的關(guān)鍵手段。治療時,可以選擇青霉素鈉注射液,按照每千克體重5萬~10萬單位的劑量,2次/d,肌肉注射,連續(xù)使用3~5d;如果病羊出現(xiàn)血便或者腸道出血癥狀,可聯(lián)合使用慶大霉素注射液,按照每千克體重1000~1500單位的劑量,2次/d,肌肉注射;對于慢性病例,可以采用磺胺胱與小蘇打混合后進行灌服,首日的劑量為 8~12g ,次日分2次灌服以此維持腸道抗菌濃度。需要注意的是,青霉素類藥物必須現(xiàn)用現(xiàn)配,且要避免與堿性藥物混合使用;磺胺類藥物首次劑量需要加倍,并且要配合等量碳酸氫鈉,防止結(jié)晶形成。治療期間應(yīng)當(dāng)每日采集糞便樣本進行細菌培養(yǎng),監(jiān)測病原菌載量變化,若連續(xù)2次檢測結(jié)果為陰性,就可考慮停藥3]。
3.3毒素中和療法
羊確診后,需要馬上注射產(chǎn)氣莢膜梭菌抗毒素血清,按照每千克體重 10~20mL 的劑量,進行靜脈注射或者多點肌肉注射,首次使用必須在發(fā)病6h之內(nèi)完成。對于已經(jīng)出現(xiàn)“軟腎癥”表現(xiàn)的病羊,可同時靜脈注射 100~200mL 葡萄糖酸鈣注射液,以此增強毛細血管通透性,并促進毒素排出。如果病羊出現(xiàn)呼吸窘迫方面的癥狀,可肌肉注射2~4mL 尼可剎米注射液,從而改善病羊的呼吸功能。毒素中和治療需要持續(xù)3~5d時間,每天都要評估病羊神經(jīng)癥狀改善的情況。
3.4中醫(yī)輔助治療
中醫(yī)治療可作為羊腸毒血癥的輔助手段??刹捎们鍩峤舛?、健脾止瀉的中藥方劑,如白頭翁散加減:白頭翁30g 、黃連 15g 、黃柏 |20g 、秦皮 25g 、甘草 10g ,煎湯后灌服,1劑/d,連用3 d 若病羊出現(xiàn)腹脹癥狀,可加炒枳殼 、厚樸15g以行氣導(dǎo)滯。中藥治療需與西藥間隔4h使用,避免藥物相互作用。此外,可采用針灸療法,選取百會、脾俞、后三里等穴位進行弱刺激,1次/d,每次留針15min ,連續(xù)治療 3~5d
4羊腸毒血癥的預(yù)防措施
4.1科學(xué)規(guī)劃飼料供給
飼料類型的選擇,需要遵循低蛋白高纖維的原則,不能選用豆科牧草和苜蓿等高蛋白飼料,優(yōu)先選用禾本科干草和秸稈等粗纖維超 18% 的飼草;青貯飼料每日投喂量要控制在2kg以內(nèi),防止因乳酸含量過高造成腸道菌群失調(diào);精料補充料必須嚴格限制谷物所占的比例,玉米和小麥等易發(fā)酵碳水化合物含量不能超過總量的 50% ,可添加15%~20% 的麩皮或米糠來改善腸道蠕動。
供給頻率控制需遵循“少量多次”原則,成年羊日喂次數(shù)不低于3次,羔羊不低于4次,每次飼喂間隔不超過6h 夜間補飼量應(yīng)占日糧的 20%~30% ,防止長時間空腹導(dǎo)致的胃酸過度分泌。自動飼喂系統(tǒng)需設(shè)置單次出料量限制,避免羊短時間內(nèi)過量采食。對于放牧羊群,需控制早晨歸牧后的補飼量,防止因饑餓引發(fā)的暴食行為。
飼料供給時,需要重點關(guān)注營養(yǎng)成分平衡,留意蛋白能量比,粗蛋白水平應(yīng)當(dāng)維持在 12%~14% ,可消化蛋白占比不能低于 65% ;鈣磷比例需要控制在2:1~1.5:1,以此防止因鈣磷失衡引發(fā)代謝紊亂的情況;定期檢測飼草料當(dāng)中的重金屬含量,保證鉛、砷等有毒元素不超過國家飼料衛(wèi)生標準;冬季補飼期間可以添加 10.5%~1% 的碳酸氫鈉,用來緩沖瘤胃酸度并維持腸道微生物平衡[5]。
飼料轉(zhuǎn)換管理需執(zhí)行“7天過渡法”,新舊飼料比例按1:3、1:1、3:1逐級替換,每級過渡期不少于 轉(zhuǎn)換期間需密切觀察羊采食量及糞便性狀,發(fā)現(xiàn)腹瀉癥狀需立即暫停轉(zhuǎn)換并恢復(fù)原飼料。季節(jié)交替時需提前15d調(diào)整飼料配方,春季搶青期需逐步增加青綠飼料比例,秋季牧草結(jié)籽期需補充維生素E和硒制劑,增強機體抗氧化能力[。
4.2強化免疫接種程序
首先需選用針對D型產(chǎn)氣莢膜梭菌的專用疫苗,當(dāng)前市場主流產(chǎn)品為羊腸毒血癥滅活疫苗或包含D型菌的多聯(lián)苗,如三聯(lián)四防疫苗(同時預(yù)防羊快疫、羊猝狙、羊腸毒血癥及羔羊痢疾)。疫苗需通過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸藥GMP認證,確保每劑疫苗效價不低于 10°9CFU/mL ,且保存于2~8℃冷藏環(huán)境,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致抗原失活。免疫程序需根據(jù)羊場生產(chǎn)周期制定,種羊建議每年春、秋兩季各接種1次,每次肌肉注射 ?5mL ;羔羊需在斷奶后15d內(nèi)完成首免,間隔4周后二免,每次劑量 3mL ;育肥羊在6月齡時加強免疫1次。接種部位應(yīng)選擇頸部或股外側(cè)肌肉豐厚處,使用7號針頭垂直進針,確保疫苗注入肌肉層,避免漏液或注入脂肪層影響吸收。免疫后需建立個體檔案,記錄批號、接種時間及操作人員信息,便于追溯管理。
4.3落實環(huán)境衛(wèi)生管控
圈舍清潔要嚴格執(zhí)行“三勤兩清”制度,其中包括勤掃圈舍內(nèi)的糞便、勤換動物的墊料、勤除各類污物,每日都要認真清掃飼槽和水槽,每周要對運動場進行徹底清理;糞便處理需采用干濕分離技術(shù),干糞要進行堆積發(fā)酵處理,尿液及污水要引入沼氣池或化糞池進行無害化處理,嚴禁將其直接排放至牧場或水源地;運動場要始終保持平整且無積水狀態(tài),要定期對其進行翻耕并撒生石灰,將土壤pH值調(diào)節(jié)至堿性以抑制病原菌繁殖[8]。
空欄期需使用 3% 火堿溶液對圈舍進行全方位噴灑,包括墻壁、地面、飼槽及飼養(yǎng)設(shè)備,作用24h后清水沖洗并空置7d。帶羊環(huán)境消毒需選用無刺激性消毒劑,如 10.2% 過氧乙酸或 0.5% 復(fù)合酚,每周2次霧化噴灑,重點覆蓋排污溝、料槽邊緣等污染高發(fā)區(qū)域。消毒劑需定期輪換使用,避免病原微生物產(chǎn)生耐藥性[]。
通風(fēng)控制方面,要同時兼顧溫度和濕度的管理,冬季的時候采用負壓通風(fēng)系統(tǒng),保證每小時換氣量不少于圈舍容積的3倍,以此防止氨氣、硫化氫等有害氣體濃度超出標準;夏季需要增設(shè)遮陽網(wǎng)和噴霧降溫裝置,并配合縱向通風(fēng)設(shè)備使用,將圈舍內(nèi)溫度控制在28℃以下,將相對濕度維持在 55%~70% ;通風(fēng)口需要安裝防鳥網(wǎng)以及60目以上的防蟲紗網(wǎng),用于阻止昆蟲和野生動物進入從而傳播病原。某現(xiàn)代化養(yǎng)殖場環(huán)境如圖2所示。
廢棄物處理需建立“日產(chǎn)日清”制度,糞便、墊料及污染飼料需使用密閉車輛運輸至指定處理點,嚴禁在圈舍周邊堆積。病死羊需按照《病死及病害動物無害化處理技術(shù)規(guī)范》要求,采用深埋法處理時,需選擇地勢高燥、遠離水源的區(qū)域,挖深2m以上的坑洞,撒布生石灰后覆蓋厚度不低于 1.5m 的土壤,并設(shè)立永久性標識[0]
結(jié)語
綜上所述,本文系統(tǒng)地闡述了羊腸毒血癥診斷治療和預(yù)防的措施,內(nèi)容既全面又具有實用價值,能為養(yǎng)殖業(yè)者提供科學(xué)方面的指導(dǎo)。通過實施科學(xué)規(guī)劃飼料、強化免疫接種以及環(huán)境衛(wèi)生管控等措施,可以有效降低羊腸毒血癥的發(fā)病概率,保障羊群能夠健康成長。未來,養(yǎng)殖業(yè)者需要積極采納并落實有效措施,以此提升養(yǎng)殖效益促進畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展。
圖2某現(xiàn)代化養(yǎng)殖場環(huán)境
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收稿日期:2025-06-06
作者簡介:鄧其亮(1975—),男,壯族,本科,畜牧師。研究方向:動物疫病防治。