蝴蚶菊發(fā)酵液對根結(jié)線蟲和斜紋夜蛾的生物活性

中圖分類號：S476+.9 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：：1673-2871（2025）07-182-07

Biological activity of Wedelia chinensis fermentation solution against Meloidogyne incongnita and Spodoptera litura

PANG Xiaowen， XIE Qinming （FisheriesCollegeofJimeiUniversity，Xiamen36lo21，F(xiàn)ujian，Cina）

Abstract： Inorder to develop the application of theinvasive alienplant Wedelia chinensis incrop pestcontrol，this paper investigatedthebiologicalactivityofdifferentconcentrationsofWedeliachinensis fermentationsolutionagainst twopests （Meloidogyne incongnitaand Spodoptera litura）inthefollowing twosetsofexperiments，one testisusingdiferentconcentrationsofWedeliachinensis fermentationsolution（stock solutionFB，diluted1OtimesFB10，anddiluted1times FB100）for indoorcontact-test against root-knot nematode second stagejuvenile（J2）;theother test is using diferentconcentrationsofWedeliachinensisfermentationsolution（diluted5timesFB5，diluted15timesFB15，anddiluted45times FB45）forsoaking taro leaves andthen fed to larvae of Spodoptera litura，andthe growthand development of Spodoptera litura wasobservedandrecorded.Both twosetsofexperimentsusedsterile waterasacontrolgroup;thechemicalcomponentsofWedeliachinensis fermentationsolutionalsowereanalyzedbyLC-MSmethod.Theresultsofthetestsshowed thathe Wedeliachinensis fermentationsolutionhadsomenematicidalactivitytorot-knotnematodesJ2，whenroot-knot nematodes J2 were treated with FB for 24h ^48h and ^72h ，thecorrected mortality rates were 25.54% 24.67% ，and 24.89% ，respectively.Moreover，after 48h and 72h of treatmentwithFB10 and FB1oo，the corrected mortality ratesof root-knot nematodes J2 both were above 10% .Thecorrected mortality rateof Spodoptera litura lst instar larvae was 34.15% bytheFB.TheFB5，F(xiàn)B15inhibitedthegrowthand developmentofSpodopteralitura larvae，delayedtheirdevelopmental period and reduced pupal mas，but there is no significantly diference compared to the control group.Among thechemical components ofWedelia chinensis fermentation solution，proportion of betaine is 8.78% ，proportion of homogentisic acid is 5.23% ，proportionof2，3-Dihydroxybenzoic acid is 3.04% ，and proportionof D -tartaricacidis 2.53% . In conclusion，the Wedeliachinensis fermentationsolutionhascertainbiologicalactivitiesagainstroot-knotnematodeand Spodoptera lituralarvae，whichcanbeusedasareferencefor thelaterdevelopmentofplantprotectionagentsofherbalorigintargeting the preventionandcontrolofroot-knot nematodeand Spodoptera lituralarvae andother harmful organisms. Keywords：Wedeliachinensis;Fermentationsolution;Melodogyneincongnita;Spodopteralitura;Bioactivity;Copositional analysis

我國是一個(gè)農(nóng)作物種植、生產(chǎn)大國，而病蟲害對作物的產(chǎn)量和品質(zhì)都有較大的影響，病蟲害已成為制約我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和可持續(xù)發(fā)展的重要因素之一。番茄生產(chǎn)過程中容易受到有害生物如根結(jié)線蟲（Meloidogyneincongnita）、斜紋夜蛾（Spodopteralitura）等侵害，無論是單一或者疊加的病蟲害均會加劇番茄植株的生理脅迫，最終由于防治困難而導(dǎo)致作物的減產(chǎn)減質(zhì)。據(jù)統(tǒng)計(jì)報(bào)道，我國病蟲害造成的農(nóng)作物產(chǎn)量損失高達(dá) 30% 以上。目前我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對有害生物的防治措施主要還是使用化學(xué)藥劑，雖然化學(xué)藥劑有用量少、作用快、效率高等特點(diǎn)，但化學(xué)農(nóng)藥一般具有高毒性、高污染性，還會使害蟲產(chǎn)生耐藥性。因此，尋找安全高效的生物防治措施是大勢所趨。

植物在生長發(fā)育過程中，會合成大量化學(xué)結(jié)構(gòu)多樣且具有獨(dú)特機(jī)制的次生代謝活性物質(zhì)，據(jù)報(bào)道已超過40萬種，如木脂素類、生物堿、黃酮、酚類、萜烯類等均有一定的生理活性，有的可以通過化感作用影響植物的生長發(fā)育，且具有抗蟲、殺蟲作用。通過深入研究這些植物次生代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)與功能，人們可以將這些物質(zhì)直接或間接應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上。菊（Wedeliachinensis）是菊科嘭菊屬多年生草本植物，原產(chǎn)于美洲，20世紀(jì)70年代作為地被植物引入我國，已被列為“世界上最有害的100種外來入侵物種\"之一，也是一種廣泛分布于中國南方各省份的資源量大的植物。研究表明，該植物含有三萜類化合物、二萜類化合物、倍半萜類化合物、類黃酮、有機(jī)酸和類固醇等活性物質(zhì)，具有抗炎、抗癌、抗氧化、抗微生物等功能4。同時(shí)在植物保護(hù)領(lǐng)域也有抗蟲、殺蟲的功效，有研究表明，嘭蝶菊提取液對萵苣指管蚜幼蟲有顯著的毒殺作用， 7.5% 的濃度毒殺效果最明顯5。南美菊精油對赤擬谷盜、玉米象和綠豆象均有一定的熏蒸毒力、觸殺毒力，對綠豆象種群抑制作用最明顯，種群抑制率為 37.63%～67.86%^[6] 。因此嘭菊中的活性物質(zhì)是優(yōu)良的植物保護(hù)劑，具備開發(fā)利用價(jià)值，將其開發(fā)成植物源農(nóng)藥，能變害為利，既可控制入侵植物的危害，又能生產(chǎn)出對環(huán)境安全無公害的植物源農(nóng)藥產(chǎn)品。

目前，嘭菊發(fā)酵液對根結(jié)線蟲、斜紋夜蛾等有害生物的生物活性鮮有報(bào)道。通過微生物發(fā)酵法工藝制備菊發(fā)酵液，研究該發(fā)酵液對根結(jié)線蟲、斜紋夜蛾的生物活性，并通過LC-MS技術(shù)分析嘭菊發(fā)酵液的化學(xué)組分，以探討是何種活性成分可能對有害生物的生長發(fā)育起控制作用，以期為菊提取液對作物害蟲的防控提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

嘭蝶菊取自廈門地區(qū)野外，干燥后粉碎，制成干粉末（過20自篩）備用；南方根結(jié)線蟲采自廈門集美后溪鎮(zhèn)蔬菜種植基地；斜紋夜蛾蟲卵購于科云生物有限公司；枯草芽孢桿菌由山東蘇柯漢生物工程股份有限公司提供；微生物菌劑由沃寶生物科技有限公司提供；纖維素酶、果膠酶由正宏生物科技有限公司提供；面包改良劑為師傅300復(fù)配面包酶制劑。

1.2 方法

1.2.1發(fā)酵液的制備方法發(fā)酵液配方為： 1kg 蝴菊干粉末， 30g 面包改良劑， 2g 枯草芽孢桿菌，10g 微生物菌劑， 2g 纖維素酶， 8g 果膠酶，與 15L 水混合均勻，將混合物裝入塑料桶中發(fā)酵，發(fā)酵起始溫度為 30～40^°C ，發(fā)酵時(shí)間30～50d，即可得到蝶菊發(fā)酵液母液 （67mg?mL^-1 ，F(xiàn)B）。

1.2.2線蟲懸浮液的制備于2023年5月從廈門集美后溪鎮(zhèn)蔬菜種植基地采集帶有根結(jié)的病根，將病根沖洗干凈，在解剖鏡下用鑷子或撥針挑取根結(jié)線蟲卵囊，置于鋪有兩層面巾紙的干凈培養(yǎng)皿上，3～5d后收集2齡幼蟲備用。

1.2.3發(fā)酵液殺線蟲活性的生物測定按發(fā)酵液濃度設(shè)置為3個(gè)處理：母液（FB）、稀釋10倍（FB10）、稀釋100倍（FB100）。然后用移液槍吸取100μL 線蟲懸浮液（30～50條）于24孔細(xì)胞板上，再分別吸取 100μL 不同倍數(shù)稀釋液，充分混合，蓋上24孔板，置于室溫下避光。同時(shí)以加 100μL 無菌水為空白對照（CK），3次重復(fù)。在處理24、48、72h后分別觀察菊發(fā)酵液處理組和對照組線蟲的死亡情況，加入1～2滴 1% 的 ΔNaOH 溶液，如果線蟲保持不動，則認(rèn)為線蟲死亡[7-8]。在顯微鏡下觀察、統(tǒng)計(jì)線蟲的存活數(shù)和死亡數(shù)，計(jì)算線蟲死亡率和校正死亡率。

死亡線蟲數(shù) ×100 線蟲死亡率/%=供試線蟲數(shù)

校正死亡率 /%=

處理組線蟲死亡率-對照組線蟲死亡率 ×100 。1-對照組線蟲死亡率

殺線蟲活性強(qiáng)弱的五級標(biāo)準(zhǔn)：校正死亡率≤10% ，用“-\"表示，為無活性；校正死亡率 10%～30% ，用“ + ”表示，為弱活性；校正死亡率 gt;30%～50% ，用4 ⁺⁺ ”表示，為中等活性；校正死亡率 gt;50%～80% ，用《 +++ ”表示，為較強(qiáng)活性；校正死亡率在 gt;80% ，用4 ++++ ”表示，為強(qiáng)活性]。

1.2.4發(fā)酵液對斜紋夜蛾幼蟲生長發(fā)育的影響試驗(yàn)于2023年9月中旬開始，對菊發(fā)酵液母液進(jìn)行稀釋，分別稀釋5倍（FB5）、15倍（FB15）、45倍（FB45），并以等量無菌水為對照（CK），用對應(yīng)的稀釋后的藥液浸泡芋頭葉 1min 后取出晾干，放入培養(yǎng)管中。每個(gè)培養(yǎng)管放入10頭斜紋夜蛾幼蟲，每個(gè)處理重復(fù)5次。試驗(yàn)開始后每天觀察幼蟲的蛻皮情況，并記錄蛻皮蟲數(shù)，計(jì)算幼蟲的發(fā)育歷期，時(shí)間單位為d。待幼蟲化蛹后稱測蛹質(zhì)量，質(zhì)量單位為mg。

1.2.5發(fā)酵液成分分析2024年3月，將菊發(fā)酵液在 4^°C 解凍，解凍后渦旋 1min ，混合均勻；精確移取適量樣本于 2mL 離心管中，濃縮干燥；接著加入 500μL 甲醇溶液到干燥后的樣本管中，渦旋1min;12000r?min^-14^°C 離心 10min ，取全部上清液，轉(zhuǎn)移至新的 2mL 離心管中，濃縮干燥；加入 150μL 80% 甲醇水配制的2-氯-L-苯丙氨酸 （4mg?L^-1） 溶液復(fù)溶樣品，取上清液過 0.22μm 膜，過濾液加入到檢測瓶中，用于LC-MS檢測。

色譜條件：使用ACQUITYUPLC HSS T3（2.1×100mm，1.8μm） 色譜柱， 0.3mL?min^-1 的流速，40^°C 的柱溫，進(jìn)樣量 2μL 。正離子模式，流動相為0.1% 甲酸乙腈（B2）和 0.1% 甲酸水（A2），梯度洗脫程序?yàn)椋?0～1min 8% B2； 1～8min ， 8%～98% B2; 8～ 10min ， 98% B2； 10～10.1min ， 98%～8% B2; 10.1～ 12min ， 8% B2。負(fù)離子模式，流動相為乙腈（B3）和 5mol?L^-1 甲酸銨水（A3），梯度洗脫程序?yàn)椋?～1min ， 8% B3； 1～8min . 8%～98% B3; 8～10min98% B3; 10～10.1min ， 98%～8% B3；10.1～12 min，8% B3。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子源（ESI），正負(fù)離子模式分別采集數(shù)據(jù)。正離子噴霧電壓為 3.50kV ，負(fù)離子噴霧電壓為 -2.50kV ，鞘氣 40arb ，輔助氣 10arb 。毛細(xì)管溫度為 325^°C ，以分辨率70000進(jìn)行一級全掃描，一級離子掃描范圍 100～1000m?z^-1 ，并采用HCD進(jìn)行二級裂解，碰撞能量為 30eV ，二級分辨率為17500，采集信號前3離子進(jìn)行碎裂，同時(shí)采用動態(tài)排除去除無必要的MS/MS信息。將發(fā)酵液樣本中檢測的特征峰分子質(zhì)量、保留時(shí)間、二級譜圖與植物譜圖庫進(jìn)行比較、匹配，實(shí)現(xiàn)代謝物的定性、定量鑒定。

1.2.6數(shù)據(jù)處理采用SPSS22.0軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析處理，并進(jìn)行方差分析與數(shù)據(jù)檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)使用平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)誤（mean ?± SE）表示， plt;0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1嘭菊發(fā)酵液對根結(jié)線蟲2齡幼蟲活性的影響

嘭蝶菊發(fā)酵液對根結(jié)線蟲二齡幼蟲抑殺的生物活性結(jié)果見表1。

由表1可知， 24h 后，F(xiàn)B處理的殺線蟲活性為弱活性，其處理根結(jié)線蟲2齡幼蟲的校正死亡率為25.54% ，而FB10、FB100處理對線蟲抑殺作用非常弱（FB100處理的校正死亡率僅為 1.02% ），處理48，72h 后，F(xiàn)B10、FB100處理殺線蟲活性均有所增強(qiáng)，表現(xiàn)為弱活性。

FB處理在 48h 和 ^72h 后殺線蟲活性依然表現(xiàn)為弱活性，校正死亡率均在 24% 以上，且顯著高于同時(shí)間段的FB10、FB100處理，兩種稀釋液的殺線蟲效果無顯著差異。

表1菊發(fā)酵液的殺線蟲活性

Table1NematicidalactivityofWedeliachinensis fermentationsolution

注：同列不同小寫字母表示在0.05水平上差異顯著。下同。

Note：Different lowercase letters in the same column indicate significantdifferenceatO.O5level.Thesamebelow.

2.2菊發(fā)酵液對斜紋夜蛾幼蟲生長發(fā)育的 影響

室內(nèi)試驗(yàn)測定結(jié)果表明，菊發(fā)酵液母液對斜紋夜蛾1齡幼蟲具有一定的觸殺作用，校正死亡率為 34.15% 。但由于母液濃度下，幼蟲無法存活到完成生長發(fā)育歷程，故在后續(xù)的試驗(yàn)中摒除掉母液濃度，對其進(jìn)行稀釋5倍（FB5）、15倍（FB15）、45倍（FB5），探究菊發(fā)酵液對斜紋夜蛾幼蟲生長發(fā)育的影響。

由表2可知，F(xiàn)B5和FB15處理斜紋夜蛾低齡表2菊發(fā)酵液對斜紋夜蛾幼蟲生長發(fā)育歷期的影響

Table2EffectsofWedeliachinensisfermentation solutions on the growth and developmental duration of the Spodopteralitura

注：幼蟲到化蛹?xì)v經(jīng)6個(gè)階段，分別為1、2、3、4、5、6齡，1-2J表示幼蟲在1齡過渡到2齡所需的天數(shù)，后面以此類推。

Note：The larva to pupation passes through six stages，namely， 1st，2nd，3rd，4th，5th，and 6th instars，and1-2Jdenotes the numberof daysrequired forthelarvato transitionfrom1stto 2nd instar，and so on thereafter.

幼蟲（1-2J階段）的發(fā)育期較CK顯著延長。在斜紋夜蛾高齡幼蟲階段（1-5J、1-6J），F(xiàn)B5和FB15處理的發(fā)育歷期延長，但與CK無顯著差異。

菊發(fā)酵液浸潤芋頭葉后喂食斜紋夜蛾幼蟲化蛹后，各處理的蛹質(zhì)量見表3。

表3菊發(fā)酵液對斜紋夜蛾蛹質(zhì)量的影響

Table3EffectsofWedeliachinensisfermentation solutionson the pupal massof the Spodoptera litura

FB5處理的蛹質(zhì)量最低（為 391.71mg ，較CK降低了 8.62% ，其次是FB15處理，較CK降低了5.86% ，F(xiàn)B45處理對蛹質(zhì)量的提高有促進(jìn)的效果。故只有適宜濃度的菊發(fā)酵液才能抑制蛹質(zhì)量，F(xiàn)B5處理抑制效果最佳，后期還需以該濃度為中心設(shè)計(jì)濃度梯度，探尋具有顯著效果的濃度。

2.3菊發(fā)酵液成分的分析

利用LC-MS測定菊發(fā)酵液母液總離子色譜（圖1）。經(jīng)檢測菊發(fā)酵液共鑒定到1166種代謝物，相對含量 1% 以上的成分見表4。

由表4可知，菊發(fā)酵液的主要成分為酚類、生物堿、有機(jī)酸、萜類和苯及其取代衍生物等。其中相對含量較高的有機(jī)物為甜菜堿 8.78% ）、高龍膽酸（ 5.23% ）、2，3-二羥基苯甲酸 （3.04% ）、D-酒石酸（ 2.53% ）、乳酸內(nèi)酯 A（1.79% 等。

圖1菊發(fā)酵液揮發(fā)性組分LC-MS分析的總離子色譜圖

Fig.1 Totalion chromatogram ofvolatile components ofWedeliachinensis fermentation solutionsanalyzed byLC-MS

表4菊發(fā)酵液主要代謝物及其作用

Table4MainmetabolitesofWedeliachinensisfermentationsolutior

注：“-”代表暫無文獻(xiàn)報(bào)道。 Note：The symbol‘-’denotesno literalure report available.

3 討論與結(jié)論

研究發(fā)現(xiàn)，多種植物提取物對根結(jié)線蟲都有很好的抑殺效果。萬壽菊的植物提取物在接觸線蟲24和 48h 后，對線蟲幼蟲都有殺線蟲作用，線蟲死亡率高達(dá) 60.5%^[10] 。任晶等[1研究發(fā)現(xiàn)，菊芋浸提液對南方根結(jié)線蟲的蟲卵孵化和2齡幼蟲的生長發(fā)育均有顯著的抑制作用，并且能夠顯著減少番茄的根結(jié)數(shù)量和土壤根結(jié)線蟲蟲口密度而不影響番茄生長。Kesba等[1]發(fā)現(xiàn)，不同稀釋度的一枝黃花和長春花水、乙醇提取物處理下2齡根結(jié)線蟲死亡率都很高，水提取物比乙醇提取物對2齡根結(jié)線蟲死亡率更有效。穿心蓮、金盞菊、沼菊、龍葵、馬錢子、印楝、紅甜椒、生姜、非洲刺槐豆等植物提取液均有一定的殺線蟲活性，能夠控制根結(jié)線蟲的種群密度[13]。

目前，對根結(jié)線蟲有控制作用的植物次生代謝成分的功效研究，也不斷有報(bào)道。研究表明甜瓜提取物中的葫蘆素A和葫蘆素B能夠殺死體外的根結(jié)線蟲幼蟲并降低其在野外的種群密度[1415]。薄荷提取物對根結(jié)線蟲表現(xiàn)出明顯的殺線蟲活性，采用色譜分析薄荷的提取物成分發(fā)現(xiàn)，精油中萜烯含量最高的是異薄荷酮、薄荷酮、薄荷醇、蕓香芹酮；水提取物主要含有綠原酸、丹參酸B、木犀草素-7-O-蕓香糖苷和迷迭香酸[。通過GC-MS分析具有控制線蟲潛力的芳香植物精油，發(fā)現(xiàn)主要化合物有乙酸肉桂酯、丁香酚甲酯、肉桂醇、乙酰丁香酚、異丁香酚、丁香酚和苯甲酸芐酯等，此外，當(dāng)將苯丙素化合物與香芹酮結(jié)合時(shí)，表現(xiàn)出了協(xié)同殺線蟲活性[]。使用GC-MS技術(shù)鑒定出菖蒲提取液主要?dú)⒕€蟲化合物有沒食子酸、丁香酸、羥基苯甲酸、綠原酸、阿魏酸、反肉桂酸和香豆酸[18]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，菊發(fā)酵液母液的殺線活性為弱活性，稀釋液的殺線蟲效果顯著弱于母液，這表明植物提取物雖然有殺線蟲活性，但與濃度密切相關(guān)。高強(qiáng)等[研究發(fā)現(xiàn)，隨著刺角瓜提取物濃度的降低，根結(jié)線蟲的校正死亡率也會降低?？略频萚20]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)嘭菊水提取液濃度為 10% 時(shí)，殺線蟲活性為強(qiáng)活性，而本研究為弱活性，這可能是因?yàn)橥恢参镏械臍⒕€蟲活性物質(zhì)的提取效果會因提取溶劑、提取方法等不同而有所差異。通過LC-MS技術(shù)發(fā)現(xiàn)菊主要活性物質(zhì)為甜菜堿（ 8.78% 。有研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)海洋褐藻堿性提取物處理后，雌性根結(jié)線蟲的數(shù)量顯著減少，植物中的卵回收率也顯著降低，這是因?yàn)楹Ｔ逄崛∥镏刑鸩藟A起關(guān)鍵的作用[21]。

植物源提取物對斜紋夜蛾的控制作用報(bào)道并不罕見。Kaur等[22發(fā)現(xiàn)，辣木的氯仿、乙酸乙酯和己烷提取物均顯著提高了斜紋夜蛾的死亡率，其中正己烷提取物的活性最高，亞致死值為 199mg?L^-1 該植物提取物也可縮短斜紋夜蛾的整體發(fā)育周期。Kaur等[23研究土木香己烷提取物對斜紋夜蛾的生物活性，發(fā)現(xiàn)提取物具有拒食作用和毒性作用，在1500mg?L^-1 的質(zhì)量濃度下，有中等的拒食效果，最大阻食率為 24.85% ，飼糧中添加 1500～2000mg?L^-1 的提取物，可顯著提高斜紋夜蛾幼蟲的死亡率，同時(shí)所有濃度的提取物均表現(xiàn)出很強(qiáng)的生長抑制作用，且呈劑量依賴性。Nebapure等[24對百合的不同溶劑提取物的拒食活性進(jìn)行了分析，結(jié)果表明均對斜紋夜蛾有一定的拒食作用，氯仿提取物的拒食活性最好，其次是丁醇提取物，這兩種的拒食效果優(yōu)于印楝素，己烷提取物效果最差。杜浩等[25研究發(fā)現(xiàn)，以飛機(jī)草浸提液處理的香蕉葉喂養(yǎng)斜紋夜蛾幼蟲，能夠延長斜紋夜蛾幼蟲和蛹的發(fā)育歷期，并使斜紋夜蛾蛹質(zhì)量降低，飛機(jī)草浸提液的濃度越高其負(fù)面影響越大。

在控制斜紋夜蛾的生物活性成分的研究方面，Yooboon等[2研究表明，菖蒲、假華拔、黑胡椒的乙醇提取物對斜紋夜蛾的2齡幼蟲具有較強(qiáng)的毒性作用，可能是因?yàn)樘崛∥镏写嬖?β -細(xì)辛腦、（2E，4E，14Z）-N-異丁基-2，4，14-三烯酰胺、乙基異丁香酚、3.9-癸二烯醇-1，3-甲基-6-（1-甲基乙烯基）4-戊基-1-（4丙基環(huán)己基）1環(huán)己烯和 a -細(xì)辛腦等化合物。Ruttanaphan等[2通過HPLC分析毒性最強(qiáng)的野波羅蜜粗提物的化學(xué)成分，結(jié)果表明兒茶素對斜紋夜蛾的毒性最強(qiáng)，可能是斜紋夜蛾潛在的殺蟲劑。Sahayaraj等[2通過GS-MS檢測具有殺斜紋葉蛾幼蟲活性的苔蘚提取物，發(fā)現(xiàn)共有18種化合物，其中含量比較高的化合物有6-十八碳烯酸（Z） 29.7% ）、十六烷酸（ 11.31% ），這些化合物可能是導(dǎo)致斜紋夜蛾死亡的原因。

本研究表明嘭菊發(fā)酵液除了對斜紋夜蛾低齡幼蟲表現(xiàn)出一定的觸殺作用外，對斜紋夜蛾幼蟲的生長發(fā)育也有一定的影響，具體表現(xiàn)為隨著發(fā)酵液濃度升高，斜紋夜蛾的幼蟲發(fā)育歷期呈延長趨勢，蛹質(zhì)量也降低。在本研究設(shè)置的濃度范圍內(nèi)，低濃度菊發(fā)酵液FB45處理對斜紋夜蛾幼蟲的發(fā)育歷期的影響較小，反而對其蛹質(zhì)量有促進(jìn)作用，而高濃度的發(fā)酵液才能夠延長幼蟲發(fā)育歷期，并且抑制蛹質(zhì)量的增加。本研究中嘭菊發(fā)酵液中相對成分 1% 以上的化合物有13種。研究表明甜菜堿可以降低根結(jié)線蟲的卵回收率[2]，龍膽酸具有抗菌功效[29]，二氫咖啡酸是綠原酸的主要代謝物，而綠原酸對黏蟲具有致死作用，亞致死濃度也會損害幼蟲的生長和發(fā)育[30]。菊發(fā)酵液對根結(jié)線蟲的殺線蟲活性以及對斜紋葉蛾幼蟲生長發(fā)育的抑制作用可能與上述的化合物有關(guān)，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，菊發(fā)酵液（ 67mg?mL^-1 對南方根結(jié)線蟲2齡幼蟲有一定抑殺活性（校正死亡率24% 以上），且稀釋10倍和100倍的菊發(fā)酵液在 48h 后和 72h 后也表現(xiàn)出弱殺線蟲活性（校正死亡率均達(dá) 10% 以上）。菊發(fā)酵液對斜紋夜蛾1齡幼蟲的校正死亡率為 34.15% ，嘭蝶菊發(fā)酵液的5倍和15倍稀釋液也具有抑制斜紋夜蛾幼蟲的生長發(fā)育、延緩其發(fā)育歷期、降低蛹質(zhì)量的效果。菊發(fā)酵液中主要含有甜菜堿、高龍膽酸、二氫咖啡酸等揮發(fā)性物質(zhì)，這些植物次生代謝產(chǎn)物都具有在農(nóng)業(yè)種植業(yè)中進(jìn)行開發(fā)利用的潛能。菊發(fā)酵液對根結(jié)線蟲和斜紋夜蛾均具有一定的生物活性，可為后期開發(fā)針對根結(jié)線蟲和斜紋夜蛾等有害生物防控的中草藥源植物保護(hù)劑提供參考。

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