血清CCL21、NLRP3與腦梗死患者機(jī)械取栓術(shù)后出血轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究

中圖分類號：R743.33 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.11958/20250110

血清CCL21、NLRP3與腦梗死患者機(jī)械取栓術(shù)后出血轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究

Correlation of serum CCL21 and NLRP3 with hemorrhagic conversion after mechanical thrombectomyin patientswith cerebral infarction

JIA Wenxin， ZHOU Lijuan， WANG Lixiang DepartmentofNeurology，theEighthPeople'sHospital ofJinan，Jinan2711O4，China

Abstract：ObjectiveTo explore the correlation between serum chemokine C-C ligand21（CCL21），NOD like receptor protein 3（NLRP3）and hemorrhagic transformation （HT）after mechanicalthrombectomy in patientswith acute cerebral infarction（ACI）.MethodsAtotal of210ACI patientswhounderwent mechanicalthrombectomywereselected anddivided into the HT group （19 cases）andthenon HTgroup （191cases）basedon there-examinationof head CT 24- hours after treatment.The diferences in clinical data and serum levels of CCL21 and NLRP3 werecompared between two groups.Multivariate Logisticregressionanalysis was used toanalyze the influencing factors of HToccurence.Receiver operating characteristic （ROC）curve was used toanalyze the predictive valueof serum CCL21and NLRP3 for HT.Results Theproportionofatrialfibrillation，anteriorcirculation infarctionandpreoperativeNational InstitutesofHealth StrokeScale （NIHSS） scores were higher in the HT group than those in the non HT group （ Plt;0.05 ）. The preoperative serum levels of CCL21 and NLRP3were higherin theHT group than thosein the nonHT group（ Plt;0.05 ）.The Logistic regression model analysis resultsshowed thatatrialfibrilltion，anteriorcirculation infarction，preoperative NHSS score，CCL21andNRP3 were risk factors for postoperative HT in ACI patients （ Plt;0.05 ）.The application of receiver operating characteristic （ROC） curve analysisresultsshowed thattheareaunder thecurve （AUC）forpredicting HToccurrenceby CCL21 was 0.850 （95%CI： 0.763-0.936）.TheAUC predicted byNLRP3 was 0.787（95%CI： 0.703-0.871），and thecombined detectionof the two further improved the predictive value （AUC=0.921，95%CI： 0.867-0.976）.ConclusionCCL21and NLRP3are closely related totheoccurrenceofHTinACIpatientsaftermechanicalthrombectomy，andwhichareinfluencingfactors forthe occurrence of HT after mechanical thrombectomy.

Key Words：acutecerebral infarction; hemorhagic transformation;chemokine C-C motif ligand 21; NOD like receptor protein3;mechanical thrombectomy

急性腦梗死（acutecerebral infarct，ACI）是由于腦血管的阻塞導(dǎo)致腦組織供血不足，進(jìn)而引起腦細(xì)胞損傷或死亡的一種急性腦血管病變。機(jī)械取栓術(shù)已經(jīng)成為腦梗死治療的重要選項之一，由于時間窗的限制，僅有少數(shù)患者治療效果顯著，隨著臨床技術(shù)和介入材料的不斷發(fā)展，機(jī)械取栓術(shù)能夠延長治療時間窗，實現(xiàn)血管快速再通，但與此同時，也增加出血轉(zhuǎn)化（hemorrhagic transformation，HT）等并發(fā)癥的風(fēng)險，嚴(yán)重影響患者恢復(fù)和生存率[1-2]。因此，尋找簡便有效的生物指標(biāo)來預(yù)測ACI患者在機(jī)械取栓術(shù)后發(fā)生HT的可能性具有重要臨床意義。趨化因子C-C基元配體21（chemokineC-C motif ligand 21，CCL21）是一類小分子分泌蛋白，主要參與免疫細(xì)胞的招募和炎癥反應(yīng)過程[3]。研究顯示，目前CCL21/趨化因子受體7（CCR7）軸參與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎血管生成、炎癥性腸病等疾病的進(jìn)展[4]。NOD樣受體蛋白3（NOD-like receptor protein 3，NLRP3）是NLR蛋白家族中NLRP亞家族成員之一，激活后形成NLRP3炎癥小體。研究表明NLRP3炎癥小體可能通過調(diào)控自噬、焦亡，影響細(xì)胞極化等方式介導(dǎo)缺血后的炎癥和免疫反應(yīng)，參與腦卒中發(fā)病[5]。目前國內(nèi)外對于CCL21、NLRP3在ACI機(jī)械取栓及HT方面鮮見研究報道。本研究通過測定ACI患者機(jī)械取栓術(shù)前血清CCL21、NLRP3的表達(dá)水平，探討二者與患者術(shù)后發(fā)生HT的相關(guān)性及可能的機(jī)制。

1對象與方法

1.1研究對象選取2022年1月一2024年1月收治的ACI患者210例為研究對象?；颊呔袡C(jī)械取栓治療，根據(jù)治療后 24h 頭顱CT復(fù)查情況分為HT組（19例）和非HT組（191例）。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《中國急性缺血性腦卒中早期血管內(nèi)介入診療指南2018》中ACI相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）入院時間均 lt;4.5h（3） 結(jié)合臨床檢查和影像學(xué)檢查確診。（4）首次發(fā)病，且美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（national institutesofhealthstrokescale，NIHSS）評分 ?6 分。（5）資料齊全，無丟失或缺損。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)影像學(xué)檢查存在顱內(nèi)出血者；（2）近3個月有手術(shù)治療史或嚴(yán)重腦外傷患者。（3）凝血功能異常。（4）有心、肝、肺、腎等重要器功能官損傷者。（5）惡性腫瘤或自身免疫缺陷疾病者。（6）參與其他臨床試驗者。本研究通過醫(yī)院倫理委員會審批（倫理號：2021015），獲得患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1資料收集記錄2組患者的年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）高血壓、糖尿病、吸煙史、心房顫動、前循環(huán)梗死、抗血小板聚集或抗凝藥物使用情況、術(shù)前是否取栓、術(shù)前NIHSS評分等資料。

1.2.2CCL21、NLRP3水平檢測抽取患者入院后次日清晨空腹外周靜脈血 4mL ，以 3000r/min 離心 10min ，留取上層血清。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測定血清CCL21、NLRP3水平。ELISA檢測試劑盒購自德國PromoCell公司，具體操作嚴(yán)格按說明書執(zhí)行。

1.2.3HT評估患者經(jīng)機(jī)械取栓術(shù)治療后 24h 復(fù)查頭顱CT，與治療前相比，腦內(nèi)存在新發(fā)的高密度病灶則表示發(fā)生HT。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS22.0分析數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計量資料以 表示，2組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料以例或例 （% ）表示，組間比較采用 χ² 檢驗；多因素非條件Logistic回歸分析HT發(fā)生的影響因素;采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清CCL21、NLRP3對HT的預(yù)測價值，以Plt;0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.12組臨床資料比較HT組心房顫動、前循環(huán)梗死占比及術(shù)前NIHSS評分均高于非HT組 （Plt; 0.05）；2組性別、年齡、BMI、吸煙史、高血壓、糖尿病、術(shù)前是否取栓等方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義0 Pgt;0.05 ）。見表1。

2.22組血清CCL21、NLRP3水平比較HT組血清CCL21、NLRP3水平均高于非HT組 （Plt;0.05） 。見表2。

2.3影響ACI患者術(shù)后發(fā)生HT的多因素分析以是否發(fā)生HT為因變量（是 ⁼¹ ，否 =0 ），以心房顫動（是 ^-1 ，否 ?=0 ）、前循環(huán)梗死（是 _：=1 ，否 =0 ）術(shù)前NIHSS評分（連續(xù)型變量）、CCL21（連續(xù)型變量）、NLRP3（連續(xù)型變量）為自變量納入多因素Logistic回歸。結(jié)果顯示心房顫動、前循環(huán)梗死、術(shù)前NIHSS評分、CCL21及NLRP3是ACI患者術(shù)后發(fā)生HT的獨立影響因素 （Plt;0.05） ，見表3。

2.4血清CCL21、NLRP3水平對HT的預(yù)測價值ROC曲線分析結(jié)果顯示，CCL21和NLRP3聯(lián)合檢測預(yù)測HT發(fā)生的曲線下面積（AUC）優(yōu)于單一指標(biāo)檢測，見表4、圖1。

3討論

隨著我國老齡化的不斷加劇及生活方式的改變，ACI發(fā)病率不斷上升。ACI主要是由于腦組織血液供應(yīng)出現(xiàn)障礙所致神經(jīng)細(xì)胞壞死、損傷，在疾病發(fā)展過程中多存在多種神經(jīng)炎癥反應(yīng)相關(guān)的血清因子水平異常改變[7-8]。腦梗死的臨床治療重點在于盡快恢復(fù)腦組織血液供應(yīng)，而機(jī)械取栓術(shù)可以通過清除大動脈的堵塞來實現(xiàn)這一目的，促進(jìn)腦部血流恢復(fù)。然而，隨著該技術(shù)的廣泛應(yīng)用，術(shù)后HT風(fēng)險也相應(yīng)增加，影響患者治療效果和康復(fù)[9-10]。因此，探索導(dǎo)致機(jī)械取栓術(shù)后HT發(fā)生的相關(guān)因素，并尋找能夠準(zhǔn)確預(yù)測HT發(fā)生的生物學(xué)標(biāo)志物，對于降低HT的發(fā)生率和改善患者預(yù)后具有重要臨床意義。

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，CCL21主要由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，其通過誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞的激活和分化，可參與多發(fā)性硬化的病理過程[1]。張蕊等[12]在成年小鼠腦缺血實驗中發(fā)現(xiàn)，CCL21能夠促進(jìn)神經(jīng)元的分化，并增強(qiáng)細(xì)胞之間的相互作用，在缺血性腦損傷引起的神經(jīng)元遲發(fā)性死亡中扮演重要角色。本研究結(jié)果顯示，與非HT組相比，HT組術(shù)前CCL21水平顯著升高，并且是ACI患者術(shù)后HT的一個重要影響因素，這提示CCL21的過量表達(dá)可能與患者在接受機(jī)械取栓術(shù)后發(fā)生HT有關(guān)。此外，ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，術(shù)前CCL21水平預(yù)測ACI患者術(shù)后發(fā)生HT的AUC為0.850，顯示出較好的預(yù)測能力。這表明CCL21水平對預(yù)測ACI患者機(jī)械取栓術(shù)后發(fā)生HT具有一定的參考價值。然而，目前尚不清楚CCL21如何具體參與HT發(fā)生，其機(jī)制可能與CCL21和受體CCR7結(jié)合后促進(jìn)炎癥反應(yīng)，破壞血腦屏障有關(guān)[13]

NLRP3是一種感受器蛋白，在細(xì)胞質(zhì)中分布較為廣泛[14]。相關(guān)研究指出，在機(jī)體出現(xiàn)危險信號時，NLRP3結(jié)構(gòu)會發(fā)生變化，可與相關(guān)蛋白結(jié)合形成蛋白復(fù)合物，成為炎癥小體，而炎癥小體被激活后會促進(jìn)白細(xì)胞介素（IL）-18的合成與分泌，最終誘導(dǎo)細(xì)胞出現(xiàn)程序性死亡[15-17]。崔大勇等[18]指出，過度炎癥反應(yīng)導(dǎo)致的細(xì)胞損傷是誘發(fā)腦出血的關(guān)鍵，而NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在腦出血后繼發(fā)性損傷中具有重要意義。本研究發(fā)現(xiàn)，HT組術(shù)前NLRP3水平顯著高于非HT組，且NLRP3為影響機(jī)械取栓術(shù)后發(fā)生HT的一個重要因素，提示術(shù)前NLRP3過度表達(dá)可能參與ACI患者在機(jī)械取栓術(shù)后發(fā)生HT的過程。經(jīng)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，術(shù)前NLRP3水平預(yù)測ACI患者發(fā)生HT的AUC為0.787，表明其具有一定的預(yù)測能力。NLRP3參與HT發(fā)生的潛在機(jī)制可能與患者腦組織受損后NLRP3的激活有關(guān)，該過程可以促使內(nèi)皮細(xì)胞和腦膠質(zhì)細(xì)胞合成并分泌大量IL-18，從而導(dǎo)致血腦屏障的破壞及血管內(nèi)皮功能的紊亂[19-21]。此外，本研究通過分析CCL21、NLRP3聯(lián)合對發(fā)生HT的預(yù)測價值，結(jié)果顯示，與各指標(biāo)單一檢測相比，二者聯(lián)合的AUC更高，說明二者聯(lián)合檢測有助于提高對HT的預(yù)測效能。

然而本研究仍存在不足之處，如該研究是一項樣本量偏少的單中心研究，患者入院時間存在差異，基線CCL21、NLRP3表達(dá)可能存在偏差。因此，后續(xù)有待完善并進(jìn)一步研究。

綜上所述，血清CCL21、NLRP3與ACI患者機(jī)械取栓術(shù)后發(fā)生HT有關(guān)，二者水平升高是影響機(jī)械取栓術(shù)后發(fā)生HT的危險因素，兩指標(biāo)聯(lián)合檢測對預(yù)測HT發(fā)生具有一定價值。

參考文獻(xiàn)

[1]于振江，王麗香，賈文歆.半乳糖凝集素3和內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子 1與老年腦梗死患者術(shù)后出血轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究[J].中華老年心 腦血管病雜志，2022，24（6）：626-629.YUZJ，WANGLX，JIAW X.Studyon thecorrelationbetween galectin-3and endothelial cell specific molecule1 and postoperative bleedingtransformationin elderlypatientswith cerebral infarction[J].ChineseJournal of Geriatric Cardiovascular and CerebrovascularDiseases，2O22，24（6）： 626-629. doi：10.3969/j.issn.1009-0126.2022.06.018.

[2］王丹，王功錦，趙學(xué)淵，等.血清基質(zhì)金屬蛋白酶9預(yù)測大血管 閉塞性腦卒中患者機(jī)械取栓術(shù)后出血轉(zhuǎn)化的[J].中華 老年心腦血管病雜志，2023，25（7）：720-724.WANGD，WANG G J，ZHAO X Y，et al. Clinical study on the prediction of bleeding transformation after mechanical thrombectomy in patients with large vessel occlusive stroke using serum matrix met alloproteinase-9 [J].ChineseJournalofGeriatricCardiovascularand CerebrovascularDiseases，2023，25（7） ：720-724.doi：10.3969/j. issn.1009-0126.2023.07.013.

[3]王維，李振東，張誠誠，等.線粒體自噬參與NLRP3介導(dǎo)的炎癥反 應(yīng)在腦卒中康復(fù)中的作用[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2022，39（8）： 689-693.WANGW，LIZD，ZHANGCC，etal.The roleof mitochondrial autophagy in NLRP3 mediated inflammatory response instroke rehabilitation[J].Journal of Stroke and Neurological Disorders，2022，39（8）：689-693.doi：10.19845/j.cnki. zfysjjbzz.2022.0174.

[4]王強(qiáng)，王萃，趙燕，等.高血壓腦出血術(shù)后腦水腫患者血清CC類 趨化因子配體5和纖維蛋白原樣蛋白2水平變化及意義[J].陜 西醫(yī)學(xué)雜志，2023，52（9）：1181-1185.WANGQ，WANG C， ZHAO Y，et al. Changes and significance of serum CC chemokine ligand5and fibrinogen like protein 2 levels in patients with postoperative cerebral edema after hypertensive intracerebral hemorrhage[J].Shaanxi Medical Journal，2023，52（9）：1181- 1185. doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2023.09.015.

[5] ANDE S R，GRYNSPAN J，AVIV R I，et al. Imaging for predicting hemorrhagic transformation of acute ischemic stroke-anarrative review[J].Can Assoc Radiol J，2022，73（1）：194-202.doi： 10.1177/08465371211018369.

[6］中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會，中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會腦血管病 學(xué)組，中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會神經(jīng)血管介人協(xié)作組.中國急 性缺血性腦卒中早期血管內(nèi)介入診療指南2018[J].中華神經(jīng) 科雜志，2018，51（9）：683-691.Chinese Medical Association Neurology Branch，Chinese Medical Association Neurology Branch CerebrovascularDisease Group，Chinese Medical Association Neurology Branch Neurovascular Intervention Collaboration Group. Guidelines for earlyintravascularintervention diagnosisand treatment ofacute ischemic stroke in China 2O18[J].Chinese Journal of Neurology，2018，51（9） ：683-691.doi：10.3760/cma.j. issn.1006-7876.2018.09.005.

[7]韓冰莎，李嬌，李翔，等.超聲檢測視神經(jīng)鞘直徑預(yù)測急性前循 環(huán)缺血性腦刻中機(jī)械取檢術(shù)后出血轉(zhuǎn)化的應(yīng)田價值[I]中華袖 經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志，2020，19（3）：266-272.HANBS，LIJ，LIX，et al. The application value of ultrasound detection of optic nerve sheath diameter in predicting bleeding transformation after mechanical thrombectomy in acute anterior circulation ischemic stroke [J]. Chinese Journal of Neuromedicine，2020，19（3）：266-272.doi： 10.3760/cma.j.cn115354-20191231-00786.

[8]GUO T，MA T，BAI X，et al.Intracranial hemorrhage risk in patients with cerebral microbleeds after mechanical thrombectomy for acute ischemic stroke：a systematic review and meta-analysis[J].Neurol Sci，2024，45（7）：3021-3029.doi：10.1007/s10072-024-07393-z.

[9]張曉霞，牛翠，曹明善，等.C-反應(yīng)蛋白低密度脂蛋白膽固醇和 嗜酸性粒細(xì)胞絕對值計數(shù)對急性腦梗死患者溶栓后出血轉(zhuǎn)化 的風(fēng)險量化評估價值[J].中國急救醫(yī)學(xué)，2022，42（5）：416-420. ZHANG X X，NIU C，CAO M S，et al .The quantitative evaluation value of C-reactive protein low-density lipoprotein cholesterol and absolute eosinophil count for the risk of hemorrhagic transformation after thrombolysis in patients with acute cerebral infarction[J]. Chinese Journal of Emergency Medicine，2022，42（5） ： 416-420. doi：10.3969/j.issn.1002-1949.2022.05.008.

[10]QU X，XU Y， WANG L，et al. Analysis of relevant factors affecting the prognosis of mechanical thrombectomy in patients with acute posterior circulation large vessel occlusion cerebral infarction[J]. Neuroradiology，2024，66（12）：2253-2260.doi： 10.1007/s00234- 024-03469-x.

[11]AGBONON R，F(xiàn)ORESTIER G，BRICOUT N，et al.Cerebral microbleeds and risk of symptomatic hemorrhagic transformation following mechanical thrombectomy for large vessel ischemic stroke[J].JNeurol， 2024，271（5）：2631-2638.doi：10.1007/s00415-024-12205-7.

[12]張蕊，江俊瑩，戴琦，等.趨化因子CCL21及其受體CCR7在缺血性 腦白質(zhì)損傷中的表達(dá)及作用[J].國際腦血管病雜志，2020，28（7）： 530-535.ZHANGR，JIANGJY，DAI Q，et al.Expression and role of chemokine CCL21 and its receptor CCR7 in ischemic white matter injury[J]. International Journal of Cerebrovascular Disease ，2020，28 （7）：530-535. doi：10.3760/cma.j.issn.1673-4165.2020.07.009.

[13]周桂銀，趙元丹，高揚(yáng)，等.趨化因子配體21對小鼠腦出血后繼 發(fā)性炎性損傷的作用研究[J].中國腦血管病雜志，2020，17 （10） ：602-609. ZHOUG Y，ZHAO Y D，GAO Y，et al. Study on the effectof chemokine ligand 21onsecondary inflammatory injury after cerebral hemorrhage in mice[J].Chinese Journal of Cerebrovascular Disease，2020，17（10） ： 602-609.doi：10.3969/j. issn.1672-5921.2020.10.006.

[14]LU H，GUO T， ZHANG Y，et al.Endoplasmic reticulum stressinduced NLRP3 inflammasome activation as a novel mechanism of polystyrenemicroplastics（PS-MPs）-inducedpulmonary inflammation in chickens[J]. Zhejiang Univ SciB，2024，25（3）： 233-243. doi： 10.1631/jzus.B2300409.

[15]XUJ，HUANG S. Omentin-1 may be one treatment factor for intravenous thrombolysis of acute cerebral infarction through the inhibitionof NLRP3ubiquitinationbyampk function：preliminary findings[J].Neurology India，2024，72（2）：309-318.doi：10.4103/ ni.ni_1325_21.

[16]田偉，楊華，高巖，等.急性前循環(huán)大血管閉塞性腦卒中合并房 顫患者行直接機(jī)械取栓治療取栓方式的臨床效果[J].國際檢驗 醫(yī)學(xué)雜志，2022，43（20）：2496-2500.TIAN W，YANG H，GAOY， etal.Clinical eect of direct mechanical thrombectomy in patients with acuteanterior circulation large vessel occlusion stroke complicated with atrial fibrillation [J]. International Journal of Laboratory Medicine，2022，43（20）：2496-2500.doi：10.3969/j. issn.1673-4130.2022.20.012.

[17]KIDOGUCHI M，AKAZAWA A，KOMORI O，et al.Prediction of occurrence of cerebral infarction after successful mechanical