投喂頻率和投喂水平對克氏原螯蝦機體生長、營養(yǎng)成分和生化指標的影響

中圖分類號 S966.12 文獻標識碼 A 文章編號 1000-2421（2025）03-0120-08

克氏原螯蝦（Procambarusclarkii）又稱紅蝦、淡水小龍蝦，原產地為北美，后經日本傳人我國，屬外來物種[1-2]。因其口感好、營養(yǎng)價值高、富含蛋白質和多種多不飽和脂肪酸頗受消費者的喜愛[3]。我國水產動物養(yǎng)殖一般依賴傳統(tǒng)人工投喂的方式[4]，近年來規(guī)模持續(xù)擴大的克氏原螯蝦養(yǎng)殖業(yè)面臨著遺傳育種工作薄弱、疾病頻發(fā)、飼料開發(fā)滯后、養(yǎng)殖模式粗放和投喂策略不科學等問題[5-8]。

投喂頻率和投喂水平是影響水產動物生長和健康的重要因素?？茖W的投喂策略有利于提升水產動物養(yǎng)殖的經濟效益和生態(tài)效益[9]，提高養(yǎng)殖對象的存活率[10]、生長性能[11]，減少飼料的損耗和代謝廢物的排放[12]，促進水產動物健康生長并降低養(yǎng)殖成本[13]。而投喂水平過高或過低均不利于水產動物養(yǎng)殖，過高會減緩養(yǎng)殖動物生長速度[14-15]、造成動物體內脂肪沉積[16]、肝損傷[17]并且加速養(yǎng)殖環(huán)境惡化;過低則會影響動物的正常生長過程甚至出現(xiàn)同類相殘的現(xiàn)象。目前關于克氏原螯蝦投喂策略的研究仍處于起步階段。因此，本研究采用 3×3 雙因子設計，通過養(yǎng)殖實踐探究投喂頻率和投喂水平對克氏原螯蝦生長、營養(yǎng)成分以及免疫功能的影響，以期為克氏原螯蝦科學的飼喂策略提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

試驗飼料為商品料，購自武漢澳華農牧科技有限公司，蛋白質含量為 34.42% ，脂肪含量 8.78% ，灰分 4.66% 。

1.2 試驗動物與飼養(yǎng)管理

試驗所用克氏原螯蝦通過網(wǎng)箱暫養(yǎng)于華中農業(yè)大學“雙水雙綠\"科研基地（監(jiān)利市新溝鎮(zhèn)）。網(wǎng)箱1 （2m×1.5m×1m 架設在基地稻蝦田 2.5m 深的圍溝內，網(wǎng)箱上沿裝有防逃設施，網(wǎng)箱中配備網(wǎng)片制作的簡易遮蔽物作為克氏原螯蝦的棲息場所，降低試驗蝦的應激反應和相互殘食可能。試驗前試驗蝦在已消毒的網(wǎng)箱中暫養(yǎng)2周。暫養(yǎng)結束，選取體格健壯、附肢齊全、規(guī)格整齊的克氏原螯蝦810尾，采用3×3 雙因子試驗設計，在日投喂1次（F1）2次（F2）和3次（F3）的頻率下投喂水平分別為蝦體質量的3% （L3） .4.5%（L4.5） 和 6% （L6），共9個試驗組，每個試驗組設3個重復，每個處理組30尾蝦，共27個養(yǎng)殖桶，試驗養(yǎng)殖 56d 。每2周測定1次養(yǎng)殖桶內試驗蝦的總質量，并且根據(jù)其生長速度調整投喂量。F1組為19：00投喂；F2組為07：00和19：00投喂；F3組為07：00、13：00和19：00投喂。每天記錄投喂前的死亡數(shù)并及時清理死蝦。

1.3樣品采集與分析方法

采樣前試驗蝦饑餓 24h ，記錄克氏原螯蝦的體質量、存活數(shù)量等。每個處理組隨機選取10尾試驗蝦置于 -20^°C 冰箱中，用于分析全蝦營養(yǎng)成分。每個處理組隨機選取7尾蝦用注射器取血淋巴，使用超速離心機（LE-8OK，貝克曼，美國）離心 （7130r/min ，10min，4^°C ，取上清， -80°C 冷凍，測定堿性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）、超氧化物歧化酶（SOD）過氧化氫酶（CAT）的活性及丙二醛（MDA）含量（采用南京建成生物工程研究所試劑盒按說明書檢測）；隨后分離肌肉樣品，肌肉稱質量計算含肉率后保存于 -20^°C 冰箱，用于分析試驗蝦肌肉營養(yǎng)成分。

測定初始均質量、終末均質量、肌肉質量用于計算增重率、特定生長率、飼料系數(shù)、含肉率和存活率。各指標的計算參照文獻[18]。試驗所用商品料5000元/t，飼料成本（feedcost， C_F ）和養(yǎng)殖效益（productionefficiency， E_P） 計算公式如下：

C_F=5000/1000×R_FC

E_P=W₁-F-W₂

式（1）（2）中， R_FC 為飼料系數(shù)， W₁ 為平均市場價， W₂ 為水、電、塘租等其他成本，平均市場價根據(jù)湖北省監(jiān)利市克氏原螯蝦市場行情，規(guī)格 25g 及以下按24元/kg計算，規(guī)格 25g 以上按照34元/ ^'kg 計算。

采用常壓烘干法在 105^°C 恒溫烘箱中烘干肌肉和全蝦計算水分含量，采用凱氏定氮法測定粗蛋白質含量（GB/T5009.5-2016），采用索氏抽提法檢測粗脂肪含量（GB/T5009.6—2016），采用馬弗爐550^°C 灼燒法分析灰分含量（GB/T5009.4-2016）。

1.4數(shù)據(jù)分析及處理

使用 SPSS 19.0 Kolmogorov Smirnov-test 和Levene-test檢驗數(shù)據(jù)的正態(tài)性和方差齊性。在滿足正態(tài)分布和方差齊性條件下，用雙因素方差分析（Two-wayANOVA）檢驗各組間的指標差異，用一般線性模型單變量方法分析投喂頻率和養(yǎng)殖密度的主效應以及交互效應，Bonferroni法進行多重比較，若2個因素之間的交互作用顯著，則使用單因素方差分析（One-wayANOVA）評估同一因素是否存在差異，鄧肯法比較多重差異顯著性， Plt;0.05 為差異顯著。

2 結果與分析

2.1克氏原螯蝦生長和飼料利用

如表1所示，當投喂水平為 6% 時，試驗蝦的終末質量（finalbodyweight，F(xiàn)BW）、增重率（weightgainrate，WGR）和特定生長率（specialgrowthratio，SGR）均達到最高值，顯著優(yōu)于L3組（ （Plt;0.05 。并且L6F3組克氏原螯蝦FBW最高，與L4.5F2、L6F1和L6F2組差異不顯著 （Pgt;0.05） ，但顯著高于其余各組 （Plt;0.05 ）。L3和L4.5組的飼料系數(shù)（specialgrowthratio，F(xiàn)CR）較低 （1.30～1.48） ，而L6組的FCR顯著升高（ 1.81～1.89 ），提示過量投喂導致轉化率下降，其中L4.5F2組飼料系數(shù)最低，顯著低于L4.5F1、L6F1、L6F2和L6F3組 （Plt;0.05） 。含肉率（dressingpercentage，DP）在各組間差異較小，其中L4.5F1組含肉率最高，顯著高于其他試驗組（ Plt; 0.05）。統(tǒng)計結果顯示，投喂水平對FBW、WGR、SGR、FCR和DP均有極顯著影響（ Plt;0.001 ），投喂頻率對FBW、SGR和FCR影響顯著（ （Plt;0.05 ），并且投喂水平和投喂頻率的交互作用對FBW、FCR和DP有顯著影響（ （Plt;0.05 ）。

2.2克氏原螯蝦存活率、飼料成本和效益

如表2所示，L3組試驗蝦的存活率最低1 66.67%～68.89% ），顯著低于其他組 （Plt;0.05） ，L6F3組存活率最高，與L4.5F1、L4.5F2和L6F2組無顯著差異（ （Pgt;0.05） ，但顯著高于其余各組（ Plt; 0.05）。L6組試驗蝦飼料成本最高，L4.5F2組飼料成本最低 6.25±0.09 元/kg）。L4.5組飼料成本最低（ 6.25～7.10 元 'kg ），顯著優(yōu)于其他組 （Plt;0.05 ，其中L4.5F2組效益最高，與L4.5F3組無顯著差異（ Pgt; 0.05），但顯著高于其余各組（ .P?0.05 。統(tǒng)計結果顯示，投喂水平對克氏原螯蝦存活率、飼料成本和養(yǎng)殖效益均有極顯著影響 Plt;0.001 ），投喂頻率對克氏原螯蝦存活率的影響不顯著（ （Pgt;0.05） ，但顯著影響飼料成本和養(yǎng)殖效益（ .P?0.05 ，投喂水平和投喂頻率的交互作用對克氏原螯蝦的存活率、飼料成本和養(yǎng)殖效益均有顯著影響（ .Plt;0.05 ）。

2.3 營養(yǎng)成分

如表3所示，在不同投喂水平和頻率下，試驗蝦全身的營養(yǎng)成分呈現(xiàn)顯著差異，L3組全蝦的水分含量（ 68.98%～69.39% 和灰分含量（ 14.32%～ 14.47% ）最高，粗蛋白含量最低 （13.05%～13.61%） -顯著低于L4.5和L6組 （Plt;0.05） ，提示過低的投喂水平不利于試驗蝦蛋白沉積。L6F2和L6F3組全蝦灰分含量顯著低于其他各組（ ?Plt;0.05 ）。L6組全蝦的粗脂肪顯著高于L4.5和L3組（ ?Plt;0.05 ，其中L6F3組全蝦的粗脂肪含量最高，與L6F2組無顯著差異 （Pgt;0.05 ）。統(tǒng)計結果顯示，投喂水平顯著影響全蝦的水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量中 （Plt;0.05 ）。隨著投喂水平的增加，全蝦粗脂肪的含量有增加的趨勢，灰分和水分的含量有降低的趨勢。投喂水平和投喂頻率對全蝦的粗脂肪和粗灰分的影響有顯著的交互作用（ ΔPlt;0.05 ，對全蝦的水分和粗蛋白的影響無顯著的交互作用4 （-Pgt;0.05 ）。

與全蝦的營養(yǎng)成分含量變化趨勢一致，L6組肌肉的粗脂肪含量 （2.28%～2.62% 最高，L4.5和L6組的粗蛋白含量較高 17.37%～17.58% ），L6肌肉的粗蛋白和粗脂肪顯著高于L3和L4.5組（ Plt; 0.05），其中L6F1組肌肉粗脂肪含量最高，與L6F2組無顯著差異 （Pgt;0.05 ）。L3組肌肉的水分和灰分均顯著高于L4.5和L6組（ ?lt;0.05 ，L4.5F2組灰分含量最低。統(tǒng)計結果顯示，投喂水平和投喂頻率對克氏原螯蝦肌肉的粗蛋白、粗脂肪和灰分有顯著的交互作用 （Plt;0.05） ，對肌肉的水分無顯著的交互作用 （Pgt;0.05） 。綜上，高投喂水平（ 6% 顯著提升全身和肌肉的粗脂肪含量，但可能導致水分和灰分降低； 4.5% 投喂水平在粗蛋白和灰分平衡上表現(xiàn)更優(yōu)。

2.4 生化指標

由表4可知，L4.5組試驗蝦的LZM活性水平最高 （26.40～27.65U/mL） ，顯著高于L3組，L6F3組的LZM活性水平達到峰值（ 28.37U/mL ;L4.5和L6組的AKP活性水平較高，其中當投喂頻率增加活性更高，L6F3組的 AKP（24.12U/mL） 和ACP活性（ 19.51U/mL ）最高。L4.5F2組SOD活性最高，與L6F3組無顯著差異（ Pgt;0.05 ，但顯著高于其他各組中 （Plt;0.05 ）。L4.5F2組CAT活性最高，顯著高于L3F1、L3F2和L3F3組（ ?Plt;0.05） ，與其他組沒有顯著差異（ （Pgt;0.05） 。L3組試驗蝦的血清AKP、SOD和CAT活性水平顯著低于L4.5和L6組 （Plt;0.05 ），F(xiàn)2、F3組試驗蝦的MDA水平顯著高于F1組（ Plt; 0.05）。統(tǒng)計結果顯示，投喂水平對LZM、AKP、ACP、MDA、CAT和SOD均有極顯著影響（ Plt; 0.001），投喂頻率對LZM、AKP、ACP、MDA和SOD均有極顯著影響（ P?0.001 ），投喂水平和投喂頻率的交互作用對克氏原螯蝦血清中的LZM、AKP、

3討論

本研究發(fā)現(xiàn)在低投喂水平時試驗蝦的生長性能隨著投喂水平的升高而顯著提高，相似的結果曾在吉富羅非魚（Oreochromisniloticus）[19]、長吻鮠仔稚魚（Leiocassis longirostrisGunther）[20]、胭脂魚（MyxocyprinusasiaticusBleeker）[2i]等魚類中報道過。此外，當投喂水平從 4.5% 增加到 6% 時，生長性能保持相對穩(wěn)定，推測試驗動物的攝食量過高時，機體無法將全部的營養(yǎng)物質消化吸收，投喂水平具有最適宜和經濟價值最高的臨界點，投喂水平超過這個臨界點，養(yǎng)殖對象無法攝取過量的飼料，生長速度趨于穩(wěn)定，但投喂水平過高會導致飼料浪費、成本增加、利潤降低。當投喂水平為 4.5% 時，2次/d和3次/d試驗蝦飼料系數(shù)顯著低于1次/d試驗組，效益顯著高于1次/d試驗組。2次/d和3次/d試驗組試驗蝦之間沒有顯著差異。推測投喂頻率為2次/d時已滿足克氏原螯蝦正常生長的需求，繼續(xù)提高投喂頻率，無法持續(xù)促進養(yǎng)殖動物的生長但會浪費更多的人力成本，這在其他魚類中也發(fā)現(xiàn)相似的結果，如Zheng等9報道1次/d的投喂頻率便可以滿足大菱鲆（ScophthalmusmaximusLinnaeus）的生長，繼續(xù)提高至2～3次/d，對大菱鲆的生長性能沒有進一步改善；Karadal等[22]發(fā)現(xiàn)2次/d的投喂頻率使施氏厚唇麗魚（Iodotropheussprengerae）達到最好的生長效果和肌肉品質。此外，試驗中還發(fā)現(xiàn)L3F1、L3F2和L3F3組的試驗蝦存活率顯著低于其他試驗組，推測可能是 3% 投喂水平過低無法滿足試驗蝦生長需求，導致試驗蝦長期饑餓，從而抵抗力水平低下。

水產動物的體成分會受到投喂水平的影響，其中粗脂肪含量受到的影響最為顯著[23]。本研究中克氏原螯蝦全蝦和肌肉的粗蛋白含量受投喂頻率的影響并不顯著，但水分含量有隨投喂水平的增加而下降的趨勢，粗脂肪含量隨投喂水平的增加有上升的趨勢。推測隨著投喂水平的增加，機體的攝食量提高，體內能量物質攝人提高，過多的能量物質以脂肪的形式儲存。投喂水平還顯著影響了肌肉中粗蛋白的含量，隨著投喂水平的增加，肌肉中粗蛋白含量隨之增加。綜上，在養(yǎng)殖過程中可以適當提高投喂水平。

甲殼動物主要依靠非特異性免疫來保護機體健康，溶菌酶（LZM）是甲殼動物非特異性免疫中關鍵的殺菌物質，研究者通常把溶菌酶的活性作為觀察機體非特異性免疫的關鍵指標之一[24]。堿性磷酸酶（AKP）是重要的代謝調節(jié)酶，主要作用于甲殼動物體內營養(yǎng)物質的消化吸收和代謝，對于提高甲殼動物免疫力發(fā)揮著重要作用；酸性磷酸酶（ACP）可以維持甲殼動物正常的生理功能和提高免疫力[25-26]王藝超等27]研究飽食水平下刺參體壁與體腔液內AKP、LZM的活性水平，發(fā)現(xiàn)這2種酶表現(xiàn)出較高水平活性提高。本研究中，克氏原螯蝦在投喂水平提高至 4.5% 時，LZM、ACP和AKP的活性水平顯著提高。這表明當投喂水平達到 4.5% 時，克氏原螯蝦抗病能力相對較強；低投喂水平不能滿足養(yǎng)殖動物的營養(yǎng)需要，本研究中 3% 的投喂水平導致克氏原螯蝦長期處于較低的代謝水平，從而影響了抗病能力。超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）可以清除機體內產生的過量活性氧（ROS），對緩解體內應激發(fā)揮著重要作用。超氧化物歧化酶系統(tǒng)將超氧化物催化為過氧化氫，為機體對抗氧化應激提供了首道防線。CAT接著通過一系列酶促反應消除過氧化氫[28]。當水產動物體內產生過多的自由基足以對抗抗氧化系統(tǒng)時，丙二醛（MDA）大量積累，危害機體健康。在本研究中，隨著投喂水平升高，SOD和CAT活性增強。推測過飽食作為一種應激源，會引起機體損傷，機體通過提高抗氧化酶活性及時緩解體內的氧化應激反應。綜上，考慮投喂水平和投喂頻率對試驗蝦生長、飼料系數(shù)、健康程度的影響，并結合養(yǎng)殖成本和效益，建議克氏原螯蝦養(yǎng)殖的投喂水平 4.5% ，投喂頻率2次/d。

參考文獻References

[1] 呼光富，劉香江.克氏原螯蝦生物學特性及其對我國淡水養(yǎng) 殖業(yè)產生的影響[J].北京水產，2008（1）：49-51.HUGF， LIUXJ.BiologicalcharacteristicsofProcambarusclarkiiand itsinfluence on freshwateraquaculture in China[J].Journal of Beijing fisheries，2008（1）：49-51（in Chinese）.

[2] YUE G H，LIJ，BAI Z，et al.Genetic diversity and population structure of the invasive alien red swamp crayfish[J].Biological invasions，2010，12（8）：2697-2706.

[3] 封功能，王愛民，邵榮，等.克氏原螯蝦不同生長階段營養(yǎng)成 分分析與評價[J].江蘇農業(yè)科學，2011，39（4）：383-385. FENGGN，WANGAM，SHAOR，etal.Analysisand evaluationof nutritional componentsof Procambarusclarkii at different growth stages[J].Jiangsu agricultural sciences，2O11，39 （4）：383-385（in Chinese）.

[4] SAPKOTAA，SAPKOTAAR，KUCHARSKIM，etal. Aquaculture practices and potential human health risks：current knowledgeand future priorities[J].Environment international， 2008，34（8）：1215-1226.

[5] 胡倩，王齊帥，黃瑾，等.基于形態(tài)性狀和SSR標記的克氏原 螯蝦養(yǎng)殖群體遺傳多樣性分析[J].華中農業(yè)大學學報， 2024，43（3）：258-266.HUQ，WANGQS，HUANGJ，etal. Genetic diversity analysis of farming Procambarus clarkii population based on morphology traits and SSR markers[J].Jour nal of Huazhong Agricultural University，2O24，43（3）： 258- 266（in Chinese with English abstract）.

[6] 王慧.淮安市克氏原螯蝦的養(yǎng)殖現(xiàn)狀與可持續(xù)發(fā)展研究[D]. 南京：南京農業(yè)大學，2O13.WANG H.Research on the current situationand sustainable development ofProcambarusclarkii aquaculture in Huai'an City[D].Nanjing： Nanjing Agricultural University，2Ol3（in Chinese with English abstract）.

[7] 董家蓮.小龍蝦養(yǎng)殖中的技術細節(jié)與誤區(qū)[J].農業(yè)與技術， 2019，39（4）：135-136.DONG JL.Technical details and misunderstandings in crayfish culture[J].Agriculture and technology，2019，39（4）：135-136 （in Chinese）.

[8] 陳松文，江洋，汪金平，等.湖北省稻蝦模式發(fā)展現(xiàn)狀與對策 分析[J].華中農業(yè)大學學報，2020，39（2）：1-7.CHENSW， JIANG Y，WANG JP，et al.Situation and countermeasures of integrated rice-crayfish farming in Hubei Province[J].Journal of HuazhongAgricultural University，202O，39（2）：1-7（in Chinese with English abstract）.

[9] ZHENG K K，LIANG M Q，F(xiàn)ANG W，et al.Effects of feeding frequency and ration level on growth performance and nonspecific immunityof juvenile turbot（Scophthalmusmaximus） at different growth stages[J]. Israeli journal of aquaculture bamidgeh，2017，1416：1-7.

[10］覃希.投喂頻率和投喂水平對吉富羅非魚幼魚生長性能和生 理機能的影響[D].南寧：廣西大學，2014.QINX.Effectsof feding frequency and feeding level on growth performance and physiological function of juvenile Gifu tilapia[D].Nanning：Guangxi University，2O14（in Chinese with English abstract）.

[11］王建學.紅鰭東方鲀幼魚蛋能比、投喂策略及主要蛋白源消 化率研究[D].上海：上海海洋大學，2020.WANGJX.The study on optimum protein to energy ratio in diet，feeding strategies and apparent digestibility coeficients of selected feed ingredients of juvenile tiger puffer （Takifugu rubripes）[D]. Shanghai： Shanghai Ocean University，2O2O（in Chinese with English abstract）.

[12]孫曉鋒，馮健，陳江虹，等.投喂頻率對尼羅系吉富羅非魚幼 魚胃排空、生長性能和體組成的影響[J].水產學報，2011，35 （11）：1677-1683.SUNXF，F(xiàn)ENGJ，CHENJH，etal.Effects of feeding frequency on gastric evacuation，growth benefit and body composition of juvenile genetic improved farmed tilapia strain of Nile tilapia（Oreochromis niloticus）[J].Journal of fisheries of China，2011，35（11）：1677-1683（in Chinese with English abstract）.

[13]徐革鋒，劉洋，李永發(fā)，等.不同投喂率對細鱗鮭（Brachymystax lenok）幼魚生長及體成分的影響[J].海洋與湖沼， 2013，44（2）：433-437.XUGF，LIUY，LIYF，etal.Effectof feding rate on growth and body composition of juvenile Brachymystaxlenok[J].Oceanologiaet limnologia sinica， 2013，44（2）：433-437（in Chinese with Englishabstract）.

[14]MIZANURRM，PARKG，YUNH，etal.The effects of feedingratesin juvenile Korean rockfish（Sebastes schlegeli） reared at 17°C and 20°C water temperatures[J].Aquaculture international，2014，22（3）：1121-1130.

[15]EROLDOGAN O T，KUMLU M，AKTAS M.Optimum feeding rates for European sea bass Dicentrarchus labrax L. reared in seawater and freshwater[J].Aquaculture，2OO4，231 （1/2/3/4）：501-515.

[16］田紅艷.光照與投喂策略對團頭魴幼魚攝食、生長及免疫的 影響研究[D].南京：南京農業(yè)大學，2018.TIANHY.Effects of lightand feeding strategies on feeding，growth and immunity of juvenile Megalobrama amblycephala[D].Nanjing： Nanjing Agricultural University，2Ol8（in Chinese with English abstract）.

[17]褚志鵬，金佳利，陳細華，等.不同投喂率和投喂頻率對雜交 鱘幼魚生長、體成分和生化指標的影響[J].中國水產科學， 2020，27（2）：177-185.CHUZP，JINJL，CHENXH，et al. Effects of different feeding ratesand frequencies on the growth performance，body composition，and biochemical parameters of juvenile hybrid sturgeon[J].Journal of fishery sciences of China，2020，27（2）：177-185（in Chinese with English abstract）.

[18］彭迪，陳效儒，文華，等。飼料脂肪水平對克氏原螯蝦親蝦生 長性能、肌肉成分、繁殖性能以及血淋巴生化指標的影響 [J].水產學報，2019，43（10）：2175-2185.PENGD，CHEN XR，WENH，etal.Effectsof dietary lipid levels ongrowth performance，muscle composition，reproductive performance andhemolymph biochemical indices of Procambarusclarkii brood-stock[J].Journal of fisheries of China，2O19，43（10）： 2175-2185 （in Chinese with English abstract）.

[19]SOUSARMR，AGOSTINHO CA，OLIVEIRAFA，et al. Productive performance of Nile tilapia （Oreochromis niloticus）fed at different frequencies and periods with automatic dispenser[J].Arq Bras Med Vet Zoo，2012，64（1）：192-197.

[20]劉變枝，朱曉鳴，韓冬，等.投喂水平對長吻鮠仔稚魚生長和 存活的影響[J].水生生物學報，2013，37（2）：261-268.LIUB Z，ZHU X M，HAND，etal.Effectsof feeding level on growth performance of Chinese longsnout catfish （Leiocassis longirostrisGunther）larvae[J].Acta hydrobiologica sinica，2O13，37 （2）：261-268（in Chinese with English abstract）.

[21]袁勇超.胭脂魚適宜蛋白能量水平、投喂水平和磷需要量及 對植物蛋白源的利用研究[D].武漢：華中農業(yè)大學，2011. YUANYC.Optimum protein and energy levels，feeding levels and phosphorus requirement and utilization of plant protein sources for Myxocyprinus asiaticus[D].Wuhan：Huazhong Agricultural University，2Ol1（in Chinese with English abstract）.

[22]KARADAL O，TRKMENG，GROY D.Effect of feeding frequency on growth performance，reproduction eficiency and skincoloration of rusty cichlids （Iodotropheus sprengerae）[J]. Journal of applied aquaculture，202o，32（2）：124-138.

[23]TIANHY，YANGCC，YUYB，etal.Dietarycholesterol level affects growth，molting performance and ecdysteroid signal transduction in Procambarus clarkii[J/OL].Aquaculture， 2020，523：735198[2024-09-30].https：//doi.org/10.1016/j. aquaculture.2020.735198.

[24]MUTA T，IWANAGA S.The role of hemolymph coagulation in innate immunity[J].Current opinion in immunology，1996，8 （1）：41-47.

[25]LIU XL，XI QY，YANGL，et al.The effect of dietary Panax ginseng polysaccharide extract on the immune responses in white shrimp，Litopenaeus vannamei[J].Fishamp;shelfish immunology，2011，30（2）：495-500.

[26]何海琪，孫鳳.中國對蝦酸性和堿性磷酸酶的特性研究[J]. 海洋與湖沼，1992，23（5）：555-560.HEHQ，SUNF.Studies on the characteristics of acid and alkaline phosphatases in Chinese shrimp，Penaeus chinensis[J].Oceanologia et limnologia sinica，1992，23（5）：555-560（in Chinese with English abstract）.

[27]王藝超，梁萌青，鄭珂珂.不同投喂水平對刺參（Apostichopus japonicusSelenka）生長、消化酶及免疫相關酶活性的影響 [J].漁業(yè)科學進展，2016，37（1）：87-92.WANGYC，LIANG MQ，ZHENG K K.Effects of different ration levelson growth，activities of digestive enzymesand immunity-related enzymes in Apostichopus japonicus Selenka[J].Progress in fishery sciences，2016，37（1） ：87-92（in Chinese with English abstract）.

[28]GUO K，RUANGL，F(xiàn)ANWH，et al.The effect of nitrite and sulfide on the antioxidant capacity and microbial composi tion of the intestinesof red swamp crayfish，Procambarus clarkii[J].Fishamp;.shelfish immunology，2020，96：290-296.

Effects of feeding frequency and feeding level on growth ，nutrient composition，andbiochemicalparametersofProcambarusclarkii

ZHANG Qian1，YANG Weijie1，MO Aijie2，YANG Huijun1，GU Zemao1，2，YUAN Yongchao ^1，2

1.College ofFisheries，Huazhong Agricultural University，Wuhan 43oo70，China ; 2.Shuangshui Shuanglii Institute，Huazhong Agricultural University/ Engineering Research Center ofMinistry of Education for Green Development of Aquatic Biological Industry in Yangtze River Economic Belt/Hubei Hongshan Laboratory，Wuhan 43oO7O，China

AbstractThis study aimed to investigate the eects of feeding frequency and feeding levels on the physiological responses of Procambarus clarkii，with the goal of optimizing feeding strategies to enhance feed utilization and reduce environmental waste discharge.A total of 8lO crayfish，with an average body weight of （ 4.97±0.11 ）g were randomly divided into 9 treatment groups，each with 3 replicates，following a 3×3 two-factor experimental design.The daily feeding frequencies were once （F1），twice （F2），and three times （F3），while the feeding levels were set at 3% （L3）， 4.5% （L4.5），and 6% （L6）of the exper imental shrimp’s body weight.The experiment lasted for 56 days.The results showed that the weight gain rate（WGR）and specific growth rate （SGR）of shrimp in the L4.5 and L6 groups were significantly higher than those in the L3 group （ Plt;0.05 ）.The L6 group exhibited significantly higher WGR，SGR，and feed conversion ratio（FCR） compared to the L3 and L4.5 groups （ Plt;0.05 ）.In terms of whole-body and muscle nutrient composition，the crude protein content in the L4.5 and L6 groups was significantly higher than that in the L3 group （ Plt;0.05 ），while the crude fat content in the whole body of the L6 group was significantly higher than in that in the L4.5 and L3 groups.Serum biochemical analysis revealed that levels of alkaline phosphatase（AKP），acid phosphatase（ACP），superoxide dismutase （SOD），catalase（CAT），and malondialdehyde（MDA） in the L6 and L4.5 groups were significantly higher than those in the L3 group （ Plt;0.05 ）.The MDA level in the F1 group was significantly lower than in the F2 and F3 groups （ Plt; O.05），with significant interaction effects observed between feeding frequency and level （ Plt;0.05 ）.Based on WGR，survival rate，and feed cost，the L4.5 group achieved the highest economic benefit （approximately 23.45 yuan/kg），followed by the L6 group，while the L3 group yielded the lowest profit （13.65 yuan/ ^′kg ） The L4.5F2 group exhibited the lowest feed cost and the highest economic return.Considering growth per formance，health status，and cost-effectiveness，a feeding level of 4.5% of body weight，administered twice daily，is recommended for rice-crayfish integrated farming systems.

Keywords Procambarus clarkii； level of feeding； feeding frequency ； growth ； nutrient composition;immunity

（責任編輯：邊書京）