欽州市無(wú)償獻(xiàn)血者人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒感染狀況調(diào)查

中圖分類號(hào)：R457.1；R446.6 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.3969/j. issn.1003-1383.2025.04.008

Investigationon human T-lymphotropicvirusinfection among voluntary blood donors in Qinzhou City

WEI Lilian，YUAN Xiaoying，XIE Lanqian，LAN Jun，HUANG Dong，CHEN Bochang（Department of Clinical Laboratory，Qinzhou Central Blood Station，Qinzhou 535000，Guangxi，China）

【Abstract】ObjectiveTo investigate the infection conditionofhuman T-cellymphotropic virus（HTLV）among voluntaryblooddonors in Qinzhou City，soasto provideabasis forformulating blood screning strategiesin China.MethodsA totalof74716bloodsamples werecolectedfromvoluntaryblooddonorsinQinzhou CityfromJuly2022 toMay2024.The antibodies against HTLV-1/2 weredetectedbydouble-antigensandwich enzyme-linked immunosorbentassy（ELISA）Samples thatshowedreactivityweresenttothe Guangxi Blood Center forfurtherconfirmationbyWesternblot（WB）andrealtimefluorescent quantitativepolymerasechainreaction（PCR）．ResultsAmongthe74716blood donorsamplestested by ELISA，10 cases were positive for HTLV-1/2 antibodies，with a preliminary sreening positivity rate of O .134‰ ；among the 10 initiallyscreened positiveblooddonors，onecase wasconfirmedtobepositiveforHTLV-1，withaconfirmed positivity rate of 0.0134%o ，no HTLV-2 positive blood donors were detected，and the confirmed positive donor was a Han Chinese of Qinzhou native.ConclusionCurrntly，there isno HTLV-2 infection detectedamong voluntary blood donorsinQinzhou City.However，alow level of HTLV-1infection，mainlyamong local residents，doesexist.Continuousmonitoring istil neded.Toensure bloodsafety，efectivepreventiveandcontrol measuresshouldbetakentoreducetheriskofHTLVtransmission through blood.

【KeyWords】human T-cellymphotropic virus （HTLV）；voluntary blood donation；infection condition

人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒（humanT-celllympho-tropicvirus，HTLV）于20世紀(jì)80年代初被發(fā)現(xiàn)，是迄今為止第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)與癌癥相關(guān)的RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒，可引起成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤（adultT-cellleukemia，ATL）熱帶痙攣性下肢輕癱/HTLV-1相關(guān)性脊髓?。╰ropical spastiparaparesis/HTLV-1 associatedmyelopathy，TSP/HAM）、下肢癱瘓等疾病，嚴(yán)重者可以導(dǎo)致死亡[1-3]。目前研究發(fā)現(xiàn)HTLV有4個(gè)亞型，分別為HTLV-1/2/3/4型，其中HTLV-1型對(duì)人類致病性最強(qiáng)，而HTLV-2型通常會(huì)使人體產(chǎn)生輕度神經(jīng)系統(tǒng)疾病，HTLV-3和HTLV-4僅在中非發(fā)現(xiàn)，通常影響非人類原始人。全球有1000萬(wàn)～2000萬(wàn)的HTLV感染者，HTLV-1病毒感染主要流行于日本、伊朗、美洲、加勒比地區(qū)、美拉尼西亞、中非和西非及澳大利亞[4]。HTLV-2病毒感染主要流行于非洲以及南美洲、北美洲和中美洲的特殊人群，主要見(jiàn)于美洲印第安人和俾格米部落，并且在發(fā)達(dá)國(guó)家的靜脈注射吸毒人群中流行[5]。HTLV-3和HTLV-4病毒感染主要是在中非游牧獵人群中流行和分布[6。我國(guó)報(bào)道流行的感染病例主要是HTLV-1和HTLV-2型，福建、廣東沿海一帶為高發(fā)地區(qū)，具有地方流行性。HTLV的主要傳播方式為母嬰傳播、性傳播和經(jīng)血液傳播，目前HTLV篩查尚未列入我國(guó)獻(xiàn)血者血液常規(guī)篩查項(xiàng)目，為降低輸血感染風(fēng)險(xiǎn)，國(guó)家衛(wèi)生健康委2016年起在我國(guó)部分地區(qū)血站開(kāi)展HTLV的監(jiān)測(cè)工作，根據(jù)前期的監(jiān)測(cè)結(jié)果，國(guó)家衛(wèi)生健康委2022年印發(fā)《“十四五”血站血液安全監(jiān)測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警工作方案的通知》（國(guó)衛(wèi)辦醫(yī)函[2022]44號(hào)）調(diào)整了全國(guó)血站HTLV監(jiān)測(cè)工作的范圍。現(xiàn)將欽州市2022年7月一2024年5月無(wú)償獻(xiàn)血者HTLV-1/2篩查情況匯報(bào)如下，為國(guó)家制定血液管理相關(guān)政策提供決策依據(jù)，進(jìn)一步提高我國(guó)血液安全水平。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源收集2022年7月1日至2024年5月30日期間在欽州市中心血站進(jìn)行無(wú)償獻(xiàn)血的74 716份獻(xiàn)血者標(biāo)本。獻(xiàn)血者均依據(jù)《獻(xiàn)血者健康檢查要求》（GB18467—2011），接受了全面且嚴(yán)格的健康征詢與檢查流程。年齡18～60歲，采集靜脈血 5mL 全血，使用EDTA-K2抗凝， 2～8‰ 保存。

1.2儀器與試劑

1.2.1試劑抗HTLV-1/2檢測(cè)試劑由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司提供，人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒抗體檢測(cè)試劑盒（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法）；HTLV確證實(shí)驗(yàn)采用免疫印跡法（WB）和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），試劑由新加坡MP公司提供的HTLVBLOT2.4試劑盒。以上試劑均為國(guó)家合格產(chǎn)品，均經(jīng)質(zhì)量抽檢合格在有效期內(nèi)使用1.2.2儀器帝肯全自動(dòng)加樣器（EV0150/8），瑞士漢密爾頓全自動(dòng)酶免分析儀（FAME24/30），微量移液器（ 10～100μL ），CS-Blot48免疫印跡儀。以上儀器均經(jīng)過(guò)校驗(yàn)合格，在正常狀態(tài)下使用。

1.3 方法

1.3.1抗HTLV-1/2初篩使用帝肯全自動(dòng)加樣器（EV0150/8）及瑞士漢密爾頓全自動(dòng)酶免分析儀（FAME24/30），嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，對(duì)獻(xiàn)血者樣本采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法進(jìn)行HTLV-1/2檢測(cè)，對(duì)初次檢測(cè)反應(yīng)性的樣本（即 S/CO"值 ?1.0 ）時(shí)進(jìn)行雙孔復(fù)檢，復(fù)檢只要有1孔呈反應(yīng)性即判定為初篩陽(yáng)性。復(fù)檢陽(yáng)性的樣本對(duì)應(yīng)的血液及由其制備的所有成分應(yīng)隔離并進(jìn)行報(bào)廢處理，不可用于臨床輸注。

1.3.2HTLV確認(rèn)實(shí)驗(yàn)對(duì)抗HTLV-1/2初篩反應(yīng)性樣本管，于 分鐘條件下再次離心。用一次性吸頭將血漿（至少 1mL 轉(zhuǎn)移至螺口管中，同時(shí)吸取血細(xì)胞上層的白膜（至少 500μL ），轉(zhuǎn)移至螺口管中，血漿管和白膜管均應(yīng)放入 -20^°C 以下冰箱保存。收集完成后采用 2～8°C 或 -20‰ 以下運(yùn)輸至廣西血液中心HTLV確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室，采用WB和PCR進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果為陽(yáng)性即判定HTLV確認(rèn)陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS27.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和千分率表示，采用 χ² 檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)： α=0.05 。

2結(jié)果

2.1ELISA檢測(cè)結(jié)果2022年7月至2024年5月74716份無(wú)償獻(xiàn)血者樣本進(jìn)行抗HTLV-1/2初篩檢測(cè)，初篩陽(yáng)性10份，初篩陽(yáng)性率為 0.134%o 。不同年份間初篩陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ²=0.611，Pgt; 0.05）。見(jiàn)表1。

2.2確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果2022年7月至2024年5月欽州市中心血站送檢廣西壯族自治區(qū)血液中心10份標(biāo)本采用免疫印跡法進(jìn)行確認(rèn)，反饋結(jié)果為1例確認(rèn)陽(yáng)性，9例確認(rèn)陰性，確認(rèn)陽(yáng)性率為 0. 0134%o （1/74716）。采用ELISA初篩HTLV假陽(yáng)性率為90.0%（9/10） 。10例HTLV-1/2初篩陽(yáng)性樣本確認(rèn)結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3HTLV確認(rèn)陽(yáng)性樣本具體情況2022年7月至2024年5月間僅2023年有1例標(biāo)本確認(rèn)陽(yáng)性，該例確認(rèn)陽(yáng)性獻(xiàn)血者為男性，首次獻(xiàn)血，其他血液篩查項(xiàng)目均合格（HBV、HCV、HIV、TP、ALT），因一些客觀原因未能對(duì)其家庭成員及密接親友進(jìn)行病毒篩查，未能了解其周邊感染情況，系統(tǒng)已對(duì)該確認(rèn)陽(yáng)性獻(xiàn)血者進(jìn)行終身屏蔽獻(xiàn)血。見(jiàn)表3。

3討論

輸血是HTLV傳播的主要途徑之一，對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行HTLV篩查可預(yù)防經(jīng)輸血傳播HTLV。在全球范圍內(nèi)，不同的國(guó)家對(duì)獻(xiàn)血者采取不同的檢測(cè)策略，以提高血液供應(yīng)的安全性。世界衛(wèi)生組織《2021全球血液安全和可獲得性現(xiàn)狀報(bào)告》7顯示，全球35個(gè)國(guó)家對(duì)所有獻(xiàn)血者進(jìn)行了HTLV-1和HTLV-2的強(qiáng)制性檢測(cè)，15個(gè)國(guó)家對(duì)來(lái)自特定地理位置的捐助者、新捐助者或以前沒(méi)有接受過(guò)檢測(cè)的捐助者進(jìn)行了選擇性檢測(cè)，目前開(kāi)展全面HTLV血液篩查的歐洲國(guó)家有英國(guó)、希臘、羅馬尼亞；部分歐洲國(guó)家采用選擇性篩查策略，如法國(guó)、盧森堡、荷蘭、挪威、葡萄牙、西班牙、瑞典等對(duì)首次獻(xiàn)血者進(jìn)行HTLV-1/2抗體檢測(cè)。在美洲，絕大多數(shù)國(guó)家采用全面HTLV血液篩查策略，如加拿大、巴西、阿根廷等；參加世界衛(wèi)生組織調(diào)查的美洲國(guó)家中僅厄瓜多爾采用選擇性篩查策略。西太平洋地區(qū)澳大利亞及日本采用全面HTLV血液篩查策略；新西蘭、韓國(guó)、越南等采用選擇性篩查策略，以滿足臨床特殊患者的輸血要求。許多國(guó)家經(jīng)過(guò)多年對(duì)當(dāng)?shù)孬I(xiàn)血人群的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及成本測(cè)算后，改變檢測(cè)策略，由原來(lái)的全面篩查改變?yōu)檫x擇性篩查；也有經(jīng)過(guò)篩查結(jié)果為低流行的認(rèn)為沒(méi)有進(jìn)行HTLV檢測(cè)的必要，如挪威和芬蘭8分別于2007年和2008年終止了獻(xiàn)血者HTLV篩查，使用對(duì)相關(guān)血液制品采取白細(xì)胞過(guò)濾的方法來(lái)預(yù)防。

目前，中國(guó)僅香港特別行政區(qū)、澳門(mén)特別行政區(qū)、臺(tái)灣地區(qū)已將HTLV血清學(xué)檢測(cè)列為獻(xiàn)血人群的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目9]，大陸地區(qū)并未將HTLV列入獻(xiàn)血者血液篩查常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，但是許多采供血機(jī)構(gòu)對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血人群進(jìn)行了HTLV感染情況流行病學(xué)調(diào)查。早在1984年李以莞等對(duì)獻(xiàn)血者中HTLV感染進(jìn)行了研究，結(jié)果462份來(lái)自四個(gè)地區(qū)的獻(xiàn)血者樣本篩查出16份樣本陽(yáng)性，感染率為 3.4% ;其中北京、天津、沈陽(yáng)和昆明四個(gè)地區(qū)的陽(yáng)性率分別為 3.0%.3.5%.5. 2%和2.3% 。此后全國(guó)各地相繼報(bào)道了對(duì)獻(xiàn)血者的HTLV篩查情況，呈現(xiàn)明顯的區(qū)域性差異，可能與各地采用試劑靈敏度差異、研究對(duì)象人群特征的不同以及統(tǒng)計(jì)分析方法差異有關(guān)。為國(guó)家制定血液管理相關(guān)政策提供決策依據(jù)，進(jìn)一步提高我國(guó)血液安全水平，2015年底，原國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委辦公廳發(fā)文《關(guān)于血站做好人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒監(jiān)測(cè)工作的通知》（國(guó)衛(wèi)辦醫(yī)函[2015]1103號(hào)），要求自2016年起浙江、福建、廣東3省對(duì)全省所有獻(xiàn)血者開(kāi)展HTLV監(jiān)測(cè)，其余各?。▍^(qū)、市）遴選部分血站進(jìn)行抽樣監(jiān)測(cè)。經(jīng)過(guò)5年的監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)部分之前未報(bào)道HTLV感染的地區(qū)出現(xiàn)高感染率，也有流行率極低的地區(qū)。根據(jù)《全國(guó)血站服務(wù)體系建設(shè)發(fā)展規(guī)劃（2021—2025年）》，各省份結(jié)合HTLV流行率動(dòng)態(tài)調(diào)整監(jiān)測(cè)策略，福建、江西、湖南、廣西和海南5?。▍^(qū)）對(duì)全?。▍^(qū)）所有獻(xiàn)血者開(kāi)展HTLV監(jiān)測(cè)；四川、浙江等調(diào)整為 30% 獻(xiàn)血者篩查；北京、廣東等調(diào)整為 10% 獻(xiàn)血者篩查;上海、山東等不再進(jìn)行HTLV常規(guī)監(jiān)測(cè)。2021年謝桂蕓等[11]對(duì)近10年中國(guó)大陸獻(xiàn)血者HTLV感染情況的分析顯示，獻(xiàn)血者HTLV-1感染率最高的三個(gè)地區(qū)分別為福建、廣東和浙江。這與2017年李文慧等[12]對(duì)近20年來(lái)中國(guó)大陸地區(qū)HTLV-1流行情況30個(gè)橫斷面調(diào)查結(jié)果一致。隨著HTLV感染率調(diào)查研究的增多，覆蓋范圍增大，結(jié)果顯示HTLV有向非流行區(qū)蔓延的趨勢(shì)，流動(dòng)性較大的城市存在HTLV感染散發(fā)案例的現(xiàn)象。

本研究對(duì)欽州市74716人份無(wú)償獻(xiàn)血者進(jìn)行HTLV感染篩查，結(jié)果HTLV-1/2抗體陽(yáng)性10份，初篩陽(yáng)性率為 0.134‰ （10/74716）;初篩陽(yáng)性樣本經(jīng)WB確認(rèn)，確認(rèn)陽(yáng)性1份，確認(rèn)陽(yáng)性率為 0.0134‰ （1/74716），高于南京地區(qū)（0）[13]、安慶市（0）[14]、紹興地區(qū) ，與煙臺(tái) 0.012‰ （1/86 429）[16]、吉林 接近，低于福建 0.25%o（254/1015939）^[18] 、溫州 0.05%o （10/214117）[19]。提示欽州市存在輸血傳播HTLV的潛在風(fēng)險(xiǎn)，但是HTLV感染率在國(guó)內(nèi)處于較低水平，屬于低流行區(qū)域，目前HTLV對(duì)欽州市血液安全的威脅不大。本研究經(jīng)ELISA檢測(cè)出的10份HTLV-1/2抗體陽(yáng)性標(biāo)本中僅1份經(jīng)確認(rèn)試驗(yàn)確證陽(yáng)性，提示ELISA方法篩查HTLV假陽(yáng)性率L 90.0% ）較高，不進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)可能導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確，因此有必要進(jìn)行WB和（或）PCR確認(rèn)。對(duì)比目前常用的三種HTLV檢測(cè)方法，ELISA操作簡(jiǎn)單，費(fèi)用低，靈敏度高，但是特異性差，不能對(duì)病毒進(jìn)行分型及病毒載量定量，適合大規(guī)模篩查；WB特異性高，可對(duì)病毒分型，但是費(fèi)用高，不能定量病毒載量，操作復(fù)雜；病毒核酸擴(kuò)增檢測(cè)（NAT）特異性高，可對(duì)病毒分型且可以定量病毒載量，但是費(fèi)用高。建議各采供血機(jī)構(gòu)根據(jù)本地區(qū)實(shí)際情況，例如年度獻(xiàn)血人數(shù)、感染率、確認(rèn)陽(yáng)性人群分布、本地經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平等綜合考慮來(lái)選擇篩查策略。

本研究發(fā)現(xiàn)的1例HTLV確認(rèn)陽(yáng)性的獻(xiàn)血者，病毒基因分型為HTLV-1型，為欽州市本地39歲男性初次獻(xiàn)血者，漢族，未婚，職業(yè)不詳。經(jīng)過(guò)初步調(diào)查，該獻(xiàn)血者無(wú)既往病史，無(wú)吸毒史，無(wú)共用針具史，無(wú)輸血史，無(wú)到國(guó)外高流行區(qū)生活史，曾到廣東工作，有多個(gè)性伴侶，考慮可能為在高流行區(qū)域（廣東）通過(guò)性傳播感染。該獻(xiàn)血者目前未發(fā)現(xiàn)任何癥狀，屬于HTLV無(wú)癥狀病毒攜帶者，遺憾的是，因一些客觀原因未能對(duì)其家庭成員及密接親友進(jìn)行病毒篩查，未能了解其周邊感染情況。因此在后續(xù)的研究工作中，我們需進(jìn)一步優(yōu)化隨訪策略，提高隨訪的成功率，以便更準(zhǔn)確地評(píng)估欽州地區(qū)HTLV感染情況。

綜上所述，本研究首次報(bào)告了欽州市無(wú)償獻(xiàn)血人群中HTLV感染情況，欽州市存在輸血傳播HTLV的潛在風(fēng)險(xiǎn)，感染率在國(guó)內(nèi)處于較低水平，與國(guó)內(nèi)其他低流行區(qū)域或非流行區(qū)域基本一致。但由于欽州市屬于沿海城市，地處于中國(guó)南海西北部的海灣區(qū)域中心位置，交通網(wǎng)發(fā)達(dá)，流動(dòng)人口較多，并且近年興建平陸運(yùn)河，務(wù)工人員流動(dòng)頻繁，都有可能增加HTLV輸入感染的風(fēng)險(xiǎn)，未來(lái)可能會(huì)出現(xiàn)HTLV輸人感染增多。鑒于以上情況，綜合考慮血液安全、檢測(cè)成本及社會(huì)效益等多方面因素，欽州地區(qū)可以通過(guò)以下措施預(yù)防和控制HTLV經(jīng)血傳播的風(fēng)險(xiǎn)：（1）加強(qiáng)獻(xiàn)血前健康征詢工作，篩選出“高危”人群，尤其是籍貫為HTLV高流行區(qū)，或在HTLV高流行區(qū)生活過(guò)、有輸血史等，對(duì)該人群進(jìn)行HTLV-1/2抗體檢測(cè)。（2）根據(jù)HTLV病毒感染的特點(diǎn)（通過(guò)其表面包膜糖蛋白與細(xì)胞的CD4分子結(jié)合而感染T淋巴細(xì)胞）[20]，臨床可輸注去白細(xì)胞的血液或輻照血液，減少輸血傳播HTLV的風(fēng)險(xiǎn)。（3）由于存儲(chǔ)時(shí)間長(zhǎng)的血液制品的淋巴細(xì)胞活力降低，可使用保存14d以上的血液制品（全血、紅細(xì)胞和血小板等），降低HTLV感染風(fēng)險(xiǎn)。此外，本研究不足之處是標(biāo)本量不夠大，后期需要進(jìn)行更大規(guī)模的研究來(lái)更準(zhǔn)確地評(píng)估欽州市HTLV的感染率、基因型以及輸血傳播的風(fēng)險(xiǎn)。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2024-11-28 修回日期：2025-02-26）

（編輯：潘明志）