阿膠和阿膠肽對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的作用研究

關(guān)鍵詞阿膠；阿膠肽；過(guò)氧化氫；人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；氧化損傷

中圖分類(lèi)號(hào)R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào) 0517-6611（2025）08-0162-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.08.035

開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Abstractbective]Toaalyeteoleoforiollini（Ejia）adEjpeptideinoxidatiestressijuyofscularedothelialcels andthemechanismoftheirrole.[Metod]Themodelofhumanumbilicalveinendothelialcellinjuryinducedbyhydrogenperoxide（ ） wasestablishedTetsofEjaodEjapeptideontesurvialateofumanmblcalvendothelialcs（HUVEC）beforeadfter modelingweredteedbyCCK-8eeectsofEjandEjaopeptideonthactitiesofcellsuperoxidedsmutase（SOD）glutatioepe oxidase（GSH-px），lactatedehydrogenase（LDH）andtecontentsofalondialdehde（MDA）ascuarendthelialgrowthfctor（EGF）， interleuki-6（-6）ricide（NO）reded.esultEdEpeptidouldectivelyproteeproliferatiodo of HUVEC，and could effectively resist the proliferation inhibition caused by oxidative injury. Ejiao and Ejiao peptide could significantly inhibit the excessive production of MDA and LDH， Ejiao could significantly increase the enzyme activity of GSH-px，Ejiao peptidecouldsignificantlyincreasetheexpressonlvelofSODandrepirteoidativeijuyofHUVCBothEjiaoadEjapeptideould effectivelyproefyulardolpottsdelalfucioteeoVGy vascularendoelialelluceotf6ooteogsisduceatoactoocisf EjiaoandEjioeptideducinoidativestressofECabelatedtprovingcellgrowhndproliferatiohncingeltioidantenzymeactivityrotigtexpresiofsredoelialgowthfctorandprootigtesetioofbasadelal cells.

Key wordsCorii colla asini（Ejiao） ；Ejiao peptide；Hydrogen peroxide ）； Human umbilical vein endothelial cells（HUVEC） ；Oxida-tive injury

由于當(dāng)今世界的人口日益老齡，許多慢性疾病如冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病和脂肪肝的患病比例正在不斷上升[1]與高血壓、高血脂、衰老等疾病密切相關(guān)的血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的損傷研究逐漸引起人們的重視[2]。人體的內(nèi)皮組織受到破壞時(shí)，它們會(huì)釋放出大量的有害物質(zhì)，如血管緊張素轉(zhuǎn)換酶、內(nèi)皮素、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因素、黏附分子等，這些物質(zhì)會(huì)刺激血管的收縮，從而誘發(fā)多種疾病，如冠心病、高血壓[3-5]這些疾病的發(fā)病機(jī)制主要是由于這些物質(zhì)的破壞所造成的。脂多糖、炎性介質(zhì)、自由基以及其他多種損傷性物質(zhì)[6-7]均會(huì)對(duì)血管壁產(chǎn)生影響，從而導(dǎo)致血管損傷[8-9]，它們會(huì)影響血液流動(dòng)，并對(duì)血管壁的代謝物質(zhì)及血流動(dòng)力學(xué)產(chǎn)生影響，干擾血液的正常層流狀態(tài)。當(dāng)血管發(fā)生破壞，受損內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)因應(yīng)激反應(yīng)而釋放出多種有害血液物質(zhì)，這些物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致微循環(huán)血管收縮、血細(xì)胞聚集、血液黏度增加等一系列變化，最終致使微循環(huán)出現(xiàn)阻塞[10-12]。另外，受損組織產(chǎn)生的凝血酶、組織因子、炎性介質(zhì)會(huì)激活炎癥細(xì)胞，引發(fā)炎癥反應(yīng)。在炎癥環(huán)境下，纖維蛋白原和血小板發(fā)生功能改變，逐步形成血栓。而血栓的存在又進(jìn)一步損害內(nèi)皮細(xì)胞功能，加劇炎癥反應(yīng)，形成惡性循環(huán)[13-14]。由此可見(jiàn)，針對(duì)受損內(nèi)皮細(xì)胞開(kāi)展積極有效的保護(hù)策略研究，無(wú)論是在心血管疾病預(yù)防領(lǐng)域還是在延緩機(jī)體衰老進(jìn)程等方面均有極為重要的理論研究?jī)r(jià)值與臨床應(yīng)用前景。

阿膠，與人參、鹿茸并稱(chēng)為“滋補(bǔ)三寶”，其應(yīng)用也有3000多年的歷史[15]，其傳統(tǒng)的補(bǔ)血止血、滋陰潤(rùn)燥功效已被廣泛認(rèn)知，近年來(lái)，隨著對(duì)其研究的深入，發(fā)現(xiàn)其在抗疲勞、增強(qiáng)記憶力、改善皮膚、呼吸系統(tǒng)改善、促骨愈合等方面均有不同作用[16-18]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，阿膠具有與其他胚胎組織類(lèi)似的微環(huán)境物質(zhì)，可以改善血液微環(huán)境[19]。有研究表明，阿膠中的膠原蛋白和糖胺多糖可以促進(jìn)造血干細(xì)胞的生長(zhǎng)和發(fā)育[20] 。

近年來(lái)，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（humanumbilicalveinendo-thelialcells，HUVEC）已經(jīng)被證明可以作為心血管疾病研究的重要細(xì)胞株之一[21]。通過(guò)過(guò)氧化氫刺激，能夠形成對(duì)HU-VEC膜上的脂和蛋白的氧化，進(jìn)而與細(xì)胞內(nèi)鐵離子反應(yīng)產(chǎn)生大量的有害自由基，這些物質(zhì)可以通過(guò)氧化作用，從而引發(fā)一連串的氧化應(yīng)激損害[22-24]。因此，該研究建立氧化損傷HUVEC模型，評(píng)估阿膠和阿膠肽對(duì)氧化應(yīng)激損傷的血管內(nèi)壁細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng)及功能調(diào)節(jié)作用，探索阿膠及其小分子肽對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響，以期為進(jìn)一步研究阿膠成分在改善微循環(huán)、預(yù)防高血壓、冠心病等血管性疾病中的作用提供基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1試材。HUVEC，購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所的細(xì)胞庫(kù)；阿膠、阿膠肽，由東阿阿膠股份有限公司提供；內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基（ECM）、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ECGS）、胎牛血清（FBS）胰酶、青霉素鏈霉素溶液、磷酸鹽緩沖液（PBS）、細(xì)胞計(jì)數(shù)（CCK-8）試劑，購(gòu)自美國(guó)Hyclone公司；3 0 % 過(guò)氧化氫，購(gòu)自萊陽(yáng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠；超氧化物歧化酶（SOD）谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ ）、乳酸脫氫酶（LDH）丙二醛（MDA）血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、一氧化氮（NO）試劑盒，購(gòu)自北京索來(lái)寶科技公司。

1.1.2儀器設(shè)備。二氧化碳培養(yǎng)箱，美國(guó)ThermoFisher公司；SW-CJ-2D 細(xì)胞超凈工作臺(tái)，上海市元析有限公司；CKX53倒置顯微鏡，日本奧林巴斯公司；MBRI03-SOP202-00EmaxPlus酶標(biāo)儀，美國(guó)MolecularDevice公司；ME2002E萬(wàn)分之一天平，梅特勒公司；H1650-W臺(tái)式高速離心機(jī)，湖南湘儀有限公司；DHP-9052小型恒溫培養(yǎng)箱，上海一恒有限公司；臭氧發(fā)生器，青島國(guó)林設(shè)備有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1細(xì)胞復(fù)蘇及傳代。液氮中取出HUVEC，迅速置于 水浴中，在 使其快速溶化，溶化完成后，向含有HUVEC的離心管中加入 ECM完全培養(yǎng)液（由 ECM、25mL FBS ECGS、 青霉素鏈霉素溶液混合而成），輕柔混勻。將混勻后的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至 平皿中，最后將平血放入二氧化碳培養(yǎng)箱，在3 7% （204 條件下培養(yǎng)，每2d換液1次，5～7d長(zhǎng)滿后，吸除培養(yǎng)液，PBS清洗2遍，隨后使用 含 0 . 0 2 % 乙二胺四乙酸（EDTA）的0 . 2 5 % 胰酶消化細(xì)胞，在消化過(guò)程中，持續(xù)使用顯微鏡進(jìn)行觀察，當(dāng)觀察到細(xì)胞完全脫離培養(yǎng)血底部時(shí)，立即加入 ECM完全培養(yǎng)液終止消化反應(yīng)，混勻得到細(xì)胞懸液。取 細(xì)胞懸液加入細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，按試驗(yàn)需求稀釋內(nèi)皮細(xì)胞單細(xì)胞懸液到合適濃度進(jìn)行后

續(xù)試驗(yàn)。

1.2.2細(xì)胞增殖活性檢測(cè)。采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性。按照\(chéng)"1.2.1\"方法制備 個(gè) 的HUVEC懸液，將該懸液加入96孔板中，每孔加入量為 ，完成加樣后，將96孔板放置于含有 5 % （ 、溫度為 的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng) 后，將其分為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組和不同濃度（50、100、200 和 ）的樣品組，每個(gè)樣品重復(fù)3孔，對(duì)應(yīng)加入各樣品，培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) ，再每孔加入 后于 進(jìn)行吸光度測(cè)量，計(jì)算細(xì)胞存活率。1.2.3細(xì)胞遷移能力檢測(cè)。通過(guò)劃痕試驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移能力。在HUVEC傳代培養(yǎng)過(guò)程中，將HUVEC懸液的量精確控制在 個(gè) ，然后將其分配給試驗(yàn)樣品組、空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組，配制不同濃度的阿膠樣本，混合均勻后滴入6孔板，在 5 % 的環(huán)境下，經(jīng)過(guò) 的培養(yǎng)，細(xì)胞會(huì)緊密地黏附在板上，然后使用 的無(wú)菌槍頭，快速地在板子上移開(kāi)，從而產(chǎn)生出細(xì)小的裂紋。將細(xì)胞培養(yǎng)液中的劃痕清理干凈，將其轉(zhuǎn)移至 5 %C O2，"l ， 3 7的環(huán)境中，并在 進(jìn)行拍照，以便進(jìn)一步研究。

1.2.4氧化損傷HUVEC模型的建立。該試驗(yàn)設(shè)置空白對(duì)照組（Blank）模型對(duì)照組（Model）阿膠低劑量組（EJ-L）、阿膠高劑量組（EJ-H）阿膠肽低劑量組（EJP-L）阿膠肽高劑量組（EJP-H）。EJ-L和EJP-L組的給藥濃度均為 ，EJ-H和EJP-H組的給藥濃度均為 。

通過(guò)HUVEC培養(yǎng)步驟，制備了一系列 個(gè) 的HUVEC懸液。將這些懸液與各完全培養(yǎng)基配制的阿膠樣品進(jìn)行混合，并將混合液分別加人6孔培養(yǎng)板，每孔 ，在 的細(xì)胞培養(yǎng)箱里培養(yǎng) ，直到細(xì)胞能夠牢固地附著在培養(yǎng)板的表面，并且能夠完整地覆蓋培養(yǎng)板。然后，將上層液體丟掉，在除空白對(duì)照組外的每個(gè)孔中添加 的 ，孵育 后，用PBS進(jìn)行反復(fù)沖洗，并在每個(gè)孔中添加對(duì)應(yīng)組的完全培養(yǎng)基配制的阿膠樣品，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組添加等體積完全培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng) ，收集各組的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液，胰酶消化后收集細(xì)胞進(jìn)行分析。

1.2.5氧化損傷HUVEC酶學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)。收集各組的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液和細(xì)胞，按照試劑盒要求進(jìn)行 、LDH、MDA的檢測(cè)，分析各樣品對(duì)氧化損傷內(nèi)皮細(xì)胞的抗氧化效果。

1.2.6血管VEGF、NO 和IL-6的檢測(cè)。取細(xì)胞培養(yǎng)液， 離心 后，收集不同阿膠處理過(guò)的氧化損傷HUVEC上清液， 1 ： 1 稀釋后進(jìn)行反應(yīng)，采用酶聯(lián)免疫吸附法，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，操作步驟按試劑盒說(shuō)明，檢測(cè)VEGF、NO和IL-6蛋白表達(dá)水平，評(píng)價(jià)阿膠及阿膠肽樣品在保護(hù)血管內(nèi)壁細(xì)胞方面的功能活性。

1.3數(shù)據(jù)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（Mean ）表示。采用Excel2007和GraphPadPrism9.00軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析并繪圖，并采用t檢驗(yàn)分析兩組數(shù)據(jù)之間的差異性。

2 結(jié)果與分析

2.1阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC存活率的影響內(nèi)皮細(xì)胞在血管的健康狀態(tài)中扮演著至關(guān)重要的角色，它們的增殖是血管健康發(fā)展的基礎(chǔ)，也是血管新生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。首先通過(guò)CCK-8法檢測(cè)阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC存活率的影響，結(jié)果如圖1所示。

從圖1可以看出，與空白對(duì)照相比，添加 阿膠和阿膠肽后HUVEC的存活率均高于 8 0 % ，說(shuō)明阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC均無(wú)細(xì)胞毒性。添加 阿膠能夠極顯著提高HUVEC存活率（ ，添加 阿膠也能夠顯著提高其存活率（ ；對(duì)于阿膠肽而言，當(dāng)添加濃度為 時(shí)，能夠極顯著提高HUVEC存活率（ ），100和 阿膠肽也能夠顯著提高其存活率 。因此，在阿膠和阿膠肽對(duì)氧化損傷HUVEC作用的試驗(yàn)中，阿膠和阿膠肽均設(shè)置2個(gè)給藥濃度（100、 。

注： ； ： * □

2.2阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC形態(tài)的影響試驗(yàn)結(jié)果表明，在貼壁生長(zhǎng)過(guò)程中，HUVEC初始多呈圓形、橢圓形或小段狀（圖2a），隨著時(shí)間的推移，細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槎绦∷笮位蝾?lèi)似磚形結(jié)構(gòu)（圖2b）。當(dāng)添加 阿膠和 阿膠肽時(shí)，阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC形態(tài)均無(wú)顯著影響，細(xì)胞外觀扁平，邊緣清晰，胞質(zhì)均勻，橢圓形的胞核明顯可見(jiàn)（圖 ）。

注：a.消化后形態(tài)；b.貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞形態(tài)；c.加阿膠細(xì)胞形態(tài)；d.加阿膠肽細(xì)胞形態(tài)。 Note：a.Afterdigestiomoholo；bCellorpolgyoferentgrowth；c.AddEjiaocelloolog；dAdEjiaoeptidecelllog

2.3阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC遷移率的影響通過(guò)劃痕試驗(yàn)研究阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC的遷移及遷移率的影響，結(jié)果如圖3和表1所示。添加 阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC的遷移速度有明顯促進(jìn)作用。劃線 后，阿膠肽組的HUVEC遷移率均極顯著高于空白對(duì)照組（ ），8 h后，阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC遷移促進(jìn)作用均極顯著（ P lt; 0.01）。人血管內(nèi)皮細(xì)胞在新血管的生成中扮演著重要的角色，它們能夠不斷地增殖、遷移而構(gòu)建出完整的血管網(wǎng)絡(luò)。

近年來(lái)研究表明膠原蛋白和膠原肽在機(jī)體的結(jié)構(gòu)、血管功能和健康狀況中均發(fā)揮著重要的作用[25-26]。該研究也進(jìn)一步證明了阿膠和阿膠肽能夠?qū)ρ軆?nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移起到促進(jìn)作用。

2.4阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC氧化損傷模型細(xì)胞存活率的影響血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷在多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。氧化應(yīng)激是導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂、凋亡壞死的重要原因。該試驗(yàn)建立 誘導(dǎo)的HUVEC氧化損傷模型，研究阿膠和阿膠肽對(duì)氧化損傷HUVEC的作用及其初步機(jī)制。從圖4可以看出，與空白對(duì)照組（Blank）比較， 損傷模型組（Model）細(xì)胞出現(xiàn)明顯的生長(zhǎng)抑制， 時(shí)細(xì)胞存活率達(dá)到 6 2 . 1 2 % ；與模型組相比，添加阿膠（EJ）和阿膠肽（EJP）對(duì)氧化損傷HUVEC 的存活率均有明顯促進(jìn)作用，EJ-L、EJP-L、EJP-H組的存活率均極顯著高于模型組（ 。

2.5阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC氧化損傷模型抗氧化及酶活指標(biāo)的影響從圖5可以看出，與未發(fā)生氧化損傷的空白對(duì)照組（Blank）相比，氧化損傷模型組（Model）細(xì)胞的SOD酶活顯著降低（ ）；與模型組相比，分別添加阿膠（EJ）和阿膠肽（EJP）后，氧化損傷HUVEC的SOD酶活均有不同程度提高，其中EJP-L和EJP-H組HUVEC的SOD 酶活均極顯著提高（ 。對(duì)HUVEC谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ ）酶活影響，與空白對(duì)照組相比， 誘導(dǎo)的氧化損傷模型組HUVEC的 酶活極顯著降低（ P lt; 0.0001）；與模型組相比，僅EJ-H組細(xì)胞的 酶活顯著升高（ 0

LDH作為一種穩(wěn)態(tài)的胞漿酶，可以有效地修復(fù)和保護(hù)細(xì)胞膜，但一旦它被過(guò)度活躍地激活，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)增加，從而導(dǎo)致細(xì)胞的破壞。從EJ和EJP對(duì)氧化損傷HUVEC的LDH酶活的影響（圖5）可以看出，氧化損傷模型組HUVEC的LDH酶活極顯著升高（ ；與模型組相比，EJP-L組LDH酶活顯著降低（ ），EJ-H組和EJP-H組LDH酶活極顯著降低（ 0

MDA是一種脂質(zhì)氧化產(chǎn)物，能夠反映機(jī)體的氧化應(yīng)激水平。從圖5可以看出，與陰性對(duì)照組（Blank）相比，氧化損傷模型組（Model）HUVEC分泌的MDA含量極顯著增加（ P lt; 0.0001），表明在機(jī)體受到氧化應(yīng)激的情況下，MDA的表達(dá)會(huì)有所提高。分別添加EJ和EJP的細(xì)胞MDA含量均低于模型組，EJ-H、EJP-L和EJP-H組細(xì)胞的MDA含量均顯著低于模型組（ ）。

綜上所述，在血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型中，LDH酶活和MDA含量顯著增強(qiáng)，而 和SOD酶活則有所下降。通過(guò)添加EJ、EJP，可以在一定程度上阻止MDA、LDH的過(guò)多釋放，并且增強(qiáng) 、SOD的酶活性，從而有效恢復(fù)HU-VEC的正常功能

注： ；* ；*** ；*** *Plt;0.0001。

Fig.5EffectsofEjiaoandEjiaopeptideonantioxidantandenzymeactivityindexesof HUVECoxidativeinjurymodel

2.6阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC氧化損傷模型VEGF和IL-6的影響VEGF是HUVEC特異性的促生長(zhǎng)因子，能夠有效激活血管網(wǎng)絡(luò)，促使血管壁的形成，并且能夠促進(jìn)血管壁的增殖、遷移、修復(fù)。從阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC氧化損傷模型中VEGF的影響（圖6）可以看出，與空白對(duì)照組（Blank）相比，模型組（Model）的VEGF含量顯著升高（ ；與氧化損傷模型組相比，EJ-L組VEGF含量顯著升高（ ，EJ-H、EJP-L和EJP-H組的VEGF含量均極顯著升高（ P lt; 0.0001）。結(jié)果表明，在HUVEC受到氧化損傷后VEGF表達(dá)量出現(xiàn)應(yīng)激性升高，而添加阿膠和阿膠肽可促使VEGF含量進(jìn)一步增加，且在一定范圍內(nèi)這種促進(jìn)作用呈濃度依賴(lài)性。這表明在細(xì)胞層面，阿膠和阿膠肽具備修復(fù)血管、促進(jìn)血管再生的活性。

氧化損傷會(huì)使得HUVEC炎性因子IL-6濃度極顯著升高（ ），添加阿膠和阿膠肽后，與模型組相比，除EJ-L組外，另外3組的IL-6濃度均顯著降低（

0.0001），可見(jiàn)阿膠和阿膠肽能顯著降低IL-6水平，即EJ-H和EJP對(duì)氧化損傷HUVEC有一定抗炎作用。

2.7阿膠和阿膠肽對(duì)HUVEC氧化損傷模型NO含量的影響一氧化氮（NO）是一種重要的內(nèi)皮激素，它能夠增進(jìn)血液，增強(qiáng)機(jī)體產(chǎn)生的免疫反應(yīng)，并且能夠干擾機(jī)體產(chǎn)生的新陳代謝物，從而干擾機(jī)體產(chǎn)生的健康。從阿膠和阿膠肽對(duì)氧化損傷HUVEC中NO含量的影響（圖7）可以看出，與模型組相比，各EJ和EJP組NO含量均極顯著高于模型組（ P lt; 。HUVEC的NO能夠快速地穿透細(xì)胞膜，并且能夠刺激血管的收縮，改善血液的循環(huán)，從而影響人體的血液狀態(tài)。此外，它還能夠激活血管壁的新陳代謝，刺激血液中的營(yíng)養(yǎng)成分，幫助人體恢復(fù)健康。氧化損傷可以顯著降低HUVEC的NO水平，進(jìn)而影響 比例，從而修復(fù)損傷內(nèi)皮細(xì)胞的正常功能。因此，EJ和EJP可以有效促進(jìn)NO的合成，從而修復(fù)氧化應(yīng)激損傷的HUVEC。

注： ；**** 。

3結(jié)論

阿膠和阿膠肽不僅可以有效促進(jìn)HUVEC的增殖、遷移，還可以抵御抗氧化應(yīng)激引起的HUVEC增殖抑制，減低細(xì)胞損傷或者凋亡。此外，通過(guò)添加阿膠和阿膠肽，可以在一定程度上阻止氧化損傷HUVEC模型中MDA、LDH的過(guò)多釋放，并且阿膠肽能夠顯著提高氧化損傷HUVEC的SOD酶活，阿膠能有效增強(qiáng)氧化損傷HUVEC的 酶活，從而更好地維持機(jī)體的健康狀態(tài)。阿膠和阿膠肽能夠有效促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的NO分泌，并刺激VEGF的產(chǎn)生，減少I(mǎi)L-6含量，促進(jìn)血管新生同時(shí)減少炎性反應(yīng)。因而，阿膠可以在細(xì)胞層面顯著減少HUVEC細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷，其機(jī)制可能與改善細(xì)胞生長(zhǎng)增殖狀態(tài)、提高細(xì)胞抗氧化酶活性、促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)和促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌NO有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

[1]中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告編寫(xiě)組.中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告2019概要[J].心腦血管病防治，2020，20（5）：437-450.

[2]ANY，XUBT，WANSR，etal.Theroleofoxidativestressindiabetesmellitus-induced vascular endothelial dysfunction[J].Cardiovasc Diabetol，2023，22（1） ：1-17.

[3]李苗，王麗麗，常冰梅.血管內(nèi)皮細(xì)胞功能損傷機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志，2019，27（8）：730-736.

[4]PAUL S，ALI A，KATARE R.Molecular complexitiesunderlying the vascu-larcomplicationsof diabetes mellitus-A comprehensive review[J].JDia-betes Complications，2020，34（8） ：107613.

[5]MA S D，XIE X N，YUAN R，et al.Vascular aging and atherosclerosis ：Aperspective on aging[J].Aging Dis，2024，16（1） ：33-48.

[6]田靜，馬英杰，王鵬，等.血管內(nèi)皮功能障礙及其評(píng)估技術(shù)[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2023，33（7） ：130-140.

[7] GREEN I D，LIU R J，WONG JJ L.The expanding role of altermative spli-cing in vascular smooh muscle cell plasticity[J].Int JMol Sci，2021，22（19） ：1-14.

[8］范紅玲，張曼宇.血塞通軟膠囊對(duì)不穩(wěn)定性心絞痛患者血管內(nèi)皮功能及炎性因子的影響[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2023，18（2）：328-332.

[9]HAN JH，PARK H S，LEE D H，et al.Regulation of autophagy by control-ling Erk1/2 and mTOR for platelet-derived growth factor-BB-mediated vas-cular smooth muscle cell phenotype shift[J].Life Sci，2021，267：118978.

[10]劉博文，楊華，吳騰飛，等.血管內(nèi)皮功能障礙與2型糖尿病及中醫(yī)證型相關(guān)性研究進(jìn)展[J].世界臨床藥物，2023，44（4）：379-383.

[11]XUSW，ILYASI，LITTLEPJ，etal.Endothelial dysfunction in athero-sclerotic cardiovascular diseases and beyond：From mechanism to pharma-cotherapies [J].Pharmacol Rev，2021，73（3）：924-967.

[12]劉丹丹，秦合偉，高洋，等.中藥通過(guò)miRNA調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷防治動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥房，2023，34（12）：1524-1528.

[13]LIU T M，SCHROEDER H，POWER G G，et al.A physiologically relevantrole for NO stored in vascular smooth muscle cells：A novel theory of vas-cular NO signaling[J].Redox Biol，2022，53：102327.

[14]MIERKE J，CHRISTOPH M，AUGSTEIN A，et al.Influence of caveolin-1and endothelial nitric oxide synthase on adventitial inflammationin aortictransplants[J].Kardiol Pol，2020，78（2） ：124-130.

[15]楊帥，魯婷婷，周祖英，等.阿膠化學(xué)成分和藥理作用及質(zhì)量控制研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志，2023，32（8）：806-816.

[16] CHENG X R，CHEN Y Y，CAO C C，et al.Ejiao peptide-iron chelates regulate the metabolism of iron deficiency anemia mice and improve the bio-availability of iron[J].Food Biosci，2023，54：102835.

[17] XIAO L，LIAO F，IDE R，et al.Enzyme-digested Colla Corii Asini（E' jiao）prevents hydrogen peroxide-induced cell death and accelerates amyloidbeta clearance in neuronal-like PC12 cells[J].Neural Regen Res，2020，15（12） ：2270-2272.

[18]姜一樸，邸志權(quán)，王延濤，等.小分子阿膠抗疲勞、抗氧化及止血作用研究[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2019，35（2）：203-208.

[19]和嫻嫻，汝文文，鈐莉妍，等.阿膠改善甲襞微循環(huán)應(yīng)用分析[J].中國(guó)藥物評(píng)價(jià)，2016，33（3）：144-146，152.

[20]付英杰，司子林，劉月，等.基于造血活性小肽研究阿膠炮制原理[J].中成藥，2023，45（7） ：2250-2258.

[21]楊瀚毅，寧佳怡，汪小蘭，等.褪黑素抑制 誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激及凋亡標(biāo)志蛋白質(zhì)的表達(dá)[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2024，44（5） ：645-650.

[22]趙佳囡，魏雪晨，叢姝，等.血栓通脈膠囊對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用機(jī)制的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2022，26（7） ：1052-1057.

[23] CARRASCO-WONG I，LANGST G，SOBREVIA L，et al.Nrf2 pre-recruitment at Enhancer 2 is a hallmark of""-induced epigenetic transcriptionalmemoryintheHMOX1geneinhumanumbilicalarteryendothelial cells[J].JCell Physiol，2024，239（11） ：1-13.

[24]DAI ZQ，NIE M M，CHEN Y，et al.Lutein-stevioside nanoparticle attenu ates

[25]LINXY，YANGX，LIPY，etal.Antibacterial conductivecollagen-based hydrogels for accelerated full-thickness wound healing[J].ACS Appl MaterInterfaces，2023，15（19）：22817-22829.

[26]張亞，孫欣，王瑞妍.重組Ⅲ型膠原蛋白在護(hù)膚品和藥械領(lǐng)域的應(yīng)用綜 述[J].上海輕工業(yè)，2024（4）：133-135.