不同激素對(duì)小黑秒組織培養(yǎng)的影響

摘要為建立小黑杪（Gymnosphaera meteniana）組織培養(yǎng)繁殖體系，優(yōu)化其繁殖過(guò)程，通過(guò)小黑杪羅孢子萌發(fā)后的原葉體作為外植體，研究不同生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)配子體增殖、分化及孢子體生根的影響。結(jié)果表明;配子體增殖，在 蔗糖 瓊脂 中增殖效果最好，增殖倍數(shù)為14.84 倍，增殖后鮮重為 ，直徑為 ；配子體分化，在 蔗糖 瓊脂 中分化率最高，分化率為 8 5 . 9 3 % ;孢子體生根，在 蔗糖 瓊脂 中生根率最高，生根率達(dá) 7 7 . 7 8 % ，平均生根數(shù)為1.42根。

關(guān)鍵詞原葉體；配子體；孢子體；小黑杪中圖分類號(hào)Q813.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 0517-6611（2025）08-0100-05doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.08.021

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

AbstractTopeliiiltablishisueulurepropagtionsstemforGymoserameeianandoiizeitseprdutioproe prothallderdfrospegeaoeedaseantstdtsoffeusdsoholfaddferentiatinofmetssellasigofspropts.eulsevealedatfoametopteproliferatiotstsultwas tained in 1/2 MS medium with kinetin（KT）， sucrose，and agar，with a proliferation multiplier of 14.84 times.The fresh weight after proliferation was ，and the diameter was The highest diferentiation rate of the gametophyte was achieved in 1/2 MS medium with KT， sucrose，and agar，with adifferentiationrate of 8 5 . 9 3 % .The best rooting of sporophytes occurred in 1/2 MS medium with indole-3-butyric acid（IBA）， sucrose，and agar，with the highest rooting rate of 7 7 . 7 8 % and an average of 1.42 roots per sporophyte.

Key words Prothallus；Gametophyte；Sporophyte；Gymnosphaera metteniana

小黑杪（Gymnosphaerametteniana）屬杪科（Cya-theaceae）黑杪屬（Gymnosphaera），國(guó)內(nèi)主要分布在貴州、云南、四川、重慶、廣東等地[1]。相對(duì)于杪（Alsophila spinulosa）而言，小黑杪植株矮小且孢子囊群位于小脈中部[2]小黑杪羅富含多糖、有機(jī)酸、黃酮等活性物質(zhì)，并具有一定觀賞價(jià)值[3-6]。杪科各物種自然雜交現(xiàn)象十分普遍，雜交種已占總數(shù)的 5 0 % 以上，其中，小黑杪是粗齒杪（Alsophiladenticulata）和大葉黑杪（Alsophilagigantea）的雜交種[7]。小黑杪稷存在一個(gè)變種光葉小黑杪，與小黑杪稷具有相同的生境，二者的區(qū)別在于光葉小黑秘稷小羽片背面和腹面均光滑，且無(wú)針狀長(zhǎng)毛[8]。野外自然環(huán)境中，小黑杪和其他蕨類植物一樣，借助水的作用，通過(guò)孢子實(shí)現(xiàn)繁殖。但伴隨著亂砍濫伐和建造房屋等人為因素，小黑杪在野外適宜的生存環(huán)境不斷縮小。其生長(zhǎng)條件苛刻，自然條件下小黑秒孢子繁殖周期長(zhǎng)，生長(zhǎng)緩慢且存活率不高。有研究發(fā)現(xiàn)，小黑杪孢子的萌發(fā)受多種環(huán)境因素影響，包括光質(zhì) 、光照強(qiáng)度和溫度等。其中，光照強(qiáng)度維持在 時(shí)，對(duì)孢子的萌發(fā)效果最佳。此外，藍(lán)光環(huán)境下孢子的萌發(fā)率最低，藍(lán)光對(duì)孢子的萌發(fā)還存在顯著的抑制作用[9]。小黑杪孢子萌發(fā)和配子體發(fā)育也受到無(wú)機(jī)鹽濃度影響，低濃度下孢子萌發(fā)時(shí)間短且萌發(fā)率高，而較高的無(wú)機(jī)鹽濃度可促進(jìn)配子體的發(fā)育[10]。近年來(lái)，在赤水杪國(guó)家級(jí)保護(hù)區(qū)內(nèi)，發(fā)現(xiàn)小黑杪葉片易被綠帶妒尺蛾（Phthonolbaviridifasciata）和杪葉蜂（Rhoptroceroscyatheae）幼蟲取食，影響小黑杪正常生長(zhǎng)發(fā)育與繁殖[]。通過(guò)探究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)配子體增殖、分化、孢子體生根等過(guò)程的影響，可實(shí)現(xiàn)蕨類植物的高效繁殖體系。如王宏航等[1]以12種觀賞蕨類作為材料，發(fā)現(xiàn)在針對(duì)蕨類植物配子體增殖方面，MS培養(yǎng)基添加 和 NAA具有顯著的促進(jìn)作用；而對(duì)于蕨類植物孢子體的生根， 1 / 2 MS培養(yǎng)基搭配 IBA效果最佳。王曉倩[13]在對(duì)闊鱗鱗毛蕨（Dryopterischampio-nii）的研究中，將孢子通過(guò) 赤霉素處理后，蕨類植物在含有 蔗糖和 瓊脂的培養(yǎng)基中，孢子的萌發(fā)率超過(guò) 6 0 % 。此外，原葉體在相同培養(yǎng)基條件下具有最大的增殖系數(shù)。而在含有 蔗糖和 瓊脂的培養(yǎng)基中，原葉體的誘導(dǎo)效果最佳，且孢子體在不同生根培養(yǎng)基中均能生根。

蕨類植物組織具有多樣化培養(yǎng)途徑，可以劃分為2種，即孢子作為外植體和孢子體作為外植體2個(gè)途徑。孢子作為外植體主要通過(guò)不同激素促進(jìn)孢子萌發(fā)和原葉體生長(zhǎng)，進(jìn)而形成孢子體，最終形成完整植株。孢子體途徑又可以分為3種：一是孢子體形成愈傷組織，再分化形成植株；二是外植體直接形成芽；三是綠色小體（greenglobularbody，GGB）途徑，通過(guò)形成原葉體球狀體，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)、分化等步驟形成孢子體[14]。孢子可作為外植體，但有的蕨類孢子存在休眠現(xiàn)象，需要打破休眠孢子才能正常萌發(fā)。有研究表明，杪楞孢子成熟后一定概率陷入休眠現(xiàn)象，通過(guò)赤霉素處理后可打破休眠，且生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素也有利于孢子萌發(fā)[15]。不同蕨類植物可采取不同的組織培養(yǎng)途徑，如張冬瑞等[6]對(duì)香鱗毛蕨（Dryopterisfragrans）的研究，通過(guò)孢子體形成愈傷組織途徑，發(fā)現(xiàn) 為最佳愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基。葉秀仙[17]以鹿角蕨（Platyceriumwal-lichii）孢子作為外植體，誘導(dǎo)形成GGB，探究6-BA、KT、NAA和IBA對(duì)GGB增殖等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的影響，并建立了鹿角蕨快繁體系。李慧[18]通過(guò)革葉蕨（Rumohraadiantiformis）莖段直接誘導(dǎo)形成不定芽，建立革葉蕨的離體培養(yǎng)和快速繁殖體系。筆者探究不同種類激素及濃度對(duì)小黑杪組織培養(yǎng)過(guò)程的影響，包括不同濃度的IBA、IAA、KT等激素對(duì)小黑杪楞配子體增殖、分化、孢子體生根過(guò)程的影響。通過(guò)對(duì)鮮重、分化率和生根率等指標(biāo)的分析，構(gòu)建最適條件的繁殖體系，進(jìn)而為小黑杪繁殖、育種提供技術(shù)支撐，為建立小黑杪的繁殖體系并對(duì)其種質(zhì)保存、物種開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1原葉體獲得小黑秒楞孢子于2021年9月采自位于貴州赤水杪國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)，將成熟孢子葉放于干凈塑料袋中，干燥環(huán)境下放置一段時(shí)間后輕輕振蕩，孢子脫落，收集于 冰箱中備用。試驗(yàn)前取一定量小黑杪孢子，放于離心管中浸泡 ，離心后去除上清液。之后用 7 5 % 乙醇充分振蕩，無(wú)菌水洗4次；加入 5 % NaCIO溶液充分振蕩，無(wú)菌水沖洗6次，制成無(wú)菌孢子懸浮液。將無(wú)菌孢子接種至 蔗糖 瓊脂 培養(yǎng)基中進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為溫度 ，光照強(qiáng)度 ，光照時(shí)間 （下同） 后獲得小黑杪原葉體。

1.2配子體增殖將小黑杪楞原葉體切割成鮮重約為 的 方塊，接種到1/2MS培養(yǎng)基中，分別添加 ） ），TDZ（ ），IAA（ ，IBA（0.3、0.5、 ），NAA ，蔗糖 ，瓊脂 。每瓶接種3個(gè)原葉體，18組各接種15瓶，重復(fù)3次，培養(yǎng) 后，統(tǒng)計(jì)原葉體的鮮重、增殖倍數(shù)和直徑。

1.3配子體分化把增殖成功且生長(zhǎng)狀態(tài)良好的原葉體切割成直徑約 的小球，接種于 培養(yǎng)基，分別加入 ） ，IAA（0.3、 ）， ，蔗糖 ，瓊脂 。將噴壺消毒后每隔10d在配子體表面噴施適量無(wú)菌水。每瓶接種一定數(shù)量的原葉體，每組接種3瓶，重復(fù)3次。培養(yǎng) 后統(tǒng)計(jì)配子體分化率。

1.4孢子體生根將分化成功且生長(zhǎng)狀態(tài)良好的孢子體接種在1/2MS培養(yǎng)基中，分別加入IAA（ 和 ，添加蔗糖 瓊脂 5.8。每瓶接種12個(gè)，每組接種3瓶，重復(fù)3次，培養(yǎng)30d后統(tǒng)計(jì)生根率和生根數(shù)。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析所有初始數(shù)據(jù)均使用Excel統(tǒng)計(jì)，采用SPSS26.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。分化率和生根率等數(shù)據(jù)均以平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)誤差表示，利用單因素ANOVA檢驗(yàn)進(jìn)行方差分析，顯著性水平 。

增殖倍數(shù) 增殖后原葉體鮮重/0.102式中，0.102為原葉體初始鮮重。

配子體分化率 配子體分化個(gè)數(shù)/接種總數(shù) × 1 0 0 % 孢子體生根率 孢子體生根個(gè)數(shù)/接種的孢子體總數(shù) × 100 %

平均生根數(shù) 孢子體生根總數(shù)/孢子體總數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1不同激素對(duì)小黑杪楞配子體增殖的影響 將小黑杪原葉體接種到 處理中（表1），原葉體鮮重、增殖倍數(shù)、直徑有顯著差異（ （表2）。隨著KT濃度上升，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直徑呈下降趨勢(shì)，說(shuō)明較低濃度的KT對(duì)小黑杪羅原葉體增殖起促進(jìn)作用。隨著6-BA濃度上升，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直徑呈上升趨勢(shì)，說(shuō)明較高濃度的 BA對(duì)小黑杪原葉體增殖起促進(jìn)作用。當(dāng)TDZ濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直徑分別為 、13.33倍2 . 0 9c m ，當(dāng)TDZ濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直徑均下降，分別為 倍、 ；當(dāng) TDZ濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直徑均上升，分別為 倍 ，反而均增大?？傮w來(lái)說(shuō)，當(dāng)培養(yǎng)基中加人低濃度TDZ時(shí)，小黑秒原葉體長(zhǎng)勢(shì)優(yōu)于高濃度TDZ，說(shuō)明較低濃度TDZ對(duì)小黑秒原葉體增殖更有利。KT、6-BA和TDZ均為細(xì)胞分裂素類物質(zhì)，但同等濃度下加入KT的培養(yǎng)基，小黑秒配子體鮮重、直徑和增殖倍數(shù)均高于6-BA和TDZ組，說(shuō)明KT更有利小黑秒楞原葉體增殖，

當(dāng)IBA濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直 徑分別為 倍" 2 . 2 5 c m ；當(dāng)IBA濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直徑均下降，分別為 倍 ；當(dāng)IBA濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍 數(shù)和直徑均上升，分別為 倍 2 . 2 9" c m" 。當(dāng)IBA濃 度為 和 時(shí)，小黑杪原葉體長(zhǎng)勢(shì)相差不 大。當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直 徑分別為 倍、 ；當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增殖倍數(shù)和直徑整體上升，分別為 9.94倍 ；當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，原葉體鮮重、增 殖倍數(shù)和直徑均下降，分別為 倍、 ?？梢?jiàn)， 當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，更有利于原葉體增殖。隨著 NAA濃度從 上升到 ，小黑杪原葉體鮮 重、增殖倍數(shù)和直徑呈下降趨勢(shì)，說(shuō)明低濃度NAA更有利于 原葉體增殖。綜合來(lái)看，培養(yǎng)基為 T時(shí)， 最有利于原葉體增殖（表2）。

2.2不同激素對(duì)小黑杪配子體分化的影響將生長(zhǎng)狀態(tài)良好的原葉體接種至 分化培養(yǎng)基上，分化率存在顯著差異（ ）。隨著KT濃度的升高，配子體分化率表現(xiàn)出先降后升的趨勢(shì)。當(dāng)KT濃度小于 時(shí)，配子體分化率隨KT濃度升高而降低；而當(dāng)KT濃度大于 時(shí)，配子體分化率則隨著KT濃度的升高而升高，即當(dāng)KT濃度為 ，分化率最高，達(dá) 8 5 . 9 3 % 。但隨著TDZ 濃度上升時(shí)，配子體分化率逐漸下降，且當(dāng)TDZ濃度為0.3、0.5和0.7mg/L時(shí)，分化率均低于KT3個(gè)濃度下的最小值 5 4 . 0 6 % 。隨著IBA濃度升高，配子體分化率先降后升，當(dāng)IBA濃度為 ，分化率最低，為 6 0 . 0 0 % ；當(dāng)IBA濃度為 時(shí)，分化率最高，達(dá) 6 3 . 8 9 % 。當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，配子體分化率為 5 6 . 8 5 % ；當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，配子體分化率升高至 6 0 . 0 4 % ；然而當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，配子體分化率降低到 5 0 . 0 3 % 。綜上所述，配子體在 處理培養(yǎng)基中，即選取 作為配子體分化的最佳培養(yǎng)基，并且 處理與其他處理（除 處理）間存在顯著差異0 （表3）。0.3和 KT配子體增殖和分化情況如圖1、2所示。

2.3不同激素對(duì)小黑杪楞孢子體生根的影響將長(zhǎng)勢(shì)良好的孢子體接種于 生根培養(yǎng)基中，隨著IBA濃度升高，生根率先上升后下降，且各處理生根率間不具有顯著差異（ 。IBA濃度為 時(shí)，孢子體生根率達(dá)到最高水平，為 7 7 . 7 8 % ；隨著IAA濃度上升，生根率逐漸降低，當(dāng)IAA濃度為 時(shí)，生根率達(dá)到最大值，為 6 6 . 6 7 % ，顯示出較低濃度的IAA更有利于孢子體的生根（表4）。隨著IAA濃度升高，平均生根數(shù)先上升后下降， 濃度時(shí)達(dá)到最高值（0.89）。隨著IBA濃度升高，平均生根數(shù)也呈先上升后下降趨勢(shì)。在相同濃度下，IBA處理的平均生根數(shù)始終高于IAA處理（表4）。綜上所述，小黑杪楞孢子體生根的最適培養(yǎng)基為 。 IBA下孢子體生根情況見(jiàn)圖3。

3討論

該研究探究不同濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素對(duì)小黑秒稷組織培養(yǎng)的影響，以小黑秒稷原葉體作為外植體，優(yōu)化配子體增殖、配子體分化、孢子體生根3個(gè)階段，以提高原葉體增殖倍數(shù)、配子體分化率和孢子體生根率，建立小黑杪楞快速繁殖體系。研究揭示，在蕨類植物的繁殖和生長(zhǎng)階段，包括原葉體的增殖、配子體形態(tài)的演變以及孢子體扎根等過(guò)程會(huì)受到多種外部環(huán)境因素的影響。這些因素涵蓋了溫度、濕度水平、照明強(qiáng)度與日照時(shí)長(zhǎng)、所選用的培養(yǎng)基類型、無(wú)機(jī)鹽的濃度比例、各類糖分及其濃度、植物生長(zhǎng)素的品類與濃度以及環(huán)境的 等[19-20]。蕨類植物的組織培養(yǎng)中，植物生長(zhǎng)激素發(fā)揮著關(guān)鍵作用，對(duì)生長(zhǎng)和發(fā)育起著重要作用。細(xì)胞分裂素6-BA和KT是其中重要的植物生長(zhǎng)激素。KT能夠促進(jìn)芽的分化，而6-BA則有利于綠色小體GGB的形成。有關(guān)二歧鹿角蕨（Platyceriumbifurcatum）的研究表明，在

圖1 KT下配子體增殖情況

或者 培養(yǎng)基中，綠色小體GGB的誘導(dǎo)率達(dá)到 9 0 % 。未添加6-BA的培養(yǎng)基中，綠色小體GGB的產(chǎn)量減少且體積較小[21]。在莢果蕨（Mat-teucciastruthiopteris）的組織培養(yǎng)中，莢果蕨根狀莖作為外植體，KT濃度為 時(shí)，能夠?qū)崿F(xiàn)莢果蕨芽的最佳增殖效果[22]。不同激素對(duì)蕨類組織培養(yǎng)有著不同的作用，往往不同的激素配比在不同階段也會(huì)發(fā)揮不同的功效。王輝等[19]研究表明，最適合杪配子體增殖的培養(yǎng)基為 NAA 蔗糖 配子體增殖率為 2 0 . 3 1 % ；最適合配子體分化的培養(yǎng)基為 NAA 蔗糖 。對(duì)過(guò)山蕨的研究中發(fā)現(xiàn)，雖然對(duì)過(guò)山蕨GGB的誘導(dǎo)和增殖均使用BA、NAA和活性炭（activatedcarbon，AC），但由于濃度不同， 是誘導(dǎo)形成GGB的最佳培養(yǎng)基，而1/2MS NAA 0.1g/L+AC 0.3g/L是最佳的GGB 增殖培養(yǎng)基[23] 。

生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素均能刺激細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂。韓汶雨等[24]在對(duì)東北對(duì)開蕨（Phyllitis japonica）組織培養(yǎng)的研究中發(fā)現(xiàn)KT和6-BA對(duì)原葉體增殖具有促進(jìn)作用，且伴隨著KT濃度上升，增殖倍數(shù)逐漸下降；隨著6-BA濃度上升，增殖倍數(shù)逐漸下降，且相同濃度下，加入KT的培養(yǎng)基比加入6-BA的培養(yǎng)基增殖倍數(shù)高，都說(shuō)明低濃度的KT更有利于蕨類植物原葉體增殖，這與該試驗(yàn)研究結(jié)果一致。張薇等[25]研究報(bào)道了細(xì)胞分裂素 和生長(zhǎng)素NAA對(duì)瘤蕨（Microsorumscolopendria）原葉體增殖有促進(jìn)作用，且發(fā)現(xiàn)最適合瘤蕨原葉體增殖的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為 KT，與該試驗(yàn)不同之處在于隨著KT濃度上升，原葉體增殖倍數(shù)先上升后下降，這可能是由于不同蕨類植物對(duì)不同濃度、不同激素的適應(yīng)性存在一定差別。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，6-BA和

TDZ雖然能誘導(dǎo)配子體增殖，但是誘導(dǎo)時(shí)間長(zhǎng)，原葉體有絨毛，且顏色呈現(xiàn)黃綠色。然而，當(dāng)激素為 ，不僅誘導(dǎo)時(shí)間短，長(zhǎng)勢(shì)良好，且原葉體顏色呈碧綠色，這與顧德峰等[26]對(duì)東亞對(duì)開蕨原葉體發(fā)育的研究結(jié)論相似，在KT濃度為 時(shí)，最有利于促進(jìn)原葉體增殖。

小黑杪稷配子體分化最關(guān)鍵的步驟是精子器和頸卵器的形成，只有這2個(gè)結(jié)構(gòu)的成熟才能產(chǎn)生精子和卵細(xì)胞，最后通過(guò)受精作用形成孢子體，進(jìn)而完成世代交替，開啟新一輪的生命周期。相關(guān)研究已證實(shí)，無(wú)機(jī)鹽離子、赤霉素和光質(zhì)等因素對(duì)配子體分化有影響，這些因素在蕨類植物的生長(zhǎng)和發(fā)育中起重要作用，在組織培養(yǎng)中能夠調(diào)節(jié)配子體的發(fā)育。戴雙[27]研究表明，鈣離子和赤霉素會(huì)影響荷葉鐵線蕨（Adiantumreniforme）頸卵器的形成，當(dāng)鈣離子濃度為0.2mg/L時(shí)，最有利于頸卵器的形成，且對(duì)分生區(qū)的形成具有促進(jìn)作用；赤霉素對(duì)國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物金毛狗蕨（Cibotiumbarometz）精子器的形成具有明顯的促進(jìn)作用，但對(duì)頸卵器的形成具有明顯的抑制作用[28]。筆者研究發(fā)現(xiàn)，KT是影響小黑杪稷配子體分化的因素之一，當(dāng)KT濃度為 時(shí)，配子體分化率明顯高于IAA、IBA組，這與朗月婷等[29對(duì)陰生杪（ A l -sophilalatebrosa）的研究存在一定區(qū)別。當(dāng)KT濃度低于 時(shí)，二者配子體分化率均隨著KT濃度的上升逐漸下降，但當(dāng)KT濃度大于 時(shí)，小黑秒配子體分化率隨著KT濃度上升而增加，而陰生杪相反，說(shuō)明杪稷屬配子體分化對(duì)激素具有一定的種間差異性。TDZ和KT、IBA、IAA對(duì)比之下，各濃度分化率均偏低，試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)TDZ誘導(dǎo)分化時(shí)，會(huì)出現(xiàn)配子體莖葉分化少、葉片發(fā)黃、孢子體矮小等現(xiàn)象，但KT組各濃度下的長(zhǎng)勢(shì)均處于良好狀態(tài)。

蕨類孢子體分化階段，誘導(dǎo)生根是重要操作之一，IBA和IAA都是常見(jiàn)的生根誘導(dǎo)激素。付偉等[30]研究發(fā)現(xiàn)，IBA對(duì)河北峨眉蕨（Lunathyriumvegetius）孢子體生根起促進(jìn)作用，孫曉丹[31]報(bào)道了生長(zhǎng)素IBA對(duì)桂皮紫萁（Osmundacin-namomeavar.asiatica）孢子體的生根具有促進(jìn)作用，同時(shí)孢子體根數(shù)多，長(zhǎng)勢(shì)好。這與該試驗(yàn)一致，當(dāng)IBA濃度為 ，孢子體生根率最高。陳習(xí)等[32]研究發(fā)現(xiàn)，IAA對(duì)狹葉金星蕨（Parathelypterisangusti-frons）孢子體生根起促進(jìn)作用，生根率為 100 % ，且當(dāng)IAA濃度低于 時(shí)，根數(shù)、冠幅、株高和根直徑均隨著濃度的升高而上升。筆者研究表明，IAA和IBA對(duì)小黑杪孢子體生根并不具備顯著差異，說(shuō)明2種生長(zhǎng)素均可作為小黑秒孢子體生根的誘導(dǎo)激素，但陳習(xí)等[32]卻發(fā)現(xiàn)IAA和IBA對(duì)狹葉金星蕨孢子體的生根具有顯著差異。這可能是由于小黑杪對(duì)于不同種類的生長(zhǎng)素敏感度不如狹葉金星蕨。

4結(jié)論

該研究建立了小黑杪的組織培養(yǎng)繁殖體系：小黑杪原葉體在 培養(yǎng)基中生長(zhǎng)效果最佳；1/2 是促進(jìn)小黑秘稷配子體分化的最適培養(yǎng)基；小黑杪孢子體在 培養(yǎng)基中誘導(dǎo)孢子體生根效果最佳。

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