強(qiáng)脈沖光聯(lián)合重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子對兔激素依賴性皮炎動(dòng)物模型的作用機(jī)制研究

[摘要]目的：觀察兔激素依賴性皮炎動(dòng)物模型應(yīng)用強(qiáng)脈沖光（IPL）聯(lián)合重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠（rb-bFGF）治療前后膠原纖維及基質(zhì)金屬蛋白酶1（MMP1）的變化。方法：應(yīng)用丙酸氯倍他索建立家兔糖皮質(zhì)激素依賴性皮炎動(dòng)物模型，每只兔背部隨機(jī)分為四組（即四個(gè)象限）：A組為對照組（無處理）；B組外涂rb-bFGF凝膠治療；C組IPL照射一次；D組兩者聯(lián)合應(yīng)用。IPL照射一次結(jié)束后分別取不同時(shí)期各組皮膚組織觀察膠原纖維及MMP1表達(dá)量的變化。結(jié)果：家兔模型與正常家兔膠原纖維量減少及MMP1表達(dá)量的增加有差異。治療后各組與對照組進(jìn)行比較，rb-bFGF凝膠組膠原纖維及MMP1表達(dá)量均無明顯差異，IPL照射組及聯(lián)合治療組膠原纖維含量增加及MMP1表達(dá)量減少有差異。結(jié)論：IPL及IPL聯(lián)合rb-bFGF凝膠治療方法均可調(diào)節(jié)MMP1的分泌，促使膠原纖維再生，但以rb-bFGF凝膠聯(lián)合IPL治療最為顯著，能更有效促進(jìn)皮膚屏障的修復(fù)。

[關(guān)鍵詞]激素依賴性皮炎；強(qiáng)脈沖光；重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠；膠原纖維；基質(zhì)金屬蛋白酶

[中圖分類號]R758.22" " [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A" " [文章編號]1008-6455（2025）04-0006-04

Mechanism Study on Intense Pulsed Light Combined with Recombinant Bovine Basic Fibroblast Growth Factor on Rabbit Model of Hormone-dependent Dermatitis

CHEN Xi1， ZHU Rui1， YANG Wenjia2， CHEN Hongduo2， XU Tianhua1

（ 1.Medical Cosmetic Center， Shenzhen Nanshan People’s Hospital amp; The Sixth Affiliated Hospital of Shenzhen University， Shenzhen 518052， Guangdong， China; 2.Department of Dermatology， the First Affiliated Hospital of China Medical University， Shenyang 110001， Liaoning， China ）

Abstract： Objective" To observe the changes of collagen fiber and MMP1 in rabbit model of corticosteroid-dependence dermatitis before and after treatment with IPL and rb-bFGF gel. Methods" The rabbit model of glucocorticoid-dependent dermatitis was established by clobetasol propionate. The back of each rabbit was randomly divided into four groups （four quadrants） ： Group A was the control group （no treatment）， Group B was treated with rb-bFGF gel. Group C was irradiated with IPL once， Group D combined application of both. The changes of collagen fiber and MMP1 expression in skin tissues of each group were observed at different periods after IPL irradiation. Results" There were differences between the model rabbits and the normal rabbits in the decrease of collagen fiber and the increase of MMP1 expression. After treatment， in contrast with the control group， the expression of collagen fibers and MMP1 in the rb-bFGF gel group showed no significant difference， the content of collagen fiber increased and the expression of MMP1 decreased significantly between the IPL irradiation group and the combined treatment group." Conclusion" These results indicate that both IPL and IPL combined with rb-bFGF can be regulated the secretion of MMP1 and promote the regeneration of collagen fiber， and rb-bFGF combined with IPL is the most efffective treatment， which can promote the repair of skin barrier more efficiently.

Key words： corticosteroid-dependence dermatitis; intense pulsed light; recombinant bovine basic fibroblast growth factor gel; collagenous fiber; matrix metalloproteinase

激素依賴性皮炎因長期不正當(dāng)應(yīng)用激素引起，目前國際上尚未統(tǒng)一其命名。國內(nèi)許多學(xué)者將其單獨(dú)命名[1]，國外學(xué)者將其命名為激素導(dǎo)致的玫瑰痤瘡樣皮炎（Corticosteroid-induced rosacea-alike dermatitis，CIRD）[2]，或類固醇性玫瑰痤瘡、酒渣鼻（Steroid-rosacea）等[3-4]。其臨床表現(xiàn)主要有紅斑、丘疹、對外界刺激敏感、皮膚萎縮等，表現(xiàn)具多樣化。目前對該病的治療有多種方案，包括藥物治療[5]、物理療法[6]等。強(qiáng)脈沖光（IPL）、重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子（rb-bFGF）已經(jīng)比較廣泛的應(yīng)用于激素依賴性皮炎的臨床治療中。本實(shí)驗(yàn)通過建立兔激素依賴性皮炎模型，經(jīng)IPL照射、rb-bFGF凝膠外用及兩者聯(lián)合治療，觀察治療前后膠原纖維及MMP1的變化，為IPL及rb-bFGF凝膠在臨床中治療激素依賴性皮炎提供理論依據(jù)。

1" 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料：12只成年健康雄性新西蘭大白兔（沈陽寶利恒生物技術(shù)有限公司），0.02%丙酸氯倍他索乳膏（廣東華潤順峰藥業(yè)有限公司），重組牛堿性成纖維細(xì)生長因子凝膠5克/支（珠海億勝生物制藥有限公司，中國）。本實(shí)驗(yàn)通過中國醫(yī)科大學(xué)倫理委員會(huì)審批。

1.2 方法：應(yīng)用丙酸氯倍他索建立家兔糖皮質(zhì)激素依賴性皮炎動(dòng)物模型，12只白兔每只背部用動(dòng)物剃毛器機(jī)械剃毛5 cm×8 cm大小范圍，充分暴露其皮膚，暴露部位皮膚每日1次外涂1/2指尖單位0.02%丙酸氯倍他索乳膏（恩膚霜）連續(xù)80 d，于兔背毛再次生長后繼續(xù)機(jī)械剃毛至不再生長。造模開始每5 d應(yīng)用數(shù)碼相機(jī)拍照，觀察造模皮膚外觀變化至造模成功；模型建成后將每只兔背部分為四個(gè)象限，隨機(jī)分為A、B、C、D四組：A組為對照組（無處理）；B組外涂rh-bFGF凝膠治療，2次/天（早、晚各一次），每次1/2指尖單位；C組IPL照射一次（波長590 nm，脈寬4 ms，延遲40 ms，3個(gè)子脈沖，能量密度16 J/cm2）；D組兩者聯(lián)合應(yīng)用。IPL照射一次結(jié)束后分別取第6小時(shí)、第24小時(shí)、第72小時(shí)、第7天、第14天、第21天各組皮膚組織，并觀察膠原纖維及MMP1表達(dá)量的變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：本研究采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用（xˉ±s）進(jìn)行描述，方差分析進(jìn)行比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2" 結(jié)果

2.1 各組膠原纖維表達(dá)結(jié)果：結(jié)果顯示，經(jīng)rb-bFGF凝膠治療組與對照組膠原纖維表達(dá)量無明顯差異；IPL照射組較對照組膠原纖維量增多較明顯；IPL聯(lián)合rb-bFGF凝膠治療組較對照組膠原纖維量增加最為顯著（見圖1～2）。

2.2 激素依賴性皮炎動(dòng)物模型治療后各組MMP1表達(dá)量結(jié)果觀察：經(jīng)Western-Blot檢測MMP1表達(dá)量。模型皮膚中MMP1表達(dá)量較正常皮膚中表達(dá)量顯著增加。治療后，第21天經(jīng)rb-bFGF凝膠治療組與對照組比較MMP1表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；經(jīng)IPL照射組與對照組比較MMP1表達(dá)量減少較明顯，于第1、2周內(nèi)下降明顯，第3周下降趨勢減緩；IPL聯(lián)合rb-bFGF治療組與對照組比較MMP1減少顯著，呈遞減趨勢（見圖3～6）。

3" 討論

激素依賴性皮炎，主要是由于濫用激素或含有激素的護(hù)膚品引起皮膚干燥、脫屑、瘙癢、對外界刺激敏感，片狀紅斑、皮膚萎縮等臨床癥狀[7-8]，該病發(fā)病機(jī)制尚未明確，但國內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為皮膚屏障功能損傷可能為主要發(fā)病機(jī)制[9]。

以往有學(xué)者應(yīng)用香豬，豚鼠、小鼠等動(dòng)物制作該疾病模型，考慮用于實(shí)驗(yàn)的體表面積、經(jīng)濟(jì)效益及操作便利等原因，本實(shí)驗(yàn)選擇經(jīng)濟(jì)、易操作的新西蘭白兔為實(shí)驗(yàn)對象，因其體表面積適宜，易于觀察處理前后不同時(shí)間點(diǎn)皮膚變化，是研究激素依賴性皮炎理想動(dòng)物模型[10]，且該動(dòng)物模型在先前實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成功制作[11]。

激素依賴性皮炎外用藥物治療有激素替代藥他克莫司、吡美莫司乳膏等[12-13]、系統(tǒng)用藥包括抗炎、抗過敏藥、中藥治療等[14]，目前效果有限，且有一定副作用。近些年隨著激光技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步，有許多國內(nèi)外臨床醫(yī)生應(yīng)用IPL治療激素依賴性皮炎取得較好的療效[15]。有學(xué)者研究表明IPL對適當(dāng)能量照射可抑制皮膚中MMP1的分泌[16]，MMP1主要裂解真皮膠原蛋白中Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白。在正常皮膚中MMP1的表達(dá)量很少，在一定的外界平衡的破壞或某些病理情況，MMP1表達(dá)量會(huì)顯著增加[17]，加速對膠原纖維的分解、破壞。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在激素依賴性皮炎模型的真皮中MMP1的表達(dá)量較正常皮膚中顯著增多，而膠原纖維量也較正常皮膚顯著下降。通過IPL照射減少M(fèi)MP1分泌，可促進(jìn)膠原蛋白再生。另外，經(jīng)IPL照射后，IPL通過波長較長部分作用于真皮中，通過光熱效應(yīng)刺激真皮中成纖維細(xì)胞及基質(zhì)，促進(jìn)膠原纖維的合成、修復(fù)。IPL可能通過上述兩種途徑修復(fù)受損的皮膚屏障，對激素依賴性皮炎起到治療作用。單一應(yīng)用IPL治療雖有一定的臨床療效，本實(shí)驗(yàn)觀察到經(jīng)IPL照射后MMP1表達(dá)量下降于2周內(nèi)較為明顯，于第3周開始MMP1減少的趨勢出現(xiàn)衰減，所以一般于第3～4周再次照射比較理想。

bFGF在傷口愈合中起關(guān)鍵作用，bFGF可作用于真皮中的基質(zhì)，促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖，而膠原纖維是創(chuàng)面愈合中的主要成分，bFGF經(jīng)常被應(yīng)用于創(chuàng)傷愈合治療中[18-19]，也有國內(nèi)外一些學(xué)者將bFGF應(yīng)用燒、燙傷治療中，取得良好效果[20]。近些年有許多臨床醫(yī)生及學(xué)者將bFGF應(yīng)用于激素依賴性皮炎的治療，以及敏感性皮膚[21]、各種物理治療損傷后的輔助治療中[22]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示應(yīng)用rb-bFGF凝膠治療后膠原纖維及MMP1表達(dá)量與對照組無明顯差異，也說明rb-bFGF外涂在皮膚中滲透作用有限，單獨(dú)應(yīng)用治療效果有限。

聯(lián)合治療是皮膚科中一種合理且較徹底的治療方案[23]，中國學(xué)者祝霞應(yīng)用IPL聯(lián)合rh-EGF凝膠治療激素依賴性皮炎取得較好的臨床療效[24]，馮琴等學(xué)者將IPL聯(lián)合rb-bFGF治療面部毛細(xì)血管擴(kuò)張，臨床效果很理想[25]。rhEGF及rb-bFGF都具有修復(fù)皮膚屏障的功能但rb-bFGF能促進(jìn)真皮中膠原的再生，對皮膚屏障的修復(fù)具有更強(qiáng)的作用。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)IPL聯(lián)合rb-bFGF凝膠對皮膚中MMP1抑制作用及對真皮中膠原纖維再生促進(jìn)效果最為顯著，通過抑制MMP1的表達(dá)，可以抑制對膠原的破壞，利于膠原纖維再生修復(fù)。通過真皮中膠原纖維再生修復(fù)，還可以加速表皮的修復(fù)，減少經(jīng)皮膚的水分流失，進(jìn)一步促進(jìn)皮膚屏障的修復(fù)，減少炎性細(xì)胞的侵襲，抑制有害菌群的入侵，從而使激素依賴性皮炎得到有效的改善。另外對于臨床患者，經(jīng)IPL照射后要有3～4周時(shí)間間隔進(jìn)行下一次的治療，在此期間給予外用rb-bFGF凝膠不僅在治療效果上得以加強(qiáng)，還可以緩解期間患者病部的不適、內(nèi)心的焦慮。

本實(shí)驗(yàn)為IPL、rb-bFGF凝膠對激素依賴性皮炎的治療提供了理論依據(jù)，但由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間有限，未能繼續(xù)探討更多因子的作用機(jī)制，希望以后能進(jìn)行更完善的研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]趙辨.芻議“激素依賴性皮炎”[J].臨床皮膚科雜志，2013，42（11）："708-709.

[2]Rosso J Q. Management of papulopustular rosacea and perioral dermatitis with emphasis on iatrogenic causation or exacerbation of inflammatory facial dermatoses： use of doxycycline-modified release 40mg capsule once daily in combination with properly selected skin care as an effective therapeutic approach[J]. J Clin Aesthet Dermatol， 2011，4（8）：20-30.

[3]Hameed A F. Steroid dermatitis resembling rosacea： a clinical evaluation of 75 patients[J]. ISRN Dermatol， 2013，2013：491376.

[4]Chen A Y， Zirwas M J. Steroid-induced rosacealike dermatitis： case report and review of the literature[J]. Cutis， 2009，83（4）：198-204.

[5] Chu" C Y. An open-label pilot study to evaluate the safety and efficacy" of topically applied pimecrolimus cream for the treatment of steroid-induced rosacea-like eruption[J]. J Eur Acad Dermatol Venereol， 2007， 21（4）： 484-90.

[6]中國醫(yī)師協(xié)會(huì)皮膚科分會(huì)美容專業(yè)組.激素依賴性皮炎診治指南[J].臨床皮膚科雜志，2009，38（8）：549-550.

[7]Sharma R， Abrol S， Wani M. Misuse of topical corticosteroids on facial skin. A study of 200 patients[J]. J Dermatol Case Rep， 2017，11（1）：5-8.

[8]詹煒，唐先發(fā)，楊森.激素依賴性皮炎研究進(jìn)展[J].中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志，2017，16（4）：370-372.

[9]Schoepe S， Sch?cke H， May E， Asadullah K. Glucocorticoid therapy-induced skin atrophy[J]. Exp Dermatol， 2006，15（6）：406-420.

[10]Schivo M， Aksenov A A， Pasamontes A， et al. A rabbit model for assessment of volatile metabolite changes observed from skin： a pressure ulcer case study[J]. J Breath Res， 2017，11（1）：016007.

[11]朱睿，陳茜，徐瑞雪，等.應(yīng)用丙酸氯倍他索乳膏建立兔激素依賴性皮炎模型及其皮膚病理變化觀察[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2020，29（11）：101-104.

[12]Lee D H， Li K， Suh D H. Pimecrolimus 1% cream for the treatment of steroid-induced rosacea： an 8-week split-face clinical trial[J]. Br J Dermatol， 2008，158（5）：1069-1076.

[13]李賢光，李彩霞，朱薇，等.他克莫司軟膏聯(lián)合創(chuàng)?？抵委熂に匾蕾囆云ぱ庄熜в^察[J].皮膚病與性病，2021，43（4）：538-540.

[14]肖茜.中藥聯(lián)合依巴斯汀治療面部糖皮質(zhì)激素依賴性皮炎[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2018，27（2）：130-132

[15]田雅蘭，陳婷婷，錢江.強(qiáng)脈沖光聯(lián)合舒敏保濕霜治療面部糖皮質(zhì)激素依賴性皮炎療效分析[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2021，30（6）：86-89.

[16]Gu W， Liu W， Yang X， et al. Effects of intense pulsed light and ultraviolet A on metalloproteinases and extracellular matrix expression in human skin[J]. Photomed Laser Surg， 2011，29（2）：97-103.

[17]王醒荷，羅賽，徐渴鑫，等.紫外線對皮膚基質(zhì)金屬蛋白酶及相關(guān)通路影響的研究進(jìn)展[J].中國美容整形外科雜志，2018，29（5）：316-318.

[18]Yang L， Zhang D， Wu H， et al. Basic fibroblast growth factor influences epidermal homeostasis of living skin equivalents through affecting fibroblast phenotypes and functions[J]. Skin Pharmacol Physiol， 2018，31（5）：229-237.

[19]Guo Y， Xu B， Wang Y， et al. Dramatic promotion of wound healing using a recombinant human-like collagen and bFGF cross-linked hydrogel by transglutaminase[J]. J Biomater Sci Polym Ed， 2019，30（17）：1591-1603.

[20]Zhan D C， Shen Y S， Zhao Y R， et al. Efficacy and safety of basic fibroblast growth factor in the treatment of burns： Protocol for a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials[J]. Medicine （Baltimore）， 2019，98（14）：e15102.

[21]齊顯龍，楊憲偉.敏感皮膚的整合治療[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2018，27（10）：21-23.

[22]劉韻，展望，游文健.外用bFGF凝膠對CO2點(diǎn)陣激光治療痤瘡瘢痕療效的影響[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2018，27（4）：54-57.

[23]Schilling L M， Halvorson C R， Weiss R A， et al. Safety of combination laser or intense pulsed light therapies and doxycycline for the treatment of rosacea[J]. Dermatol Surg， 2019，45（11）：1401-1405.

[24]祝霞，孫麗玲.強(qiáng)脈沖光聯(lián)合重組人表皮生長因子凝膠治療面部激素依賴性皮炎的療效觀察[J]中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2017，27（2）：91-93.

[25]馮琴，梁瓊，魏林林，等.重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子聯(lián)合強(qiáng)脈沖光對糖皮質(zhì)激素依賴性皮炎患者皮膚屏障功能的影響[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2022，31（10）：59-62

[收稿日期]2022-09-21

本文引用格式：陳茜，朱睿，楊文佳，等.強(qiáng)脈沖光聯(lián)合重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子對兔激素依賴性皮炎動(dòng)物模型的作用機(jī)制研究[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2025，34（4）：6-9.