大理州4種生物農(nóng)藥對(duì)煙草番茄斑萎病毒病的田間防效試驗(yàn)

摘 要 為篩選有效防治危害大理州植煙區(qū)的煙草番茄斑萎病毒?。═omato spotted wilt virus， TSWV）的生物農(nóng)藥（Biological pesticides， BP），以烤煙品種K326為材料開(kāi)展氨基寡糖素、超敏蛋白、香菇多糖、寧南霉素4種高活性抗病毒BP、廣譜化學(xué)農(nóng)藥嗎胍·乙酸銅對(duì)煙草TSWV田間防效比較試驗(yàn)。結(jié)果：1）施用BP能提高TSWV防治效果，其中超敏蛋白和香菇多糖能顯著降低發(fā)病率（44.07%～55.44%）和病情指數(shù)（46.63%～58.24%）（p＜0.05），抗病性提高24.47%～56.37%。2）施用BP能提高烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀，其中超敏蛋白顯著提高烤煙產(chǎn)值（24.35%）和產(chǎn)量（16.14%）（p＜0.05）。3）Mantel檢驗(yàn)、冗余分析和灰色關(guān)聯(lián)度分析共同證實(shí)了超敏蛋白和香菇多糖提高TSWV防治效果、產(chǎn)量及中上等煙比例的效果優(yōu)于其他處理，同時(shí)TSWV發(fā)病率和病情指數(shù)會(huì)顯著降低烤煙產(chǎn)值，而產(chǎn)量和中上等煙比例則是決定產(chǎn)值的主要因素。綜上，超敏蛋白和香菇多糖可以作為大理州植煙區(qū)煙草TSWV防治的主要BP推廣使用。

關(guān)鍵詞 煙草；番茄斑萎病毒病；生物農(nóng)藥；防治效果；農(nóng)藝性狀；經(jīng)濟(jì)性狀

中圖分類(lèi)號(hào)：S513 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2025.03.001

煙草產(chǎn)業(yè)是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)支柱之一，煙葉的產(chǎn)量和品質(zhì)直接決定了國(guó)家稅收及煙農(nóng)的利益[1-2]。云南省植煙面積和卷煙產(chǎn)銷(xiāo)規(guī)模位居中國(guó)首位[3-4]，其煙葉金黃、鮮亮、清甜香味突出、工業(yè)可用性強(qiáng)，具有特色鮮明的香韻特征和感官評(píng)吸質(zhì)量，是中式卷煙不可替代的優(yōu)質(zhì)煙葉原料[5]。大理白族自治州（大理州）是云南省典型的優(yōu)質(zhì)煙葉產(chǎn)地之一，自《大理州“十四五”煙草產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃》實(shí)施以來(lái)，進(jìn)一步確立了大理州植煙區(qū)在全省煙草產(chǎn)業(yè)的牢固地位[6]?！扒逑阈汀碧厣緹熎贩NK326是大理州植煙區(qū)核心地位的重要保障，以煙葉顏色橘黃、色澤飽滿(mǎn)、香氣宜人、口感醇和為特點(diǎn)[7]。2023年大理州K326的產(chǎn)量超過(guò)全州收購(gòu)計(jì)劃的20.25%，供應(yīng)云南中煙紅塔集團(tuán)主料煙生產(chǎn)[8]。K326在田間栽培過(guò)程中的重點(diǎn)問(wèn)題是對(duì)病毒病的抗性較差，病原僅需輕微摩擦煙葉導(dǎo)致微傷口、蚜蟲(chóng)口器吸食、煙粉虱和薊馬傳播等即可侵染煙草，也可以通過(guò)病殘?bào)w、肥料、土壤、種子及帶病的其他寄生植物進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播[9]。病毒病導(dǎo)致的植株矮化、黃葉斑駁、煙葉變形壞死、烤后顏色不均等是嚴(yán)重危害K326煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)的原因[10]。因此，針對(duì)大理州K326病毒病的防治研究對(duì)于穩(wěn)定大理州植煙區(qū)煙葉高質(zhì)量生產(chǎn)具有重要意義。K326極易感染煙草番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus，TSWV），TSWV廣泛分布于云南植煙區(qū)，2020年在云南省10個(gè)主要植煙區(qū)的檢出率為31.58%[11]。于海芹等人調(diào)查發(fā)現(xiàn)云南主要植煙區(qū)的TSWV發(fā)病率正呈逐年上升的趨勢(shì)，局部煙區(qū)超60%，嚴(yán)重制約了煙葉高質(zhì)量發(fā)展和經(jīng)濟(jì)效益[12]。TSWV主要通過(guò)薊馬以持久增殖性方式傳播。薊馬僅在幼蟲(chóng)期（若蟲(chóng)階段）通過(guò)取食感染植物獲取病毒，病毒隨后在其體內(nèi)中腸上皮細(xì)胞復(fù)制，并通過(guò)血淋巴遷移至唾液腺，完成跨齡期傳遞（transstadial transmission）。一旦成功定殖，成蟲(chóng)薊馬無(wú)需再次取食感染源即可終身傳播病毒[13]。楊軍章等人發(fā)現(xiàn)銀黑色、銀灰色地膜均能有效降低煙田TSWV的發(fā)病率和病情指數(shù)，對(duì)傳毒介體西花薊馬具有明顯的趨避作用[14]。同時(shí)，基因工程培育抗病品種不僅技術(shù)成本較高，而且周期長(zhǎng)、見(jiàn)效緩慢，生產(chǎn)上推廣應(yīng)用較為困難。使用病毒抑制劑仍然是植物病毒病綜合治理中的常用防治手段，其中生物農(nóng)藥（Biological pesticides，BP）作為安全高活性、環(huán)境友好型的綠色農(nóng)藥廣泛應(yīng)用于烤煙病毒病的防治，來(lái)源于活體生物及其代謝產(chǎn)物，不僅能防治病毒病，還能提高作物的免疫抗性[15-16]。陳永對(duì)等人成功利用植物源自然產(chǎn)物3-丙酮基-3-羥基羥吲哚（3-acetonyl-3-hydroxyoxindole，AHO）防治煙草TSWV，其防治效果高達(dá)79.86%，這一成果展示了BP在防治TSWV屬病毒方面的應(yīng)用前景和巨大潛力[17]。游堂貴等通過(guò)香菇多糖水劑、超敏蛋白微粒劑、氨基寡糖素水劑和嘧肽霉素水劑4種BP對(duì)田間煙草TSWV進(jìn)行防治取得了良好效果[18]。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中可以應(yīng)用數(shù)學(xué)模型對(duì)作物病害防治效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，因?yàn)樽魑锔腥静『髸?huì)產(chǎn)生復(fù)雜的農(nóng)藝性狀、生理生化和產(chǎn)量變化，數(shù)學(xué)模型則是將一系列定性指標(biāo)轉(zhuǎn)化為定量指標(biāo)，從而分析導(dǎo)致或防治病害發(fā)生的因子，同時(shí)對(duì)病害進(jìn)行預(yù)防，甚至預(yù)測(cè)人為防治措施實(shí)施后對(duì)作物產(chǎn)量的影響[19]。現(xiàn)有研究表明，開(kāi)展問(wèn)卷收集、病害植保調(diào)查、遙感監(jiān)測(cè)、地理氣象等多來(lái)源生境數(shù)據(jù)綜合數(shù)學(xué)模型可以充分挖掘病害動(dòng)態(tài)發(fā)展趨勢(shì)[20-21]。曹哲銘等通過(guò)6種數(shù)學(xué)模型篩選出7個(gè)關(guān)鍵預(yù)測(cè)因子對(duì)煙草赤星病和靶斑病病情進(jìn)行預(yù)測(cè)和防治，擬合度可達(dá)86.49%[22]。黃海榮等利用灰色關(guān)聯(lián)度分析了274個(gè)甘蔗常用親本的白條病、葉焦病等8種葉部病害和黑穗病的抗性，將親本抗病害能力分為6類(lèi)，進(jìn)一步對(duì)甘蔗雜交親本材料的選擇和優(yōu)化提供參考[23]。譚壯生等利用MATLAB軟件的BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模塊對(duì)20種常見(jiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[19]。灰色關(guān)聯(lián)度數(shù)據(jù)模型常應(yīng)用于社會(huì)學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)和農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中多因素變化趨勢(shì)異同性的評(píng)價(jià)手段[24]，但目前針對(duì)農(nóng)藥防治作物病害方面的研究較少，尤其在對(duì)烤煙病毒病的生物農(nóng)藥防治方面有待深入研究。本研究綜合前期田間試驗(yàn)基礎(chǔ)和前人關(guān)于烤煙病毒病的農(nóng)藥防治研究進(jìn)展[18，25-27]，選擇廣泛用于TSWV防治的化學(xué)農(nóng)藥（嗎胍·乙酸銅）和4種BP（氨基寡糖素、超敏蛋白、香菇多糖、寧南霉素）進(jìn)行大田試驗(yàn)，利用多元線性回歸模型和灰色關(guān)聯(lián)度模型對(duì)不同農(nóng)藥防治煙草TSWV的效果及烤煙生產(chǎn)力進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，為進(jìn)一步篩選防治TSWV的綠色BP提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)于2022年在大理州灣橋鎮(zhèn)下灣橋村（100°12′E，25°78′N(xiāo)）進(jìn)行，海拔1 986 m，屬于北亞熱帶高原性季風(fēng)氣候，年平均氣溫15～22 ℃，年均降水量1 065.7 mm。試驗(yàn)田為長(zhǎng)期烤煙定位田，土質(zhì)為黏壤土，前茬作物為小麥。試驗(yàn)地區(qū)歷年烤煙TSWV發(fā)生嚴(yán)重。

1.2" 試驗(yàn)材料和農(nóng)藥

供試品種為K326，由云南省煙草公司大理白族自治州公司培育。

供試農(nóng)藥：1）嗎胍乙酸銅可濕性粉劑（農(nóng)藥登記證號(hào)：PD20100257），300 g·袋-1。2）氨基寡糖素水劑（農(nóng)藥登記證號(hào)：PD20150246），10 g·袋-1。3）超敏蛋白微粒劑（農(nóng)藥登記證號(hào)：PD20070120），10 g·袋-1。4）香菇多糖水劑（農(nóng)藥登記證號(hào)：PD20181937），15 g·袋-1。5）寧南霉素水劑（農(nóng)藥登記證號(hào)：PD20097122），15 g·袋-1。

1.3" 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，2022年3月進(jìn)行漂浮苗培育，5月膜上小苗移栽，株行距為130 cm×50 cm。試驗(yàn)田總面積約為0.70 hm2，分別設(shè)置5個(gè)農(nóng)藥處理和1個(gè)空白對(duì)照，3次重復(fù)，共18個(gè)小區(qū)，各小區(qū)四周均設(shè)置保護(hù)行。各處理所用農(nóng)藥及用量詳見(jiàn)表1。

試驗(yàn)期內(nèi)除了施用供試農(nóng)藥外，不施用其他任何抗病毒農(nóng)藥，其他農(nóng)事操作及病蟲(chóng)害防控措施均采用當(dāng)?shù)乜緹焹?yōu)質(zhì)管理方式進(jìn)行。生育期內(nèi)施用的復(fù)合肥料為云南云煙化肥股份有限公司生產(chǎn)的煙草專(zhuān)用肥[m（N）∶m（P2O5）∶m（K2O）＝10∶10∶24]。

1.4" 施藥方式

煙苗移栽后的第3天噴施第1次農(nóng)藥，以后每隔10 d再?lài)娛?次，共噴施3次。第1次施藥時(shí)間為2022年5月13日，第2次為5月23日，第3次為6月2日，連續(xù)施藥3次，于每日傍晚施藥，采用3WBD-20型背負(fù)式電動(dòng)噴霧器噴施。

1.5" 測(cè)定指標(biāo)及方法

調(diào)查各小區(qū)的煙草TSWV發(fā)病情況，計(jì)算5種農(nóng)藥對(duì)煙草TSWV的防治效果。每次施藥后的第3天仔細(xì)觀察煙株生長(zhǎng)狀況和葉片的狀態(tài)，判斷有無(wú)藥害發(fā)生。在煙株生長(zhǎng)的團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期和成熟期進(jìn)行農(nóng)藝性狀測(cè)定，在采烤結(jié)束后進(jìn)行經(jīng)濟(jì)性狀調(diào)查。

1.5.1" TSWV發(fā)病調(diào)查

每次施藥后7～10 d，以株為單位對(duì)試驗(yàn)田的煙株進(jìn)行煙草TSWV發(fā)病調(diào)查，調(diào)查均在晴天下午進(jìn)行，記錄各小區(qū)煙株數(shù)量及調(diào)查的各級(jí)病株數(shù)。TSWV病害的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《煙草病蟲(chóng)害分級(jí)及調(diào)查方法》（GB/T 23222—2008）執(zhí)行（見(jiàn)表2）。

發(fā)病率、病情指數(shù)和抗病性計(jì)算公式如下：

[發(fā)病率=發(fā)病株數(shù)調(diào)查總株數(shù)×]100% （1）

[病情指數(shù)=∑（各級(jí)病株或葉數(shù)×該病級(jí)值）調(diào)查總株或葉數(shù)×最高級(jí)值×]100%"（2）

[抗病性=對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)對(duì)照區(qū)病情指數(shù)×]100%"（3）

1.5.2" 農(nóng)藝性狀調(diào)查

按照煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查測(cè)量方法》（YC/T 142—2010），在煙草生長(zhǎng)的不同階段（團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期、成熟期），從各小區(qū)中選取最具代表性的5株煙草進(jìn)行株高、莖圍、有效葉片數(shù)、葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積的測(cè)量和記錄。這些數(shù)據(jù)將有助于分析煙草生長(zhǎng)過(guò)程中不同因素對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量的影響，從而優(yōu)化煙草種植管理策略。

葉面積計(jì)算公式如下：

[葉面積=葉長(zhǎng)×葉寬×葉面積系數(shù)（0.634 5）] （4）

1.5.3" 經(jīng)濟(jì)性狀測(cè)定

烤后煙葉按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2635—92進(jìn)行分級(jí)，供試煙葉請(qǐng)當(dāng)?shù)責(zé)熣痉旨?jí)手進(jìn)行評(píng)估，價(jià)格均為當(dāng)年當(dāng)?shù)貎r(jià)格。統(tǒng)計(jì)初烤煙葉的各等級(jí)煙葉比例、均價(jià)、產(chǎn)量和產(chǎn)值。

1.6" 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2019和R（Version 4.2.1）軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。對(duì)不同農(nóng)藥處理數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），并采用Duncan法檢驗(yàn)差異顯著性（p＜0.05），用Duncan's新復(fù)極差法進(jìn)行事后多重比較。分析前利用Levene's test檢驗(yàn)方差齊性與否，方差齊性時(shí)使用鄧肯多重檢驗(yàn)（Duncan's Multiple Range Test）法進(jìn)行多重比較，方差不齊時(shí)使用T2 Tamhane's test進(jìn)行多重比較（α=0.05）。使用R的ggcor包并利用dplyr程序進(jìn)行Mantel檢驗(yàn)TSWV防治效果、烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀之間的相關(guān)性。采用CANOCO 5.0（Biometris-Plant Research International，Wageningen，Netherlands）對(duì)不同農(nóng)藥處理的TSWV防治效果、烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀進(jìn)行多重相關(guān)的冗余分析（Redundancy analysis，RDA）。利用MATLAB 2022b （MathWorks Incorporated，USA）進(jìn)行灰色關(guān)聯(lián)度數(shù)學(xué)模型構(gòu)建，設(shè)置特征序列和母數(shù)列，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行量綱一化后計(jì)算關(guān)聯(lián)系數(shù)[28]，公式如下：

[γik=Δmin+ρΔmaxΔik+ρΔmax]" "（5）

式中，[γik]為關(guān)聯(lián)系數(shù)，

[Δmin=miniminkX0k-Xik]，

[Δmax=maximaxkX0k-Xik]，

[Δik=X0k-Xik]，[ρ=0.5]為分辨系數(shù)。

進(jìn)一步計(jì)算關(guān)聯(lián)系數(shù)的加權(quán)平均值，根據(jù)權(quán)重系數(shù)和關(guān)聯(lián)度的積記為加權(quán)關(guān)聯(lián)度，公式如下：

[γi'=k=1XWkγik]" "（6）

式中，[γi']為加權(quán)關(guān)聯(lián)度，[Wk]為[k]的權(quán)重系數(shù)，[γik]為灰色關(guān)聯(lián)度。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 不同農(nóng)藥處理對(duì)煙草TSWV的防治效果比較

由圖1可知，每次施用化學(xué)農(nóng)藥（Chemical pesticide， CP）和生物農(nóng)藥（Biological pesticides，BP）后均能顯著降低煙草TSWV的發(fā)病率和病情指數(shù)（p＜0.05），其中以超敏蛋白（T3）降低效果最好，其次為香菇多糖（T4）。與CK相比，平均3次施藥后的煙草TSWV發(fā)病率和病情指數(shù)分別顯著降低了26.39%～55.44%、29.95%～58.24%（p＜0.05），其中T3分別顯著降低了55.44%、58.24%（p＜0.05），T4分別顯著降低了44.07%、46.63%（p＜0.05）。在煙草TSWV的抗病性方面，與嗎胍·乙酸銅（T1）相比，除氨基寡糖素（T2）以外，每次施用BP后煙株的抗病性均有提升，其中以T3的效果最佳，其次為T(mén)4；與T1相比，平均3次施藥后T3對(duì)煙草TSWV的抗病性顯著提高56.37%（p＜0.05），T4提高了24.47%。

2.2" 不同農(nóng)藥處理對(duì)煙株農(nóng)藝性狀的影響

由表3可知，施用CP、BP對(duì)烤煙農(nóng)藝性狀沒(méi)有顯著性影響，其中T3在提高農(nóng)藝性狀方面最具有優(yōu)勢(shì)，其次為T(mén)4。烤煙的株高、葉長(zhǎng)、葉寬、莖圍、葉面積在團(tuán)棵期的最高值分別為T(mén)4、清水（CK）、寧南霉素（T5）、CK、T3處理，旺長(zhǎng)期分別為T(mén)3、T3、T4、T3、T4處理，成熟期分別為T(mén)6、T4、T3、T3、T3處理。與CK相比，T3各時(shí)期的株高、葉寬、莖圍、有效葉片數(shù)、葉面積分別提高5.20%、3.29%、3.32%、2.78%、2.46%。有效葉片數(shù)方面，與CK相比，在旺長(zhǎng)期和成熟期以T4更具有優(yōu)勢(shì)，分別提高了8%、5%。

2.3" 不同農(nóng)藥處理對(duì)煙葉經(jīng)濟(jì)性狀的影響

由表4可知，施用CP、BP均能提高初烤煙葉的經(jīng)濟(jì)性狀，其中T3的提升效果最好，T4其次，但僅T3處理能顯著提高產(chǎn)值和均價(jià)（p＜0.05）。與CK相比，T1～T5處理初烤煙葉的產(chǎn)量、產(chǎn)值、均價(jià)、上等煙比例和中等煙比例分別提高了1.67%～7.07%、2.61%～24.35%、0.92%～16.14%、0.69%～6.62%、4.61%～22.99%，其中T3的產(chǎn)值和均價(jià)分別顯著提高了24.35%、16.14%（p＜0.05）；下等煙比例方面，T1～T5處理較CK降低了18.78%～78.82%，其中T3的降低效果最佳。

2.4" 不同農(nóng)藥處理下TSWV防治效果、烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)系

由Mantel檢驗(yàn)（圖2）可知，煙草TSWV防治效果對(duì)烤煙產(chǎn)量和產(chǎn)值具有顯著性影響（p＜0.05），其中發(fā)病率、病情指數(shù)與烤煙產(chǎn)量的顯著負(fù)相關(guān)系數(shù)分別為0.57、0.59，與烤煙產(chǎn)值的顯著負(fù)相關(guān)系數(shù)分別為0.71、0.68；抗病性與烤煙產(chǎn)值的顯著正相關(guān)系數(shù)為0.21。同時(shí)，產(chǎn)值主要受產(chǎn)量、中上等煙比例和葉寬的正向顯著影響，株高和葉長(zhǎng)顯著正相關(guān)，葉面積則主要受葉寬的正向顯著影響。

由RDA分析（圖3）可知，第一軸能夠解釋所有信息的94.62%，第二軸能夠解釋5.36%，累計(jì)解釋信息量達(dá)99.98%，蒙特卡洛置換檢驗(yàn)表明，產(chǎn)值（F=12.1，p=0.036）、產(chǎn)量（F=10.4，p=0.016）和中上等煙比例（F=9.5，p=0.028）是多元線性回歸中3個(gè)最重要的貢獻(xiàn)者。圖3表明4種BP處理與TSWV抗病性均具有正相關(guān)性，同時(shí)T3、T4與經(jīng)濟(jì)性狀及除葉長(zhǎng)以外的烤煙農(nóng)藝性狀均具有較強(qiáng)的正相關(guān)性，CK則與發(fā)病率、病情指數(shù)和株高具有正相關(guān)性。

2.5" 灰色關(guān)聯(lián)度分析及綜合評(píng)價(jià)

由表5可知，BP處理的TSWV防治效果、烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀排名優(yōu)于CK和化學(xué)農(nóng)藥（T1），其中T3、T4的效果最優(yōu)。利用灰色關(guān)聯(lián)度分析，以產(chǎn)值為母序列，以TSWV防治效果、烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀為特征序列，得到產(chǎn)值與其余指標(biāo)的關(guān)聯(lián)度，由表5可知產(chǎn)量、中上等煙比例和葉寬是影響產(chǎn)值的重要指標(biāo)。進(jìn)一步對(duì)CK和5種農(nóng)藥進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，可知T3、T4對(duì)TSWV防治效果、烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀的提高具有優(yōu)勢(shì)。

3" 討論與結(jié)論

病毒病的增殖有5個(gè)步驟，分別是吸附、注入、合成、裝配、釋放，通過(guò)阻斷或限制病毒生命周期的任何一個(gè)環(huán)節(jié)便可以達(dá)到防治病毒病的目的，因此田間施用阻斷農(nóng)藥來(lái)防治病毒病仍是主要措施之一[29]。本研究選用廣譜抗病毒農(nóng)藥，對(duì)大理州灣橋鎮(zhèn)的烤煙開(kāi)展TSWV防治試驗(yàn)，結(jié)果表明生物農(nóng)藥的防治作用較優(yōu)，其中以超敏蛋白微粒劑（T3）和香菇多糖（T4）對(duì)TSWV的防控效果、烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀提升最佳。超敏蛋白是一種能夠增強(qiáng)植物抗病性的蛋白質(zhì)，在1992年被美國(guó)康奈爾大學(xué)的韋忠民團(tuán)隊(duì)首次發(fā)現(xiàn)[30]，雖然其本身無(wú)法直接對(duì)病原體產(chǎn)生作用，但是可以通過(guò)誘導(dǎo)植株產(chǎn)生過(guò)敏性壞死現(xiàn)象來(lái)提高植物的抗病性，從而抑制病原體的進(jìn)入和繁殖。大量研究表明超敏蛋白能促進(jìn)煙草、水稻的農(nóng)藝性狀指標(biāo)[31-32]，這與本研究結(jié)果一致。陳永對(duì)等人的研究表明，超敏蛋白對(duì)煙草TSWV的防治效果最佳（72.17%～79.86%），本研究中超敏蛋白微粒劑對(duì)烤煙TSWV發(fā)病率、病情指數(shù)的降低和防治效果提升最優(yōu)，與前人研究結(jié)果保持一致[17]。香菇多糖作為一種植物提取物，其主要機(jī)制作用于病毒的侵染位點(diǎn)，通過(guò)鈍化其活性進(jìn)而抑制病毒在植物體內(nèi)的復(fù)制過(guò)程[33]。張超群等人研究表明香菇多糖素水劑500倍液對(duì)煙草病毒病的防效為55.77%[34]，本研究中香菇多糖第3次施藥的防治效果僅次于超敏蛋白，達(dá)24.47%。值得一提的是，香菇多糖第2次、第3次施藥的防治效果優(yōu)于第1次，與游堂貴等人的研究結(jié)果不一致[18]，可能是香菇多糖屬于真菌多糖，可誘導(dǎo)植株和細(xì)胞緩慢產(chǎn)生并積累抗病性物質(zhì)[33]，導(dǎo)致香菇多糖的防效后期更好，前期的防治效果并不明顯。

本研究中另外兩種BP分別是寧南霉素和氨基寡糖素，防治效果不如超敏蛋白和香菇多糖，其原因可能是二者對(duì)病毒病的作用機(jī)制均屬于提高作物抗逆性和緩解病毒發(fā)病能力[35-36]。寧南霉素是一種核苷肽類(lèi)抗菌藥物，具有抗菌活性，已有大量研究表明，寧南霉素在防治病毒方面發(fā)揮著重要作用，其鈍化機(jī)制及誘導(dǎo)植物產(chǎn)生相關(guān)蛋白都是關(guān)鍵因素[37]，它通過(guò)延長(zhǎng)病毒的潛育期和破壞其粒體結(jié)構(gòu)來(lái)提高植物的抗病力，并且有效誘導(dǎo)植株產(chǎn)生抗性蛋白，增強(qiáng)植物的耐病能力而發(fā)揮作用，這種強(qiáng)大的功能讓它成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一種備受歡迎的治療和預(yù)防藥物[38]。本研究中寧南霉素防治TSWV的效果并不突出，可能是由于寧南霉素本身延長(zhǎng)病毒潛伏期和提高抗逆性的作用機(jī)制有關(guān)，單施寧南霉素的效果不如復(fù)配BP和生防菌的效果佳[27]。氨基寡糖素是一種天然的低聚糖產(chǎn)物，它通過(guò)激發(fā)植物自身的免疫反應(yīng)，提高植物自身的抗逆能力，并通過(guò)誘導(dǎo)其產(chǎn)生抗體來(lái)阻止病毒侵染和增殖，更重要的是，它能在一定程度上抑制病毒的活性[39]。趙小明等[40]和龍光泉等[41]的研究結(jié)果表明2%～5%氨基寡糖素對(duì)煙草病毒病的防治效果分別為63.44%～75.07%和69.26%～73.95%，而本研究的防治效果則并不明顯，一方面可能是本研究施藥次數(shù)較少，時(shí)間間隔較長(zhǎng)；另一方面可能與氨基寡糖素促進(jìn)作物生長(zhǎng)，激活其體內(nèi)的抗病基因，合成與抗病毒有關(guān)的化合物質(zhì)（例如幾丁酶、葡聚糖酶等）需要一定的起效時(shí)間有關(guān)[37]。

嗎胍·乙酸銅作為廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的抗病毒農(nóng)藥，含有鹽酸嗎啉胍有效成分，該成分可有效抑制或破壞病毒核酸和蛋白質(zhì)的合成，阻礙了病毒的復(fù)制過(guò)程，進(jìn)而達(dá)到預(yù)防和治療的效果[42]。本研究中唯一的化學(xué)農(nóng)藥嗎胍·乙酸銅對(duì)烤煙TSWV的防治效果和促進(jìn)烤煙生產(chǎn)力的效果最差。邵彥坡等通過(guò)20%嗎胍·乙酸銅可濕性粉劑500倍液與20%嘧肽·嗎啉胍3種倍液（1 000倍、1 500倍、2 000倍液）對(duì)比研究表明，嗎胍·乙酸銅對(duì)煙草花葉病的防治效果并不明顯[43]。其次，嗎胍·乙酸銅對(duì)作物病毒病的防治需要在發(fā)病后及時(shí)噴施，本研究則是移栽后固定時(shí)間噴施，缺乏發(fā)病時(shí)施用農(nóng)藥的時(shí)效性。最后，有研究表明嗎胍·乙酸銅在強(qiáng)制接毒環(huán)境下的防治效果優(yōu)于自然條件發(fā)病，并且需要發(fā)病后連續(xù)施藥才能獲得較好的防治效果[44]。

目前，國(guó)內(nèi)外都沒(méi)有研發(fā)出防治煙草TSWV的特效農(nóng)藥，植物病毒病作為“惡性腫瘤”長(zhǎng)期脅迫茄科和葫蘆科等作物。同時(shí)，由于煙草TSWV的宿主種類(lèi)眾多，抗病品種選育面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。BP的研發(fā)和推廣應(yīng)用已經(jīng)日益成熟，契合國(guó)家倡導(dǎo)的農(nóng)業(yè)綠色發(fā)展要求，因?yàn)锽P的作用機(jī)制主要為免疫誘導(dǎo)、鈍化和抑制病毒增殖、降低病毒粒子活性表達(dá)等，同時(shí)具有高活性和安全性的特點(diǎn)。本研究下一步將針對(duì)多種BP進(jìn)行復(fù)合使用，同時(shí)結(jié)合轉(zhuǎn)錄組和微生物基因組的多組學(xué)聯(lián)用，探尋復(fù)合BP對(duì)煙草TSWV的防治效果和促進(jìn)烤煙生產(chǎn)力提高的機(jī)制，為安全高效生產(chǎn)和綠色防治煙草TSWV提供科學(xué)依據(jù)。

本研究結(jié)果表明，生物農(nóng)藥對(duì)煙草TSWV具有良好的防治效果，并且能提高烤煙農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)性狀，其中以超敏蛋白的效果最優(yōu)，其次為香菇多糖。超敏蛋白能有效提高烤煙各生育期農(nóng)藝性狀（2.46%～5.20%），顯著降低發(fā)病率（55.44%）和病情指數(shù)（58.24%），顯著提高TSWV防治效果（56.37%），顯著提高烤煙產(chǎn)值（24.35%）和均價(jià)（16.14%）。Mantel檢驗(yàn)、RDA和灰色關(guān)聯(lián)度分析綜合表明，煙草TSWV發(fā)病率和病情指數(shù)會(huì)顯著降低烤煙產(chǎn)值，產(chǎn)量和中上等煙比例則是決定產(chǎn)值的主要因素，而超敏蛋白和香菇多糖能有效提高烤煙TSWV防治效果、產(chǎn)量及中上等煙比例。因此，超敏蛋白和香菇多糖可以作為有效防治煙草TSWV和穩(wěn)定TSWV脅迫條件下烤煙生產(chǎn)力的重要生物農(nóng)藥。

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（責(zé)任編輯：易" 婧）

基金項(xiàng)目：云南省煙草公司大理州公司項(xiàng)目“基于傳毒介體控制與免疫誘抗的煙草番茄斑萎病生物防治研究與應(yīng)用”（DLYC2022003）。

作者簡(jiǎn)介：楊智梅（1994—），碩士，助理農(nóng)藝師，主要研究方向煙草生產(chǎn)技術(shù)與推廣。E-mail：13508803114@163.com。

*為通信作者，E-mail：yzjuan456@163.com。