蒲桃果實(shí)多糖提取純化工藝及抗氧化活性研究

摘要：以蒲桃果實(shí)為原料，選取料液比、超聲時(shí)間和超聲溫度作為試驗(yàn)因子，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面法對(duì)蒲桃粗多糖（Syzygium jambos polysaccharides，SJP）超聲輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，經(jīng)活性炭脫色、Sevage法除蛋白、DEAE-52柱層析純化得到精多糖；以ABTS、DPPH自由基清除能力和鐵離子還原能力評(píng)價(jià)精多糖的體外抗氧化活性。結(jié)果表明，蒲桃果實(shí)多糖最佳提取工藝為超聲時(shí)間58 min，超聲溫度77 ℃，料液比1∶50，該條件下蒲桃果實(shí)粗多糖得率為（5.46±0.02）%；粗多糖經(jīng)純化得到精多糖SJP-Ⅰ和SJP-Ⅱ，SJP-Ⅰ與SJP-Ⅱ均具有較好的抗氧化能力；SJP-Ⅱ抗氧化活性優(yōu)于SJP-Ⅰ，其ABTS自由基清除率為（0.30±0.01）mg/mL，DPPH自由基清除率為（0.68±0.03）mg/mL，鐵離子還原能力為（166.41±0.15） μmol VitC/g。該提取純化方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定，純化的蒲桃果實(shí)精多糖具有良好的抗氧化活性，為蒲桃果實(shí)合理開發(fā)和綜合性利用提供了理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：蒲桃（Syzygium jambos）果實(shí)；多糖；抗氧化；提取工藝

中圖分類號(hào)：R284.2" " " " "文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2025）01-0119-07

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2025.01.021 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Study on extraction and purification of polysaccharides from Syzygium jambos fruit and its antioxidant activity

WEI Ai-honga， HE Ru-qiana， ZHUANG Yuan-beia，b， LI Rong-dia，b，NIE Huaa，b，ZHANG Sheng-yuana，b

（a.Guangdong Provincial Key Laboratory of Conservation and Precision Utilization of Characteristic Agricultural Resources in Mountainous Areas；

b.Institute of Hakka Medicinal Bio-resources， Jiaying University， Meizhou" 514015， Guangdong，China）

Abstract： Using Syzygium jambos fruit as the raw material， the solid-liquid ratio， ultrasonic time，" and ultrasonic temperature were selected as experimental factors. On the basis of single factor experiments， the response surface methodology was used to optimize the ultrasonic-assisted extraction process of crude polysaccharides from Syzygium jambos. The crude polysaccharide was purified by using the activated carbon method， Sevage method and the DEAE-52 column chromatography. ABTS free radical scavenging ability， DPPH free radical scavenging ability and iron reducing ability were used to determine the antioxidant activity. The results showed that the optimal extraction condition of the polysaccharide from Syzygium jambos fruit was ultrasonic time 58 min， ultrasonic temperature 77 ℃， and solid-liquid ratio 1∶50. Under this condition， the crude polysaccharide yield was （5.46±0.02）%. The pure polysaccharide SJP-Ⅰ and SJP-Ⅱ were purified from the crude polysaccharide， and both SJP-Ⅰ and SJP-Ⅱ had antioxidant capacity. SJP-Ⅱ had better antioxidant activity than SJP-Ⅰ， and its ABTS free radical scavenging rate was （0.30±0.01） mg/mL， DPPH free radical scavenging rate was （0.68±0.03） mg/mL， iron reducing ability was （166.41±0.15） μmol VitC/g. The extraction and purification technology was simple and stable， and the pure polysaccharide from Syzygium jambos fruit had certain antioxidant capacity， which provided a theoretical basis for the rational development and comprehensive utilization of Syzygium jambos fruit.

Key words： Syzygium jambos fruit； polysaccharides； antioxidant； extraction process

蒲桃（Syzygium jambos）為桃金娘科蒲桃屬常綠喬木，分布在廣東、海南、廣西等省，為嶺南地區(qū)民間習(xí)用藥材［1］。據(jù)《中華本草》記載，蒲桃果肉具補(bǔ)肺止咳、暖胃健脾、破血消腫等功效，主治脾虛泄瀉、久痢、胃寒呃逆、疽瘤、肺虛寒咳［2］?，F(xiàn)代研究表明，蒲桃果肉含多糖、揮發(fā)油、萜類、黃酮類、酚類等活性成分［3］，具有抗氧化、抑菌、降血糖、抗炎鎮(zhèn)痛等藥理活性［4-6］。

多糖廣泛存在于動(dòng)植物和微生物中［7］，具有生物相容性好、穩(wěn)定性高、毒副作用小、可降解等優(yōu)點(diǎn)［8，9］，可參與機(jī)體生理代謝，發(fā)揮抗氧化、抗腫瘤、抗炎、降血糖、免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性［10-14］，已成為天然新型藥物研發(fā)和功能性食品開發(fā)的研究熱點(diǎn)，在藥品和食品領(lǐng)域具有良好的運(yùn)用前景。研究顯示，心腦血管疾病、衰老和癌癥等疾病的發(fā)展過程與機(jī)體氧自由基的產(chǎn)生與猝滅的失衡密切相關(guān)［15］，維持機(jī)體氧自由基的平衡對(duì)機(jī)體健康具有重要意義，抗氧化已成為功能食品的研發(fā)方向之一。程謙偉等［16］采用超聲波輔助酶法對(duì)水蒲桃核仁多糖的提取工藝進(jìn)行研究。時(shí)二敏［17］采用膜分離技術(shù)對(duì)蒲桃枝葉可溶性多糖進(jìn)行分段純化并測(cè)定其總糖含量。張亮亮等［18］研究發(fā)現(xiàn)海南蒲桃葉黃酮具有良好的抗氧化活性。但目前對(duì)蒲桃屬多糖活性研究方面的報(bào)道較少，關(guān)于蒲桃多糖抗氧化活性研究未見報(bào)道。

基于此，試驗(yàn)以蒲桃果實(shí)為原料，選取料液比、超聲時(shí)間和超聲溫度作為試驗(yàn)因子，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面法對(duì)蒲桃粗多糖超聲輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，粗多糖再經(jīng)活性炭脫色、Sevage法除蛋白、DEAE-52柱層析純化得到精多糖；分析精多糖對(duì)ABTS、DPPH自由基清除能力和鐵離子還原能力，評(píng)價(jià)精多糖的體外抗氧化活性，以期為蒲桃果實(shí)多糖成分在藥品和功能性食品方面的開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

蒲桃果實(shí)采自廣東省梅江區(qū)，經(jīng)嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院張聲源副教授鑒定為桃金娘科蒲桃屬蒲桃（Syzygium jambos），標(biāo)本（20170602）存放于嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院客家藥用生物資源研究所；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH，批號(hào)：S21J11M116469）、DEAE-52纖維素（批號(hào)：R16O11D127771），上海源葉生物科技有限公司；2，2-聯(lián)氮基-雙-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺）二氨鹽（ABTS，批號(hào)：E1920068）、維生素C（VitC，批號(hào)：J1924032）、鐵氰化鉀（批號(hào)：G1523049）、苯酚（批號(hào)：I1619016），上海阿拉丁生化科技股份有限公司；葡萄糖（批號(hào)：20161102）、濃硫酸（批號(hào)：20120301），西隴科學(xué)股份有限公司；無水乙醇、石油醚，" 廣東光華科技股份有限公司。

1.2 儀器

UV-1800型紫外-可見分光光度計(jì)，日本島津公司；JP-100S型超聲波清洗器，深圳市潔盟清洗設(shè)備有限公司；BS110s型電子分析天平，德國(guó)Sartorius公司；N-1100V型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海愛朗儀器有限公司；WJX-A1000型高速多功能粉碎機(jī)，浙江省永康市紅太陽機(jī)電有限公司；MS7-H550-Pro數(shù)顯恒溫磁力攪拌器，大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器（北京）股份公司；THZ-D型恒溫振蕩器，蘇州培英實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；SPARK型酶標(biāo)儀，瑞士TECAN公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 蒲桃果實(shí)預(yù)處理 參考文獻(xiàn)［19］，采摘大小均勻、無蟲害的蒲桃果實(shí)，曬干，粉碎，過60目篩網(wǎng)，用3倍體積石油醚超聲脫脂30 min（40 ℃，200 W，40 kHz），脫脂3次，烘干備用。

1.3.2 蒲桃果實(shí)粗多糖提取 參考文獻(xiàn)［20］，取經(jīng)脫脂干燥蒲桃果實(shí)粉末2.0 g→去離子水超聲（40 ℃，200 W，40 kHz）提取→過濾→濃縮濾液至" 20 mL→加入4倍體積無水乙醇進(jìn)行醇提→4 ℃，靜置24 h→離心（4 ℃，4 500 r/min，15 min）→收集沉淀→60 ℃烘干→得蒲桃果實(shí)粗多糖。

1.3.3 粗多糖提取單因素試驗(yàn) 參考文獻(xiàn)［20］，取經(jīng)脫脂干燥蒲桃果實(shí)粉末2.0 g。固定超聲溫度為70 ℃，超聲時(shí)間為50 min，考察料液比（1∶10、1∶20、 1∶30、1∶40、1∶50）對(duì)粗多糖得率的影響；固定料液比為1∶40，超聲溫度為70 ℃，考察超聲時(shí)間（20、30、40、50、60 min）對(duì)粗多糖得率的影響；固定料液比為1∶40，超聲時(shí)間為50 min，考察超聲溫度（40、50、60、70、80 ℃）對(duì)粗多糖得率的影響。以蒲桃果實(shí)多糖得率為參考指標(biāo)，各組試驗(yàn)重復(fù)3次，取其平均值。

1.3.4 響應(yīng)面法設(shè)計(jì) 參考文獻(xiàn)［21］，根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選取表1所示3因素3水平進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)，利用Design-Expret 8.0.6軟件設(shè)計(jì)試驗(yàn)并分析影響蒲桃果實(shí)粗多糖提取得率的主要因素，得出最佳提取工藝。

1.3.5 多糖含量測(cè)定 采取苯酚-硫酸法測(cè)定蒲桃果實(shí)多糖含量［22］。取105 ℃下干燥2 h至恒重的葡萄糖10.00 mg，配制葡萄糖系列質(zhì)量濃度（0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02 mg/mL）。分別加入5%（V/V）的苯酚溶液1.5 mL，搖勻，迅速加入5.0 mL濃硫酸，搖勻，于50 ℃水浴30 min。冷卻至室溫，于490 nm測(cè)吸光度。以吸光度（A）為縱坐標(biāo)，葡萄糖質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。配制蒲桃果實(shí)粗多糖溶液重復(fù)上述操作，根據(jù)式（1）計(jì)算粗多糖得率（W）。

[W=c×V×Dm×100%] " " " " " " " " "（1）

式中，m為蒲桃果實(shí)干燥粉末質(zhì)量（g）；c為標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)應(yīng)的蒲桃果實(shí)粗多糖質(zhì)量濃度（mg/mL）；V為待測(cè)液體積（mL）；D為稀釋倍數(shù)。

1.3.6 蒲桃果實(shí)粗多糖純化

1）純化流程。蒲桃果實(shí)粗多糖→脫色→除蛋白→DEAE-52纖維素柱層析→透析→濃縮干燥→蒲桃果實(shí)精多糖。

2）脫色與除蛋白。參考文獻(xiàn)［23］，活性炭法脫色：取粗多糖溶液添加1.5%（m/V）的活性炭，磁力攪拌（58 ℃，150 r/min，50 min）；過濾，4 ℃醇沉24 h，離心（4 ℃，4 500 r/min，15 min），得脫色粗多糖。Sevage法除蛋白：將Sevage（氯仿∶正丁醇=5∶1）試劑加入5倍體積的已脫色蒲桃果實(shí)粗多糖溶液，搖床振搖（40 ℃，200 r/min，1 h）；靜置分層，收集上清液，除去變性蛋白，重復(fù)多次操作，直至振搖后試劑交界處無白色沉淀，上清液收集待用。

3）DEAE-52纖維素柱層析。參考文獻(xiàn)［20］，精確稱量經(jīng)脫色除蛋白后的蒲桃果實(shí)粗多糖100 mg，制備成質(zhì)量濃度為100 mg/mL待測(cè)液，上DEAE-52纖維素柱（2.6 cm×60 cm）進(jìn)行分級(jí)純化，分別用去離子水和0.1、0.2、0.3、1.0 mol/L的NaCl溶液進(jìn)行梯度洗脫，流速1.0 mL/min，每管分別收集10 mL。采用硫酸-苯酚法測(cè)定吸光度，以收集管號(hào)為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)，繪制DEAE-52層析柱離子交換洗脫曲線。根據(jù)曲線合并相同流分，濃縮，獲得蒲桃果實(shí)多糖不同組分。根據(jù)洗脫峰收集多糖溶液，于去離子水中透析48 h，濃縮干燥得到精多糖。

1.3.7 蒲桃果實(shí)精多糖抗氧化活性

1）清除ABTS自由基活性。參考文獻(xiàn)［24］，將7.0 mmol/L的ABTS溶液與2.45 mmol/L過硫酸鉀溶液等體積混合，室溫避光靜置12～16 h，制備ABTS自由基母液。采用10 mmol/L（pH 7.4）磷酸緩沖溶液將ABTS自由基母液稀釋，使其在734 nm處吸光度達(dá)到（0.70±0.02）。精密吸取50 μL不同質(zhì)量濃度被試樣品溶液于96孔酶標(biāo)板，分別加入200 μL ABTS自由基溶液，搖勻，靜置10 min，于734 nm處測(cè)定其吸光度（Ai）；同時(shí)測(cè)定200 μL ABTS自由基溶液與50 μL去離子水混合后于734 nm處的吸光度（A0）；測(cè)定200 μL（10 mmol/L；pH 7.4）磷酸緩沖溶液與50 μL樣品溶液于734 nm處的吸光度（Aj）；每組平行測(cè)定3 次，以維生素C作為陽性對(duì)照。根據(jù)式（2）計(jì)算出ABTS自由基的清除率。

[ABTS自由基清除率=（1-Ai-AjA0）×100%] （2）

2）清除DPPH自由基活性。參考文獻(xiàn)［25］，精密吸取80 μL不同質(zhì)量濃度被試樣品溶液于96孔酶標(biāo)板，分別加入0.15 mmoL/L DPPH溶液150 μL，搖勻，靜置5 min，于517 nm處測(cè)定吸光度（Ai）；同時(shí)測(cè)定150 μL DPPH溶液與80 μL去離子水混合后在517 nm處的吸光度（A0）；測(cè)定150 μL去離子水與80 μL樣品溶液在517 nm處的吸光度（Aj）；每組平行測(cè)定3次，以維生素C作為陽性對(duì)照。根據(jù)式（3）計(jì)算DPPH 自由基的清除率。

[DPPH自由基清除率=（1-Ai-AjA0）×100%] （3）

3）鐵離子還原能力的測(cè)定。參考文獻(xiàn)［26］，精密吸取200 μL不同質(zhì)量濃度的待測(cè)液于96孔酶標(biāo)板，分別加入200 μL的PBS緩沖液、200 μL K3Fe（CN）6溶液，搖勻，在50 ℃下恒溫水浴20 min，急速冷卻，加入200 μL三氯乙酸溶液，搖勻，于4 ℃，6 000 r/min離心10 min，取上清液100 μL加入80 μL去離子水與20 μL FeCl3溶液混合均勻，于 700 nm測(cè)定吸光值（Ai）。以200 μL的去離子水代替不同濃度的試樣品在700 nm處測(cè)得空白吸光值（A0）。每組平行測(cè)定3 次，以維生素 C濃度為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程為Y=0.433 4ln（X）+1.843 3，R2=0.990 3。據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算蒲桃果實(shí)精多糖組分鐵還原能力，以每克精多糖含有的維生素C當(dāng)量表示（μmol VitC/g）。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

葡萄糖線性回歸方程為：Y=0.006 82 X+0.086 4，R2=0.996 8，線性關(guān)系良好，結(jié)果見圖1。

2.2 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 料液比的影響 由圖2可知，當(dāng)料液比在" " " 1∶10～1∶50 范圍內(nèi)，隨著溶劑體積的增大，蒲桃果實(shí)粗多糖得率呈先升高后降低趨勢(shì)，此變化趨勢(shì)可能由于隨著溶劑量的增大，蒲桃果實(shí)粉末與溶劑之間的濃度差增大，多糖的擴(kuò)散效應(yīng)增強(qiáng)；但當(dāng)繼續(xù)增大溶劑量時(shí)，較大的溶劑體積影響超聲波的傳導(dǎo)，進(jìn)而影響超聲提取效果，且其余雜質(zhì)的溶出可能影響多糖的擴(kuò)散［22］。在料液比為1∶40 時(shí)粗多糖得率達(dá)到最大值，為（4.92±0.25）%。因此選擇料液比為1∶30、1∶40、1∶50作為響應(yīng)面設(shè)計(jì)的水平。

2.2.2 超聲時(shí)間的影響 由圖3可知，在20～50 min范圍內(nèi)，隨著超聲時(shí)間延長(zhǎng)，蒲桃果實(shí)粗多糖得率升高；當(dāng)超聲時(shí)間為50 min時(shí)，蒲桃果實(shí)粗多糖得率達(dá)到最大值，為（5.19±0.15）%；之后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，粗多糖得率開始下降，可能是由于蒲桃果實(shí)粉末中粗多糖已全部溶解擴(kuò)散并隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)部分粗多糖分子發(fā)生降解，導(dǎo)致得率降低［27］。因此選擇超聲時(shí)間40、50、60 min作為響應(yīng)面設(shè)計(jì)的水平。

2.2.3 超聲溫度的影響 由圖4可知，在40～70 ℃范圍內(nèi)，隨著超聲溫度升高，蒲桃果實(shí)粗多糖得率升高，這可能是因?yàn)樵谝欢囟确秶鷥?nèi)升高溫度，有利于蒲桃果實(shí)多糖的充分溶出。當(dāng)超聲溫度為70 ℃時(shí)，蒲桃果實(shí)粗多糖得率達(dá)到最大值，為（5.08±0.08）%；之后，隨溫度繼續(xù)升高，粗多糖得率開始下降，可能是因?yàn)闇囟冗^高易造成多糖分解、淀粉糊化等［28］。因此，選擇超聲溫度為60、70、80 ℃作為響應(yīng)面設(shè)計(jì)的水平。

2.3 響應(yīng)曲面優(yōu)化蒲桃果實(shí)粗多糖提取工藝

2.3.1 Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選取料液比（A）、超聲時(shí)間（B）、超聲溫度（C）為自變量，以蒲桃果實(shí)粗多糖得率（Y）為響應(yīng)值，通過Box-Benhnken方法設(shè)計(jì)優(yōu)化試驗(yàn)，所得數(shù)據(jù)見表2，得到蒲桃果實(shí)多糖得率的多元二次回歸方程：

Y=5.27+0.19A+0.32B-0.018C+0.093AB+0.39AC+0.054BC-0.21A2-0.28B2-0.32C2。

對(duì)方程的分析結(jié)果見表3。模型P=0.027 0lt;0.05，說明模型具有顯著性，同時(shí)相關(guān)系數(shù)R2=0.930 4，表明響應(yīng)值的變化有93.04%來源所選的自變量，試驗(yàn)值和預(yù)測(cè)值具有高度相關(guān)性；失擬項(xiàng)P=0.975 0gt;0.05，表明未知因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響較小；一次項(xiàng)B、交互項(xiàng)AC、二次項(xiàng)C2對(duì)多糖得率影響極顯著（Plt;0.01）；一次項(xiàng)A、二次項(xiàng)A2、B2對(duì)多糖得率影響顯著（Plt;0.05）；由F值可知，在試驗(yàn)范圍內(nèi)各因素對(duì)多糖得率的影響大小依次為Bgt;Agt;C。

2.3.2 響應(yīng)曲面及等高線 由圖5可知，料液比（A）和超聲溫度（C）之間的響應(yīng)曲面具有明顯的陡坡，且等高線圖為橢圓形，說明AC交互作用明顯；當(dāng)料液比不變時(shí)，粗多糖得率隨著超聲溫度的升高先上升后下降，當(dāng)超聲溫度不變時(shí)，粗多糖得率隨溶劑量升高先上升后下降；粗多糖得率變化隨料液比的變化程度大于隨超聲時(shí)間的變化程度，表明料液比的效應(yīng)大于超聲時(shí)間，當(dāng)料液比不變時(shí)粗多糖得率隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)先上升后下降，當(dāng)超聲時(shí)間不變時(shí)，粗多糖得率隨溶劑量升高先上升后下降；當(dāng)超聲溫度不變時(shí)，粗多糖得率隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)先上升后下降，當(dāng)超聲時(shí)間不變時(shí)，粗多糖得率隨著超聲溫度的升高先上升后下降。AB、BC交互作用不明顯，表明AC對(duì)多糖得率影響較高，AB、BC影響較低，該結(jié)果與方差分析結(jié)果一致。

2.3.3 驗(yàn)證試驗(yàn) 通過軟件Design-Exper 8.0.6，經(jīng)模型預(yù)測(cè)，考察因素的最佳參數(shù)料液比、超聲時(shí)間、超聲溫度分別為1∶50、57.8 min、76.5 ℃，在該條件下，預(yù)測(cè)蒲桃果實(shí)粗多糖得率為5.51%?？紤]實(shí)際操作，將最佳提取條件調(diào)整為：料液比1∶50、超聲時(shí)間58 min、超聲溫度77 ℃，理論預(yù)測(cè)值為5.49%。為了驗(yàn)證模型的準(zhǔn)確性，選取該參數(shù)條件進(jìn)行驗(yàn)證，重復(fù)3次試驗(yàn)，蒲桃果實(shí)多糖得率分別為5.49%、5.44%、5.46%，平均得率為（5.46±0.02）%，表明該模型優(yōu)化工藝參數(shù)可靠。

2.4 蒲桃果實(shí)粗多糖的純化

如圖6所示，經(jīng)超聲輔助提取以及脫色除蛋白后得到的蒲桃果實(shí)粗多糖SJP通過DEAE-52纖維素柱層析，得到2個(gè)明顯的洗脫峰，洗脫峰所對(duì)應(yīng)分別是以去離子水、0.1 mol/L NaCl溶液洗脫。用去離子水洗脫時(shí)，可以將一些不帶電或帶電能力較弱的，不易被DEAE-52纖維素吸附的多糖首先洗脫［29］，由此得到精多糖組分SJP-Ⅰ。NaCl溶液中Cl-1有強(qiáng)吸附性，DEAE-52纖維素中吸附的有負(fù)電荷的部分多糖可被洗脫，得到由0.1 mol/L NaCl溶液洗脫的精多糖組分SJP-Ⅱ。SJP-Ⅰ多糖含量為371.53 mg/g，SJP-Ⅱ多糖含量為698.27 mg/g。

2.5 蒲桃果實(shí)精多糖的抗氧化活性

2.5.1 清除DPPH自由基能力 由圖7可知，蒲桃果實(shí)精多糖對(duì)DPPH自由基具有良好的清除效果。在研究的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，對(duì)DPPH自由基清除效果隨蒲桃果實(shí)精多糖質(zhì)量濃度的增加而增強(qiáng)。SJP-Ⅰ、SJP-Ⅱ、維生素C對(duì)DPPH自由基清除率的IC50值分別為（3.71±0.62）mg/mL、（0.68±0.03）mg/mL、（0.002±0.000 1）mg/mL?？梢?，SJP-Ⅱ清除DPPH自由基能力大于組分SJP-Ⅰ。

2.5.2 清除ABTS自由基能力 由圖8可知，蒲桃果實(shí)精多糖對(duì)ABTS自由基具有較好的清除效果。在研究的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，清除效果隨精多糖質(zhì)量濃度的增加而增強(qiáng)，SJP-Ⅰ、SJP-Ⅱ、維生素C對(duì)ABTS自由基清除作用的IC50值分別為（1.22±0.03）mg/mL、（0.30±0.01）mg/mL、（0.03±0.001）mg/mL。因此，SJP-Ⅱ清除ABTS自由基能力大于組分SJP-Ⅰ。

2.5.3 鐵離子還原能力 由圖9所示，蒲桃果實(shí)精多糖組分SJP-Ⅱ的鐵還原能力為（166.41±0.15）μmol VitC/g，組分SJP-Ⅰ的鐵還原能力為（42.43±0.13）μmol VitC/g，表明SJP-Ⅱ鐵還原能力大于SJP-Ⅰ。

綜合清除DPPH、ABTS自由基和鐵還原能力結(jié)果，蒲桃果實(shí)精多糖SJP-Ⅱ的抗氧化活性強(qiáng)于SJP-Ⅰ。

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)對(duì)蒲桃多糖提取工藝進(jìn)行了探究，經(jīng)響應(yīng)面優(yōu)化后粗多糖得率可達(dá)5.46%，與程謙偉等［16］提取水蒲桃多糖的得率接近。體外抗氧化活性顯示SJP-Ⅱ?qū)PPH自由基清除能力與張亮亮等［18］對(duì)海南蒲桃黃酮的研究結(jié)果較為接近。響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取蒲桃果實(shí)粗多糖最佳提取工藝為超聲時(shí)間58 min，料液比1∶50，超聲溫度77 ℃，該提取優(yōu)化條件簡(jiǎn)便，穩(wěn)定，能有效提高蒲桃果肉粗多糖的得率。優(yōu)化得到的粗多糖經(jīng)活性炭脫色、Sevage法除蛋白、DEAE-52柱層析純化得到兩個(gè)精多糖組分：SJP-Ⅰ和SJP-Ⅱ，其含量分別為371.53 mg/g、698.27 mg/g；SJP-Ⅰ和SJP-Ⅱ多糖組分均具有良好的抗氧化能力，且SJP-Ⅱ抗氧化活性優(yōu)于SJP-Ⅰ，可用于蒲桃果實(shí)多糖抗氧化活性成分的靶向分離和抗氧化食品的開發(fā)。

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