益生菌補(bǔ)劑對(duì)妊娠期糖尿病大鼠模型糖脂代謝的影響

【摘要】目的 探究益生菌補(bǔ)劑對(duì)妊娠期糖尿?。℅DM）大鼠血糖、血脂、腸道菌群的影響，為臨床治療GDM提供參考。方法 取SFP級(jí)Wistar大鼠50只雌性和30只雄性合籠交配后，選取成功妊娠的40只大鼠以隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、模型組、低劑量組及高劑量組，各10只，以高脂高糖飼料與鏈脲佐菌素構(gòu)建GDM大鼠模型，對(duì)照組大鼠以普通飼料與檸檬酸鈉緩沖液處理；低劑量組、高劑量組大鼠造模成功后分別接受0.5 g/d、1 g/d益生菌補(bǔ)劑灌胃，連續(xù)給藥14 d，模型組與對(duì)照組大鼠同時(shí)間點(diǎn)以等體積生理鹽水處理。比較4組大鼠給藥1、4、10、14 d空腹血糖水平，給藥14 d后血脂[總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）]與腸道菌群水平。結(jié)果 給藥1～14 d后，模型組大鼠空腹血糖呈升高趨勢(shì)，低劑量組與高劑量組大鼠空腹血糖均呈降低趨勢(shì)，且均高于對(duì)照組，與模型組比，給藥4、10、14 d后低劑量組與高劑量組大鼠空腹血糖均降低；給藥14 d后，與對(duì)照組比，模型組、低劑量組及高劑量組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均升高，血清HDL-C水平均降低，與模型組比，低劑量組和高劑量組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均降低，血清HDL-C水平均升高，且高劑量組改善幅度均大于低劑量組；給藥14 d后，與對(duì)照組比，模型組、低劑量組及高劑量組大鼠腸道嗜酸乳酸桿菌、長雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量均減少，糞腸球菌數(shù)量均增加，與模型組比，低劑量組與高劑量組大鼠嗜酸乳酸桿菌、長雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量均增加，糞腸球菌數(shù)量均減少，且高劑量組改善幅度均大于低劑量組（均Plt;0.05）；而給藥1～14 d后低劑量組、高劑量組大鼠及給藥1 d后模型組、低劑量組、高劑量組大鼠空腹血糖比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05）。結(jié)論 益生菌補(bǔ)劑可調(diào)節(jié)GDM大鼠的腸道菌群，并改善其血糖、血脂水平，且相較于低劑量益生菌補(bǔ)劑，高劑量的改善作用更佳。

【關(guān)鍵詞】益生菌補(bǔ)劑 ; 妊娠糖尿病 ; 血糖 ; 血脂 ; 腸道菌群

【中圖分類號(hào)】R587.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2096-3718.2025.02.0001.03

DOI：10.3969/j.issn.2096-3718.2025.02.001

妊娠期糖尿?。╣estational diabetic mellitus，GDM）是指在妊娠期間發(fā)生的葡萄糖耐受異常，其發(fā)病率在全球范圍內(nèi)逐年升高，在黃種人群中尤為顯著，GDM會(huì)導(dǎo)致羊水過多、酮癥酸中毒、胎兒早產(chǎn)等不良妊娠結(jié)局發(fā)生，嚴(yán)重影響母嬰健康[1]。孕期飲食不合理會(huì)導(dǎo)致胰島素分泌不足，如高脂高糖飲食、膳食纖維不足、飲食不規(guī)律等均會(huì)影響胰島β細(xì)胞功能，長期會(huì)導(dǎo)致胰島β細(xì)胞受損，從而導(dǎo)致胰島素分泌水平下降，最終引起血糖水平異常升高。因此，臨床主要采用胰島素治療，并輔以飲食控制以改善患者癥狀，但部分患者存在胰島素抵抗，常規(guī)胰島素治療的效果有限[2]。有研究表明， GDM患者的腸道菌群發(fā)生改變，菌群間比例失衡，且多樣性較差[3]。近年來，益生菌被認(rèn)為可能對(duì)改善GDM患者的糖脂代謝有積極作用，可通過調(diào)整患者腸道菌群紊亂，增加機(jī)體免疫功能，有助于調(diào)節(jié)患者血脂、血糖，改善胰島素抵抗[4]?；诖?，本研究旨在探討不同劑量益生菌補(bǔ)劑對(duì)GDM大鼠血糖、血脂及腸道菌群的影響，為GDM的臨床治療提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、儀器及試劑

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)方法 選取80只SFP級(jí)Wistar大鼠[上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（滬）2012-0002]，其中雌性大鼠50只，10～16周齡，平均（12.41±1.26）周齡；體質(zhì)量130～161 g，平均（146.62±8.86） g。雄性大鼠30只，11～16周齡，平均（14.05±1.31）周齡；體質(zhì)量128～161 g，平均（145.52±8.92） g，均飼養(yǎng)于海南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室，環(huán)境溫度20～22 ℃，濕度70%～85%，光照/黑暗12 h循環(huán)，自由進(jìn)食飲水，每天更換飼料和飲水，每5 d更換1次墊料。本研究經(jīng)海南現(xiàn)代婦女兒童醫(yī)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)開展。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑 血糖分析儀（青島雅斯生物科技有限公司，型號(hào)：GLM-79）；全自動(dòng)生化分析儀（IDEXX Laboratories Inc，型號(hào)：Catalyst One）。乳酸菌素片（海南海神同洲制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20074167，規(guī)格：0.4 g/片）；雙歧桿菌三聯(lián)活菌腸溶膠囊（晉城海斯制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字S19993065，規(guī)格：210 mg/粒）。

1.2 研究方法

1.2.1 益生菌補(bǔ)劑制備 在無菌環(huán)境下，取出雙歧桿菌三聯(lián)活菌腸溶膠囊內(nèi)的粉末，并將等質(zhì)量的乳酸菌素片研磨成粉末，置于無菌容器中，混合3～5 min，通過無菌包裝設(shè)備分裝，高劑量為1 g/袋，低劑量為0.5 g/袋。

1.2.2 模型構(gòu)建和干預(yù) 選取50只雌性大鼠和30只雄性大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，按雌雄比5∶3夜間合籠，次日觀察雌鼠陰道栓或涂片精子確認(rèn)妊娠，記錄孕0天。選取成功妊娠的40只雌鼠以隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、模型組、低劑量組及高劑量組，各10只，其中對(duì)照組大鼠以普通飼料喂養(yǎng)，模型組、低劑量組及高劑量組采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)。妊娠第3天，對(duì)模型組、低劑量組、高劑量組大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素25 mg/kg體質(zhì)量，72 h后其空腹血糖（禁食8 h）在6.67～16.67 mmol/L視為造模成功，對(duì)照組大鼠注射等體積檸檬酸鈉緩沖液。低劑量組、高劑量組接受高劑量（1 g/d）和低劑量（0.5 g/d）益生菌補(bǔ)劑，將其溶于生理鹽水后進(jìn)行灌胃，模型組與對(duì)照組接受等體積生理鹽水灌胃，連續(xù)給藥14 d。

1.3 觀察指標(biāo) ⑴空腹血糖。給藥1、4、10、14 d后，采集大鼠尾尖血2 mL，應(yīng)用血糖分析儀檢測(cè)大鼠空腹血糖水平。⑵血脂。給藥14 d后，采集大鼠腹主動(dòng)脈血2 mL，離心（3 000 r/min，10 min）取上層血清，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平。⑶腸道菌群。給藥14 d后，采集大鼠糞便5 mg，利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測(cè)嗜酸乳酸桿菌、長雙歧桿菌、柔嫩梭菌及糞腸球菌數(shù)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用Excel 2000與SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料經(jīng)S-W法檢驗(yàn)符合正態(tài)分布且方差齊，以（ x ±s）表示，多組間比較采取單因素方差分析，組內(nèi)兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組大鼠空腹血糖水平比較 給藥1～14 d后，對(duì)照組大鼠空腹血糖水平較平穩(wěn)，模型組大鼠空腹血糖呈升高趨勢(shì)，低劑量組、高劑量組大鼠空腹血糖均呈降低趨勢(shì)；與對(duì)照組比，給藥1～14 d后模型組、低劑量組、高劑量組大鼠空腹血糖均升高；與模型組比，給藥4、10、14 d后低劑量組、高劑量組大鼠空腹血糖均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）；而給藥1～14 d后低劑量組、高劑量組大鼠空腹血糖及給藥1 d后模型組、低劑量組、高劑量組大鼠空腹血糖比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），見表1。

2.2 4組大鼠血脂指標(biāo)比較 給藥14 d后，與對(duì)照組比，模型組、低劑量組、高劑量組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均升高，血清HDL-C水平均降低；與模型組比，低劑量組、高劑量組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均降低，且高劑量組均低于低劑量組，血清HDL-C水平均升高，且高劑量組均高于低劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見表2。

2.3 4組大鼠腸道菌群數(shù)量比較 給藥14 d后，與對(duì)照組比，模型組、低劑量組、高劑量組大鼠嗜酸乳酸桿菌、長雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量均減少，糞腸球菌數(shù)量均增加；與模型組比，GDM與高劑量組大鼠嗜酸乳酸桿菌、長雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量均增加，且高劑量組高于低劑量組，糞腸球菌數(shù)量均減少，且高劑量組低于低劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見表3。

3 討論

妊娠期糖脂代謝異常如GDM、肥胖等均會(huì)增加新生兒高膽紅素血癥、巨大兒等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。臨床常采用胰島素、二甲雙胍治療GDM，但長期應(yīng)用會(huì)降低胰島素敏感性，產(chǎn)生胰島素抵抗，還會(huì)影響患者糖脂代謝，導(dǎo)致新生兒肥胖[5]。

本研究結(jié)果顯示，給藥1～14 d后，模型組大鼠空腹血糖呈升高趨勢(shì)，低劑量組與高劑量組大鼠空腹血糖均呈降低趨勢(shì)，與模型組比，給藥4～14 d后低劑量組與高劑量組大鼠空腹血糖均降低，給藥14 d后，與模型組比，低劑量組與高劑量組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均降低，血清HDL-C水平均升高，且高劑量組改善幅度均大于低劑量組。這提示益生菌補(bǔ)劑可改善GDM大鼠血糖、血脂水平，且高劑量的改善作用更佳。分析其原因?yàn)椋焉锲跁?huì)引起機(jī)體胰島素的敏感性下降，促使胰島素分泌增加，最終會(huì)引起胰島β細(xì)胞障礙，導(dǎo)致機(jī)體血糖水平逐漸升高，同時(shí)妊娠會(huì)引起體內(nèi)激素變化，誘發(fā)慢性炎癥反應(yīng)，影響機(jī)體代謝[6]。益生菌補(bǔ)劑可調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu)，增加有益菌的數(shù)量，抑制有害菌生長，并抑制炎癥因子釋放，減輕胰島β細(xì)胞損傷，進(jìn)而調(diào)節(jié)糖脂代謝；且益生菌的代謝產(chǎn)物能夠增強(qiáng)腸道上皮細(xì)胞的功能，修復(fù)腸道黏膜屏障，還能影響神經(jīng)遞質(zhì)釋放，進(jìn)而調(diào)節(jié)血糖、血脂等代謝[7-8]。本研究中，給藥14 d后，與模型組比，低劑量組與高劑量組大鼠腸道嗜酸乳酸桿菌、長雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量均增加，糞腸球菌數(shù)量均減少，且高劑量組改善幅度均大于低劑量組，這提示益生菌補(bǔ)劑可調(diào)節(jié)GDM大鼠腸道菌群，且高劑量的改善作用更佳。分析其原因?yàn)?，GDM會(huì)破壞腸道菌群結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致有害菌數(shù)量增多，引起腸道通透性變化，導(dǎo)致內(nèi)毒素進(jìn)入血液引發(fā)炎癥反應(yīng)，間接影響機(jī)體代謝，而益生菌補(bǔ)劑可通過增加腸道內(nèi)益生菌的數(shù)量，調(diào)節(jié)菌群微生態(tài)，進(jìn)而促進(jìn)有益菌生長，減少內(nèi)毒素，有助于改善糖脂代謝[9-10]。

綜上，益生菌補(bǔ)劑具有抑制GDM大鼠血糖血脂升高的作用，調(diào)節(jié)腸道菌群，且以高劑量為佳。但本研究未明確對(duì)血糖、血脂代謝的作用機(jī)制，后續(xù)有待深入研究。

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基金項(xiàng)目：海南省衛(wèi)生健康行業(yè)科研項(xiàng)目（編號(hào)：22A200299）

作者簡介：肖淑，大學(xué)本科，副主任醫(yī)師，研究方向：妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓。