梓醇-川芎嗪方對SAMP8小鼠認知功能的改善作用及機制

摘要 目的：探討梓醇-川芎嗪方（CT）對快速老化（SAMP8）小鼠認知功能的改善作用及其機制。方法：將50只14周齡SAMP8小鼠隨機分為模型（Model）組、梓醇-川芎嗪方低劑量（CT-L）組、中劑量（CT-M）組、高劑量（CT-H）組、鹽酸多奈哌齊組（DH組），10只14周齡快速衰老模型對照（SAMR1）小鼠作為對照（Control）組。Control組及Model組均以生理鹽水灌胃，各用藥組以相應藥物灌胃，每日1次，連續(xù)8周。采用自主活動實驗、筑巢行為實驗、新物體辨別實驗、Morris水迷宮實驗等行為學觀察。行為學觀察后，檢測各組小鼠海馬組織超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、β-淀粉樣蛋白（Aβ）_1-42、p-Tau、核因子-κB（NF-κB）p65、核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3（NLRP3）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）及活性氧（ROS）水平，檢測各組小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS含量。結果：與Model組比較，DH、CT-M、CT-H組小鼠自主活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、對新物體辨別時間增加、新舊物體辨別時間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、探索新物體辨別時間明顯增加、新舊物體辨別時間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、探索新物體辨別時間增加、新舊物體辨別時間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、探索新物體辨別時間增加、新舊物體辨別時間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與Model組比較，DH組和CT-M、CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。結論：梓醇-川芎嗪方可能通過改善氧化/還原失衡狀態(tài)，抑制腦內炎癥反應從而改善SAMP8小鼠的認知功能障礙，且其量效關系呈正相關。

關鍵詞 阿爾茨海默病；氧化應激；梓醇-川芎嗪方；神經炎癥；實驗研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.21.009

Effect of Catalpol-Tetramethylpyrazine Prescription on Cognitive Function of SAMP8 Mice

DENG Chujun¹， MENG Shengxi¹， YANG Ruoyu²， CHEN Huize¹， YANG Ran²， YU Jialuo²， ZHANG Bochao²

1. Shanghai Sixth People′s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine， Shanghai 200233， China; 2. Shanghai Jiao Tong University School of Medicine， Shanghai 200025， China

Corresponding Author MENG Shengxi， E-mail： mengsx163@163.com

Abstract Objective：To explore the effect of catalpol-tetramethylpyrazine（CT） prescription on cognitive function in SAMP8 mice.Methods：Fifty 14-week-old SAMP8 mice were randomly divided into Model group，low dose CT prescription（CT-L） group，medium dose CT prescription（CT-M） group，high dose CT prescription（CT-H） group and donepezil hydrochloride（DH） group.Ten 14-week-old SAMR1 mice were chosen as Control group.The Control group and Model group were both gavaged with physiological saline，and each medication group was gavaged with corresponding drugs once a day for 8 consecutive weeks.Autonomous activity experiment，nesting behavior experiment，new object recognition experiment，and morris water maze experiment were adopted.After behavioral observations，superoxide dismutase（SOD），glutathione（GSH），β-amyloid protein（Aβ） 1-42，p-Tau，nuclear factor-κB（NF-κB） p65，nucleotide-bound oligomerized domain-like receptor protein 3（NLRP3），tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-1β（IL-1β），and reactive oxygen species（ROS） levels were detected in the hippocampus of each group.The contents of NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in serum of each group were detected.Results：Compared with Model group，the number of autonomous activities，nesting behavior scores，the time to distinguish new objects increased，the ratio of time to distinguish new，and old objects increased，the escape latency significantly shortened，the cross-platform number and residence time in the target quarter increased in DH group，CT-M group and CT-H group（P＜0.05）.Compared with CT-L group，the number of free activities，nesting behavior score increased，the identification time of exploring new objects significantly increased，the ratio of old and new object identification time increased，the escape latency shortened，the cross-platform number and the residence time in the target quarter increased in CT-M group，CT-H group，DH group（P＜0.05）.Compared with the CT-M group，the number of free activities，the score of nesting behavior，the identification time of exploring new objects，the ratio of old and new objects identification time，the escape latency period，the cross-platform number，and the target quadrant residence time of mice in the CT-H group increased（P＜0.05）.Compared with DH group，the number of free activities increased，nesting behavior score，identification time of exploring new objects increased，ratio of old and new object identification time increased，escape latency decreased significantly，cross-platform frequency，and target quadrant residence time increased in CT-H group（P＜0.05）.Compared with Model group，SOD and GSH levels in hippocampus of mice in DH group，CT-M group and CT-H group increased，while Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS levels decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Compared with CT-L group，the levels of SOD and GSH in hippocampus of mice in CT-M group，CT-H group and DH group increased，while the levels of Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β and ROS decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Compared with the CT-M group，the levels of SOD and GSH in the hippocampus of mice in the CT-H group increased，and the levels of Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Compared with DH group，the levels of SOD and GSH in hippocampus of mice in CT-H group increased，and the levels of Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Conclusion：CT prescription could improve the imbalance between oxidation and reduction，inhibit inflammation in the brain，and thus improve cognitive impairment of SAMP8 mice，and the dose-effect relationship is positive.

Keywords Alzheimer′s disease; oxidative stress; catalpol-tetramethylpyrazine prescription; neuroinflammation; experimental study

基金項目 上海市第六人民醫(yī)院“腦科學與類腦研究”腦項目功能和針灸腦圖譜光聲成像技術應用研究（No.ynnkxyb202415）；上海市第六人民醫(yī)院醫(yī)療服務能級提升工程臨床醫(yī)療技術骨干隊伍培育項目（No.20220213）；上海市第六人民醫(yī)院院級課題（No.ynxg202218）；上海交通大學醫(yī)學院“大學生創(chuàng)新訓練計劃”項目（No.1723Z002，1824011）；上海市進一步加快中醫(yī)藥傳承創(chuàng)新發(fā)展三年行動計劃項目（2021年—2023年）［No.ZY（2021-2023）-0205-04］；華東片區(qū)及市級中醫(yī)專科專病聯(lián)盟建設項目［No.ZY（2021-2023）-0302］

作者單位 1.上海交通大學醫(yī)學院附屬第六人民醫(yī)院（上海200233）；2.上海交通大學醫(yī)學院（上海 200025）

通訊作者 孟勝喜，E-mail：mengsx163@163.com

引用信息 鄧楚珺，孟勝喜，楊若瑜，等.梓醇-川芎嗪方對SAMP8小鼠認知功能的改善作用及機制［J］.中西醫(yī)結合心腦血管病雜志，2024，22（21）：3907-3912.

阿爾茨海默?。ˋlzheimer′s disease，AD）作為一種神經退行性疾病，以漸進性認知功能障礙和行為損害為主要臨床表現(xiàn)^［1］。隨著全球老齡化的不斷加劇，AD患病率也在逐年激增^［2-3］。這不僅給AD病人及其家庭帶來沉重的經濟和精神負擔，也給社會和國家?guī)砭薮髩毫?sup>［4^］。梓醇-川芎嗪（Catalpol-Tetramethylpyrazine prescription，CT）方是本課題組經過反復篩選和驗證出來治療AD的中藥組分復方^［5-6］。本實驗研究梓醇-川芎嗪方對快速老化（SAMP8）小鼠認知功能的作用并闡明其可能的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物

梓醇-川芎嗪方由梓醇4.274 mg和川芎嗪1.554 mg組成。梓醇，純度（HPLC）≥98.0%，上海滬崢生物科技有限公司提供，批號：DSTDZ000502。川芎嗪，純度（HPLC）≥98.0%，由上海滬崢生物科技有限公司提供，批號：DST200602-032。鹽酸多奈哌齊（安理申），衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司，國藥準字H20050978，批號：1705080，規(guī)格：每片5 mg。

1.2 儀器與試劑

小鼠自由活動箱（北京諾達思信息技術有限責任公司），筑巢行為實驗裝置、新物體識別實驗裝置（深圳瑞沃德公司），實驗Morris水迷宮（上海吉量軟件科技有限公司生產，型號：JLBehv-MWMG-1），記錄系統(tǒng)（美國Smart3.0公司），攝像頭（日本Sony公司）。超氧化物歧化酶（SOD）、還原型谷胱甘肽（GSH）、β-淀粉樣蛋白（amyloid-β protein，Aβ）_1-42、p-Tau、核因子-κB（NF-κB）p65、核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3（NLRP3）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）及活性氧（ROS）等酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測試劑盒（北京普利萊基因技術有限公司）。

1.3 實驗動物及分組

14周齡無特定病原體（SPF）級SAMP8小鼠50只，體質量（30±5）g；14周齡SPF級同源雄性快速衰老模型鼠對照（SAMR1）小鼠10只，體質量（30±5）g。上述SAMP8與SAMR1小鼠均購自至善（北京）健康醫(yī)學研究院有限公司，許可證號SCXX（京）2016-0010。小鼠購進后，飼養(yǎng)在上海吉凱基因化學技術有限公司動物房，飼養(yǎng)至24周齡。分別單籠喂養(yǎng)，光照/黑暗：12 h/12 h，自由飲水和進食，溫度（22±2）℃，相對濕度（60±5）%。所有動物飼養(yǎng)和實驗操作程序均符合上海市第六人民醫(yī)院實驗動物福利倫理委員會相關規(guī)定，并經上海市第六人民醫(yī)院動物倫理委員會批準，編號：2023-0463。SAMR1設為對照組（Control），SAMP8按隨機數(shù)字法隨機分為模型（Model）組、梓醇-川芎嗪方低劑量（CT-L）組、梓醇-川芎嗪方中劑量（CT-M）組、梓醇-川芎嗪方高劑量（CT-H）組、鹽酸多奈哌齊（DH）組，每組10只。

1.4 實驗動物干預

CT-L組、CT-M組、CT-H組分別對應給予低劑量、中劑量、高劑量梓醇-川芎嗪方灌胃，DH組以鹽酸多奈哌齊（安理申）溶液灌胃。梓醇-川芎嗪方低、中、高劑量及鹽酸多奈哌齊溶液給藥濃度，依據(jù)人和動物體表面積折算系數(shù)換算^［7］，計算結果分別為梓醇-川芎嗪方25、50、100 mg/kg灌胃。DH組小鼠每天給予鹽酸多奈哌齊5 mg/kg灌胃。Control組、Model組小鼠給予等體積生理鹽水灌胃。各組小鼠均每天1次，連續(xù)灌胃8周。

1.5 檢測指標

1.5.1 行為學觀察

干預前后，對各組小鼠進行行為學觀察。

1.5.1.1 自主活動實驗

觀察各組小鼠自由活動次數(shù)。自由活動箱（長×寬×高＝0.30 m×0.30 m×0.45 m），箱體底部和側壁均不透光，頂端安置有紅外攝像機。小鼠置于箱中即開始實驗，小鼠自由活動10 min后開始記錄，采集30 min內各組小鼠自由活動次數(shù)。以自由活動次數(shù)代表小鼠自主活動能力。

1.5.1.2 筑巢行為實驗

觀察各組小鼠社會行為和日?；顒幽芰?。筑巢行為實驗更關注小鼠日?；顒雍蛨?zhí)行功能^［8］。小鼠分成單籠飼養(yǎng)，適應48 h，每籠中換入厚度為1 cm的玉米芯墊料，12 h后放入方形無味薄紙片16張（邊長4 cm），18 h后按照4分法對筑巢質量進行評分。1分：紙片無規(guī)則地分散在籠子中，未被撕咬；2分：紙片較松散地聚集于籠子一側，但無成型的巢，無明顯的撕咬痕跡；3分：紙片聚攏折疊成型，但只有較平的巢，無明顯的撕咬痕跡；4分：紙片聚攏折疊成較深的巢，并被撕咬成小塊。

1.5.1.3 新物體辨別實驗

新物體識別實驗通過記錄小鼠對不同物體探索時間的區(qū)別，從而檢測小鼠的非空間記憶能力^［9］。操作方法^［10］：裝置要求隔音、避光，以長×寬×高＝0.25 m×0.25 m×0.40 m預備3個物體，其中2個物體為顏色形狀相同的立方體，另1個物體為與前2個物體不一致的圓錐體。測試裝置上方采用60 W白光燈照射，消除陰影。第1天將小鼠置入盒中央，適應活動5 min；第2天在盒內置入2個顏色形狀完全相同的物體，位置固定，小鼠背對物體置于裝置中，探索10 min；第3天取出相同物體中的1個物體，并于相同位置放入顏色外觀不同的物體，小鼠背對物體置于裝置中，探索10 min。記錄不同階段探索新物體辨別時間，并計算新舊物體辨別時間比值。新舊物體辨別時間比值＝探索新物體時間/探索物體總時間。

1.5.1.4 Morris水迷宮實驗

實驗前在水池壁上標注不同標記作為參照物。水池均分為4個象限，平臺始終置于第1象限的中間。小鼠頭朝池壁置于任一象限水中，逃避潛伏期為小鼠找到平臺所用時間。引導其學習上臺并停留10 s。每次學習上限90 s，如果未能登陸平臺，記為90 s，每天間歇性訓練3次，連續(xù)訓練5 d。第7天，移去平臺，開始空間探索。小鼠從第3象限置于水中，記錄逃避潛伏期和90 s內小鼠跨平臺次數(shù)以及目標象限停留時間。

1.5.2 生化檢驗

行為學觀察實驗結束后，采集各組小鼠的外周血，血液在室溫下靜置2 h，血清完全析出后，4 ℃，3 000 r/min，離心20 min，然后收集上清。取各組小鼠海馬組織，海馬組織按質量/體積比1∶9加入磷酸緩沖鹽溶液（phosphate buffer saline，PBS），組織研磨儀勻漿，勻漿液4 ℃、12 000 r/min離心10 min，取上清液。

1.5.2.1 檢測各組小鼠海馬組織中SOD、GSH、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平

取小鼠腦組織，根據(jù)所取組織質量，加入PBS（1 g組織樣品加入9 mL PBS）制成10%腦組織勻漿。然后按照ELISA試劑盒說明書檢測各組小鼠海馬組織中SOD、GSH、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。采用酶標儀檢測波長450 nm和412 nm處A值，繪制標準曲線。根據(jù)標準曲線和A值計算海馬組織中SOD、GSH、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。

1.5.2.2 檢測各組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平

通過特異性ELISA試劑盒分別測定各組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。

1.6 統(tǒng)計學處理

采用GraphPad Prism 9.0軟件進行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標準差（xˉ±s）表示，采用Levene進行方差齊性檢驗，多組間數(shù)據(jù)比較采用One-way ANOVA，進一步采用LSD-t檢驗對有統(tǒng)計意義的數(shù)據(jù)進行兩兩比較。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 各組小鼠自主活動次數(shù)和筑巢行為評分

與Control組比較，Model組小鼠自由活動次數(shù)、筑巢行為評分降低（P＜0.05）。與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠自由活動次數(shù)、筑巢行為評分明顯升高（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高（P＜0.05）。詳見表1。

2.2 各組小鼠新物體辨別時間及新舊物體辨別時間比值比較

與Control組比較，Model組小鼠探索新物體辨別時間減少，且新舊物體辨別時間比值降低（P＜0.05）。與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠探索新物體辨別時間增加，且新舊物體辨別時間比值升高（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠探索新物體辨別時間增加，且新舊物體辨別時間比值升高（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠探索新物體辨別時間增加，且新舊物體辨別時間比值升高（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠探索新物體辨別時間明顯增加，且新舊物體辨別時間比值升高（P＜0.05）。詳見表2。

2.3 各組小鼠Morris水迷宮實驗學習記憶能力比較

與Control組比較，Model組小鼠逃避潛伏期延長，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間減少（P＜0.05）；與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組逃避潛伏期縮短、跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。詳見表3。

2.4 各組小鼠海馬組織SOD活性及GSH水平

與Control組比較，Model組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平降低（P＜0.05）。與Model組比較，DH組、CT-M組、CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。詳見表4。

2.5 各組小鼠海馬組織Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平比較

與Control組比較，Model組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平升高（P＜0.05）。與Model組比較，DH組、CT-M組、CT-H組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。詳見表5。

2.6 各組小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平比較

與Control組比較，Model組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS含量升高（P＜0.05）。與Model組比較，DH組、CT-M組、CT-H組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β、ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。詳見表6。

3 討 論

氧化應激產生的大量ROS及其氧化損傷在AD的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用^［11］。氧化應激被認為是AD中神經元損傷的主要原因^［12］。在AD中，抗氧化酶的活性受到抑制，氧化與抗氧化之間的平衡被打破，從而導致氧化損傷的無限制積累，最終引起細胞損傷^［13］。

本研究結果顯示，與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時間增加，新舊物體辨別時間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時間增加，新舊物體辨別時間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時間增加，新舊物體辨別時間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時間增加，新舊物體辨別時間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標象限停留時間增加（P＜0.05）。表明梓醇-川芎嗪方可以改善SAMP8小鼠的認知功能，且其作用與劑量呈正相關。

本研究結果顯示，與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β、ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β、ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平均下降，小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。表明梓醇-川芎嗪方可以升高SAMP8小鼠海馬組織中SOD及GSH水平，降低小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平，降低小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。

綜上所述，梓醇-川芎嗪方可能通過改善氧化/還原失衡狀態(tài)，抑制腦內炎癥反應從而改善SAMP8小鼠的認知功能障礙，且其量效關系呈正相關。

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（收稿日期：2023-05-04）

（本文編輯 鄒麗）