系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者免疫指標變化及與狼瘡性腎炎的關系

[摘要]"目的"分析系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic"lupus"erythematosus，SLE）患者外周血免疫指標變化，并探討其與狼瘡性腎炎（lupus"nephritis，LN）的相關性。方法"回顧性選取2021年11月至2023年10月于寧波大學附屬李惠利醫(yī)院就診的109例SLE患者納入SLE組，根據(jù)是否診斷為LN將SLE組患者分為LN組（56例）和非LN組（53例），選取同期在醫(yī)院體檢的健康者32人納入健康對照組。檢測研究對象的免疫指標，收集患者的臨床資料及系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動指數(shù)2000（systemic"lupus"erythematosus"disease"activity"index"2000，SLEDAI-2000）評分。采用Spearman相關法分析SLE患者SLEDAI-2000評分與免疫指標的相關性；采用多因素Logistic回歸分析SLE患者發(fā)生LN的影響因素。結(jié)果"SLE組患者的總淋巴細胞計數(shù)、T細胞計數(shù)、自然殺傷細胞（natural"killer"cell，NK細胞）計數(shù)、B細胞計數(shù)、輔助性T細胞（helper"T"cell，Th細胞）比例、NK細胞比例、B細胞比例、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）M、補體C3、補體C4均顯著低于健康對照組（Plt;0.05），T細胞比例、抑制性T細胞（suppressor"T"cell，Ts細胞）比例、抗雙鏈DNA抗體IgG均顯著高于健康對照組（Plt;0.05）。SLE組患者的SLEDAI-2000評分與NK細胞計數(shù)、B細胞計數(shù)、NK細胞比例均呈負相關（Plt;0.05），與T細胞比例、Ts細胞比例均呈正相關（Plt;0.05）。LN組患者的NK細胞計數(shù)、B細胞計數(shù)、NK細胞比例、B細胞比例均顯著低于非LN組（Plt;0.05），T細胞比例、抗雙鏈DNA抗體IgG、SLEDAI-2000評分均顯著高于非LN組（Plt;0.05）。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，NK細胞計數(shù)、SLEDAI-2000評分均是SLE患者發(fā)展為LN的影響因素（Plt;0.05）。結(jié)論"免疫指標具備評估SLE患者疾病狀態(tài)的能力，NK細胞計數(shù)下降、SLEDAI-2000評分升高的SLE患者更容易發(fā)展為LN。

[關鍵詞]"系統(tǒng)性紅斑狼瘡；免疫指標；狼瘡性腎炎；影響因素；相關性

[中圖分類號]"R593.241""""""[文獻標識碼]"A""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.22.010

Changes"of"immune"indicators"in"patients"with"systemic"lupus"erythematosus"and"their"correlation"with"lupus"nephritis

ZHANG"Riyi，"MU"Yinyu，"ZOU"Songyan，"XIE"Fuyi

Department"of"Laboratory，"Affiliated"Lihuili"Hospital"of"Ningbo"University，"Ningbo"315046，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"analyze"the"changes"of"immune"indicators"in"patients"with"systemic"lupus"erythematosus"（SLE）"and"explore"their"correlation"with"lupus"nephritis"（LN）."Methods"A"total"of"109"SLE"patients"treated"in"Affiliated"Lihuili"Hospital"of"Ningbo"University"from"November"2021"to"October"2023"were"retrospectively"included"in"SLE"group，"SLE"patients"were"divided"into"LN"group"（56"cases）"and"non-LN"group"（53"cases）"according"to"whether"they"were"diagnosed"with"LN"or"not."32"healthy"people"who"underwent"physical"examination"in"the"hospital"during"the"same"period"were"included"in"healthy"control"group."The"immune"indicators"of"subjects"were"detected，"and"the"clinical"data"and"the"scores"of"systemic"lupus"erythematosus"disease"activity"index"2000"（SLEDAI-2000）"were"collected."Spearman"correlation"method"was"used"to"analyze"correlation"between"SLEDAI-2000"scores"and"immune"indicators"in"SLE"patients."Multivariate"Logistic"regression"was"used"to"analyze"the"influencing"factors"of"LN"in"SLE"patients."Results"The"total"lymphocyte"count，"T"cell"count，"natural"killer"（NK）"cell"count，"B"cell"count，"helper"T"（Th）"cell"proportion，"NK"cell"proportion，"B"cell"proportion，"immunoglobulin"（Ig）"M，"complement"C3"and"complement"C4"in"SLE"group"were"significantly"lower"than"those"in"healthy"control"group"（Plt;0.05），"T"cell"proportion，"suppressor"T"（Ts）"cell"proportion"and"anti-double-stranded"DNA"antibody"IgG"were"significantly"higher"than"those"in"healthy"control"group"（Plt;0.05）."SLEDAI-2000"scores"in"SLE"group"were"negatively"correlated"with"NK"cell"count，"B"cell"count"and"NK"cell"proportion"（Plt;0.05），"and"were"positively"correlated"with"T"cell"proportion"and"Ts"cell"proportion"（Plt;0.05）."The"NK"cell"count，"B"cell"count，"NK"cell"proportion"and"B"cell"proportion"in"LN"group"were"significantly"lower"than"those"in"non-LN"group"（Plt;0.05），"T"cell"proportion，"anti-double-stranded"DNA"antibody"IgG"and"SLEDAI-2000"scores"were"significantly"higher"than"those"in"non-LN"group"（Plt;0.05）."Multivariate"Logistic"regression"analysis"showed"that"NK"cell"count"and"SLEDAI-2000"scores"were"all"factors"influencing"the"development"of"LN"in"SLE"patients"（Plt;0.05）."Conclusion"Immune"indicators"have"the"ability"to"evaluate"the"disease"status"of"SLE"patients."SLE"patients"with"decreased"NK"cell"count"and"increased"SLEDAI-2000"scores"are"more"likely"to"develop"LN.

[Key"words]"Systemic"lupus"erythematosus;"Immune"indicator;"Lupus"nephritis;"Influence"factor;"Correlation

近年來，系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic"lupus"erythematosus，SLE）在自身免疫性疾病中的發(fā)病率居高不下，其病因復雜，以女性多見，患者體內(nèi)常有大量自身抗體，造成皮膚、腎臟、關節(jié)、神經(jīng)系統(tǒng)等損害[1]。全世界每年SLE的發(fā)病率為5.14/10萬，中國SLE發(fā)病率為8.57/10萬[2]。狼瘡性腎炎（lupus"nephritis，LN）是SLE常見的并發(fā)癥，若不能得到及時診療，10年內(nèi)5%～30%的患者可發(fā)展為終末期腎病[3]。目前臨床上常采用免疫指標監(jiān)測SLE病情，如淋巴細胞亞群、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）、補體C3、補體C4、抗核抗體譜等，已有研究表明淋巴細胞亞群的變化與SLE患者的發(fā)生發(fā)展密切相關[4]。本研究深入挖掘SLE患者外周血免疫指標變化，并探討這些變化與SLE的聯(lián)系，旨在為SLE的早期診斷、治療及LN的有效管理提供理論依據(jù)，為患者提供個體化、精準的醫(yī)療方案。

1nbsp;"資料與方法

1.1""研究對象

回顧性選取2021年11月至2023年10月于寧波大學附屬李惠利醫(yī)院就診的109例SLE患者納入SLE組，其中男6例，女103例，年齡19～49歲，平均（36.50±7.79）歲。納入標準：①年齡18～50歲；②男女不限；③符合《2020中國系統(tǒng)性紅斑狼瘡診療指南》[5]中SLE的診斷指標。排除標準：①合并其他自身免疫性疾??；②合并其他部位惡性腫瘤、嚴重高血壓、心肺疾病者；③臨床資料不完整者。選取同期在醫(yī)院體檢的健康者32人納入健康對照組，其中男4人，女28人，年齡18～50歲，平均（38.81±8.24）歲。兩組研究對象的性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）。根據(jù)是否符合LN診斷指標[6]，將SLE組患者分為LN組和非LN組，LN組患者56例，其中男4例，女52例，年齡19～49歲，平均（36.09±7.86）歲；非LN組患者53例，其中男2例，女51例，年齡19～48歲，平均（36.92±7.76）歲。LN組和非LN組患者的性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）。本研究經(jīng)寧波大學附屬李惠利醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準（倫理審批號：李惠利醫(yī)院倫審2023研第346號）。

1.2""主要儀器和試劑

淋巴細胞亞群采用流式細胞儀（BD"FACS"CantoII，美國）檢測，試劑為美國BD公司的淋巴細胞亞群試劑和BD"trucount絕對計數(shù)管；IgG、IgM、IgA、補體C3、補體C4采用全自動蛋白分析儀（西門子BNII，德國）檢測，試劑為德國西門子公司配套試劑；抗雙鏈DNA抗體IgG采用化學發(fā)光免疫分析儀（iFlash"3000，深圳市亞輝龍）檢測，試劑為深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司配套抗雙鏈DNA抗體IgG測定試劑盒。

1.3""方法

1.3.1""淋巴細胞亞群檢測""采集研究對象清晨空腹靜脈血2ml，抗凝充分混勻后室溫放置備用。取1支BD"trucount絕對計數(shù)管并編號，加入20μl淋巴細胞亞群檢測試劑，接著加入50μl混勻的抗凝全血，振蕩混勻后室溫避光孵育15min。然后加入450μl"BD"FACS流式細胞分析用溶血素，振蕩混勻后室溫避光孵育15min。孵育結(jié)束后充分混勻上機檢測。

1.3.2""其他免疫指標檢測""采集研究對象清晨空腹肘靜脈血5ml，3500轉(zhuǎn)/min離心5min，吸取上層血清，在8h內(nèi)完成IgG、IgM、IgA、補體C3、補體C4、抗雙鏈DNA抗體IgG的檢測。

1.4""評價指標

收集所有患者的臨床資料，包括年齡、性別、SLE病程、系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動指數(shù)2000（systemic"lupus"erythematosus"disease"activity"index"2000，SLEDAI-2000）[7]、淋巴細胞亞群、IgG、IgM、IgA、補體C3、補體C4、抗雙鏈DNA抗體IgG水平。

1.5""統(tǒng)計學方法

采用SPSS"26.0軟件進行統(tǒng)計學分析。計數(shù)資料以例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗。所有數(shù)據(jù)均使用Shapiro-Wilk法進行正態(tài)檢驗，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，不符合正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M（Q1，Q3）]表示，比較使用Mann-Whitney"U檢驗；采用Spearman相關法分析SLE患者SLEDAI-2000評分與免疫指標的相關性；采用多因素Logistic回歸分析SLE患者發(fā)生LN的影響因素。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2""結(jié)果

2.1""SLE組與健康對照組的免疫指標比較

兩組研究對象的抑制性T細胞（suppressor"T"cell，Ts細胞）計數(shù)、輔助性T細胞（helper"T"cell，Th細胞）計數(shù)、IgG、IgA比較差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）；SLE組患者的總淋巴細胞計數(shù)、T細胞計數(shù)、自然殺傷細胞（natural"killer"cell，NK細胞）計數(shù)、B細胞計數(shù)、Th細胞比例、NK細胞比例、B細胞比例、IgM、補體C3、補體C4均顯著低于健康對照組（Plt;0.05），T細胞比例、Ts細胞比例、抗雙鏈DNA抗體IgG均顯著高于健康對照組（Plt;0.05），見表1。

2.2""SLE組患者SLEDAI-2000評分與免疫指標的相關性

SLE組患者的SLEDAI-2000評分與NK細胞計數(shù)、B細胞計數(shù)、NK細胞比例均呈負相關（Plt;0.05），與T細胞比例、Ts細胞比例均呈正相關（Plt;0.05），見表2。

2.3""LN組與非LN組患者的免疫指標比較

兩組患者的總淋巴細胞計數(shù)、T細胞計數(shù)、Ts細胞計數(shù)、Th細胞計數(shù)、Ts細胞比例、Th細胞比例、IgG、IgM、IgA、補體C3、補體C4比較差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）；LN組患者的NK細胞計數(shù)、B細胞計數(shù)、NK細胞比例、B細胞比例均顯著低于非LN組（Plt;0.05）；T細胞比例、抗雙鏈DNA抗體IgG、SLEDAI-2000評分均顯著高于非LN組（Plt;0.05），見表3。

2.4""SLE患者發(fā)展為LN的影響因素分析

以SLE患者是否發(fā)展為LN為因變量，將NK細胞計數(shù)、B細胞計數(shù)、T細胞比例、NK細胞比例、B細胞比例、抗雙鏈DNA抗體IgG、SLEDAI-2000評分（均為連續(xù)變量）納入多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示NK細胞計數(shù)、SLEDAI-2000評分是SLE患者發(fā)展為LN的影響因素（Plt;0.05），見表4。

3""討論

SLE是一種復雜的自身免疫性疾病，免疫系統(tǒng)失調(diào)是SLE發(fā)生發(fā)展的核心原因之一。如何有效監(jiān)測患者的免疫系統(tǒng)和評估患者的疾病狀態(tài)，對SLE患者的預后有著重要意義。

淋巴細胞功能異常是SLE患者疾病發(fā)展中的一個重要方面?；颊唧w內(nèi)淋巴細胞異?；罨?，導致各淋巴細胞亞群的比例失調(diào)，產(chǎn)生大量自身抗體及炎癥介質(zhì)[7-8]。這些抗體介導免疫復合物形成、沉積激活補體系統(tǒng)，導致大量補體C3、C4的消耗，從而引起患者多器官損傷[9-10]。因此，臨床上常應用多種免疫指標評估SLE患者的疾病狀態(tài)。本研究發(fā)現(xiàn)SLE組患者的補體C3、補體C4、總淋巴細胞計數(shù)、T細胞計數(shù)、Th細胞比例均顯著低于健康對照組，抗雙鏈DNA抗體IgG、T細胞比例、Ts細胞比例均顯著高于健康對照組，與既往研究相符[11-12]，說明免疫指標的檢測有利于監(jiān)測SLE患者的疾病進展。

SLEDAI-2000評分是評估SLE活動程度的臨床工具，可提供一個客觀的、量化的方式衡量患者的疾病活動水平[13]。本研究評估SLE患者的SLEDAI-2000評分與免疫指標的相關性，發(fā)現(xiàn)患者的SLEDAI-2000評分與NK細胞計數(shù)、B細胞計數(shù)、NK細胞比例呈負相關，與T細胞比例、Ts細胞比例呈正相關。B細胞的過度活化和NK細胞的激活可通過產(chǎn)生多種細胞因子、直接殺傷細胞、呈遞抗原及參與免疫調(diào)控等機制導致腎臟損傷[14-15]。本研究發(fā)現(xiàn)LN組患者的NK細胞計數(shù)、B細胞計數(shù)、NK細胞比例、B細胞比例均低于非LN組，與張羽等[16]的研究不符，可能是由于兩個研究納入LN患者的病程、病理類型等存在差異所致。

LN是SLE患者最常見的腎臟并發(fā)癥，通常表現(xiàn)為腎小球炎癥、蛋白尿、血尿和腎功能損害[17]。本研究結(jié)果顯示NK細胞計數(shù)、SLEDAI-2000評分均是SLE患者發(fā)展為LN的影響因素，提示NK細胞計數(shù)下降、SLEDAI-2000評分升高可作為SLE患者發(fā)生LN的評估因素。

綜上所述，免疫指標有助于評估SLE患者的疾病狀態(tài)，可為臨床制定個性化的治療方案提供指導。NK細胞計數(shù)下降、SLEDAI-2000評分升高的SLE患者更容易發(fā)展為LN。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2024–04–17）

（修回日期：2024–07–07）