UPLC指紋圖譜與一測多評法結(jié)合化學模式識別分析的扣子七質(zhì)量控制研究

〔摘要〕 目的 建立扣子七的超高效液相（ultra high performance liquid chromatography， UPLC）指紋圖譜，同時建立一測多評法（quantitative analysis of multi-components by single marker， QAMS）對8個化學成分進行含量測定，并結(jié)合化學模式識別分析對扣子七進行質(zhì)量評價。方法 采用Waters CORTECS UPLC T3色譜柱，以0.1%磷酸水-乙腈溶液為流動相進行梯度洗脫，柱溫 30 ℃，流速0.3 mL·min-1，建立扣子七 UPLC 指紋圖譜，進行聚類分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判別分析，并以竹節(jié)參皂苷Ⅳa為內(nèi)標，建立人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1和金盞花苷E的相對校正因子，計算8種成分的含量，并與外標法測定結(jié)果進行比較，以驗證 QAMS 方法的準確性、重復性及可行性。結(jié)果 14批指紋圖譜共確定12個共有峰，指認人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1和金盞花苷E 8種主要特征成分。14批樣品圖譜的相似度在0.793～0.993之間，聚類分析可將14批樣品分為4類，主成分分析得到4個主成分，累計方差貢獻率為83.20%，正交偏最小二乘法-判別分析篩選出5個差異質(zhì)量標志物。QAMS法計算值與外標法實測值無統(tǒng)計學差異。結(jié)論 該研究建立的扣子七UPLC指紋圖譜結(jié)合一測多評法簡便可行，結(jié)合化學模式識別可有效為扣子七藥材整體質(zhì)量控制提供參考。

〔關(guān)鍵詞〕 扣子七；超高效液相；指紋圖譜；一測多評；質(zhì)量控制；化學模式識別

〔中圖分類號〕R284.1" " " " "〔文獻標志碼〕A" " " " " 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０24.11.013

Quality control methods for Kouziqi （Panacis Majoris Rhizoma） by combining UPLC fingerprint and QAMS method with chemical pattern recognition

LIU Leping1， ZHANG Yijia1，2， HE Zizhou3， HU Xinyue1，2， HUANG Jiacheng1，2， YAN Jianye1，2*， WANG Wei1*

1. School of Pharmacy （Traditional Chinese Medicine and Ethnomedicine Innovation amp; Development International Laboratory）， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 2. Science amp; Technology Innovation Center， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 3. The College of Chemistry， Xiangtan University， Xiangtan， Hunan 411105， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Objective To establish an ultra high performance liquid chromatography （UPLC） fingerprint for Kouziqi （Panacis Majoris Rhizoma）， to develop a quantitative analysis of multi-components by single marker （QAMS） method for the quantitative determination of eight chemical components of it， and to conduct a quality evaluation of Kouziqi （Panacis Majoris Rhizoma） by combining chemical pattern recognition analysis. Methods A Waters CORTECS UPLC T3 column was used with a mobile phase consisting of 0.1% phosphoric acid water-acetonitrile solution for gradient elution. A UPLC fingerprint of Kouziqi （Panacis Majoris Rhizoma） was established at a column temperature of 30℃ and a flow rate of 0.3 mL/min， followed by cluster analysis， principal component analysis （PCA）， and orthogonal partial least squares-discriminant analysis （OPLS-DA）. Using chikusetsusaponin Ⅳa as an internal standard， relative correction factors were established for ginsenoside Rb1， ginsenoside Ro， ginsenoside Rb3， chikusetsus？鄄

aponin Ⅳ， ginsenoside Rd， zingibroside R1， and calenduloside E. The content of these eight components was determined and compared with the results obtained by the external standard method to verify the accuracy， repeatability， and feasibility of the QAMS method. Results Twelve common peaks were identified from the fingerprints of 14 batches of samples， recognizing ginsenoside Rb1， ginsenoside Ro， ginsenoside Rb3， chikusetsusaponin Ⅳ， chikusetsusaponin Ⅳa， ginsenoside Rd， zingibroside R1， and calenduloside E as the main characteristic components. The similarity of the chromatograms among the 14 batches of samples ranged from 0.793 to 0.993. Cluster analysis divided the 14 batches of samples into four categories. PCA yielded four principal components with a cumulative variance contribution rate of 83.20%， and OPLS-DA identified five differential quality markers. The calculated values by the QAMS method showed no statistically significant differences from the measured values obtained by the external standard method. Conclusion The established UPLC fingerprint combined with the QAMS method for Kouziqi （Panacis Majoris Rhizoma） is simple and feasible. Coupled with chemical pattern recognition， it effectively provides a reference for the overall quality control of Kouziqi （Panacis Majoris Rhizoma）.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 Kouziqi （Panacis Majoris Rhizoma）; ultra high performance liquid chromatography; fingerprint; quantitative analysis of multi-components by single marker; quality control; chemical pattern recognition

扣子七又名珠子參、大葉三七、鈕子七、疙瘩七、盤七，收載于2020年版《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》），為五加科人參屬植物珠子參Panax japonicus C. A. Mey. var. major （Burk.） C. Y. Wu et K. M. Feng或羽葉三七P. japonicus C. A. Mey. var. bipinnatifidus （Seem.） C. Y. Wu et K. M. Feng的干燥根莖，分布于湖南、湖北、云南和重慶等地，為土家族藥物七十二“七”藥之上品，被譽為“土家圣藥”之一，有補肺養(yǎng)陰、祛瘀止痛、止血等功效[1]?，F(xiàn)代藥理學研究顯示，扣子七具有抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、抗氧化、心腦血管保護及肝臟保護等多種藥理活性[2]。其主要化學成分包括皂苷類和多糖類等，皂苷類成分中以齊墩果烷型的人參皂苷Ro和竹節(jié)參皂苷Ⅳa含量最高[3]。

《中國藥典》僅對珠子參的竹節(jié)參皂苷Ⅳa單一指標進行含量測定，但中藥化學成分復雜，單一成分難以全面反映扣子七整體質(zhì)量的優(yōu)劣，而指紋圖譜在中藥分析方面具有整體性、能靈敏反映樣品特征的優(yōu)點[4-5]。有研究建立了珠子參總皂苷的HPLC特征圖譜[6]，還有研究對扣子七采用HPLC法對扣子七中多指標成分進行定量檢測及質(zhì)量控制[7]。但尚未有研究使用UPLC法對扣子七進行質(zhì)量評價，UPLC比HPLC具有更短的分析時間、更好的分離效果、更加經(jīng)濟環(huán)保。中藥質(zhì)量控制提倡全面性，故指紋圖譜結(jié)合多指標成分測定為中藥質(zhì)量控制的直接有效的方法[8-12]。但傳統(tǒng)的多指標含量測定方法存在對照品緊缺，成本高昂等缺點。一測多評法下的多指標質(zhì)量控制解決了上述的缺點，它整合了內(nèi)標、校正因子等方法的優(yōu)勢，僅用一個對照品（價廉，易得，有效）就可以進行多成分的含量測定，極大的降低成本，減輕工作量[13-20]。目前，還未見有研究建立扣子七的一測多評含量測定方法。

因此，本研究采用UPLC建立扣子七藥材的指紋圖譜及一測多評方法，以扣子七中成分含量相對較高的人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1和金盞花苷E為指標進行含量測定，并結(jié)合聚類分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判別分析對扣子七進行整體質(zhì)量評價，旨在為扣子七藥材的質(zhì)量控制和相關(guān)研究提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1" 儀器

Waters ACQUITY H-CLASS UPLC液相色譜儀（美國Waters公司）；XSR205DU/A十萬分之一分析天平，ME204E萬分之一分析天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；Option R7 utra AN超純水系統(tǒng)（英國ELGA LabWaters公司）；KQ-800DE數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2" 對照品及試劑

對照品人參皂苷Rb1（批號：WP23101801，純度≥98.0%）、人參皂苷Ro（批號：WP23090604，純度≥98.0%）、人參皂苷Rb3（批號：wkq23061504，純度≥98.0%）、竹節(jié)參皂苷Ⅳ（批號：WP23072713，純度≥98.0%）、竹節(jié)參皂苷Ⅳa（批號：WP23051713，純度≥98.0%）、人參皂苷Rd（批號：wkq23050807，純度≥98.0%）、姜狀三七皂苷R1（批號：wkq22091910，純度≥98.0%）均購自四川省維克奇生物科技有限公司；金盞花苷E（批號：F13HB175447，純度≥98.0%）購自上海源葉生物科技有限公司。乙腈[色譜純，西格瑪奧德里奇（上海）貿(mào)易有限公司]；磷酸（分析純，天津市科密歐化學試劑有限公司）；乙醇（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）。

1.3" 樣品

14批扣子七樣品具體產(chǎn)地信息見表1，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學龔力民副教授鑒定為正品，藥材符合《中國藥典》的規(guī)定品種，其中S2、S5、S10和S12的樣品為羽葉三七P. japonicus C. A. Mey. var. bipinnatifidus （Seem.） C. Y. Wu et K. M. Feng的干燥根莖，其余的產(chǎn)地樣品為珠子參Panax japonicus C. A. Mey. var. major （Burk.） C. Y. Wu et K. M. Feng的干燥根莖。

2 方法與結(jié)果

2.1" 色譜條件

Waters CORTECS UPLC T3色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.6 μm），流動相為 0.1%磷酸水（A）-乙腈（B），梯度洗脫（0～7 min，30%～32% B；7～10 min，32%～35% B；10～13 min，35%～48% B；13～15 min，48%～54% B；15～25 min，54%～70% B；25～30 min，70%～70% B）；流速 0.3 mL·min-1；檢測波長203 nm；柱溫30 ℃；進樣量 1 μL。

2.2" 溶液的制備

2.2.1" 對照品溶液的制備" 分別精密稱取人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1以及金盞花苷E對照品適量，置于2 mL量瓶中，用 60%乙醇溶解并定容，得各對照品儲備液，再取各對照品儲備液適量，定容至5 mL，得到濃度分別為303.70、2 279.09、299.44、1 366.18、1 910.64、380.76、189.15、521.60 μg·mL-1混合對照品儲備溶液。

2.2.2" 供試品溶液的制備" 取扣子七粉末約1.0 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，加入60%乙醇溶液50 mL，稱定重量，超聲提取（功率360 W，頻率40 kHz）40 min，放冷再稱定重量，用60%乙醇溶液補足減失的重量，精密稱定，過0.22 μm有機濾膜，即得供試品溶液。

2.3" 指紋圖譜研究

2.3.1" 精密度實驗" 取同一供試品（S2）的溶液，按“2.1”項下色譜條件，連續(xù)進樣6次，記錄各共有峰的保留時間和峰面積，以人參皂苷Ro峰為參照峰，計算各主要共有峰的相對保留時間RSD均小于0.8%，相對峰面積RSD均小于0.85%，結(jié)果表明該方法精密度良好。

2.3.2" 穩(wěn)定性實驗" 取同一供試品（S2）的溶液，按“2.1”項下色譜條件，于0、2、4、8、16、24、36、48 h分別進樣1次，記錄各共有峰的保留時間和峰面積，以人參皂苷Ro峰為參照峰，計算各共有峰相對保留時間RSD均小于0.96%，相對峰面積RSD均小于1.93%，結(jié)果表明供試品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.3" 重復性實驗" 取同一供試品（S2），按“2.2.2”項下方法平行制備6份供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件進樣，記錄各共有峰的保留時間和峰面積，以人參皂苷Ro峰為參照峰，計算各共有峰相對保留時間RSD均小于0.31%，相對峰面積RSD均小于1.64%，結(jié)果表明方法重復性良好。

2.3.4" 指紋圖譜的建立及相似度評價" 取14批樣品，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件進樣，記錄色譜圖。將14批樣品圖譜導入國家藥典委員會《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》（2012版），采用平均數(shù)生成對照圖譜，設(shè)置時間窗寬度為0.1 min，進行多點校正Mark峰及全譜匹配，生成共有峰。結(jié)果14批樣品指紋圖譜共確認12個共有峰（圖1），14批指紋圖譜的相似度在0.793～0.993之間。

通過供試品（S2）溶液色譜圖與混合對照品色譜圖進行歸屬比對，指認出指紋圖譜中8個化合物（圖2），峰1為人參皂苷Rb1，峰2為人參皂苷Ro，峰3為人參皂苷Rb3，峰4為竹節(jié)參皂苷Ⅳ，峰5為竹節(jié)參皂苷Ⅳa，峰6為人參皂苷Rd，峰8為姜狀三七皂苷R1，峰9為金盞花苷E。

2.3.5" 聚類分析" 將14批扣子七樣品中12個共有峰的峰面積導入SPSS 25.0軟件，采用系統(tǒng)聚類分析方式，以組間聯(lián)接法和歐式平方距離進行分類，詳見圖3。當歐式距離=10時，14批扣子七樣品分為4類，S2、S9、S10樣品各自單獨聚為一類，其余樣品聚為一類。

2.3.6" 主成分分析" 以14批扣子七指紋圖譜中12個共有峰的峰面積為變量，利用GraphPad Prism 10.1.2軟件進行主成分分析，以主成分特征值gt;1為提取標準得到4個主成分，其方差貢獻率分別為32.06%、22.52%、16.03%、12.60%，累計方差貢獻率為83.20%，可以代表12個共有成分的大部分信息，詳見表2。主成分1貢獻率較高的有峰5、峰7和峰12，其中峰12為負載荷，主成分2貢獻率較高的有峰8和峰9，均為負載荷，主成分3貢獻率較高的有峰1和峰6，主成分4貢獻率較高的有峰2，詳見表3。將4個主成分的得分分別記為Y1、Y2、Y3、Y4，以各主成分對應的貢獻率作為權(quán)重系數(shù)，建立主成分綜合得分模型：

Y=0.320 6Y1+0.225 2Y2+0.160 3Y3+0.126 0Y4 （1）

得分結(jié)果詳見表4，得分反映各批次扣子七的質(zhì)量情況，得分越高，則質(zhì)量越好。將14批樣品中的12個共有峰的峰面積導入SIMCA 14.1軟件進行PCA處理，得分圖詳見圖4，與聚類結(jié)果相似。

2.3.7" 正交最小偏二乘法-判別分析（OPLS-DA）" 為了進一步分析不同產(chǎn)地扣子七之間的差異性，將14批扣子七指紋圖譜中12個共有峰的峰面積導入SIMCA 14.1軟件進行OPLS-DA分析，該模型參數(shù)R2X=0.972，R2Y=0.980，Q2=0.355，其得分圖結(jié)果與聚類分析和主成分分析結(jié)果相似，見圖5。以VIPgt;1為篩選標準，峰4（竹節(jié)參皂苷Ⅳ）、峰3（人參皂苷Rb3）、峰9（金盞花苷E）、峰8（姜狀三七皂苷R1）和峰10的VIP值分別為1.245 8、1.235 3、1.082 6、1.080 5和1.016 3，均大于1，這5個成分可作為扣子七潛在的差異質(zhì)量標志物。對OPLS-DA模型進行置換200次，得置換檢驗圖，詳見圖6。結(jié)果R2和Q2在Y軸的截距均小于原始值，表明建立的模型未過度擬合。詳見圖7。

2.4" 含量測定方法學考察

2.4.1" 線性關(guān)系考察" 精密移取“2.2.1”項下混合對照品溶液0.05、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00 mL，分別用60%乙醇定容至2 mL，制備6份不同濃度的混合對照品溶液，再將人參皂苷Rb3母液稀釋5倍，按“2.1”項下色譜條件，依次進樣，記錄色譜圖峰面積。以相應成分的峰面積為縱坐標，對照品濃度（μg/mL）為橫坐標，繪制標準曲線，得到人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1和金盞花苷E 8種成分的回歸方程及線性范圍，分別以信噪比（S/N）為3和10時的濃度計算各個成分的檢測限（limit of defection， LOD）及定量限（limit of quantitation，LOQ）。詳見表5。

2.4.2" 精密度實驗" 取同一供試品（S2）的溶液，按“2.1”項下色譜條件，連續(xù)進樣6次，結(jié)果人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1、金盞花苷E的峰面積RSD分別為1.93%、0.74%、1.44%、0.97%、0.87%、1.73%、0.84%、0.63%，表明儀器精密度良好。

2.4.3" 穩(wěn)定性實驗" 取同一供試品（S2）的溶液，按“2.1”項下色譜條件，于0、2、4、8、16、24、36、48 h分別進樣1次，結(jié)果人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1、金盞花苷E的峰面積RSD分別為0.86%、0.31%、0.62%、0.25%、0.19%、0.59%、0.35%、0.43%，表明供試品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.4" 重復性實驗" 取同一供試品（S2），按“2.2.2”項下方法平行制備6份供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件，連續(xù)進樣6次，結(jié)果人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1、金盞花苷E的峰面積RSD分別為1.18%、1.62%、1.33%、1.07%、1.65%、1.00%、1.15%、1.30%，表明儀器重復性良好。

2.4.5" 加樣回收實驗" 精密稱取6份已知成分含量的供試品（S2）粉末約0.5 g置于錐形瓶中，按約1∶1的成分含量比例加入各對照品溶液，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項色譜條件下進樣分析，計算得人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1、金盞花苷E的平均加樣回收率分別為104.74%、103.10%、105.70%、101.65%、95.79%、102.60%、96.41%、101.47%，表明本方法的加樣回收率良好。詳見表6。

2.5" 一測多評研究

2.5.1 相對校正因子的計算" 取系列濃度梯度的混合對照品溶液按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積，以竹節(jié)參皂苷Ⅳa為內(nèi)標物，計算人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1、金盞花苷E的相對校正因子（fi/s）。

fi/s=fi/fs=（Ai/Wi）/（As/Ws）" " " " " （1）

式中Wi為內(nèi)標物質(zhì)量濃度，Ai為內(nèi)標峰面積，Ws為待測物質(zhì)量濃度，As為待測物峰面積。詳見表7。

2.5.2" 待測成分色譜峰定位" 采用相對保留時間即各待測成分與竹節(jié)參皂苷Ⅳa保留時間的比值，對色譜峰進行定位，結(jié)果人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb3、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、人參皂苷Rd、姜狀三七皂苷R1、金盞花苷E的相對保留時間分別為0.547 0、0.696 0、0.852 4、0.911 8、1.020 2、1.305 5、1.459 9，RSD分別為3.35%、2.62%、1.62%、0.57%、0.39%、0.92%、0.63%，表明各待測成分相對保留時間波動較小，無顯著性差異。詳見表8。

2.5.3" 耐用性考察" 按“2.1”項下色譜條件，考察4根色譜柱（具體型號及批號見表8）、流速（0.25、0.3、0.35 mL·min-1、柱溫（25、30、35 ℃）對相對校正因子的影響，結(jié)果表明RSDlt;2.81%，不同條件下各成分耐用性良好。詳見表9—11。

2.5.4" 樣品的含量測定" 分別采用一測多評法（quantitative analysis of multi-components by single-marker， QAMS）與外標法（external standard method，ESM）對14批次扣子七樣品進行上述8種成分的含量進行測定，以相對平均偏差對兩個方法的結(jié)果進行準確性評價。

RAD=×100%（2）

式中，Xi為QAMS方法測定的結(jié)果；X為兩種方法測定結(jié)果的平均值。

計算結(jié)果詳見表12，結(jié)果表明一測多評法在扣子七多指標成分含量評價中的應用具有可行性。

3 討論

為了選出扣子七的最佳制備方法，在前期預試驗中分別考察了提取時不同提取溶液（60%甲醇、70%甲醇、60%乙醇、70%乙醇）、不同提取方式（超聲和回流）、不同提取時間（40、60、80 min），從提取的色譜信息全面性、色譜峰豐度、雜質(zhì)干擾等方面考慮，發(fā)現(xiàn)60%乙醇超聲提取40 min為扣子七供試品制備的最佳方法。同時還考察了不同流動相系統(tǒng)（乙腈-0.1%磷酸溶液、乙腈-0.2%磷酸溶液、乙腈-0.1%甲酸溶液）和不同洗脫程序?qū)┰嚻啡芤荷V圖的影響，結(jié)果顯示，乙腈-0.1%磷酸溶液按2.1項梯度程序運行時，所得色譜圖中基線平穩(wěn)、色譜峰數(shù)量較多且色譜峰豐度飽滿。

本研究選取了不同產(chǎn)地的扣子七作為研究對象，建立了UPLC指紋圖譜，標定了12個共有峰，指認其中8個成分，完成了扣子七的定性分析，并結(jié)合聚類分析和主成分分析將不同產(chǎn)地的扣子七分為4類，分類結(jié)果表明大部分產(chǎn)地的扣子七質(zhì)量差異不大，這提示扣子七藥材有擴大產(chǎn)地栽培的可能。OPLS-DA發(fā)掘出5個差異性成分，其中4個是已指認成分竹節(jié)參皂苷Ⅳ、人參皂苷Rb3、金盞花苷E和姜狀三七皂苷R1。

扣子七中8個已指認的成分被用于扣子七的定量分析，并建立一測多評法對扣子七進行定量分析。參照QAMS法建立的技術(shù)指南[21]，內(nèi)參物應選擇在各類樣品中含量均較高，保留時間適中的有效成分，竹節(jié)參皂苷Ⅳa對照品化學性質(zhì)穩(wěn)定，易于得到，且為《中國藥典》中珠子參含量測定項下的被測成分，因此本實驗確定選擇竹節(jié)參皂苷Ⅳa作為內(nèi)參物建立扣子七的一測多評法。結(jié)果顯示，QAMS法含量測定數(shù)據(jù)與ESM法測定數(shù)據(jù)無顯著性差異，可用QAMS法代替ESM法對扣子七中此8種成分進行含量測定，能更加經(jīng)濟和快捷地為扣子七的質(zhì)量控制做出評價。

綜上所述，本文采用指紋圖譜與一測多評法結(jié)合化學模式識別分析對扣子七進行質(zhì)量評價，建立的定性定量方法簡便、快速、價廉，所建立的扣子七UPLC指紋圖譜可以快速對扣子七進行定性評價，分析扣子七藥材真?zhèn)危状谓⒌目圩悠叨嘀笜顺煞值腝AMS可以簡便快速的對扣子七進行定量評價，分析扣子七藥材優(yōu)劣，為該藥材的質(zhì)量控制和評價提供參考。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典： 2020版 一部[M]. 北京： 中國醫(yī)藥科技出版社， 2020： 283.

[2] 劉琪琪， 李" 曄， 宗時宇， 等. 太白七藥珠子參的研究進展[J]. 中國野生植物資源， 2021， 40（6）： 53-58.

[3] 楊" 延， 張" 翔， 姜" 森， 等. 珠子參中皂苷成分及其藥理活性研究進展[J]. 食品工業(yè)科技， 2019， 40（2）： 347-356.

[4] 伍紅年， 譚詩涵， 王元清， 等. 竹節(jié)參HPLC指紋圖譜的建立及7種成分測定[J]. 中成藥， 2019， 41（5）： 1074-1080.

[5] 葉" 彬， 閆小巧， 雷" 婷， 等. 葛根藥材HPLC指紋圖譜與6種成分含量測定研究[J]. 中草藥， 2023， 54（24）： 8222-8227.

[6] 任華忠， 朱麗金， 何毓敏. 珠子參總皂苷的HPLC特征圖譜及化學成分研究[J]. 中成藥， 2022， 44（9）： 2885-2890.

[7] 李海燕， 王慧然， 那麗莎， 等. 基于主成分分析、正交偏最小二乘判別分析及加權(quán)逼近理想解排序-灰色關(guān)聯(lián)度融合模型評價不同產(chǎn)地珠子參質(zhì)量[J]. 中草藥， 2024， 55（9）： 3116-3126.

[8] 溫海成， 蘇永精， 謝" 澳， 等. 指紋圖譜結(jié)合一測多評法的壯藥南酸棗樹皮質(zhì)量控制方法研究[J]. 中藥材， 2024（4）： 934-939.

[9] 楊柯楠， 關(guān)永霞， 范建偉， 等. 川蛭通絡(luò)膠囊HPLC指紋圖譜建立及9個成分測定[J]. 中藥材， 2024（6）： 1477-1481.

[10] 張思敏， 張" 也， 伍紅年， 等. 不同產(chǎn)地竹節(jié)參中7種皂苷含量測定及化學計量學評價[J]. 食品與機械， 2022， 38（3）： 65-70， 79.

[11] 葉" 彬， 閆小巧， 林敏生， 等. 南五味子藥材的指紋圖譜研究[J]. 中藥材， 2023， 46（12）： 3063-3067.

[12] 賈天寧， 劉" 芳， 陳" 鵬， 等. 基于指紋圖譜結(jié)合化學模式識別對狗脊藥材的質(zhì)量評價[J]. 中草藥， 2023， 54（24）： 8214-8221.

[13] 張國鑫， 劉佳琪， 惲辰珂， 等. UPLC指紋圖譜結(jié)合一測多評法的蘆蒿廢棄莖葉酚酸類成分質(zhì)量控制方法研究[J]. 中國中藥雜志， 2024， 49（13）： 3566-3573.

[14] 王智民， 高慧敏， 付雪濤， 等. “一測多評”法中藥質(zhì)量評價模式方法學研究[J]. 中國中藥雜志， 2006， 31（23）： 1925-1928.

[15] 孫云波， 陳育鵬， 張創(chuàng)峰， 等. 一測多評法同時測定連花清瘟膠囊中7個成分[J]. 藥物分析雜志， 2022， 42（7）： 1128-1136.

[16] 杜俊潮， 浦香蘭， 范愷磊， 等. 基于UPLC指紋圖譜及一測多評法的天麻標準湯劑質(zhì)量評價研究[J]. 中國中藥雜志， 2020， 45（20）： 4909-4917.

[17] 王" 趙， 趙劍鋒， 昝" 珂， 等. 一測多評法測定不同企業(yè)心腦健制劑中9個成分的含量[J]. 中國中藥雜志， 2022， 47（22）： 6082-6089.

[18] 張明曉， 李" 化， 陳" 娜， 等. 一測多評法同時測定辣木葉中硫苷及黃酮類成分的含量[J]. 中國中藥雜志， 2022， 47（12）： 3285-3294.

[19] 譚詩涵， 伍紅年， 雷雅婷， 等. 一測多評法測定竹節(jié)參中7種皂苷類成分的含量[J]. 中草藥， 2019， 50（17）： 4164-4169.

[20] 曾楊麗， 徐" 菲， 蔡" 思， 等. 一測多評結(jié)合指紋圖譜的肝復樂膠囊質(zhì)量控制研究[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志， 2021， 28（4）： 94-100.

[21] 王智民， 錢忠直， 張啟偉， 等. 一測多評法建立的技術(shù)指南[J]. 中國中藥雜志， 2011， 36（6）： 656-658.