超微技術(shù)對(duì)鐵皮石斛粗多糖浸出的影響

何云山 譚周進(jìn)

摘要 ? ?通過(guò)苯酚-硫酸法測(cè)定鐵皮石斛超微粉與鐵皮石斛常規(guī)粉水溶性粗多糖的含量，探討超微技術(shù)對(duì)鐵皮石斛粗多糖浸出的影響。結(jié)果表明，鐵皮石斛超微粉中水溶性粗多糖含量為484.6 mg/g，常規(guī)粉水溶性粗多糖含量為370.2 mg/g，鐵皮石斛超微粉水溶性粗多糖含量比常規(guī)粉水溶性粗多糖含量高30.9 %，二者的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。超微技術(shù)有助于鐵皮石斛粗多糖的浸出。

關(guān)鍵詞 ? ?鐵皮石斛;超微中藥;粗多糖

中圖分類(lèi)號(hào) ? ?R282 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ? ?A

文章編號(hào) ? 1007-5739（2020）04-0214-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）

Abstract ? ?The phenol-sulfuric acid method was used to determine the water-soluble crude polysaccharide content of Dendrobium candidum ultrafine powder and regular powder，and the effect of ultramicrotechnique on the extraction of polysaccharides from Dendrobium candidum was investigated.The results showed that the content of water-soluble crude polysaccharide of Dendrobium candidum ultrafine powder was 484.6 mg/g，and the content of water-soluble crude polysaccharide of regular powder was 370.2 mg/g，the former was 30.9% higher than that of the later，there was a signficant difference between the two（P<0.05）.The ultra-microtechnique is helpful for the extraction of crude polysaccharides from D.officinale.

Key words ? ?Dendrobium officinale;ultra-micro Chinese medicine;crude polysaccharide

鐵皮石斛（Dendrobium officinale）在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品，“味甘，平。主傷中，除痹，下氣，補(bǔ)五臟虛勞羸弱，強(qiáng)陰，久服厚腸胃”。《本草綱目》也有詳細(xì)記載，《道藏》將鐵皮石斛列為“九大仙草”之首，民間稱(chēng)其為“救命仙草”，擁有“藥中黃金”之美譽(yù)[1]。研究表明，多糖是鐵皮石斛的主要成分[2]，鐵皮石斛對(duì)治療胃腸道疾病、白內(nèi)障、關(guān)節(jié)炎、血栓閉塞性脈管炎及慢性咽炎等疾病有很好的療效[3]。石斛多糖對(duì)腸道中乳酸菌和雙歧桿菌有明顯的增殖作用，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和肺炎球菌都有很好的抑制作用[4]，石斛多糖同時(shí)具有增強(qiáng)免疫力的作用，對(duì)超氧陰離子自由基、羥基自由基的清除作用效果好[5]，從而對(duì)相關(guān)的腸道病原菌有很好的抑制作用。為了體現(xiàn)鐵皮石斛超微制劑的優(yōu)越性，本文對(duì)鐵皮石斛超微細(xì)粉與傳統(tǒng)細(xì)粉的粗多糖含量進(jìn)行了研究。

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?試驗(yàn)材料

葡糖糖（西隴科學(xué)股份有限公司）、無(wú)水乙醇（天津市富宇精細(xì)化工有限公司）、苯酚（成都市科隆化學(xué)品有限公司）、濃硫酸（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）;鐵皮石斛常規(guī)細(xì)粉和超微粉，由湖南龍石山鐵皮石斛基地有限公司提供。

1.2 ? ?試驗(yàn)方法

1.2.1 ? ?鐵皮石斛粗多糖的提取。參照《中華人民共和國(guó)藥典》2015年一部中介紹的方法進(jìn)行。設(shè)鐵皮石斛常規(guī)粉和超微粉2個(gè)處理，即分別稱(chēng)取1 g鐵皮石斛常規(guī)細(xì)粉和超微粉，加水200 mL，沸水煎煮2 h，放冷，轉(zhuǎn)移至250 mL量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，搖勻、過(guò)濾，置于4 ℃冰箱保持，備用。

1.2.2 ? ?鐵皮石斛中粗多糖含量的測(cè)定。

（1）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制[6]。準(zhǔn)確稱(chēng)取在105 ℃干燥至恒重的葡萄糖100 mg，置于100 mL燒杯中，加水80 mL溶解，轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，燒杯與玻璃棒反復(fù)潤(rùn)洗3次，潤(rùn)洗液均需移入容量瓶中，最后加水定容至刻度線，配成濃度為1 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，選取部分葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為0.1 mg/mL置于4 ℃冰箱備用。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線按表1進(jìn)行制作。

（2）鐵皮石斛粗多糖含量的測(cè)定。準(zhǔn)確量取“1.2.1”項(xiàng)中的濾液2 mL，置于15 mL離心管中，加入無(wú)水乙醇8 mL，搖勻，冷藏過(guò)夜，取出，4 000 r/min離心20 min，棄去上清液，沉淀加80%乙醇洗滌2次，每次8 mL，離心，棄上清液，沉淀加熱水溶解，轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，放冷，加水至刻度，搖勻，即得待測(cè)液。準(zhǔn)確量取1 mL待測(cè)液（設(shè)3個(gè)平行，以蒸餾水作為空白對(duì)照），加入1 mL 5%苯酚溶液，搖勻，再加入濃硫酸5 mL，搖勻，置于沸水浴中加熱20 min，置于冰浴中冷卻5 min，在488 nm處測(cè)吸光度值，根據(jù)平均吸光度值計(jì)算鐵皮石斛粗多糖的含量。

1.3 ? ?統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù)，各分組所得計(jì)量數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，2組間均數(shù)符合正態(tài)性、方差齊性用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，否則運(yùn)用非參數(shù)檢驗(yàn)進(jìn)行比較。

2 ? ?結(jié)果與分析

2.1 ? ?葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

由圖1可以看出，不同葡萄糖含量在488 nm處的吸收值均勻分布在標(biāo)準(zhǔn)曲線的兩側(cè)或其上，反映出此次試驗(yàn)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性極好，運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)曲線能很好地計(jì)算各個(gè)吸光值下的葡萄糖含量。通過(guò)線性方程擬合發(fā)現(xiàn)吸光度與糖含量之間的關(guān)系方程式為Y=1.438X。

2.2 ? ?超微對(duì)鐵皮石斛粗多糖浸出的影響

由圖2可知，運(yùn)用苯酚-硫酸法測(cè)得鐵皮石斛常規(guī)粉中粗多糖的含量為370.2 mg/g，而鐵皮石斛超微粉中粗多糖的含量為484.6 mg/g，結(jié)果表明，鐵皮石斛超微粉粗多糖浸出量顯著高于鐵皮石斛常規(guī)粉（P<0.05）。進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)，鐵皮石斛超微粉粗多糖浸出含量比鐵皮石斛常規(guī)粉粗多糖浸出含量增加30.9%，促進(jìn)了鐵皮石斛的利用。綜上可知，超微技術(shù)有助于鐵皮石斛水溶性粗多糖的浸出。

3 ? ?結(jié)論與討論

中藥飲片經(jīng)歷了傳統(tǒng)中藥、配方顆粒、納米中藥、超微中藥等發(fā)展歷程[7]。傳統(tǒng)中藥飲片顯示了極強(qiáng)的生命力，但是傳統(tǒng)中藥飲片服用前需臨時(shí)煎煮，使用和攜帶不方便。超微中藥采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)與傳統(tǒng)的中藥炮制技術(shù)相結(jié)合，將傳統(tǒng)飲片加工成一種粒徑為微米級(jí)的新型中藥飲片，服用方便。超微技術(shù)增加了藥材成分與溶劑的接觸面積，使中藥有效成分在水中的溶出明顯高于傳統(tǒng)中藥飲片，顯著提高了藥材利用率，節(jié)省了資源;同時(shí)超微粉碎能促進(jìn)藥物在體內(nèi)的吸收，提高生物利用度[8]。陳 ?熹等[9]采用高效液相色譜法分別測(cè)定肉蓯蓉常規(guī)粉和肉蓯蓉超微粉中有效成分的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肉蓯蓉常規(guī)粉中松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量明顯低于超微粉（P<0.01）。何春龍等[10]通過(guò)比較靈芝超微粉、普通粉以及其提取物三萜類(lèi)成分之間指紋圖譜的差異，發(fā)現(xiàn)靈芝藥材超微粉碎后，三萜類(lèi)成分種類(lèi)數(shù)目并未改變但單位質(zhì)量相對(duì)峰面積積分值均明顯提高。本研究通過(guò)苯酚-硫酸測(cè)定法發(fā)現(xiàn)超微鐵皮石斛能夠顯著提高粗多糖浸出量，對(duì)鐵皮石斛的臨床應(yīng)用和產(chǎn)品研發(fā)具有重要的指導(dǎo)意義。

4 ? ?參考文獻(xiàn)

[1] 羅迪，龐璐，趙興兵，等.淺析《本草綱目》中鐵皮石斛的功能主治[J].中國(guó)中醫(yī)雜志，2013，29（3）：108-109.

[2] 鹿偉，陳玉滿，徐彩菊，等.鐵皮石斛抗疲勞作用研究[J].中醫(yī)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（10）：2488-2490.

[3] 李玲，鄧曉蘭，趙興兵，等.鐵皮石斛化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].腫瘤藥學(xué)，2011，1（2）：90-93.

[4] 張周英，楊成密，藍(lán)忠，等.石斛多糖的抗菌作用研究[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（33）：439-440.

[5] 查學(xué)強(qiáng)，王軍輝，潘利華，等.石斛多糖體外抗氧化活性的研究[J].食品科學(xué)，2007，10（28）：92-93.

[6] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).《中華人民共和國(guó)藥典》（一部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：266.

[7] 張愛(ài)霞，辛二旦，邊甜甜，等.新型中藥飲片的發(fā)展與趨勢(shì)[J].中華中醫(yī)藥雜志，2019，34（2）：44-46.

[8] 錢(qián)珊珊，桂雙英，楊滿琴，等.中藥超微粉碎技術(shù)的研究進(jìn)展[J].陜西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，42（3）：136-140.

[9] 陳熹.超微粉碎技術(shù)對(duì)肉蓯蓉的粉碎效果及有效成分含量的影響[J].臨床合理用藥雜志，2017，10（5）：86-87.

[10] 何春龍，張屏，鞠愛(ài)華，等.靈芝超微粉、普通粉和靈芝提取物高效液相色譜指紋圖譜的比較研究[J].中華中醫(yī)藥雜志，2017，32（2）：575-578.