從“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”探討中醫(yī)藥調(diào)控細(xì)胞自噬延緩皮膚衰老機(jī)制

李曾妍，胡煒圣，李 麟，黃黎珊，靖 媛*

（1.福建中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，福建 福州 350122；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院，福建 福州 350003）

皮膚是人體與外界環(huán)境接觸的一道天然屏障，也是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的外在表現(xiàn)形式。皮膚衰老可分為自然衰老與光老化，前者為以皺紋的出現(xiàn)和皮膚的松弛為特征，后者以皮膚暴露部位粗糙干燥、皺紋加深加粗等為特征［1-2］。自噬作為皮膚新陳代謝的必要過程，越來越多的證據(jù)表明調(diào)控細(xì)胞自噬水平是延緩皮膚衰老的重要途徑［3］。中醫(yī)理論認(rèn)為，皮膚衰老的基本病機(jī)為各種內(nèi)外界因素所致的營衛(wèi)失調(diào)、經(jīng)脈不暢在面部的具體表現(xiàn)［3-4］，故常以調(diào)和營衛(wèi)、活血通絡(luò)作為延緩皮膚衰老的治法。諸多研究證實(shí)，自噬過程與營衛(wèi)氣血經(jīng)絡(luò)的調(diào)節(jié)過程存在相似性，調(diào)和營衛(wèi)、活血通絡(luò)的中醫(yī)藥療法能夠通過調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬水平，發(fā)揮抗氧化、抗炎、修復(fù)皮膚屏障功能等作用，從而達(dá)到延緩皮膚衰老的目的［5］。

1 細(xì)胞自噬及與皮膚衰老的關(guān)系

細(xì)胞自噬是一種廣泛存在的細(xì)胞自我吞噬降解的行為，能夠促進(jìn)某些細(xì)胞器的自我更新，從而完成自我代謝，維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)［6］。良好的細(xì)胞自噬功能對(duì)維持皮膚健康狀態(tài)有著重要的意義，有助于細(xì)胞在多種應(yīng)激條件中生存，保護(hù)生物體抵御各類炎癥性、感染性疾?。?］。細(xì)胞自噬大致過程可分為起始、延伸、成熟和結(jié)束4 個(gè)階段。見圖1。

圖1 細(xì)胞自噬發(fā)生的具體過程

1.1調(diào)控表皮細(xì)胞分化以維持皮膚正常代謝 角質(zhì)形成細(xì)胞參與構(gòu)成維持皮膚屏障的磚墻結(jié)構(gòu)，當(dāng)其處于有序、合理的分化與增殖狀態(tài)是皮膚屏障功能正常發(fā)揮的基礎(chǔ)［8］。研究表明，自噬會(huì)參與角質(zhì)形成細(xì)胞的分化、衰老及死亡過程［9］，皮膚屏障功能的正常發(fā)揮是皮膚抵御外界環(huán)境損傷、維持良好狀態(tài)的必要條件。因此，自噬能夠通過調(diào)節(jié)角質(zhì)形成細(xì)胞分化、增殖與角化過程，使表皮處于正常、穩(wěn)定的狀態(tài)。當(dāng)自噬功能發(fā)生障礙時(shí)，可能產(chǎn)生因角質(zhì)細(xì)胞分化不全而使屏障功能受損引發(fā)的皮膚光老化，或者過度角化而產(chǎn)生老年斑。

1.2清除皮膚自由基以抵抗氧化損傷 當(dāng)人體內(nèi)環(huán)境失衡或機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，氧化應(yīng)激反應(yīng)增多，使機(jī)體產(chǎn)生大量包括自由基在內(nèi)的氧化中間產(chǎn)物，這也是導(dǎo)致人體衰老的重要原因之一。LI 等［10］發(fā)現(xiàn)，在2，2'-鹽酸脒基丙烷（AAPH）誘導(dǎo)的體外氧化應(yīng)激皮膚衰老模型中，咖啡因能夠通過激活SIRT3/AMPK 細(xì)胞自噬信號(hào)通路，保護(hù)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞免受氧化應(yīng)激帶來的自由基損傷。因此，自噬能夠減輕氧化應(yīng)激給表皮細(xì)胞帶來的損傷，抵抗皮膚因外源性損傷產(chǎn)生的致衰老因素，并恢復(fù)表皮代謝的平衡，將皮膚維持在健康、穩(wěn)定的狀態(tài)，從而達(dá)到延緩衰老的目的。

1.3調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)以維持皮膚穩(wěn)態(tài) 研究發(fā)現(xiàn)，缺乏自噬會(huì)使機(jī)體內(nèi)炎癥小體激活，使皮膚處于炎癥反應(yīng)狀態(tài)，導(dǎo)致衰老加?。?1］。皮膚的炎癥反應(yīng)狀態(tài)很大程度上伴隨著p62 的過度表達(dá)。而自噬能夠降低角質(zhì)形成細(xì)胞中p62 水平，避免皮膚處于高炎癥狀態(tài)，維持皮膚穩(wěn)態(tài)，從而減輕炎癥反應(yīng)造成的皮膚衰老［12］。

綜上所述，細(xì)胞自噬對(duì)皮膚衰老的調(diào)控作用，主要表現(xiàn)在上調(diào)細(xì)胞自噬水平，減少細(xì)胞外基質(zhì)過度沉積，促進(jìn)表皮新陳代謝，從而使衰老的表皮細(xì)胞加速凋亡脫落；同時(shí)抑制炎性細(xì)胞因子的釋放，維護(hù)表皮屏障功能正常與穩(wěn)定，降低炎癥反應(yīng)造成的衰老影響；減少角質(zhì)形成細(xì)胞的氧化產(chǎn)物，降低皮膚氧化損傷，從而維持皮膚穩(wěn)態(tài)。

2 中醫(yī)藥從“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”角度調(diào)控細(xì)胞自噬延緩皮膚衰老

營衛(wèi)者乃氣血也，循行于經(jīng)脈中而走行全身，濡潤肌表，布達(dá)臟腑，維持人體正常生命活動(dòng)。故營衛(wèi)、經(jīng)絡(luò)、臟腑系統(tǒng)共同構(gòu)成人體的生命機(jī)能，是人體生命功能的外在反映。三者協(xié)調(diào)配合，共同發(fā)揮著調(diào)節(jié)皮膚屏障、維持氣血運(yùn)行從而延緩皮膚衰老的作用。筆者從營衛(wèi)、經(jīng)絡(luò)、臟腑角度出發(fā)，總結(jié)了中醫(yī)藥通過調(diào)節(jié)“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”功能來調(diào)控細(xì)胞自噬，從而延緩皮膚衰老的機(jī)制，可為研究中醫(yī)藥延緩皮膚衰老的微觀機(jī)制提供了新的思路。

2.1從營衛(wèi)氣血角度探究自噬對(duì)皮膚衰老的調(diào)控作用 氣血是維持人體正常生理活動(dòng)的必需物質(zhì)，研究表明，氣的溫煦與推動(dòng)作用、血的濡潤作用對(duì)自噬具有直接的影響［13］。營衛(wèi)是氣血在機(jī)體中運(yùn)行的體現(xiàn)，也是其功能的反映，調(diào)和氣血營衛(wèi)是延緩皮膚衰老的重要途徑。靖媛等［3］認(rèn)為營衛(wèi)濡潤、固護(hù)肌表的功能與細(xì)胞自噬清除炎癥、修復(fù)皮膚屏障的功能類似，因此可以通過調(diào)和營衛(wèi)來誘導(dǎo)細(xì)胞自噬，延緩皮膚衰老。如黃芪為補(bǔ)氣要藥，能夠調(diào)和營衛(wèi)，益氣固表。SHAN 等［14］發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷能夠增強(qiáng)大鼠真皮成纖維細(xì)胞的自噬水平，抑制其在光老化條件下的過度分化與增殖，并降低其炎癥表達(dá)，從而保護(hù)大鼠真皮成纖維細(xì)胞處于有序、合理的生長(zhǎng)進(jìn)程，延緩皮膚衰老。又如當(dāng)歸飲子是調(diào)和營衛(wèi)、補(bǔ)益氣血之代表方。徐風(fēng)等［15］發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸飲子可促進(jìn)慢性蕁麻疹過敏小鼠體內(nèi)自噬小體形成，調(diào)節(jié)p62 mRNA 及蛋白表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞自噬水平，并達(dá)到改善小鼠皮膚狀態(tài)的目的。因此，調(diào)和營衛(wèi)氣血能夠直接激活自噬，減輕外源性因素帶來的損傷，保護(hù)皮膚屏障，維持皮膚穩(wěn)態(tài)，對(duì)于延緩皮膚衰老有著重要意義。

2.2從經(jīng)絡(luò)角度探究自噬對(duì)皮膚衰老的調(diào)控作用 十二經(jīng)脈內(nèi)系臟腑，外絡(luò)于肢節(jié)，人體氣血通過經(jīng)脈輸布周身，潤養(yǎng)臟腑，臟腑氣血的盛衰可以通過經(jīng)脈皮部反映于體表。從皮膚衰老的經(jīng)絡(luò)病機(jī)來看，陽明經(jīng)為十二經(jīng)脈中氣血之最盛，且統(tǒng)領(lǐng)三陽經(jīng)脈，與沖脈、帶脈、督脈聯(lián)系緊密，因此，陽明經(jīng)氣血充盛與否決定了人體一身氣血運(yùn)行之狀態(tài)，陽明脈衰則氣血枯，氣血不能上榮于面則導(dǎo)致皮膚衰老。既往的經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)與作用途徑的研究也證實(shí)了陽明經(jīng)脈氣血盛衰與皮膚衰老過程中自噬水平間的關(guān)聯(lián)性。張苗等［16］發(fā)現(xiàn)艾灸足三里穴可以減輕自然衰老大鼠皮膚的氧化應(yīng)激損傷，陽明經(jīng)足三里穴能夠調(diào)動(dòng)周身陽氣，運(yùn)行氣血，從而使皮膚處于正常、有序的代謝過程，延緩皮膚衰老。陳紹斐［17］采用艾灸療法配合超聲波對(duì)皮膚光老化患者進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示各項(xiàng)氧化應(yīng)激指標(biāo)都有明顯改善，這說明艾灸法能夠減輕光老化皮膚的氧化應(yīng)激損傷，達(dá)到延緩皮膚衰老的效果。關(guān)元穴是任脈上的重要穴位，具有培腎固本、補(bǔ)氣回陽、補(bǔ)益一身先天之本并延緩衰老的作用。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)艾灸關(guān)元穴可顯著改善光老化誘導(dǎo)大鼠皮膚組織氧化應(yīng)激紊亂，提高大鼠皮膚組織膠原蛋白含量，增加皮膚組織中自噬小體和自噬相關(guān)蛋白含量，從而改善光老化誘導(dǎo)的大鼠皮膚微環(huán)境，延緩皮膚衰老的進(jìn)程，明確了細(xì)胞自噬體形成和自噬水平與皮膚組織氧化應(yīng)激紊亂調(diào)控具有關(guān)聯(lián)性。綜上所述，針灸療法調(diào)理經(jīng)絡(luò)和局部氣血能夠有效調(diào)動(dòng)周身陽氣，減少氧化應(yīng)激損傷，激活細(xì)胞自噬，改善皮膚衰老狀態(tài)。

2.3從臟腑辨證角度探究自噬對(duì)皮膚衰老的調(diào)控作用 《丹溪心法》云：“有諸內(nèi)者，必形諸外。”說明臟腑的病理變化能夠通過皮膚的外在表現(xiàn)反映出來。傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，皮膚衰老主要與肝、脾、腎的虛衰有關(guān)。肝血虧虛會(huì)導(dǎo)致氣血不充，無以濡潤臟腑與頭面肌表，出現(xiàn)皮膚色暗、肌膚甲錯(cuò)等皮膚衰老征象［18］。脾氣虧虛而失健運(yùn)，氣血精微無以布散至頭面，則面色不榮，皮膚暗滯少華。同時(shí)，肝脾相互聯(lián)系，相互影響。肝脾失和則氣機(jī)不利，氣滯血瘀，表現(xiàn)在皮膚上則會(huì)出現(xiàn)各種郁滯性、衰老性問題［19-20］。腎藏精，為先天之本。腎氣、腎精虧虛時(shí)，人體臟腑無以充養(yǎng)，則易加速衰老。因此，臨床上往往從調(diào)和肝脾、滋陰溫陽補(bǔ)腎的角度選方用藥，以調(diào)節(jié)皮膚衰老的狀態(tài)，將人體內(nèi)在發(fā)生的細(xì)胞自噬現(xiàn)象與外在皮膚狀態(tài)改變進(jìn)行關(guān)聯(lián)，通過調(diào)節(jié)相應(yīng)臟腑功能，可以檢測(cè)細(xì)胞自噬水平的變化與其對(duì)皮膚衰老狀態(tài)的影響［21］。在調(diào)氣運(yùn)脾方面，F(xiàn)ANG 等［22］發(fā)現(xiàn)，茯苓提取物能夠抑制皮膚中基質(zhì)金屬肽酶-9（MMP-9）的表達(dá)，降低促炎因子白細(xì)胞介素-6（IL-6）水平，激活TGF-β1/Smad7 細(xì)胞自噬通路，從而減弱自由基對(duì)于皮膚的老化效應(yīng)，達(dá)到延緩皮膚衰老的目的。說明健脾化濕法可以在一定程度上激活細(xì)胞自噬，抑制皮膚氧化應(yīng)激反應(yīng)，延緩皮膚衰老。在滋陰溫陽補(bǔ)腎方面，LI 等［23］用七寶美髯丹對(duì)衰老的人皮膚成纖維細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)抗凋亡基因Bcl-2 顯著上調(diào)，自噬相關(guān)基因LC3 Ⅱ表達(dá)顯著增加，說明七寶美髯丹可能通過補(bǔ)肝益腎，促進(jìn)精血生化，充盈皮膚肌腠而提升了細(xì)胞自噬水平，延緩了皮膚衰老。在補(bǔ)肝滋腎方面，LIU 等［24］發(fā)現(xiàn)，經(jīng)何首烏制劑處理后的光老化大鼠的皮膚線粒體激酶1（PINK1）和LC3Ⅰ/Ⅱ表達(dá)增加，p62 表達(dá)降低。說明補(bǔ)肝腎、益精血的何首烏飲能夠減少細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)細(xì)胞自噬，并且降低炎癥因子水平，從而有延緩皮膚衰老之功。

綜上所述，當(dāng)脾腎之氣虧虛、肝腎精血不榮時(shí)，化氣生血、濡潤肌腠的功能下降，此時(shí)細(xì)胞自我更新代謝減緩，自噬水平降低，皮膚屏障易受損。此時(shí)通過補(bǔ)益脾腎之氣，暢達(dá)肝脾氣機(jī)，滋養(yǎng)肝腎精髓，能夠調(diào)節(jié)自噬水平，使皮膚正常發(fā)育，維持良好狀態(tài)［25］。因此，從臟腑角度探討自噬對(duì)皮膚衰老的調(diào)控機(jī)制，可以從肝、脾、腎三臟入手，運(yùn)用中藥復(fù)方、中藥提取物等，通過調(diào)暢氣機(jī)、調(diào)理肝脾腎等方式，調(diào)控細(xì)胞自噬水平以延緩皮膚衰老。

2.4“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”的整體觀調(diào)控細(xì)胞自噬延緩皮膚衰老 “正氣存內(nèi)，邪不可干”，將自噬對(duì)于皮膚的調(diào)控理解為調(diào)節(jié)正氣以疏散邪氣，或可解釋其對(duì)于皮膚衰老的延緩作用［26］。皮膚屏障固護(hù)肌表，抵御外源性損傷，恰如正氣衛(wèi)外抗邪之功。構(gòu)成抵御外界損傷的磚墻結(jié)構(gòu)的角質(zhì)形成細(xì)胞、參與創(chuàng)面修復(fù)的成纖維細(xì)胞是使皮膚成分合理更新與代謝、進(jìn)而延緩皮膚衰老的重要成分，這與中醫(yī)的“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”的整體調(diào)節(jié)觀密切相關(guān)。當(dāng)其異常增殖、變性，呈現(xiàn)皮膚衰老之征象，此時(shí)應(yīng)該修復(fù)其虛損，補(bǔ)益其衰微，調(diào)控自噬以參與其增殖分化過程，去其舊而促其新，恢復(fù)“陰平陽秘”之狀態(tài)，維持皮膚穩(wěn)態(tài)；而自由基、炎癥反應(yīng)物等會(huì)對(duì)皮膚造成損傷，正如邪氣在里，伏邪傷臟，此時(shí)通過“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”的整體觀增強(qiáng)細(xì)胞自噬活性以抵抗氧化損傷、調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，正如鼓動(dòng)正氣以驅(qū)除邪氣，使各類維持皮膚彈性、含水度等的結(jié)構(gòu)與成分不被破壞，從而維護(hù)皮膚穩(wěn)態(tài)。因此通過調(diào)控“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”整體以調(diào)控細(xì)胞自噬水平，使其細(xì)胞處于有序的代謝過程以自我修復(fù)或抵御外邪，于延緩皮膚衰老而言至關(guān)重要。

3 小結(jié)與展望

衰老是一個(gè)日趨嚴(yán)重的社會(huì)性問題，延緩皮膚衰老是醫(yī)學(xué)美容學(xué)科的重點(diǎn)研究方向之一。本文從調(diào)控表皮細(xì)胞增殖與分化、抗氧化損傷、清除炎癥產(chǎn)物3 個(gè)角度闡釋自噬對(duì)于維持皮膚穩(wěn)態(tài)、延緩皮膚衰老的重要意義；同時(shí)從營衛(wèi)、經(jīng)絡(luò)角度出發(fā)，通過“營衛(wèi)-經(jīng)絡(luò)-臟腑”的整體觀探究導(dǎo)致皮膚衰老的病機(jī)，闡釋細(xì)胞自噬對(duì)皮膚衰老的影響，明確了中醫(yī)藥療法對(duì)于調(diào)控自噬延緩皮膚衰老的效果與廣闊的前景。目前中醫(yī)藥對(duì)于自噬的研究尚不完善，針對(duì)從自噬途徑探討皮膚衰老機(jī)制的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究尚不充分，仍需要進(jìn)一步從不同皮膚衰老實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?yīng)用不同的中醫(yī)藥干預(yù)手段來探討細(xì)胞自噬與皮膚衰老的中醫(yī)證候之間的關(guān)系，完善其調(diào)控機(jī)制與臟腑、經(jīng)絡(luò)、營衛(wèi)、氣血功能的相關(guān)性，為這一理論價(jià)值的挖掘提供更加客觀化的支持。