雙冬膠囊HPLC指紋圖譜建立及其抗炎作用的譜效關(guān)系研究Δ

劉星村 ，張米嬋 ，姚青青 ，黃家宇 ，湯磊 ，吳軍 ，李莉 #（.貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴陽 55005；.貴州遠(yuǎn)程制藥有限責(zé)任公司，貴陽 55008）

雙冬膠囊是一種由梔子、黃芪、麥冬、苦木、白花蛇舌草、冬葵果6味藥材組成的中藥制劑[1]，臨床上用于治療單純性下尿路感染以及下焦?jié)駸峒鏆怅巸商撟C導(dǎo)致的尿頻、尿急、尿道灼熱刺痛、尿黃等癥狀[2]。目前，對于雙冬膠囊的國內(nèi)外研究報(bào)道較少，主要是定性鑒別、單一成分的定量分析或藥理作用研究等[1―6]，而雙冬膠囊具體是哪些成分發(fā)揮抗炎作用目前尚不明確。中藥譜效關(guān)系是在中藥指紋圖譜研究基礎(chǔ)上，將中藥指紋圖譜中化學(xué)成分的變化與中藥藥效聯(lián)系起來，進(jìn)而篩選出與藥效密切的成分[7―8]。鑒于此，本研究采用高效液相色譜（HPLC）法建立雙冬膠囊指紋圖譜，并以抗炎作用為切入點(diǎn)，將大鼠足腫脹率及炎癥因子水平作為藥效指標(biāo)，結(jié)合灰色關(guān)聯(lián)度分析研究雙冬膠囊指紋圖譜與抗炎作用的譜效關(guān)系，以期從該藥中篩選出與抗炎藥效密切相關(guān)的化學(xué)成分，為探索其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用的主要儀器有Ultimate 3000型HPLC儀（美國Thermo Fisher Scientific公司）、MS105DU型電子分析天平（瑞士Mettler-Toledo公司）、H1-16KR型高速冷凍離心機(jī)（湖南可成儀器設(shè)備有限公司）、ReadMax-1500型光吸收全波長酶標(biāo)儀（上海閃譜生物科技有限公司）、T10 basic型組織分散機(jī)[艾卡（廣州）儀器設(shè)備有限公司]。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

本研究所用動物為雄性SD大鼠，體重（190±10） g，購自長沙市天勤生物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（湘）2022-0011。大鼠飼養(yǎng)于貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院動物房內(nèi)，溫度為（24±2） ℃，相對濕度為（55±2）%。所有動物實(shí)驗(yàn)操作均符合貴州醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)福利倫理審查委員會標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)動物倫理號為2200394。

1.3 主要藥品及試劑

雙冬膠囊（批號分別為20210903、20211004、20211101、20211122、20211203、20211224、20220101、20220112、20220123、20220202、20220213、20220224、20220305、20221001、20221013，編號依次為S1～S15，規(guī)格均為0.3 g/粒）購自貴州遠(yuǎn)程制藥有限責(zé)任公司；京尼平苷酸、去乙酰車葉草苷酸甲酯、京尼平龍膽雙糖苷、綠原酸、梔子苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西紅花苷、毛蕊異黃酮對照品（批號分別為wkq22041210、wkq20052505、wkq22060614、wkq20042702、wkq20011502、wkq20010904、wkq22042612、wkq21122903，純度≥98%）購自四川維克奇生物科技有限公司；阿司匹林腸溶片（批號BJ70397，規(guī)格100 mg/粒）購自拜耳醫(yī)藥保健有限公司；BCA蛋白濃度測定試劑盒（批號20220914）購自北京索萊寶科技有限公司；丙二醛（malondialdehyde，MDA）檢測試劑盒、總超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性檢測試劑盒（批號分別為081722221214、021423230302）購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試劑盒、白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）ELISA試劑盒、IL-8 ELISA試劑盒、IL-1β ELISA試劑盒、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）ELISA試劑盒（批號均為02/2023）均購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司；甲醇、乙腈為色譜純；磷酸為分析純；水為純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 雙冬膠囊指紋圖譜的建立

2.1.1 混合對照品溶液的制備

取京尼平苷酸、去乙酰車葉草苷酸甲酯、京尼平龍膽雙糖苷、綠原酸、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西紅花苷、毛蕊異黃酮對照品適量，精密稱定，分別加甲醇制成對照品儲備液。精密量取上述各對照品儲備液適量，精密稱取梔子苷對照品適量，置于同一10 mL量瓶中，加甲醇制得每1 mL含30.6 μg京尼平苷酸、133.3 μg去乙酰車葉草苷酸甲酯、297.8 μg京尼平龍膽雙糖苷、34.5 μg綠原酸、12.7 μg毛蕊異黃酮葡萄糖苷、85.0 μg西紅花苷、3.5 μg毛蕊異黃酮、1 408.0 μg梔子苷的混合對照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備

取雙冬膠囊內(nèi)容物約2 g，精密稱定，置于50 mL具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇30 mL，稱定質(zhì)量；超聲（頻率40 kHz，功率250 W）提取20 min后取出，放冷，再次稱定質(zhì)量；用50%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，采用0.22 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.1.3 色譜條件

本研究所用色譜柱為ACE C18-AR（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）為流動相，進(jìn)行梯度洗脫（0～20 min，4%A→25%A；20～25 min，25%A→28%A；25～40 min，28%A→38%A）；檢測波長為235 nm（0～22 min）、440 nm（22～28 min）、250 nm（28～40 min）；柱溫為30 ℃；流速為1 mL/min；進(jìn)樣量為10 μL。

2.1.4 精密度試驗(yàn)

取“2.1.2”項(xiàng)下供試品溶液（樣品編號S10），按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次，記錄色譜圖。選取峰9（京尼平龍膽雙糖苷）作為參照峰，以此計(jì)算各共有峰相對保留時(shí)間和相對峰面積的RSD。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時(shí)間的RSD為0.14%～0.67%（n＝6），相對峰面積的RSD為0.44%～2.92%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.1.5 重復(fù)性試驗(yàn)

取雙冬膠囊（樣品編號S10）內(nèi)容物適量，共6份，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。選取峰9（京尼平龍膽雙糖苷）作為參照峰，以此計(jì)算各共有峰相對保留時(shí)間和相對峰面積的RSD。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時(shí)間的RSD為0.04%～0.57%（n＝6），相對峰面積的RSD為0.41%～2.92%（n＝6），表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“2.1.2”項(xiàng)下供試品溶液（樣品編號S10），于室溫放置0、2、4、8、12、24 h后，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。選取峰9（京尼平龍膽雙糖苷）作為參照峰，以此計(jì)算各共有峰相對保留時(shí)間和相對峰面積的RSD。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時(shí)間的RSD為0.06%～1.71%（n＝6），相對峰面積的RSD為0.96%～3.39%（n＝6），表明供試品溶液在室溫放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.7 指紋圖譜的生成和共有峰的指認(rèn)

取15批雙冬膠囊供試品溶液及混合對照品溶液適量，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，將15批供試品溶液的色譜圖導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)（2012版）》進(jìn)行分析。將色譜峰峰形較明顯、信號強(qiáng)度較好的樣品S11的圖譜作為參照圖譜，時(shí)間窗寬度設(shè)置為0.1，并經(jīng)過多點(diǎn)校正后進(jìn)行全譜峰匹配，生成包含15批供試品溶液色譜圖的疊加指紋圖譜；同時(shí)，采用中位數(shù)法生成對照指紋圖譜R。通過對比供試品溶液（樣品編號S11）與混合對照品溶液的色譜圖，進(jìn)行色譜峰的識別與指認(rèn)。結(jié)果顯示，共標(biāo)定出20個共有峰，并指認(rèn)出其中8個共有峰：峰4為京尼平苷酸、峰5為去乙酰車葉草苷酸甲酯、峰9為京尼平龍膽雙糖苷、峰10為綠原酸、峰11為梔子苷、峰13為毛蕊異黃酮葡萄糖苷、峰16為西紅花苷、峰20為毛蕊異黃酮。結(jié)果見圖1、圖2。

圖1 15批雙冬膠囊的HPLC疊加指紋圖譜和對照指紋圖譜R

圖2 混合對照品溶液和供試品溶液的HPLC圖

2.1.8 相似度評價(jià)

將對照指紋圖譜R作為參照，采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)（2012版）》進(jìn)行15批雙冬膠囊的相似度評價(jià)。結(jié)果顯示，15批樣品與對照指紋圖譜R的相似度分別為0.985、0.989、0.972、0.989、0.988、0.979、0.996、0.998、0.995、0.991、0.992、0.990、0.996、0.994、0.990，表明15批樣品化學(xué)成分組成一致性良好。

2.2 雙冬膠囊抗炎作用考察

2.2.1 藥液的制備

臨用前，將阿司匹林腸溶片、15批雙冬膠囊內(nèi)容物加入適量生理鹽水超聲（頻率40 kHz，功率250 W）分散，分別配制成適當(dāng)濃度的混懸液。

2.2.2 雙冬膠囊對角叉菜膠致大鼠足趾腫脹的影響

將SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后隨機(jī)分為18組，分別為對照組、模型組、阿司匹林腸溶片組（陽性對照，0.18 g/kg，根據(jù)臨床等效劑量設(shè)置）、雙冬膠囊S1～S15組（1.96 g/kg，以藥物內(nèi)容物計(jì)，根據(jù)臨床等效劑量設(shè)置），每組6只。各給藥組大鼠每天灌胃給藥1次，連續(xù)7 d，對照組與模型組大鼠灌胃等體積生理鹽水。末次給藥后1 h，模型組和各給藥組大鼠右后足趾皮下注射0.1 mL 1%角叉菜膠溶液以致炎，對照組注射等劑量生理鹽水。3 h后測定每只大鼠右后足趾的腳板厚度，并計(jì)算足腫脹率[足腫脹率＝（致炎足趾的腳板厚度－正常足趾的腳板厚度）/正常足趾的腳板厚度×100%][9―10]。采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。結(jié)果（表1）顯示，與對照組比較，模型組大鼠足腫脹率顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組大鼠足腫脹率顯著降低（P＜0.01），表明這15批雙冬膠囊均具有較好的抗炎作用。

表1 各組大鼠足腫脹率的檢測結(jié)果（±s，n＝6，%）

表1 各組大鼠足腫脹率的檢測結(jié)果（±s，n＝6，%）

a：與對照組比較，P＜0.01；b：與模型組比較，P＜0.01。

組別對照組模型組阿司匹林腸溶片組雙冬膠囊S1組雙冬膠囊S2組雙冬膠囊S3組雙冬膠囊S4組雙冬膠囊S5組雙冬膠囊S6組足腫脹率14.55±1.46b 25.64±5.77b 18.59±2.65b 15.51±4.41b 17.81±2.84b 20.94±1.78b 19.41±1.44b 22.27±4.00b 16.24±1.46b足腫脹率3.00±0.25 64.14±15.45a 16.13±5.06b 20.94±2.30b 20.18±2.40b 13.11±3.26b 31.29±7.16b 28.13±5.98b 19.76±5.94b組別雙冬膠囊S7組雙冬膠囊S8組雙冬膠囊S9組雙冬膠囊S10組雙冬膠囊S11組雙冬膠囊S12組雙冬膠囊S13組雙冬膠囊S14組雙冬膠囊S15組

2.2.3 雙冬膠囊對大鼠右后足組織中炎癥因子的影響

脫頸處死各組大鼠，并剪下炎癥右后足，稱定質(zhì)量，以預(yù)冷的0.9% NaCl溶液為勻漿介質(zhì)，制備成10%組織勻漿，再于4 ℃下以3 000 r/min離心15 min；取上清液適量，按試劑盒說明書方法檢測炎癥組織中MDA、SOD、PGE2，IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平。結(jié)果（表2）顯示，與對照組比較，模型組大鼠右后足組織中MDA、PGE2、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平均顯著升高，SOD水平顯著降低（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組大鼠右后足組織中上述指標(biāo)水平均顯著逆轉(zhuǎn)（P＜0.01）。

表2 各組大鼠右后足組織中炎癥因子水平的檢測結(jié)果（±s，n＝6）

表2 各組大鼠右后足組織中炎癥因子水平的檢測結(jié)果（±s，n＝6）

a：與對照組比較，P＜0.01；b：與模型組比較，P＜0.01。

組別對照組模型組阿司匹林腸溶片組雙冬膠囊S1組雙冬膠囊S2組雙冬膠囊S3組雙冬膠囊S4組雙冬膠囊S5組雙冬膠囊S6組雙冬膠囊S7組雙冬膠囊S8組雙冬膠囊S9組雙冬膠囊S10組雙冬膠囊S11組雙冬膠囊S12組雙冬膠囊S13組雙冬膠囊S14組雙冬膠囊S15組TNF-α/（pg/mL）260.53±21.73 357.01±41.83a 313.42±18.58b 322.75±23.04b 313.75±20.35b 315.31±18.79b 319.43±19.74b 317.28±27.70b 322.88±27.70b 322.11±23.23b 322.44±39.35b 312.37±42.73b 313.08±16.61b 316.62±17.74b 317.03±21.65b 320.96±11.09b 318.41±27.74b 317.48±11.11b MDA/（μmol/mg）2.40±0.54 12.50±2.22a 3.11±0.81b 3.80±0.80b 5.41±0.61b 5.28±2.05b 3.79±2.30b 4.90±1.47b 5.52±1.10b 4.24±1.91b 4.67±1.14b 4.41±2.68b 5.40±2.06b 3.79±1.91b 5.09±2.63b 4.08±1.88b 3.40±1.03b 4.33±1.40b SOD/（U/mL）208.12±25.06 153.72±14.83a 202.95±18.47b 190.77±28.18b 176.42±10.73b 202.65±23.86b 205.84±12.47b 183.17±10.70b 187.07±15.02b 205.91±12.47b 198.18±13.60b 184.05±12.24b 183.47±37.30b 184.05±12.18b 167.20±19.24b 199.84±10.93b 186.95±15.15b 203.59±15.79b PGE2/（pg/mL）81.93±5.91 105.39±17.19a 86.68±8.25b 88.56±12.98b 86.20±11.15b 87.82±10.33b 86.60±20.01b 86.12±19.25b 91.53±22.12b 88.36±23.17b 85.80±27.37b 90.13±19.08b 91.11±26.01b 87.18±18.90b 89.55±21.23b 85.30±18.35b 86.88±20.60b 91.47±24.14b IL-6/（pg/mL）16.27±1.13 21.48±1.92a 17.69±2.69b 17.88±1.73b 19.68±0.67b 18.31±2.74b 18.76±5.07b 18.32±3.04b 18.23±2.66b 18.10±2.24b 19.33±1.72b 19.37±1.86b 19.36±2.05b 19.12±1.01b 17.82±8.01b 18.29±2.03b 19.95±5.62b 19.01±5.33b IL-8/（pg/mL）34.31±2.79 44.07±2.12a 36.95±1.20b 36.70±1.70b 37.25±2.01b 38.74±3.95b 37.86±8.00b 37.65±4.80b 37.12±3.54b 36.26±2.49b 36.50±2.22b 37.48±3.20b 36.92±3.07b 37.27±1.08b 37.42±2.63b 36.90±6.02b 38.59±1.27b 37.01±3.40b IL-1β/（pg/mL）15.01±3.31 24.54±6.83a 16.03±5.18b 18.72±3.51b 17.88±2.44b 18.12±4.77b 19.46±7.90b 19.73±7.62b 18.81±7.71b 18.58±9.44b 18.09±9.81b 17.82±2.61b 18.45±7.25b 17.41±4.24b 18.94±3.26b 17.65±5.01b 20.19±1.60b 19.79±7.15b

2.3 雙冬膠囊指紋圖譜與炎癥因子的灰色關(guān)聯(lián)度分析

2.3.1 原始數(shù)據(jù)無量綱化處理

由于數(shù)據(jù)的物理意義不同，所以數(shù)據(jù)的量綱也不一定相同，不便于比較，或在比較時(shí)難以得到正確的結(jié)論，因此在進(jìn)行灰色關(guān)聯(lián)度分析時(shí)，需要將數(shù)據(jù)統(tǒng)一進(jìn)行無量綱化處理[10―11]。本研究以大鼠足腫脹率及炎癥因子水平作為參考序列，記為Y（k），k＝1，2，3，……，m。以指紋圖譜共有峰峰面積作為比較序列，記為Xi（k），i＝1，2，3，……，n；k＝1，2，3，……，m。采用均值化法進(jìn)行無量綱化處理。

2.3.2 灰色關(guān)聯(lián)度分析

分別計(jì)算每個比較序列和參考序列所對應(yīng)元素的關(guān)聯(lián)系數(shù)Ai（k），具體公式為其中i＝1，2，3，……，n；k＝1，2，3，……，m；ρ為分辨系數(shù)，一般取0.5；Δi(k)是參考序列與比較序列的絕對差值；Δmin是兩極最小差值；Δmax是兩極最大差值。然后再根據(jù)公式計(jì)算關(guān)聯(lián)度ri，具體公式為其中i＝1，2，3，……，n；k＝1，2，3，……，m。結(jié)果（表3）顯示，15批雙冬膠囊各共有峰峰面積與足腫脹率和MDA、SOD、PGE2、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平的關(guān)聯(lián)度分別為0.621 1～0.783 5、0.564 3～0.827 9、0.581 0～0.845 3、0.564 9～0.855 0、0.583 1～0.856 4、0.576 5～0.863 5、0.564 1～0.838 0、0.572 5～0.851 3。由此可知，各共有峰對足腫脹率與炎癥因子水平的貢獻(xiàn)大小不一，提示雙冬膠囊的抗炎作用是化學(xué)成分群共同作用的結(jié)果。當(dāng)關(guān)聯(lián)度大于0.6時(shí)，表示色譜峰代表的化學(xué)成分與藥效指標(biāo)有關(guān)聯(lián)性；當(dāng)關(guān)聯(lián)度大于0.8時(shí)，表示色譜峰代表的化學(xué)成分與藥效指標(biāo)有較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性[12]。綜合可以發(fā)現(xiàn)，峰4（京尼平苷酸）、峰10（綠原酸）和峰2所代表的化學(xué)成分與抗炎藥效指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性較強(qiáng)，可能是雙冬膠囊發(fā)揮藥效的主要成分。

表3 各共有峰峰面積與足腫脹率和炎癥因子水平的關(guān)聯(lián)度

3 討論

3.1 雙冬膠囊內(nèi)容物提取方法及色譜條件的選擇

實(shí)驗(yàn)前期本課題組分別考察了不同提取方式（回流、超聲）、不同提取溶劑（甲醇、乙醇、50%甲醇、50%乙醇、70%甲醇、70%乙醇）、不同提取時(shí)間（20、30、40 min）對雙冬膠囊內(nèi)容物提取的影響，結(jié)果顯示，采用50%甲醇超聲提取20 min的效果最好。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)前期本課題組還考察了不同流動相系統(tǒng)（水-乙腈、0.1%磷酸溶液-乙腈、0.1%甲酸溶液-乙腈）和不同柱溫（20、25、30、35、40 ℃）對樣品洗脫能力及色譜峰分離效果的影響，結(jié)果顯示，采用0.1%磷酸溶液-乙腈為流動相、選擇柱溫30 ℃對樣品洗脫和色譜峰分離效果最好。此外，實(shí)驗(yàn)前期本課題組對雙冬膠囊內(nèi)容物樣品進(jìn)行了全波長掃描，最終確定應(yīng)用波長轉(zhuǎn)化法進(jìn)行檢測并篩選了最佳的洗脫程序。

3.2 雙冬膠囊抗炎作用炎癥指標(biāo)選擇

足腫脹模型是常用于評價(jià)藥物抗炎作用的經(jīng)典急性炎癥模型。給大鼠足趾注射角叉菜膠后，可使局部組織毛細(xì)血管擴(kuò)張、水腫等，足腫脹率的變化則反映了足部腫脹的程度[13]。機(jī)體在炎癥反應(yīng)發(fā)生時(shí)，TNF-α是最早分泌的一種強(qiáng)促炎因子，其在參與炎癥反應(yīng)的同時(shí)能誘導(dǎo)并調(diào)節(jié)IL-6、IL-8、IL-1β等，從而增強(qiáng)組織對TNF-α的敏感性[14]。在炎癥反應(yīng)的過程中，PGE2也是一種重要的炎癥介質(zhì)，其在促進(jìn)血管擴(kuò)張的同時(shí)，還能增加炎癥水腫，促進(jìn)大量氧自由基生成，導(dǎo)致機(jī)體氧化產(chǎn)物增多、抗氧化能力降低，從而使機(jī)體損傷[15]。MDA是自由基損傷的代謝產(chǎn)物，其在組織中的水平能間接地反映機(jī)體氧化應(yīng)激損傷的程度；SOD能催化還原氧自由基生成過氧化氫，從而達(dá)到保護(hù)機(jī)體免受損傷的目的[16]。因此，本研究選擇足腫脹率和MDA、SOD、PGE2、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平作為藥效評價(jià)指標(biāo)。

3.3 雙冬膠囊的譜效關(guān)系分析

本研究對15批雙冬膠囊進(jìn)行了HPLC分析，并建立了指紋圖譜，篩選了20個共有峰，指認(rèn)了8個共有峰。采用灰色關(guān)聯(lián)度分析法將雙冬膠囊HPLC指紋圖譜與抗炎藥效指標(biāo)進(jìn)行了關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果顯示，與雙冬膠囊抗炎作用具有較強(qiáng)關(guān)聯(lián)性的是峰4（京尼平苷酸）、峰10（綠原酸）和峰2所代表的化學(xué)成分。由此可知，這些成分起著相互協(xié)同的作用，正符合中藥復(fù)方“多成分、多靶點(diǎn)”綜合作用的特點(diǎn)。

綜上所述，本研究成功建立15批雙冬膠囊的HPLC指紋圖譜，其中京尼平苷酸、綠原酸等可能是其抗炎藥效成分。