食品中菌落總數(shù)能力驗證結(jié)果分析

摘 要：目的：為了加強食品中菌落總數(shù)檢驗?zāi)芰Γ龠M(jìn)實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制，本實驗室參加了中國檢驗檢疫科學(xué)研究院測試評價中心組織的ACAS-PT1582（2023）食品中菌落總數(shù)計數(shù)能力驗證。方法：依據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》（GB 4789.2—2022）和能力驗證作業(yè)指導(dǎo)書對兩個樣品進(jìn)行檢測。結(jié)果：樣品A812菌落總數(shù)為1.4×103 CFU·mL-1，樣品Y109菌落總數(shù)為5.0×103 CFU·mL-1。經(jīng)評價，兩個考核樣品的|Z|值均小于2，結(jié)果滿意。結(jié)論：實驗室具備食品中菌落總數(shù)的檢測能力。

關(guān)鍵詞：能力驗證；菌落總數(shù)；計數(shù)；食品

Analysis of Validation Results for Total Bacterial Count in Food

YUAN Weidao， FENG Chenyun， CHEN Caixia， WANG Xueyin

（Hainan Academy of Inspection and Testing， Haikou 570203， China）

Abstract： Objective： In order to strengthen the ability to detect total bacterial count in food and promote internal quality control in the laboratory， our laboratory participated in the ACAS-PT1582 （2023） validation of the ability to count total bacterial count in food organized by the Testing and Evaluation Center of the Chinese Academy of Inspection and Quarantine Sciences. Method： Two samples were tested according to the GB 4789.2—2022 and the capability verification operation manual. Result： The total colony count of sample A812 was 1.4×103 CFU·mL-1， and the total colony count of sample Y109 was 5.0×103 CFU·mL-1. After evaluation， the |Z| values of both assessment samples are less than 2， and the results are satisfactory. Conclusion： The laboratory has the ability to detect the total number of bacterial colonies in food.

Keywords： proficiency testing; aerobic plate count; count; food

隨著我國居民生活質(zhì)量的持續(xù)提高，食品安全與衛(wèi)生問題逐漸成為了公眾關(guān)注的焦點[1-2]。在此背景下，食品檢驗工作面臨著更高的要求和更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)，這要求相關(guān)檢測單位必須更加努力提升食品檢驗的準(zhǔn)確性和可靠性，確保公眾的飲食安全與健康。在食品檢測領(lǐng)域，菌落總數(shù)是食品衛(wèi)生狀況的重要評估指標(biāo)，反映了食品是否符合衛(wèi)生要求及受細(xì)菌污染的程度[3-6]。

為驗證實驗室具備相關(guān)技術(shù)能力[7]，本實驗室積極參加了ACAS-PT1582（2023）食品中菌落總數(shù)檢測能力驗證，在實驗過程中加入質(zhì)控樣品，通過對不同人員和方法的檢測結(jié)果進(jìn)行比較分析，確保了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

中國檢驗檢疫科學(xué)研究院測試評價中心（ACAS）提供了兩份能力驗證樣品，原始編號分別為23-A812和23-Y109，在本實驗中分別用A812和Y109表示。此次能力驗證樣品是人工污染的食品樣品，采用西林瓶真空包裝，鋁蓋密封。菌落總數(shù)質(zhì)控樣品（QC-FD-001），來自ACAS。氯化鈉，汕頭市西隴科學(xué)有限公司；菌落總數(shù)測試片和平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（PCA），廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

PL-1001L電子天平（梅特勒）；BSC-1000IIB2生物安全柜（蘇州安泰）；HVA-85高壓蒸汽滅菌器（HIRAYAMA）；LRH系列生化培養(yǎng)箱（上海一恒）。

1.3 實驗方法

1.3.1 檢測方法

依照ACAS-PT1582（2023）食品中菌落總數(shù)檢測能力驗證作業(yè)指導(dǎo)書和《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》（GB 4789.2—2022）進(jìn)行檢測。

1.3.2 樣品前處理

在生物安全柜內(nèi)開啟西林瓶，立即加入5 mL生理鹽水進(jìn)行再水化，待溶解后，將液體吸出至無菌瓶中，并用余下的55 mL生理鹽水清洗西林瓶內(nèi)壁2～3次，將全部液體收集到無菌瓶中，即為待測樣品原液。

1.3.3 樣品稀釋

從樣品原液中吸取1 mL液體至9 mL稀釋液中，充分混勻，即為1∶10的樣品勻液。按此方法分別制備1∶100、1∶1 000、1 ∶10 000的樣品勻液。包括樣品原液，每個稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液于無菌培養(yǎng)皿中，每個梯度做2個平行樣[8]。同時分別吸取1 mL稀釋液加入2個無菌平皿中，作為空白對照。培養(yǎng)基融化并冷卻至46 ℃左右，每個平皿傾注培養(yǎng)基約20 mL，轉(zhuǎn)動并使其混合均勻。

1.3.4 培養(yǎng)

按照GB 4789.2—2022要求，待瓊脂凝固后，在36 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，觀察并記錄結(jié)果。紙片法操作參照上述稀釋方法，分別吸取不同稀釋度的樣品勻液1 mL，裝入2個測試紙片中，正面向上水平放置在36 ℃環(huán)境中培養(yǎng)24 h，取出紙片進(jìn)行菌落總數(shù)計數(shù)，計算平均值[9]。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌落總數(shù)結(jié)果對比

檢驗人員A獨立采用平板計數(shù)法和紙片法測定菌落總數(shù)，結(jié)果見表1?？梢钥闯觯?種檢測方法所得結(jié)果基本一致，說明紙片法在菌落總數(shù)能力驗證檢測過程中同樣適用。

2.2 不同人員比對結(jié)果

為了確保檢驗結(jié)果的客觀準(zhǔn)確性，由3位檢驗人員單獨完成實驗。通過比較不同人員的檢測結(jié)果，有助于減少可能存在的人員操作誤差，確保檢測工作的規(guī)范性和計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。人員對比實驗結(jié)果見表2?？梢钥闯?，菌落總數(shù)計數(shù)結(jié)果與稀釋度倍數(shù)成反比，且相同稀釋度下的兩個平板菌落數(shù)基本接近，這表明實驗結(jié)果相對準(zhǔn)確?？瞻讓φ諢o菌落生長，說明實驗過程沒有受到污染，檢測結(jié)果是有效的。

2.3 能力驗證結(jié)果與分析

紙片法菌落總數(shù)計數(shù)結(jié)果略高于平板計數(shù)法，因此最終上報的數(shù)據(jù)以平板計數(shù)法為準(zhǔn)。

在實驗中采用了3人獨立操作，因此每個樣品都有3個檢測結(jié)果，但3個結(jié)果之間差異不大，最終以人員A的檢測結(jié)果作為能力驗證的上報結(jié)果。則樣品A812的菌落總數(shù)為1.4×103 CFU·mL-1，樣品Y109的菌落總數(shù)為5.0×103 CFU·mL-1。具體見表3。

綜合上述檢測結(jié)果可知，3個人員質(zhì)控樣品的檢驗結(jié)果均在區(qū)間內(nèi)（質(zhì)控樣品QC-FD-001菌落總數(shù)的特征值區(qū)間為950～3 500 CFU·mL-1），人員比對結(jié)果滿意，數(shù)據(jù)可靠。從能力驗證組織方提供的報告中獲悉，在菌落總數(shù)項目中，全國共有92家實驗室參與，其中78家結(jié)果滿意，滿意率達(dá)到了84.8%。每個實驗室收到兩個菌落總數(shù)樣品，全國共184個樣品，滿意結(jié)果數(shù)164個，滿意率為89.1%。本實驗室樣品A812和Y109的Z值分別為-1.2和-1.1，結(jié)果評價均為滿意，表明本實驗室具備檢測食品中菌落總數(shù)的能力[10]。

3 結(jié)論與討論

雖然此次能力驗證結(jié)果均為滿意，但也存在一些不足之處，如兩個樣品的菌落總數(shù)檢測結(jié)果Z值均偏低、平板上菌落分布不夠均勻、計數(shù)時發(fā)現(xiàn)霉菌蔓延覆蓋等。影響能力驗證結(jié)果準(zhǔn)確性的因素很多，但人為因素尤為關(guān)鍵。微生物檢驗工作非常注重人員操作規(guī)范性，應(yīng)當(dāng)加強相關(guān)培訓(xùn)，提高檢驗檢測人員的操作技能，同時也要從思想上高度重視每一次微生物檢驗工作。為了不斷改進(jìn)和提高檢驗工作質(zhì)量，確保檢驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確真實，應(yīng)對影響檢驗結(jié)果的人員、設(shè)備、材料、檢測方法、環(huán)境條件以及測量因素等進(jìn)行全面控制[11-12]。

通過參加能力驗證，不僅可以加強實驗室質(zhì)量控制，增進(jìn)客戶信任、提升實驗室核心競爭力，對實驗室的生存和發(fā)展也具有長遠(yuǎn)的現(xiàn)實意義[13-16]。實驗室應(yīng)該積極參與、認(rèn)真對待每次能力驗證，并對能力驗證結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，不斷提升實驗室的管理水平和檢測能力[17-18]，確保實驗室檢測結(jié)果的真實可靠，從而更好地為人們的食品安全保駕護(hù)航。

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作者簡介：袁維道（1985—），男，陜西興平人，碩士，工程師。研究方向：藥品、食品、化妝品微生物檢驗。