中醫(yī)藥調(diào)控PI3K/Akt信號通路治療慢傳輸型便秘的研究進展*

王 紅，吳 容，張智彬，唐學(xué)貴

（1.川北醫(yī)學(xué)院研究生院，四川 南充 637001；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610075；3.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，四川 南充 637001）

慢傳輸型便秘（slowtransit constipation，STC）是多種因素造成結(jié)腸傳輸動力減弱所致的慢性疾病，以原發(fā)性排便次數(shù)減少、排便費力、大便干硬為主要表現(xiàn)，是目前臨床便秘診治的重點。我國成年人慢性便秘患病率為4.0%~10.0%[1]，有學(xué)者[2]預(yù)測，隨著社會老齡化和人們生活方式改變，該數(shù)據(jù)將會持續(xù)上升。STC不僅會引起腹痛、會陰脹痛等，還可增加心血管系統(tǒng)疾病發(fā)病率，有致殘致死風(fēng)險[3]，同時因療效不滿意，病情反復(fù)，患者長期處于焦慮、抑郁的狀態(tài)，有害精神健康[4]。STC患者長期承受巨大的生理和心理雙重負(fù)擔(dān)，生命質(zhì)量明顯下降[5]。

目前STC發(fā)病機制尚未完全明確，有效治療方法不多?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療STC以瀉劑、促動力藥或手術(shù)為主，短期內(nèi)療效尚可，但易反復(fù)，且療效不穩(wěn)定。相較之下，中醫(yī)藥在臨床應(yīng)用中療效顯著，具有不良反應(yīng)少、復(fù)發(fā)率低等優(yōu)勢，但作用機制尚不明確。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信號通路與胃腸疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，該信號通路在腸道細(xì)胞組織抗氧化應(yīng)激[6]、炎癥反應(yīng)[7]、黏膜屏障損傷[8]、腫瘤細(xì)胞增殖凋亡[9]中發(fā)揮重要作用，與STC之間的關(guān)系也受到學(xué)者們密切關(guān)注。筆者綜述近5年來中醫(yī)藥通過PI3K/Akt信號通路治療STC的研究進展，以期為今后中醫(yī)藥治療STC提供信息參考。

1 STC發(fā)病機制

STC屬中醫(yī)“大便難”范疇?！端貑枴れ`蘭秘典論篇》記載：“大腸者，傳導(dǎo)之官，變化出焉?！贝竽c受盛化物，其主要作用是接受經(jīng)小腸傳輸?shù)氖澄餁堅瑢⑹Ｓ鄽堅D(zhuǎn)化為糞便，最后傳輸至直腸肛門，排出體外。故糞便的順利排出有賴于大腸傳導(dǎo)功能的正常發(fā)揮。各種原因引起大腸傳導(dǎo)功能失常，如氣滯、氣虛、腸燥等，則會導(dǎo)致糞便秘結(jié)不下。因此，便秘的根本病因在于大腸傳導(dǎo)功能障礙[3]。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為STC發(fā)生的根本原因在于結(jié)腸傳輸動力障礙。由腸神經(jīng)系統(tǒng)（enteric nervous system，ENS）-Cajal間質(zhì)細(xì)胞（interstitial cells of Cajal，ICC）-腸道平滑肌（smooth muscle cells，SMC）共同構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)通過調(diào)節(jié)、傳遞神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)信號調(diào)節(jié)腸道運動，是腸道動力的基本單位[10]。因此，結(jié)腸傳輸動力障礙主要有以下4種因素導(dǎo)致：（1）腸神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)；（2）腸神經(jīng)遞質(zhì)異常；（3）Cajal間質(zhì)細(xì)胞異常；（4）腸道平滑肌功能異常。另外腸道菌群、水通道蛋白也參與其中。

2 PI3K/Akt信號通路生物學(xué)作用

PI3K/Akt信號通路廣泛地參與細(xì)胞生長、增殖、分化[11]。PI3K家族是一類脂質(zhì)激酶，屬于原癌基因，是肌醇與磷脂酰肌醇的重要激酶，由催化亞基p110和調(diào)節(jié)亞基p85構(gòu)成，其本身既具有磷脂酰肌醇激酶活性，又有絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶活性，現(xiàn)有3種分型[12]。PI3K可通過Ras蛋白激活，也可與受體酪氨酸激酶或G蛋白偶聯(lián)受體相互作用而活化[13]。PI3K活化后將二磷酸磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate,PIP2）轉(zhuǎn)化為三磷酸磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol 3,4,5-triphosphate, PIP3）作為第二信使參與Akt磷酸化。Akt是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，共有Akt1、Akt2、Akt3三個亞型，都由氨基末端PH結(jié)構(gòu)域、中心激酶結(jié)構(gòu)域和含有疏水基序的羥基末端調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域組成[14]。PH結(jié)構(gòu)域與PIP3相互作用，使Akt轉(zhuǎn)位到細(xì)胞膜并發(fā)生構(gòu)象改變，在磷酸肌醇依賴性激酶-1（phosphoinositide dependent kinase-1，PDK1）的作用下，Akt的Thr308和Ser473點位磷酸化，Akt完全活化，進一步激活下游因子，產(chǎn)生級聯(lián)反應(yīng)，對周圍細(xì)胞產(chǎn)生調(diào)節(jié)控制作用[14]。激活后的Akt通過作用于核因子E2相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）、核因子-κB（nuclear factorκB，NF-κB）、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）等，促進抗氧化酶及血紅素加氧酶（HO-1）表達(dá)，發(fā)揮抗炎、抗細(xì)胞凋亡等生物學(xué)作用。

更重要的是，有研究[15]發(fā)現(xiàn)在由洛哌丁胺誘導(dǎo)的便秘模型中，PI3K/Akt信號通路通過調(diào)控炎癥反應(yīng)，免疫應(yīng)答主導(dǎo)便秘發(fā)生發(fā)展。GONG W J等[16]通過觀察研究STC細(xì)胞組織和谷氨酸（5 mmol/L，12、24、36、72 h分別給藥1次）誘導(dǎo)的ICC自噬模型發(fā)現(xiàn)，甲基轉(zhuǎn)移樣酶3（METTL3）通過m6A甲基化修飾促進miR-30b-5p成熟，作用于靶向基因PIK3R2，通過PI3K/Akt/mTOR信號通路調(diào)控細(xì)胞自噬和凋亡。提示PI3K/Akt信號通路可以通過抑制ICC自噬，促使ENS-ICC-SMC網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)發(fā)揮正常生理功能，改善結(jié)腸傳輸動力。LI Y J等[17]發(fā)現(xiàn)在糖尿病狀態(tài)下，蛋白酶激活受體2通過PI3K/Akt信號通路介導(dǎo)血小板衍生生長因子受體-α陽性（PDGFRα+）細(xì)胞增殖，功能亢進，導(dǎo)致結(jié)腸傳輸動力減弱，引發(fā)STC，表明PI3K/Akt信號通路參與高血糖環(huán)境中STC發(fā)生發(fā)展。

總之，各種病理因素導(dǎo)致PI3K/Akt信號通路異常表達(dá)，致使結(jié)腸細(xì)胞組織損害，可能是STC發(fā)生的機制之一。PI3K/Akt信號通路也成為治療STC的重要靶向途徑。

3 中醫(yī)藥調(diào)控PI3K/Akt信號通路在STC中的作用機制

中醫(yī)藥治療STC從整體出發(fā)，辨證論治，通過健脾行氣、溫腎益精、滋陰養(yǎng)液、活血化瘀、順氣導(dǎo)滯、生津潤腸等治法，取得了令人滿意的療效。研究發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥調(diào)控PI3K/Akt信號通路治療STC的途徑主要有以下5種：（1）抗氧化應(yīng)激；（2）調(diào)節(jié)腸道神經(jīng)遞質(zhì)；（3）調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬；（4）調(diào)節(jié)腸道水通道蛋白含量；（5）修復(fù)受損腸神經(jīng)元。（見圖1）

圖1 中醫(yī)藥調(diào)控PI3K/Akt 信號通路在STC 中的作用機制

3.1 抗氧化應(yīng)激 PI3K/Akt信號通路活化后產(chǎn)生級聯(lián)反應(yīng)，促使Nrf2核轉(zhuǎn)位，誘導(dǎo)HO-1表達(dá)，增強細(xì)胞抗氧化防御能力[18]。濟川煎、枳術(shù)丸、黃芪、紫檀芪均可通過活化PI3K/Akt信號通路，發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用，修復(fù)受損腸道組織，改善結(jié)腸傳輸動力。

Nrf2/HO-1信號通路是機體最重要的內(nèi)源性保護途徑之一。Nrf2是一種轉(zhuǎn)錄因子，由6個Neh結(jié)構(gòu)域組成，其中N端的Neh2結(jié)構(gòu)域能與Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白（Keap1）結(jié)合。在生理狀態(tài)下Keap1與Nrf2結(jié)合形成復(fù)合物，Nrf2被隔離在細(xì)胞質(zhì)中；在應(yīng)激狀態(tài)下，Keap1與Nrf2分離，Nrf2轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核與抗氧化反應(yīng)元件結(jié)合，誘導(dǎo)Nrf2調(diào)控的下游基因表達(dá)[19]。血紅素加氧酶（HO-1）是一種受Nrf2調(diào)控的誘導(dǎo)應(yīng)激反應(yīng)蛋白，HO-1通過降解血紅素，產(chǎn)生Fe2+、一氧化碳和膽綠素3種活性物質(zhì)，參與細(xì)胞組織抗氧化過程。

濟川煎出自《景岳全書》，具有溫腎益精、潤腸通便的功效，對于脾腎虧虛型便秘療效顯著。WANG X M等[20]以復(fù)方苯氧乙酸混懸液誘導(dǎo)的STC小鼠為研究對象，發(fā)現(xiàn)濟川煎從提高結(jié)腸乙酰膽堿濃度，抑制腸道炎癥和加速腸道蠕動3個方面治療STC。此外，濟川煎能顯著增加結(jié)腸?；撬岷蛠喤；撬岷浚谙嚓P(guān)研究中，兩者與腸道動力呈正相關(guān)，推測通過調(diào)節(jié)結(jié)腸?；撬岷靠梢愿纳芐TC癥狀。該課題組進一步發(fā)現(xiàn)，濟川煎發(fā)中以槲皮素、漢黃芩素為主的活性成分刺激調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號通路及下游Nrf2/HO-1信號通路，逆轉(zhuǎn)STC結(jié)腸中的腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞損傷，上調(diào)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)，改善結(jié)腸傳輸動力。枳術(shù)丸出自《內(nèi)外傷辨惑淪》，以其“補重于消，寓消于補”的精妙配伍和顯著的療效而被廣泛應(yīng)用。武鵬飛等[21]通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析發(fā)現(xiàn)枳術(shù)丸以多途徑治療STC，以木犀草素、柚皮素、川陳皮素為主的活性成分作用于AKT1、MAPK3、MAPK1、TP53等STC治療核心靶點，通過調(diào)控PI3K/Akt信號通路、IL-17信號通路等發(fā)揮作用，其主要生物過程集中在對氧化應(yīng)激反應(yīng)、對活性氧反應(yīng)、對輻射的反應(yīng)等。這提示枳術(shù)丸治療STC具有多成分、多靶點、多途徑的特點。

黃芪味甘，性溫，入肺、脾二經(jīng)，以黃芪湯為代表的中藥湯劑對于改善老年型、肺脾氣虛型便秘療效顯著。因黃芪益氣善補，又能扶正祛邪，能通體虛所致氣機壅滯，恢復(fù)大腸傳導(dǎo)功能。施敏等[22]通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析發(fā)現(xiàn)山柰酚、葉酸、槲皮素、3,9-二-0-甲基尼森香豌豆紫檀酚是黃芪治療STC的主要活性成分，這些活性成分作用于關(guān)鍵核心靶點AKT1、JUN、IL6、VEGF、CASP3，通過對脂多糖的回應(yīng)，絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶復(fù)合物、IL-17、乙型肝炎等信號通路發(fā)揮抑制炎癥反應(yīng)、抗腸黏膜損傷、調(diào)節(jié)腸道菌群和神經(jīng)遞質(zhì)的作用，達(dá)到治療STC的目的。楊金玉等[23]分析發(fā)現(xiàn)槲皮素是黃芪中與STC關(guān)聯(lián)靶點最多、連接度最高的活性成分。研究證實槲皮素改善腸道動力與以下4種機制有關(guān)：（1）通過PI3K/Akt信號通路發(fā)揮神經(jīng)保護作用[24]；（2）激活Nrf2/HO-1信號通路發(fā)揮抗氧化應(yīng)激的作用[25]；（3）改善厚壁菌門種群與變形菌門種群之間的比率，調(diào)整腸道微生態(tài)[26]；（4）誘導(dǎo)調(diào)節(jié)M型乙酰膽堿受體促胃腸蠕動，刺激黏蛋白分泌[27]。槲皮素與黃芪補中益氣，扶正祛邪，疏通氣機等功效息息相關(guān)，提示槲皮素可能是中醫(yī)藥治療STC的關(guān)鍵活性成分之一，但缺乏可靠的實驗證實，在未來可對其進行深入研究。

龍血竭是百合劍葉龍血樹屬植物，屬中醫(yī)活血化瘀藥范疇，味甘、性平，具有抑制血栓形成、抗炎鎮(zhèn)痛等作用。紫檀芪（pterostilbene，PTE）是白藜蘆醇的天然衍生物，因最初在紫檀中發(fā)現(xiàn)而命名，是中藥龍血竭主要抗氧化活性成分之一[28]。YAO Z W等[29]通過洛哌丁胺混懸液誘導(dǎo)制成STC小鼠模型發(fā)現(xiàn)PTE能夠上調(diào)胃動素（motilin，MLT）、胃泌素（gastrin，Gas）表達(dá)水平，逆轉(zhuǎn)洛哌丁胺導(dǎo)致的谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性降低，同時減少氧化應(yīng)激標(biāo)志物丙二醛（malonaldehyde，MDA）含量，減少ICC凋亡。進一步研究發(fā)現(xiàn)，PTE通過上調(diào)PI3K/Akt信號通路表達(dá)，激活下游Nrf2/HO-1信號通路，產(chǎn)生多種抗氧化酶，對抗細(xì)胞凋亡，恢復(fù)腸道蠕動。此外，高劑量PTE能夠顯著改善腸道菌群，增加乳酸菌、嗜膽汁菌等細(xì)菌含量，通過產(chǎn)生腸道硫化氫、丁酸等遞質(zhì)發(fā)揮改善STC癥狀的作用。

3.2 調(diào)節(jié)腸道神經(jīng)遞質(zhì) PI3K/Akt信號通路通過調(diào)節(jié)腸道中一氧化氮（nitric oxide，NO）含量改善結(jié)腸傳輸動力。益氣健脾通便方、化瘀通便湯、養(yǎng)榮潤腸舒合劑、六磨湯聯(lián)合電針療法通過調(diào)節(jié)腸道中NO、血管活性腸肽（vasoactive intestinal polypeptide，VIP）等神經(jīng)遞質(zhì)含量，解除腸道平滑肌抑制狀態(tài)，促進腸蠕動。

NO是一種生物活性極強的氣體神經(jīng)遞質(zhì)，廣泛參與胃腸道平滑肌運動。NO與可溶性鳥苷酸環(huán)化酶相結(jié)合并激活該酶，提高胞內(nèi)cGMP濃度，促使cGMP依賴性蛋白激酶活化或直接作用于cGMP依賴性離子通道，降低胞內(nèi)Ca2+濃度，松弛腸道平滑肌[30]。與傳統(tǒng)神經(jīng)遞質(zhì)不同，NO是由L-精氨酸通過一氧化氮合酶（NOS）按需合成。NOS是NO的限速酶，能夠催化釋放內(nèi)源性NO，Akt可以直接磷酸化內(nèi)皮型NOS（eNOS）[31]。PI3K/Akt信號通路表達(dá)異常導(dǎo)致過量eNOS，NO生成和釋放超過生理需要量，使腸道平滑肌處于被抑制的狀態(tài)，影響腸內(nèi)容物在腸道內(nèi)的傳輸[32]，可能是STC病理機制之一。VIP是儲存于大顆粒囊泡中的一種神經(jīng)遞質(zhì)，通過與其受體結(jié)合激活A(yù)C，使胞內(nèi)ATP產(chǎn)生cAMP，激活cAMP依賴性蛋白激酶，后者既能直接抑制SMC收縮，又能降低肌球蛋白活性使SMC松弛。研究[33]表明，NO和VIP能夠相互刺激釋放。

氣機升降正常是腸道能否發(fā)揮正常功能的關(guān)鍵，中藥通過理氣、益氣等方法可以發(fā)揮治療STC的作用。王建民等[34]運用以補通滯，肺腸同治的理念，選用白術(shù)、黃芪、黨參等8味藥擬成益氣健脾通便方用于治療STC，取得了顯著療效。

研究[35]發(fā)現(xiàn)該方能顯著下調(diào)STC大鼠結(jié)腸組織中p-Akt、NO、eNOS表達(dá)水平，縮短大鼠首粒黑便排出時間，提高糞便含水量，提示益氣健脾通便方通過抑制PI3K/Akt/eNOS信號通路，促使大腸傳導(dǎo)功能得以正常發(fā)揮。此外，相較于枸櫞酸莫沙必利對照組，益氣健脾通便方能夠更顯著的改善STC患者Wexner便秘評分、PAC-QOL評分[36]。路越[37]使用白術(shù)、當(dāng)歸、桃仁、清半夏等13味中藥作為化瘀通便湯，旨在活血化瘀，行氣潤腸。實驗發(fā)現(xiàn)該方通過抑制PI3K/Akt/eNOS信號通路，下調(diào)STC小鼠結(jié)腸組織中NO和VIP表達(dá)，糾正大腸傳輸動力紊亂，治療STC。田振國以“以補治秘”為治法，選用黃精、桃仁、枳殼、肉蓯蓉、柏子仁等中藥制成養(yǎng)榮潤腸舒合劑，以調(diào)和陰陽，扶助正氣[38]。王雪等[39]通過研究分析發(fā)現(xiàn)養(yǎng)榮潤腸舒合劑中槲皮素、柚皮素、β-谷甾醇、山柰酚、黃芩素等成分通過神經(jīng)活性配體-受體相互作用，PI3K/Akt、MAPK等信號通路降低STC大鼠結(jié)腸組織中5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、VIP表達(dá)水平，達(dá)到解除或減弱SMC抑制狀態(tài)，促進腸道蠕動，但該實驗僅對目標(biāo)靶點進行分析檢測，未對其作用機制進行深入分析，還需進一步實驗明確。研究[40]發(fā)現(xiàn)電針（支溝、足三里、上巨虛）聯(lián)合六磨湯通過PI3K/Akt信號通路抑制eNOS，同時下調(diào)AQP3、AQP8、AQP9在結(jié)腸組織中表達(dá)，促進腸道蠕動，增加糞便含水量，達(dá)到治療STC的目的。支溝位于手少陽三焦經(jīng)，調(diào)節(jié)三焦氣機，疏通水道，是治療便秘的經(jīng)驗穴；足三里是胃下合穴，上巨虛是大腸下合穴，兩者同調(diào)則水谷精微得以正常輸布，腑氣通降，大腸傳導(dǎo)功能得以正常發(fā)揮。實驗過程中，電針聯(lián)合六磨湯表現(xiàn)出顯著協(xié)同作用，為中醫(yī)藥治療STC提供了更多選擇和參考

3.3 調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬 PI3K/Akt/mTOR信號通路是經(jīng)典細(xì)胞自噬路徑，對細(xì)胞增殖、生長和分化起核心作用[16]。研究[41]表明自噬失調(diào)與胃腸道動力障礙密切相關(guān)?；鐾ū惴?、枳實-白術(shù)藥對、電針療法通過PI3K/Akt/mTOR信號通路糾正腸道細(xì)胞自噬紊亂，維持腸道自噬平衡，改善腸道功能。

自噬是一種廣泛存在于真核細(xì)胞中的機制，通過吞噬自身的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞器，形成自噬小體與溶酶體結(jié)合，產(chǎn)生自噬溶酶體，清除衰老細(xì)胞、受損細(xì)胞器和錯誤折疊的蛋白，以維持細(xì)胞環(huán)境穩(wěn)態(tài)[42]。哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是位于PI3K/Akt信號通路下游細(xì)胞自噬路徑的重要信號分子，形成的mTOR復(fù)合物1（mTORC1）對雷帕霉素尤為敏感。mTORC1通過抑制蛋白質(zhì)分解代謝[43]、抑制轉(zhuǎn)錄因子EB的核易位調(diào)控細(xì)胞自噬[44]。過度自噬產(chǎn)生大量自噬體，超過溶酶體承載數(shù)量，引發(fā)細(xì)胞過度凋亡；自噬不足則會影響衰老細(xì)胞清除和蛋白質(zhì)降解。

臨床上STC以起病緩，病程長為主要特征，“初病治氣，久病治血”，久病入絡(luò)，正氣虧損，血行不暢，則瘀血阻滯，脈絡(luò)不通。針對這一病理特征，于永鐸以活血化瘀、解毒通絡(luò)為治則，選用當(dāng)歸、生地黃、半夏等藥物擬成化瘀通便湯治療STC，療效顯著[45]。孫宇等[46]研究發(fā)現(xiàn)化瘀通便湯通過PI3K/Akt信號通路發(fā)揮治療STC的作用。滿如等[47]研究證實化瘀通便湯劑量依賴性下調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3、Beclin 1和Atg5，增強p62表達(dá)水平，推測化瘀通便湯可以通過PI3K/Akt信號通路修正STC發(fā)病過程中ICC過度自噬，修復(fù)結(jié)腸組織，恢復(fù)腸道功能，但并未對其中關(guān)鍵信號分子進行深入研究。YAN S等[48]用枳實-白術(shù)含藥血清孵育谷氨酸誘導(dǎo)的體外ICC自噬模型，發(fā)現(xiàn)血清中柚皮蘆丁、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷4種活性成分促使PI3K/Akt/mTOR信號通路失活，抵抗谷氨酸誘導(dǎo)的ICC自噬，提高ICC細(xì)胞活性。但該研究以體外培養(yǎng)的ICC自噬模型為載體，缺乏體內(nèi)實驗證據(jù)，PI3K/Akt/mTOR信號通路對ICC細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)作用還需進一步研究確認(rèn)。WANG L等[49]發(fā)現(xiàn)電針針刺天樞、上巨虛能夠上調(diào)結(jié)腸肌叢中LC3、Beclin 1蛋白表達(dá)水平，改善STC小鼠癥狀，其機制是通過PI3K/Akt/mTOR信號通路糾正腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中自噬失衡，達(dá)到清除受損細(xì)胞器和錯誤蛋白，修復(fù)腸神經(jīng)元，改善結(jié)腸傳輸動力。

3.4 調(diào)節(jié)腸道水通道蛋白 PI3K/Akt信號通路通過調(diào)節(jié)結(jié)腸組織中AQPs含量，參與結(jié)腸中水液代謝，調(diào)節(jié)糞便含水量[50]。水通道蛋白（aquaporin, AQP）是一種膜內(nèi)蛋白質(zhì)，主要負(fù)責(zé)滲透梯度驅(qū)動的跨膜水運動，參與腸道中水的分布吸收。研究[51]發(fā)現(xiàn)，AQP3大量分布在結(jié)腸上皮細(xì)胞基底膜外側(cè)和隱窩頂部，具有參與水轉(zhuǎn)運和維持腸上皮細(xì)胞完整性的作用；在近端結(jié)腸柱狀上皮中有AQP8大量分布，介導(dǎo)跨上皮細(xì)胞水運動；兩者與結(jié)腸水分重吸收關(guān)聯(lián)密切。

大腸主津，大腸傳導(dǎo)功能有賴于津液代謝，津虧則大腸失去濡潤，糞便在腸道內(nèi)干澀難行。朱秉宜以“清”“潤”為治則研制朱氏潤腸方，并取得了良好療效[52]。孟君等[53]研究發(fā)現(xiàn)朱氏潤腸方通過抑制PI3K/Akt信號通路降低結(jié)腸AQP3、AQP8表達(dá)。AQP3、AQP8在STC治療中對腸道水分調(diào)節(jié)起負(fù)反饋作用[54]，朱氏潤腸方通過下調(diào)兩者在結(jié)腸組織中表達(dá)，抑制腸道對水分的過度吸收，提高糞便含水量，減少排便阻力，達(dá)到潤腸通便的治療效果。

3.5 修復(fù)受損腸神經(jīng)元 GDNF/PI3K/Akt信號通路在改善胃腸道功能方面發(fā)揮著重要作用，能夠逆轉(zhuǎn)高血糖導(dǎo)致腸神經(jīng)元凋亡，誘導(dǎo)受損腸神經(jīng)元再生，改善胃腸動力[55]；下調(diào)功能性便秘結(jié)腸組織中mTOR表達(dá)，修復(fù)結(jié)腸細(xì)胞組織，恢復(fù)腸道蠕動[56]。膠質(zhì)細(xì)胞衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial cell line-derived neurotrophin factor,GDNF）是主要神經(jīng)營養(yǎng)因子之一，有助于受損細(xì)胞的修復(fù)存活和軸突再生，在腸道中由腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分泌。GDNF經(jīng)過Ret活化與其受體GDNFα1形成復(fù)合物，Ret分子與該復(fù)合物二聚化后通過酪氨酸殘基自磷酸化形激活MAPK/ERK、PI3K/AKT、PLCγ等信號通路[57]。孫路強等[58]用復(fù)方地芬諾酯混懸液誘導(dǎo)GDNFα1基因敲除小鼠為功能性便秘模型，發(fā)現(xiàn)電針刺激（天樞、大腸俞）對小鼠胃腸動力并無改善作用，GDNF表達(dá)受到抑制，表明基因敲除后，GDNF與GDNFα1復(fù)合物減少，Ret同源二聚化和自磷酸化功能受到減弱，最終影響下游PI3K/Akt信號通路。但該課題組在實驗過程中發(fā)現(xiàn)針刺后PI3K、Akt蛋白表達(dá)水平仍然有一定程度的下調(diào)，可能與PI3K信號通路的負(fù)反饋有關(guān)。但仍然提示可以通過刺激上調(diào)腸道內(nèi)GDNF含量，激活下游PI3K/Akt信號通路誘導(dǎo)腸神經(jīng)元修復(fù)再生，修復(fù)ENS-ICC-SMC網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，改善胃腸動力以治療STC，但還需進行更多實驗驗證。

4 總結(jié)與展望

PI3K/Akt信號通路是細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)經(jīng)典途徑之一，參與細(xì)胞生長、凋亡，炎癥反應(yīng)等，其表達(dá)異常與STC發(fā)生發(fā)展存在密切關(guān)聯(lián)。整理文獻(xiàn)過程中發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥基于PI3K/Akt信號通路治療STC，通過溫腎、益氣、潤腸、化瘀、行氣等治法促使大腸傳導(dǎo)功能恢復(fù)正常，其機制與抗氧化應(yīng)激、促進腸道平滑肌蠕動、平衡細(xì)胞自噬、調(diào)節(jié)腸道水分吸收、修復(fù)受損腸神經(jīng)元等有關(guān)，從而發(fā)揮修復(fù)ENS-ICC-SMC網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，恢復(fù)結(jié)腸電節(jié)律，促進腸蠕動的作用。并在安全性、長期有效性方面展現(xiàn)出了顯著優(yōu)勢。但仍存在一些問題需要在今后的研究中解決。

首先，PI3K/Akt信號通路是一系列靶蛋白的信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中心，與多條信號通路存在級聯(lián)或交叉反應(yīng)，筆者綜述中多數(shù)研究主要集中于PI3K/Akt信號通路與某個關(guān)聯(lián)靶蛋白之間的關(guān)系，僅明確了兩者之間的相關(guān)性，未能對其具體作用機制，與其他信號通路之間是否存在互相干擾進行深入研究闡釋。其次，現(xiàn)階段中醫(yī)藥基于PI3K/Akt信號通路治療STC的研究更多地針對ICC、SMC的改善修復(fù)，ENS-ICC-SMC作為腸道動力的基本單位，三者缺一不可，通過對各靶蛋白與該網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的關(guān)系進行深入研究，為治療STC提供更多思路。此外，中醫(yī)治療以“辨證論治”為基本治療原則，在基礎(chǔ)研究中難以復(fù)制完全符合人類疾病的動物模型，導(dǎo)致實驗結(jié)果與臨床療效之間可能存在差異，在接下來的研究中還需聯(lián)系STC具體臨床表現(xiàn)制定客觀標(biāo)準(zhǔn)，為更加充分發(fā)揮中藥治療優(yōu)勢奠定基礎(chǔ)。

中藥所含成分復(fù)雜，藥物產(chǎn)地、炮制方式、給藥方式的不同都有可能導(dǎo)致藥物活性成分改變，在臨床運用中療效參差不齊。加之中醫(yī)藥治療STC存在多靶點、多途徑、多層次的特點，明確不同活性成分與相關(guān)靶點、途徑之間的關(guān)系，并進一步研究其體內(nèi)代謝過程，對于提高臨床用藥的安全性和有效性具有較高的指導(dǎo)價值。本次綜述中部分研究以名專家經(jīng)驗方為中心展開，可能存在一定地區(qū)限制，導(dǎo)致難以推廣，可在今后對其中的關(guān)鍵活性成分進行提取研究，將現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)與之結(jié)合，更廣地運用于STC患者。

綜上，中醫(yī)藥基于PI3K/Akt信號通路治療STC具有治法多樣，安全有效的特點，但STC發(fā)病機制復(fù)雜，還需進一步發(fā)揮祖國醫(yī)學(xué)優(yōu)勢，深層次研究中醫(yī)藥治療STC的作用機制，為基礎(chǔ)研究成果向臨床試驗轉(zhuǎn)化提供可靠依據(jù)。