通過全血細(xì)胞分析儀篩選出1例輸入性三日瘧

趙巧,秦林,唐志德,梁湘輝

(1.寧鄉(xiāng)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖南寧鄉(xiāng)410600;2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)院檢驗(yàn)科,長(zhǎng)沙410000)

瘧疾是一種嚴(yán)重威脅人類健康和生命安全的重要傳染病,被WHO列為全球三大公共衛(wèi)生問題之一。隨著全球化進(jìn)程的不斷加快,輸入性瘧疾已成為臨床上主要的瘧疾類型。2017年,我國(guó)實(shí)現(xiàn)了無本地感染瘧疾病例的突破[1]。本文報(bào)道1例通過全血細(xì)胞分析儀篩查發(fā)現(xiàn)的輸入性三日瘧病例。該病例充分展示了將全血細(xì)胞分析儀散點(diǎn)圖分析與常規(guī)血涂片鏡檢相結(jié)合的優(yōu)勢(shì),可提高瘧原蟲感染的檢出率,避免漏診,從而實(shí)現(xiàn)瘧疾的早期確診,降低重癥瘧疾發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),防止疾病進(jìn)一步傳播。

1 病歷資料

患者,男性,52歲。2022年2月至7月在幾內(nèi)亞工作5個(gè)月,當(dāng)年回國(guó)后20多天因“間斷發(fā)熱、身痛1周”于8月23日入院就診。體檢所見:體溫38.5 ℃,心率86次/分鐘,血壓128 mmHg/90 mmHg,全身皮膚黏膜正常,未見皮疹,雙肺呼吸音清晰。實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果:白細(xì)胞計(jì)數(shù)5.15×109/L,血紅蛋白151 g/L,血小板計(jì)數(shù)193×109/L,中性粒細(xì)胞百分比57.9%,C反應(yīng)蛋白86.77 mg/L。尿常規(guī)、糞便常規(guī)、肝腎功能、心肌酶、凝血功能均正常。感染相關(guān)檢查陰性,包括肥達(dá)試驗(yàn)、輸血前四項(xiàng)、血培養(yǎng)等。兩次血涂片鏡檢及瘧疾抗體、登革熱抗體檢測(cè)均為陰性。

2022年8月28日,患者處于畏寒期,行靜脈血采集。經(jīng)全血細(xì)胞分析儀檢測(cè),發(fā)現(xiàn)DIFF通道散點(diǎn)圖異常,在中性粒細(xì)胞左下方及嗜酸細(xì)胞上方出現(xiàn)異常散點(diǎn)群(見圖1)。分析儀研究參數(shù)顯示:瘧原蟲感染紅細(xì)胞0.05‰,感染紅細(xì)胞絕對(duì)值45(正常<40,>40報(bào)警)。

圖1 全血細(xì)胞分析儀散點(diǎn)圖

為進(jìn)一步確認(rèn)診斷,同時(shí)制作了EDTA-K2抗凝血厚薄血涂片,經(jīng)瑞吉染色后鏡檢觀察。厚涂片上可見呈典型的菊花狀瘧原蟲裂殖體;薄涂片上感染紅細(xì)胞大小正常,環(huán)狀體胞質(zhì)呈深藍(lán)色,環(huán)較粗大,具有單個(gè)核。未成熟裂殖體較小、圓形,核開始分裂,瘧色素集中。成熟裂殖體的6～12個(gè)裂殖子排列成環(huán),瘧色素集中于中央呈菊花狀。綜合形態(tài)學(xué)特征,初步診斷為三日瘧感染。

結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、流行病學(xué)史和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果,最終確診為輸入性三日瘧疾病。診斷依據(jù):(1)間歇性發(fā)熱、寒戰(zhàn)(72小時(shí)周期);(2)有瘧疾流行區(qū)工作居住史;(3)全血細(xì)胞分析儀發(fā)現(xiàn)異常并經(jīng)血涂片鏡檢確認(rèn);(4)長(zhǎng)沙市疾控中心復(fù)核確認(rèn)三日瘧原蟲感染,三日瘧核酸檢測(cè)陽性。經(jīng)及時(shí)抗瘧治療,患者病情好轉(zhuǎn),出院后隨訪3～6個(gè)月無復(fù)發(fā)。

根據(jù)全血細(xì)胞分析儀的異常報(bào)警和研究參數(shù)提示,使用自動(dòng)推片染色機(jī)推片并進(jìn)行自動(dòng)閱片。結(jié)果可見瘧原蟲裂殖體(見圖2、圖3)。

圖2 全血細(xì)胞分析自動(dòng)閱片機(jī)拍攝圖片(×1 000)

注:厚血膜片上,A,裂殖體;薄血膜片上,B,環(huán)狀體,C,未成熟裂殖體,D,成熟裂殖體。

2 討論

本例為一起來自非洲幾內(nèi)亞地區(qū)的輸入性三日瘧病例,72 h周期性發(fā)熱與流行病學(xué)史吻合,近年我國(guó)已有類似非洲輸入性三日瘧報(bào)道[2]。目前瘧疾實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要有3種方法:免疫學(xué)快速診斷試劑、血涂片鏡檢和分子生物學(xué)檢測(cè)[3]。快速診斷試劑操作簡(jiǎn)便但無法分型;分子生物學(xué)靈敏度高但儀器設(shè)備要求較高,不利于基層推廣;血涂片鏡檢雖費(fèi)時(shí)但通用性強(qiáng),是臨床上常用的參考方法。全血細(xì)胞分析儀通過檢測(cè)細(xì)胞體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)復(fù)雜度和核酸含量等差異對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分型和計(jì)數(shù)。瘧原蟲感染紅細(xì)胞的散點(diǎn)分布位于中性粒細(xì)胞下方,熒光信號(hào)低于其他白細(xì)胞。嗜酸性粒細(xì)胞區(qū)域也可見異常散點(diǎn),可能由于白細(xì)胞吞噬瘧色素所致[4-5]。三日瘧原蟲的鏡檢特征包括:寄生紅細(xì)胞不脹大或略縮小;環(huán)期粗大環(huán)狀體;帶狀胞漿;菊花狀排列的裂殖體;粗大瘧色素等[6]。本例前兩次血涂片陰性可能與采血時(shí)機(jī)不當(dāng)、制片不規(guī)范、技能缺陷、蟲量低和缺乏全面閱片及與儀器結(jié)果結(jié)合等因素有關(guān)[7]。

總之,瘧疾檢驗(yàn)需要全面運(yùn)用血涂片鏡檢、全血細(xì)胞分析儀分析等多種手段,結(jié)合臨床和流行病學(xué)資料綜合判斷。規(guī)范操作、扎實(shí)的專業(yè)知識(shí)、細(xì)致入微的工作作風(fēng)及現(xiàn)代化智能輔助分析手段的應(yīng)用,對(duì)于及時(shí)發(fā)現(xiàn)瘧原蟲感染至關(guān)重要。