基因遞送中陽離子脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)對轉(zhuǎn)染效率及細胞毒性的影響研究進展

邢浩宇，孫潔芳，董慧勝，高千龍，潘琪霏，馬茜，李迎

（1.云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，云南昆明 650500；2.北京茵諾醫(yī)藥科技有限公司，北京 100915）

脂質(zhì)是人體細胞不可缺少的重要組成部分［1］。自1960 年被Bangham 和Horne［2］發(fā)現(xiàn)以來，脂質(zhì)體一直作為極具潛力的藥物遞送系統(tǒng)被廣泛研究，其增強藥效的同時兼具靶向能力，能夠減少藥物其體內(nèi)蓄積，降低藥物不良反應(yīng)［3］。

基因藥物載體主要分為病毒和非病毒載體。病毒載體雖然極大推動了基因治療的發(fā)展，但因其免疫原性強、細胞毒性較大等因素制約了其應(yīng)用。脂質(zhì)體是非病毒載體中應(yīng)用最為廣泛的策略之一。相較于中性脂質(zhì)體，陽離子脂質(zhì)體對基因的負載能力及轉(zhuǎn)染效率較高，且因易制備、可重復(fù)及生物降解性好被作為非病毒載體中的優(yōu)選［4］。

載藥陽離子脂質(zhì)體進入體內(nèi)后通常以3種不同的形式存在：完整的脂質(zhì)體、釋放出來的游離藥物和脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中的聚合物材料［4］。有研究表明，陽離子脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)對其轉(zhuǎn)染效率至關(guān)重要［5］。脂質(zhì)體的組成材料也并非惰性、無毒，也可能影響基因藥物的體內(nèi)藥動學(xué)過程，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率、靶向能力及不良反應(yīng)的改變。

本文主要綜述陽離子脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)對于轉(zhuǎn)染效率及細胞毒性的影響，為陽離子脂質(zhì)體載基因藥物的設(shè)計和研究提供一定的理論支持。

1 陽離子脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)

陽離子脂質(zhì)體與脂質(zhì)體類似，通常是直徑在20～1000 nm 之間的球形脂質(zhì)囊泡，具有一層或多層由磷脂構(gòu)成的雙層膜結(jié)構(gòu)［3，6］（圖1A）。

圖1 陽離子脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)（A）及陽離子脂質(zhì)單元組成（B）.

陽離子脂質(zhì)體主體由陽離子脂質(zhì)單元和輔助脂質(zhì)組成。陽離子脂質(zhì)單元從結(jié)構(gòu)上分為親水陽離子頭部、疏水脂質(zhì)尾部和連接鍵3 部分（圖1B），均可對脂質(zhì)體行為造成一定影響，也是影響體內(nèi)過程的主要因素［6-7］。

1.1 親水陽離子頭部

陽離子脂質(zhì)的親水頭部通常帶有正電荷，在包載核酸類帶有負電荷物質(zhì)時起至關(guān)重要的作用。絕大多數(shù)用于基因遞送的陽離子是通過氮原子引入的，常見類別有季銨鹽、胺類（伯、仲、叔胺）、氨基酸或肽類、胍類、雜環(huán)類以及復(fù)合型頭部［8］。陽離子脂質(zhì)體性質(zhì)與環(huán)境pH及其pKa均有一定關(guān)系，pKa越大，pH越低，則堿性相對越強，利于與核酸結(jié)合。

陽離子頭部通過靜電力吸引帶負電荷物質(zhì)，用作基因遞送載體時可較大程度增加基因包封率。陽離子頭部還能與內(nèi)體膜陰離子相吸引，降低內(nèi)體膜穩(wěn)定性，促進膜融合，從而達到逃逸效果［9］。

1.2 疏水脂質(zhì)尾部

陽離子脂質(zhì)尾部通常是由不同結(jié)構(gòu)的脂肪烴鏈組成的，也存在以固醇類結(jié)構(gòu)為尾部的脂質(zhì)。脂肪烴鏈根據(jù)其結(jié)構(gòu)特征可分為不飽和鏈、多尾鏈、多分支鏈和聚合鏈等。其中，脂肪鏈的不飽和度、鏈長、支鏈數(shù)量以及不對稱性均可對脂質(zhì)體的體內(nèi)過程產(chǎn)生影響。隨著鏈長的減少，脂質(zhì)體在體內(nèi)的轉(zhuǎn)染效率越高［10］。有研究表明，脂肪鏈的不飽和度越高、支鏈數(shù)量越多、不對稱性越高時，脂質(zhì)體表現(xiàn)出的轉(zhuǎn)染效率越高［11］，這可能是由于結(jié)構(gòu)的變化改變了其相變溫度，賦予了雙層膜更好的流動性，有利于跨膜轉(zhuǎn)運［12］。

1.3 連接鍵

脂質(zhì)的親脂端和親水端之間往往通過不同的連接鍵連接，連接鍵決定了磷脂和脂質(zhì)體的穩(wěn)定性和毒性，同時影響基因遞送的轉(zhuǎn)染效率。一些學(xué)者利用連接鍵的這個特點設(shè)計了生物可降解的陽離子脂質(zhì)體，以避免體內(nèi)蓄積帶來的毒性［13］。陽離子脂質(zhì)體中采用的連接鍵主要包括醚鍵、酯鍵、酰胺鍵、氨基甲酸酯、二硫鍵、酰腙、尿素和磷酸，還包括肉毒堿、縮酮、天冬氨酸和谷氨酸及二羥基苯等一些特殊的連接鍵［14］。

常見的連接鍵中，醚鍵可提供較高的體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率，但其生物降解性差，通常會帶來較大的細胞毒性；相反，酯鍵化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，但在體內(nèi)具有良好可降解性，毒性較低；酰胺鍵降低相轉(zhuǎn)變溫度，可使脂質(zhì)體的雙層膜結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，與酯鍵相比，其可能與相領(lǐng)脂質(zhì)的羰基形成氫鍵，而使脂質(zhì)體表現(xiàn)出更佳的穩(wěn)定性［14］；此外，一些pH 敏感型脂質(zhì)體和生物可降解脂質(zhì)體都使用了一些易受環(huán)境影響的連接鍵，如氨基甲酸酯和腙［9，11，15］。

1.4 輔助脂質(zhì)

盡管單一的陽離子脂質(zhì)體能夠完成基因遞送，但通常還是會加入一些輔助物質(zhì)，如膽固醇等，以增加膜穩(wěn)定性，提高遞送效率［16］。

基因遞送的限速步驟在于攜帶DNA/RNA 跨膜轉(zhuǎn)運，單用一種陽離子脂質(zhì)時，跨膜時的瞬時穩(wěn)定性差，若加入輔助脂質(zhì)如1，2-二油酰基甘油-3 磷脂酰乙醇胺（1，2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphatidylethanolamine，DOPE）則能增強其穩(wěn)定性。膜融合時，由于DOPE 頭部小、尾部大，可形成較為穩(wěn)定的錐形結(jié)構(gòu)，最終形成倒六邊形的空間結(jié)構(gòu)，增加膜的融合性。因此，DOPE 這類輔助脂質(zhì)也被稱為融合脂質(zhì)［17］。膽固醇的加入通常用來提高膜穩(wěn)定性，膽固醇嵌入在脂質(zhì)間的空隙中，大大增加脂質(zhì)層密度，同時減少相鄰脂質(zhì)間的作用，進而增加藥物的包封率。其中，膽固醇的加入量也對脂質(zhì)體的穩(wěn)定性及藥物的釋放有一定影響。研究表明，脂質(zhì)∶膽固醇為70%∶30%時可使脂質(zhì)體達到最穩(wěn)定的狀態(tài)［18-19］。

聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）作為一種具有長循環(huán)作用的修飾物，與脂質(zhì)結(jié)合后通過其較大的體積對脂質(zhì)體進行保護，防止脂質(zhì)體被腎清除，被酶降解以及被免疫系統(tǒng)識別，達到免疫逃逸及體內(nèi)長循環(huán)作用，同時改善脂質(zhì)體的基因遞送效率［20-21］。

2 陽離子脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)對轉(zhuǎn)染效率和毒性的影響

陽離子脂質(zhì)體的各個組成部分對其體內(nèi)的遞送過程均有一定的影響，表1 整理了目前常見的陽離子脂質(zhì)體及其組成部分的特征［22］，其化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖2。非病毒載體有較低的免疫原性，且易制備、成本低，但轉(zhuǎn)染效率相對較低，細胞毒性高，靶向性較差［35］。陽離子脂質(zhì)體作為非病毒載體中的代表之一，轉(zhuǎn)染效率和細胞毒性也成為體內(nèi)過程的主要考察指標。

表1 陽離子脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征

圖2 不同陽離子脂質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu).

2.1 陽離子頭部

在DNA 遞送時陽離子脂質(zhì)體的形成過程相對復(fù)雜，預(yù)形成脂質(zhì)體時，根據(jù)陽離子脂質(zhì)結(jié)構(gòu)組成的不同，表現(xiàn)出不同的形成機制和構(gòu)象，這主要與陽離子脂質(zhì)中排列參數(shù)（P）有關(guān)：式中，v表示烴基尾部的分子體積；a表示親水頭部的橫截面積；l表示親脂鏈的長度。

P與DNA 和脂質(zhì)的比例有密切關(guān)系，通常用來衡量陽離子脂質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)平衡性。P＜1/3 時，脂質(zhì)呈球形膠束；1/3＜P＜1/2 時，陽離子頭部較大，脂質(zhì)尾部較小，脂質(zhì)在空間上呈類似甜筒狀，整體以六邊形結(jié)構(gòu)排列（HⅠC型）；P＜1 時，脂質(zhì)通常排列成雙分子層，因為頭與尾部橫截面仍有差距，因此通常是具有曲度和流動性的雙層膜；當P=1 時，即兩端完全平衡，此時脂質(zhì)分子呈圓柱形，宏觀為平行的雙層膜結(jié)構(gòu)（LαC型）；相反，當P＞1 時，脂質(zhì)尾部占據(jù)較大的空間，此時形成的脂質(zhì)通常呈反轉(zhuǎn)膠束狀態(tài)，同樣以六邊形形式排列（HⅡC型）（圖3）。此外，脂質(zhì)尾部越大，脂質(zhì)體越不穩(wěn)定，易形成一種倒置的六邊形結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)親脂性較強，能促進脂質(zhì)融合，因此脂質(zhì)體和內(nèi)體膜之間會更易結(jié)合，能一定程度上改善遞送和轉(zhuǎn)染效率［7，36-38］。

圖3 不同排列參數(shù)（P）下的脂質(zhì)結(jié)構(gòu).

因自身攜帶的正電荷，陽離子脂質(zhì)體具有不容忽視的細胞毒性，其陽離子頭部是影響細胞毒性的主要因素，表面電荷增加，細胞毒性也隨之增強［40］。陽離子頭部大多是由胺類結(jié)構(gòu)引入的帶正電荷結(jié)構(gòu)，也有以堿性氨基酸和肽類作為頭部的脂質(zhì)。崔韶暉等［41］研究了一種季銨頭部的陽離子脂質(zhì)CDA14 和一種三肽頭部的陽離子脂質(zhì)CDO14 對細胞毒性的影響，結(jié)果表明季銨頭部脂質(zhì)的細胞毒性要高得多。因此，大多常用的陽離子脂質(zhì)都可能具有較高的細胞毒性，這也是現(xiàn)在可電離脂質(zhì)研究越來越多的原因?？呻婋x脂質(zhì)在體循環(huán)的生理pH 條件下不帶電荷，所以處于內(nèi)體的酸性條件時，質(zhì)子化表現(xiàn)出陽離子性質(zhì)，相較于陽離子脂質(zhì)體細胞毒性降低［7，36］。

2.2 脂質(zhì)尾部

親脂的尾部區(qū)域決定了雙層膜的相變溫度和流動性，同時也影響脂質(zhì)體的穩(wěn)定性、內(nèi)體逃逸以及核酸釋放。其在體內(nèi)的過程不同，毒性的強弱也不盡相同［42］。疏水的脂質(zhì)尾通常是脂肪烴鏈，但據(jù)其鏈長、支鏈的有無以及鏈中含有的官能團不同，脂質(zhì)尾部的性能也有所區(qū)別［43］。

多數(shù)脂質(zhì)以甘油為骨架結(jié)構(gòu)，連接3 個較長的脂肪酸鏈形成。天然磷脂多是不飽和脂肪酸鏈，而合成脂質(zhì)則可是飽和的脂肪鏈［3］；飽和鏈與不飽和鏈相比，轉(zhuǎn)染效率明顯較低。脂肪鏈多以雙尾結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)，但也有類似于十六烷基三甲基銨的單尾脂肪鏈，盡管其在核酸遞送中效果較好，但其毒性大，這也表明單尾脂質(zhì)可能顯示出更高的毒性［24］。支鏈較多的脂質(zhì)占據(jù)較大的空間，相鄰的2 條或多條鏈間有較大位阻，易形成較大橫截面，形成錐形空間結(jié)構(gòu)，可增加載脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率［36］。此外，甘油骨架結(jié)構(gòu)在空間上相對比較對稱，但尾部2 條鏈結(jié)構(gòu)如極其不對稱，也易形成錐形結(jié)構(gòu)，向HⅡC的排列方式發(fā)展，故轉(zhuǎn)染效率較高。

2.3 連接鍵

目前很多學(xué)者認為陽離子頭部與疏水的脂質(zhì)尾部之間的連接是一個區(qū)域，因此連接部分應(yīng)基于連接鍵與骨架來討論［44］。但除甘油骨架脂質(zhì)外，其余脂質(zhì)并無固定骨架，因此目前以研究連接鍵的作用居多。

2，3-二油氧基丙基三甲基氯化銨（2，3-dioleoyloxy-3-trimethylammoniumpropane，DOTAP）是常用的陽離子脂質(zhì)，其連接鍵是酯鍵。Lou 等［34］研究發(fā)現(xiàn)，與連接鍵為碳碳鍵的二甲基雙十八烷基胺相比，DOTAP 在基因遞送時的清除率較高，但濃度時間曲線下面積較低，表明酯鍵連接的陽離子脂質(zhì)在體內(nèi)擁有較好的消除能力，毒性相對較小，但同時意味著其在體內(nèi)停留時間較短，生物利用度和轉(zhuǎn)染效率不如醚鍵連接的脂質(zhì)體。含醚鍵的1，2-雙十八烯氧基-3-甲基銨丙烷與含酯鍵的DOTAP 相比，體外釋放過程略顯緩慢，醚鍵提供了體內(nèi)高轉(zhuǎn)染率，隨之而來的是生物降解性差，與酯鍵相反，易產(chǎn)生高毒作用［45］。除最常見醚鍵和酯鍵外，其他連接鍵對脂質(zhì)體的體內(nèi)過程也有較大影響，如酰胺鍵能提供穩(wěn)定的遞送環(huán)境，氨基酸類和多肽類陽離子脂質(zhì)中也常以酰胺鍵作為連接域中的一部分。氨基甲酸酯作為生物可降解型脂質(zhì)的典型代表，易受環(huán)境因素如pH 的影響，其在體內(nèi)循環(huán)過程較為穩(wěn)定，一旦分布到細胞內(nèi)，受內(nèi)體較低pH 的影響會加速代謝，因此由這類連接鍵形成的脂質(zhì)通常毒性低，備受研究者的青睞。

2.4 輔助脂質(zhì)

膽固醇無論作為陽離子脂質(zhì)的尾部結(jié)構(gòu)，還是作為輔助脂質(zhì)，都是脂質(zhì)體制備中十分重要的部分，膽固醇類及其衍生物能增強脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率；另外，PEG 化修飾的脂質(zhì)具有明顯的體內(nèi)長循環(huán)作用，能明顯改善脂質(zhì)體的藥動學(xué)參數(shù)。除延長循環(huán)半衰期外，PEG 化脂質(zhì)的血漿濃度峰值較低，波動較小，這為脂質(zhì)體的體內(nèi)分布過程提供了較為穩(wěn)定的環(huán)境，即使在體內(nèi)循環(huán)時間較長，也不會導(dǎo)致細胞毒性的提高。脂質(zhì)體表面修飾的PEG 鏈能保護脂質(zhì)體免受酶和免疫系統(tǒng)的識別，含有支鏈的PEG 在空間上占據(jù)較大面積，能對脂質(zhì)體提供更好的保護［20］。

3 可電離陽離子脂質(zhì)結(jié)構(gòu)特點及已上市產(chǎn)品

由于陽離子脂質(zhì)的正電荷在體內(nèi)長時間存在會引入不容小覷的細胞毒性，可電離脂質(zhì)的出現(xiàn)與應(yīng)用顯示了極大的優(yōu)越性?？呻婋x陽離子脂質(zhì)是RNA 遞送系統(tǒng)的重要組成部分，直接決定RNA 轉(zhuǎn)染和療效，其在不同pH 環(huán)境下可改變電荷密度，能解決傳統(tǒng)陽離子脂質(zhì)引入的毒性問題［46］。

3.1 常見可電離陽離子脂質(zhì)結(jié)構(gòu)

目前具有代表性的可電離脂質(zhì)特征見表2，化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖4。

表2 可電離陽離子脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征

圖4 典型可電離脂質(zhì)結(jié)構(gòu).

3.1.1 含胺頭基

可電離脂質(zhì)與普通陽離子脂質(zhì)骨架結(jié)構(gòu)類似，但可電離脂質(zhì)多以叔胺作為頭基，在循環(huán)中不表現(xiàn)出正電荷特征，因此不會帶來明顯細胞毒性。在較低pH 環(huán)境下，陽離子頭部的胺發(fā)生質(zhì)子化，從而發(fā)揮陽離子脂質(zhì)體作用［36］。此外，可電離脂質(zhì)在與基因結(jié)合穩(wěn)定時呈電荷平衡，在內(nèi)環(huán)境中表現(xiàn)出較低的表面電勢，從而起到降低細胞毒性作用［44］。目前針對新型冠狀病毒感染研制的mRNA 疫苗采用的SM-102 和ALC-0315 等［47］，基于合成理念設(shè)計的DLin-MC3-DMA 和DLin-KC2-DMA，以及高通量篩選得到的C12-200 和cKK-E12 均是具有代表性的可電離脂質(zhì)［50］。此外，各類新一代可電離脂質(zhì)也在不斷涌現(xiàn)，具備可降解性質(zhì)的可電離脂質(zhì)也逐步成為目前設(shè)計的趨勢。

諸多研究表明，基因遞送效率與內(nèi)涵體逃逸有直接聯(lián)系。可電離脂質(zhì)具備根據(jù)不同pH 調(diào)節(jié)電荷的能力，且用其制備的脂質(zhì)納米粒在酸性pH 下能形成非雙層膜結(jié)構(gòu)，對內(nèi)體逃逸及RNA遞送效率有舉足輕重的影響［51-52］。有研究表明，可電離脂質(zhì)在遞送RNA 時促進內(nèi)體逃逸，改變了其空間分布，同時對RNA在組織的蓄積和藥效均有一定影響；但小干擾RNA 在組織累積過多也會影響細胞活力和內(nèi)體轉(zhuǎn)運平衡，進而帶來一定毒性［53］。

3.1.2 其他部分

可電離脂質(zhì)和普通陽離子脂質(zhì)最主要的區(qū)別在于其頭基的不同，連接鍵和尾部的種類和影響與陽離子脂質(zhì)類似。但由于可電離脂質(zhì)的特殊性質(zhì)，另有諸多因素也影響可電離脂質(zhì)遞送，如氮磷比、pKa 值甚至立體構(gòu)型［54-55］，其中脂質(zhì)pKa 值是可電離脂質(zhì)的重要參數(shù)，對體內(nèi)基因的沉默效率有決定性作用。叔胺基數(shù)量及衍生化基團的連接影響可電離脂質(zhì)pKa 值及表面電荷，pKa 值影響基因沉默的效率［54］。有學(xué)者認為pKa 在6.2～6.5 范圍內(nèi)能發(fā)揮最佳優(yōu)勢［50，56］。由可電離脂質(zhì)制備而成的脂質(zhì)納米粒的粒徑及PEG 化脂質(zhì)的含量也可在一定程度上改變脂質(zhì)納米粒對不同細胞的靶向性［57］。立體構(gòu)型方面，目前認為純立體異構(gòu)的可電離脂質(zhì)相較于外消旋體具有更高的RNA遞送效率，這很可能是脂質(zhì)依賴型的，即不同脂質(zhì)有不同表現(xiàn)，如DOTAP 的R構(gòu)型相較于S構(gòu)型和外消旋體具有更高的轉(zhuǎn)染效率，而Dlin-KC2-DMA 的不同對映異構(gòu)體卻有相同的轉(zhuǎn)染能力［55］。

3.2 已上市的典型可電離陽離子脂質(zhì)產(chǎn)品

目前已經(jīng)有技術(shù)較為成熟的可電離陽離子脂質(zhì)上市，主要涉及小干擾RNA和mRNA疫苗2個領(lǐng)域（表3）［47，58-60］。

盡管3 種產(chǎn)品選用的可電離脂質(zhì)不同，但在結(jié)構(gòu)上卻有著相通之處，即體內(nèi)代謝清除過程中均可發(fā)生降解，使毒性降低；不同的是與Dlin-MC3-DMA相比，ALC-0315 和SM-102 在尾部具有多個酯鍵，在體內(nèi)生物過程中代謝速率更快；其次，三者都采用了磷脂DSPC 和膽固醇作為輔助脂質(zhì)以提高結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，且使用PEG 化脂質(zhì)改善載體的遞送能力。

4 結(jié)語

基因治療作為熱門的研究領(lǐng)域之一，在全球疫情大形勢下更加成為研究焦點。陽離子脂質(zhì)體作為一種高效的非病毒載體更需要不斷篩選與創(chuàng)新，其結(jié)構(gòu)和組成也需進行更深入地研究和探索。陽離子脂質(zhì)體種類繁多，盡管近年來對其結(jié)構(gòu)的研究日益增多，但大多限于局部探索。因此，需要從整體、系統(tǒng)性角度出發(fā)，在宏觀上把控陽離子脂質(zhì)體的選擇。

陽離子頭部對基因轉(zhuǎn)染效率的影響主要體現(xiàn)在其空間結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)形式，HⅡC型脂質(zhì)轉(zhuǎn)染效率較高。此外，連接鍵和脂質(zhì)尾部的選擇也會影響轉(zhuǎn)染效率。由于陽離子的存在，細胞毒性是陽離子脂質(zhì)不可避免的不足，但通過輔助脂質(zhì)的加入以及連接鍵的選擇能在一定程度上減少陽離子帶來的細胞毒性風(fēng)險。

可電離陽離子脂質(zhì)的出現(xiàn)為穩(wěn)定的基因遞送提供了新選擇，陽離子脂質(zhì)的設(shè)計和開發(fā)必須考慮遞送效率和細胞毒性之間的平衡，可電離脂質(zhì)極大程度減少了脂質(zhì)頭基陽離子帶來的細胞毒性，提高了其基因治療優(yōu)勢。除陽離子脂質(zhì)結(jié)構(gòu)影響外，可電離陽離子脂質(zhì)表面電荷和pKa 等對基因遞送均有不同程度影響。由于可電離陽離子脂質(zhì)的良好表現(xiàn)，現(xiàn)已逐步替代了普通陽離子脂質(zhì)的遞送策略。但影響可電離脂質(zhì)遞送的因素較多，應(yīng)著重考慮諸多因素間的平衡。

目前陽離子脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)相關(guān)的研究僅停留在局部單一因素的影響，但實際上諸多因素都能影響到后續(xù)產(chǎn)品質(zhì)量，因此整體考慮產(chǎn)品設(shè)計和改善是迫切需求。此外，陽離子脂質(zhì)體制備模式相對簡單，如一昧追求設(shè)計和性能完美則會導(dǎo)致合成的困難，設(shè)計還需考慮其實際合成的難易程度。