生物制品生產(chǎn)設(shè)備檢查要點(diǎn)探析

顏若曦

國(guó)家藥品監(jiān)督管理局 食品藥品審核查驗(yàn)中心，北京 100076

生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)是關(guān)系國(guó)計(jì)民生、國(guó)家安全的戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)，其創(chuàng)新發(fā)展是健康中國(guó)建設(shè)的重要內(nèi)容。生物制品與化學(xué)藥品、中藥相比，其生產(chǎn)質(zhì)量管理的特殊性主要集中在生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)設(shè)備、分析檢測(cè)等生物相關(guān)專業(yè)技術(shù)內(nèi)容[1]，其中生產(chǎn)設(shè)備是生物制品生產(chǎn)必不可少的要素，涉及到所有的生產(chǎn)和包裝工序，也是特殊性較凸顯的方面。近年來(lái)，隨著生物工程技術(shù)、一次性使用系統(tǒng)的快速發(fā)展和應(yīng)用，生物制品生產(chǎn)設(shè)備也展現(xiàn)出了新的變化和特點(diǎn)，特別是歐洲藥品管理局、藥品檢查合作計(jì)劃（PIC/S）和世界衛(wèi)生組織新修訂的無(wú)菌藥品附錄發(fā)布后，對(duì)生產(chǎn)設(shè)備污染控制要求進(jìn)行了進(jìn)一步提升和細(xì)化[2]。無(wú)論是人工操作的簡(jiǎn)單設(shè)備，或是由計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)控制的自動(dòng)化復(fù)雜設(shè)備，其生產(chǎn)設(shè)備必須符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）的要求，必須符合其預(yù)定用途，且不對(duì)藥品質(zhì)量產(chǎn)生任何不利影響，其設(shè)計(jì)、制造、安裝和改造必須能防止對(duì)藥品的污染和交叉污染，并便于維護(hù)和清潔。國(guó)內(nèi)外生物制品GMP 規(guī)定對(duì)生物制品生產(chǎn)設(shè)備的核心要求可以概括為4 個(gè)方面：一是生產(chǎn)設(shè)備設(shè)計(jì)和安裝必須符合其預(yù)定用途，且便于清潔和維護(hù)；二是生產(chǎn)設(shè)備被正確的安裝，且在其設(shè)計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)運(yùn)行、使用；三是制定了預(yù)防性維護(hù)和校準(zhǔn)活動(dòng)計(jì)劃，且按計(jì)劃開(kāi)展，并在標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程中予以規(guī)定；四是生產(chǎn)設(shè)備不會(huì)對(duì)生物制品帶來(lái)毒害物質(zhì)（如一次性使用系統(tǒng)的可提取物和浸出物研究、設(shè)備的潤(rùn)滑劑、冷卻劑等），且在運(yùn)行使用（包括維護(hù)、校準(zhǔn)）中能防止對(duì)產(chǎn)品的污染。

近年來(lái)，在國(guó)內(nèi)外生物制品生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查中發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)設(shè)備方面的問(wèn)題較為突出，對(duì)世界衛(wèi)生組織生物制品檢查的缺陷統(tǒng)計(jì)顯示涉及生產(chǎn)設(shè)備的缺陷居于首位[3]，這體現(xiàn)出在生物制品行業(yè)中一些生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)設(shè)備生命周期管理中存在的不足。對(duì)生物制品生產(chǎn)設(shè)備的檢查是基于GMP 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定開(kāi)展的，檢查內(nèi)容主要包括生產(chǎn)設(shè)備管理與程序規(guī)定、設(shè)計(jì)與選型、確認(rèn)與校準(zhǔn)、使用與監(jiān)測(cè)、維護(hù)與維修（即預(yù)防性維護(hù)、糾正性維護(hù)）、清潔、標(biāo)識(shí)、數(shù)據(jù)和記錄、退役管理等方面。從生產(chǎn)設(shè)備生命周期角度進(jìn)行考慮，結(jié)合近年來(lái)檢查中的常見(jiàn)問(wèn)題[1,3-4]，本研究從藥品檢查角度對(duì)生物制品生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)行分析，通過(guò)以疫苗、抗體類藥物為代表的無(wú)菌生物制品常用生產(chǎn)設(shè)備的要點(diǎn)和問(wèn)題的研究，重點(diǎn)從生產(chǎn)設(shè)備符合其預(yù)定用途、有效防止污染和交叉污染兩個(gè)核心角度對(duì)無(wú)菌生物制品原液生產(chǎn)設(shè)備、制劑生產(chǎn)設(shè)備和一次性使用系統(tǒng)的檢查要點(diǎn)進(jìn)行總結(jié)和分析，并列舉了國(guó)內(nèi)外生物制品檢查典型問(wèn)題，探討在各類檢查和自查中如何提高對(duì)生物制品生產(chǎn)設(shè)備的檢查實(shí)效，同時(shí)也為生物制品行業(yè)進(jìn)一步加強(qiáng)生產(chǎn)設(shè)備的管理提供參考。

1 生物制品原液生產(chǎn)設(shè)備檢查分析

目前較典型的疫苗、單克隆抗體等生物制品原液生產(chǎn)通常由上游工藝（如菌毒種復(fù)蘇和擴(kuò)增、工作細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞擴(kuò)增、發(fā)酵培養(yǎng)和收獲等）、下游工藝（如離心、深層過(guò)濾、親和色譜、病毒滅活、離子交換色譜、納濾、超濾濃縮等）和原液制備工藝（如配制、除菌過(guò)濾、灌裝等）組成，其中常見(jiàn)生產(chǎn)設(shè)備包括培養(yǎng)箱、生物反應(yīng)器、離心機(jī)、深層過(guò)濾系統(tǒng)、色譜系統(tǒng)、病毒滅活設(shè)備、除病毒過(guò)濾系統(tǒng)、超濾系統(tǒng)、除菌/減菌過(guò)濾系統(tǒng)。針對(duì)液體除菌/減菌過(guò)濾系統(tǒng)的要求在原液、制劑階段基本一致，原液生產(chǎn)中需要額外注意的是不能忽視對(duì)培養(yǎng)基、緩沖液除菌過(guò)濾系統(tǒng)的驗(yàn)證、使用、監(jiān)測(cè)和評(píng)估。

1.1 培養(yǎng)箱

主要用于生物制品生產(chǎn)早期階段菌毒種、細(xì)胞的復(fù)蘇、擴(kuò)增，重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）設(shè)備確認(rèn)是否包括適宜的空載和滿載溫度分布試驗(yàn)、滿載熱穿透試驗(yàn)、振搖速度、CO2濃度（適用時(shí)）；（2）設(shè)備使用過(guò)程中的溫度、振搖速度、CO2濃度監(jiān)測(cè)和記錄。參考缺陷：規(guī)定每3 年對(duì)細(xì)胞復(fù)蘇用培養(yǎng)箱進(jìn)行一次確認(rèn)缺少依據(jù)和合理評(píng)估；在設(shè)備確認(rèn)或常規(guī)監(jiān)測(cè)中均未進(jìn)行過(guò)CO2的測(cè)量和記錄。

1.2 生物反應(yīng)器

對(duì)于生物發(fā)酵工序（包括分批、補(bǔ)料和灌流培養(yǎng)），關(guān)鍵參數(shù)和指標(biāo)通常包括溫度、pH 值、培養(yǎng)時(shí)間、空氣/氣體噴射速度（溶氧值）、攪拌轉(zhuǎn)速（波浪式生物反應(yīng)器為搖擺角度、速度）、進(jìn)料/灌流成分和速度、目標(biāo)種子/細(xì)胞密度、膜尺寸（對(duì)于灌流培養(yǎng)）、質(zhì)量或體積、密封性。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）對(duì)關(guān)鍵參數(shù)和指標(biāo)的校準(zhǔn)、確認(rèn)、監(jiān)測(cè)和記錄，其中注意監(jiān)測(cè)、取樣可能導(dǎo)致污染的控制；（2）清潔和滅菌，包括驗(yàn)證、程序規(guī)定、實(shí)施情況和效果。參考缺陷：確認(rèn)存在多項(xiàng)不足，包括未對(duì)滅菌后保壓性能進(jìn)行確認(rèn)、噴淋球覆蓋效果確認(rèn)照片（核黃素?zé)晒庀拢╋@示僅覆蓋部分內(nèi)表面、生物指示劑未放置于末端管路。

1.3 離心機(jī)

離心是收獲階段常用方式之一，主要用于自細(xì)胞基質(zhì)中分離產(chǎn)品，從操作方式上一般包括間隙式離心機(jī)、連續(xù)流離心機(jī)兩類。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）離心時(shí)間/進(jìn)料速度、離心間隔/排放間隔、離心轉(zhuǎn)速、離心溫度等參數(shù)的監(jiān)測(cè)和確認(rèn)；（2）離心機(jī)清潔、消毒、污染和交叉污染控制，包括對(duì)離心操作中可能形成氣溶膠的控制措施和評(píng)估。參考缺陷：碟片離心機(jī)清洗驗(yàn)證未對(duì)設(shè)備內(nèi)部葉片等最難清洗位置進(jìn)行檢查和確認(rèn)；收獲間現(xiàn)場(chǎng)標(biāo)識(shí)已清潔的2 臺(tái)落地離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi)部仍殘留少量菌泥。

1.4 深層過(guò)濾系統(tǒng)

通常采用分子大小、分子間相互作用原理在生物制品發(fā)酵后去除細(xì)胞、碎片等雜質(zhì)，重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）過(guò)濾膜包的管理，包括驗(yàn)收、使用、清潔和對(duì)應(yīng)的驗(yàn)證；（2）過(guò)濾參數(shù)設(shè)置和過(guò)程監(jiān)測(cè)。參考缺陷：深層濾板的清洗程序描述不詳細(xì)，如未詳細(xì)規(guī)定氫氧化鈉浸泡后深層濾板的沖洗方式、未規(guī)定最終沖洗用冷注射用水溫度；清潔驗(yàn)證中未規(guī)定最終沖洗水的細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)，且缺少評(píng)估。

1.5 色譜系統(tǒng)

主要用于分離、富集所需產(chǎn)品，一般包括分子排阻色譜、親和色譜、離子交換色譜、反相色譜和疏水色譜。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）色譜柱填料，包括填料類型、填料體積、裝填過(guò)程的體積流量和壓力、可浸出物檢測(cè)情況、純化曲線一致性、單產(chǎn)品單工序?qū)Ｓ们闆r、使用次數(shù)的驗(yàn)證和評(píng)估；（2）日常使用、清潔和維護(hù)，包括色譜關(guān)鍵參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)（如上樣體積、線體積流量、洗脫體積流量、填料高度、柱高度、梯度、溫度等）和收集標(biāo)準(zhǔn)，色譜系統(tǒng)的準(zhǔn)備、拆卸、使用前對(duì)填料和色譜柱檢查的程序文件，清潔程序和清潔驗(yàn)證，清潔后貯存條件，部件檢查和預(yù)防性更換等[5]。參考缺陷：多產(chǎn)品共用色譜柱缺少防止交叉污染風(fēng)險(xiǎn)的支持性證據(jù)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；清潔驗(yàn)證中未考慮離子交換色譜、分子篩色譜使用后清潔前后的保持時(shí)限；針對(duì)填料凝膠最大使用次數(shù)的驗(yàn)證不充分，未評(píng)估不同使用次數(shù)凝膠間洗脫曲線的一致性，未設(shè)置蛋白去除率的可接受標(biāo)準(zhǔn)。

1.6 病毒滅活設(shè)備

目前常用的病毒滅活方法一般包括低溫甲醛滅活法、低pH 值孵放法、β-丙內(nèi)酯法等，滅活設(shè)備主要是提供滅活場(chǎng)所并保證滅活條件。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）病毒滅活設(shè)備關(guān)鍵參數(shù)（包括pH 值、時(shí)間、溫度等）的確認(rèn)和監(jiān)測(cè)；（2）病毒滅活前后交叉污染控制措施的有效性，包括必要的轉(zhuǎn)罐、傳輸軟管的滅活、設(shè)備使用后的清潔和消毒等。參考缺陷：滅活罐性能確認(rèn)未規(guī)定具體模擬物料，僅描述為1 200 L 液體；用于37%甲醛滅活的設(shè)備未確認(rèn)攪拌速度（影響混合均勻性）和滅活溫度。

1.7 除病毒過(guò)濾系統(tǒng)

是指通過(guò)分子大小原理在生物生產(chǎn)工藝中去除病毒的設(shè)備，其核心為過(guò)濾器，通常包括直流/常規(guī)過(guò)濾、分流過(guò)濾，作為生物制品下游生產(chǎn)的工序之一，一般屬于低生物負(fù)載的非無(wú)菌操作[6]。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）過(guò)濾器的選擇、驗(yàn)證和驗(yàn)收，如流體與過(guò)濾器兼容性、顆粒物、可浸出物、可提取物、毒性測(cè)試、病毒/噬菌體挑戰(zhàn)測(cè)試、最差情況的病毒滯留能力、吸附性、濾過(guò)條件（如體積流量或壓差、切向流超濾壓力降、濾過(guò)終點(diǎn)）、過(guò)濾器滅菌等內(nèi)容的驗(yàn)證或評(píng)估；（2）完整性測(cè)試，包括測(cè)試方法的適用性、使用前及/或后進(jìn)行測(cè)試要求、測(cè)試記錄和異常情況處理等。參考缺陷：未對(duì)除病毒過(guò)濾濾芯進(jìn)行吸附性研究和驗(yàn)證。

1.8 超濾系統(tǒng)

一般用于病毒滅活后中間產(chǎn)品的純化，采用加壓膜分離技術(shù)，基于分子大小進(jìn)行進(jìn)一步純化。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）超濾關(guān)鍵參數(shù)的確認(rèn)和/或監(jiān)測(cè)，如膜包（包括截留相對(duì)分子質(zhì)量、膜包面積、完整性檢測(cè)、水通量測(cè)試、重復(fù)使用次數(shù)等）、跨膜壓（進(jìn)/出濾過(guò)液壓力）、體積流量、壓力增量、溫度、緩沖液組成和用量等；（2）超濾系統(tǒng)的清潔和保存，特別是使用前后的清洗、使用后膜包的保存條件、保存液種類和更換頻率。參考缺陷：超濾系統(tǒng)清潔驗(yàn)證中僅進(jìn)行淋洗水取樣，未采用擦拭法，且未進(jìn)行取樣回收率研究；超濾膜包更換前僅進(jìn)行了水通量檢測(cè)，未進(jìn)行完整性檢測(cè)，未規(guī)定達(dá)到最大使用次數(shù)時(shí)的檢測(cè)要求。

1.9 培養(yǎng)基/緩沖液配制系統(tǒng)

在生物制品原液生產(chǎn)階段，涉及到大量培養(yǎng)基、緩沖液的配制和使用。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）培養(yǎng)基、緩沖液配制準(zhǔn)確性保證，涉及質(zhì)量、體積、攪拌速度、溫度等參數(shù)控制；（2）配制后滅菌、取樣、儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)的污染控制。參考缺陷：配制罐清潔驗(yàn)證取樣點(diǎn)未包括最難清潔位置。

2 生物制品制劑生產(chǎn)設(shè)備檢查分析

無(wú)菌生物制品制劑生產(chǎn)設(shè)備與常規(guī)無(wú)菌制劑生產(chǎn)設(shè)備基本一致，涉及中間產(chǎn)品配制、灌封、軋蓋、燈檢等工序，生物制品制劑階段常見(jiàn)生產(chǎn)設(shè)備包括：除菌過(guò)濾系統(tǒng)、洗瓶機(jī)、隧道式滅菌干燥機(jī)、灌裝加塞機(jī)、冷凍干燥機(jī)、軋蓋機(jī)、全自動(dòng)燈檢機(jī)、脈動(dòng)真空滅菌柜等。由于生物制品本身、行業(yè)高速創(chuàng)新發(fā)展的特殊性等因素，在檢查關(guān)注要點(diǎn)和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題方面與其他藥品相比仍存在一些差異。

2.1 除菌過(guò)濾系統(tǒng)

重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容為除菌過(guò)濾驗(yàn)證是否能代表實(shí)際的過(guò)濾參數(shù)、過(guò)濾器完整性檢測(cè)、過(guò)濾器的滅菌和使用等。一些典型缺陷，如未進(jìn)行除菌過(guò)濾驗(yàn)證或驗(yàn)證不充分，存在試驗(yàn)或確認(rèn)項(xiàng)目不完整、已完成驗(yàn)證不能代表實(shí)際待過(guò)濾介質(zhì)和實(shí)際工藝；完整性檢測(cè)操作不規(guī)范，對(duì)異常情況調(diào)查處理不充分；最終除菌過(guò)濾系統(tǒng)沒(méi)有最大程度地接近灌裝線、沒(méi)有最大程度地減少最終除菌過(guò)濾后和灌裝之間所需的無(wú)菌連接次數(shù)等[7]。需要注意的是：在生物制品生產(chǎn)中，通常會(huì)使用氣體除菌過(guò)濾器，對(duì)于參與生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵氣體過(guò)濾器（即過(guò)濾與中間產(chǎn)品直接接觸的氣體，如灌裝階段的氮?dú)?、凍干機(jī)真空后補(bǔ)氣、吹-灌-封設(shè)備用氣等），注意重點(diǎn)關(guān)注其無(wú)菌要求和滅菌影響、完整性檢測(cè)的時(shí)間和頻次；對(duì)于非關(guān)鍵氣體或排氣過(guò)濾器（如培養(yǎng)罐進(jìn)氣和排氣、設(shè)備清潔后干燥用壓縮空氣等），注意其使用期間壓差監(jiān)測(cè)和定期的完整性檢測(cè)，特別是需長(zhǎng)時(shí)間安裝的氣體過(guò)濾器，在安裝時(shí)和更換前進(jìn)行完整性測(cè)試，并基于風(fēng)險(xiǎn)確定最長(zhǎng)使用時(shí)間和過(guò)程監(jiān)測(cè)項(xiàng)目。

2.2 洗瓶機(jī)

主要用于去除玻璃小瓶的細(xì)菌內(nèi)毒素、化學(xué)物質(zhì)和顆粒物。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容：（1）針對(duì)不同規(guī)格小瓶清洗參數(shù)規(guī)定和定期檢查，如清洗程序設(shè)計(jì)、清洗壓力、洗瓶速度、洗瓶溫度和時(shí)間、針頭深度、針頭中心位置、清洗針完好情況監(jiān)測(cè)、過(guò)濾器完整性檢測(cè)、清洗過(guò)程取樣監(jiān)測(cè)等，同時(shí)關(guān)注運(yùn)輸、卸載、裝載、清洗過(guò)程中對(duì)玻璃小瓶損害和污染的風(fēng)險(xiǎn)控制[8]；（2）設(shè)備確認(rèn)，特別是對(duì)清洗效果的確認(rèn)以及與實(shí)際清洗參數(shù)一致性。參考缺陷：設(shè)備確認(rèn)報(bào)告和記錄無(wú)法證明有效的關(guān)鍵清潔參數(shù)（壓力、體積流量、針頭位置等）的范圍或設(shè)置值；未對(duì)小瓶清潔進(jìn)行適宜的驗(yàn)證，設(shè)備確認(rèn)范圍未覆蓋程序文件規(guī)定的全面參數(shù)范圍（如超聲波：0.4～0.9 kW，壓縮空氣壓力：0.2～0.6 MPa，注射用水壓力：0.1～0.6 MPa，循環(huán)水壓力：0.2～0.6 MPa，循環(huán)水溫度：40～60 ℃）；設(shè)備確認(rèn)未考慮進(jìn)行生物負(fù)載的測(cè)試。

2.3 隧道式滅菌干燥機(jī)

主要用于去除清洗后玻璃小瓶的細(xì)菌內(nèi)毒素和微生物。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認(rèn)的充分性，特別是在運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)中是否包括過(guò)濾器完整性、懸浮粒子、風(fēng)速、氣流平衡和壓差、傳送速度（暴露時(shí)間）、裝載模式和最差裝載條件（足夠空間以保證空氣流通）、溫度分布（空載、滿載和負(fù)載）、最差操作條件（最短時(shí)間、最低溫度設(shè)定、最大單位面積質(zhì)量的容器等）、探頭位置、熱穿透試驗(yàn)（包括對(duì)離開(kāi)隧道烘箱物品溫度已冷卻至對(duì)產(chǎn)品安全溫度的確認(rèn)）、細(xì)菌內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗(yàn)（細(xì)菌內(nèi)毒素水平下降3 個(gè)對(duì)數(shù)單位），生物指示劑試驗(yàn)（微生物殘存概率不低于1×10?6）、清洗速度與傳送速度、灌裝速度的關(guān)系等項(xiàng)目的確認(rèn)；（2）使用、監(jiān)測(cè)和維護(hù)方面，關(guān)注實(shí)際生產(chǎn)中傳送速度等關(guān)鍵參數(shù)是否包括在確認(rèn)范圍內(nèi)，預(yù)熱段、加熱段和冷卻段之間壓差梯度、溫度監(jiān)測(cè)，高效過(guò)濾器完整性測(cè)試頻率（如每半年）和更換周期的合理性，冷卻段清潔和滅菌方式的有效性（尤其是在干預(yù)操作后），設(shè)備夜間模式和正常模式對(duì)內(nèi)部潔凈環(huán)境保護(hù)能力的評(píng)估（特別是正常模式時(shí)冷卻段與設(shè)備房間之間的壓差），設(shè)備維護(hù)中對(duì)傳送帶磨損程度、門(mén)密封性等項(xiàng)目的檢查。參考缺陷：除設(shè)備確認(rèn)外，生產(chǎn)時(shí)未對(duì)屬于A 級(jí)區(qū)域的冷卻段進(jìn)行塵埃粒子監(jiān)測(cè)；設(shè)備確認(rèn)中未充分評(píng)估和控制隧道式滅菌干燥機(jī)與灌裝間、清洗間壓差可能導(dǎo)致的風(fēng)險(xiǎn)（特別是冷區(qū)段與清洗間之間）。

2.4 灌裝加塞機(jī)

用于在A 級(jí)潔凈環(huán)境下對(duì)生物制品進(jìn)行分裝和加塞。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認(rèn)與使用中的關(guān)鍵參數(shù)和項(xiàng)目（如灌裝速度、裝量精度、加塞效果、必要時(shí)的充氮或抽真空效果等），以及在理瓶、傳輸全過(guò)程對(duì)玻璃小瓶造成損害的風(fēng)險(xiǎn)；（2）除生產(chǎn)設(shè)備本身外，還需關(guān)注整個(gè)灌裝線設(shè)計(jì)布局（包括RABS、傳送軌道、操作空間等）和生產(chǎn)過(guò)程可能導(dǎo)致的潛在污染風(fēng)險(xiǎn)，如A 級(jí)區(qū)、延展層流潔凈環(huán)境確認(rèn)和監(jiān)測(cè)[9]、氣流煙霧試驗(yàn)、設(shè)備的清潔和消毒、無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)[10]、RABS 手套完整性檢測(cè)和更換、最終的除菌過(guò)濾濾器是否盡可能的接近灌裝點(diǎn)等。參考缺陷：無(wú)菌灌裝過(guò)程中，每小時(shí)檢查一次裝量（每個(gè)灌裝針頭一瓶），但該企業(yè)常規(guī)批量為45 萬(wàn)瓶，不能從小樣本中得出灌裝一致性的結(jié)論，應(yīng)充分證明分裝體積的均一性和分裝過(guò)程控制的合理性；未評(píng)估不銹鋼針頭可能對(duì)玻璃小瓶造成損害的風(fēng)險(xiǎn)；未基于使用風(fēng)險(xiǎn)確定合理的灌裝機(jī)對(duì)應(yīng)RABS 手套滅菌和完整性檢測(cè)頻次；對(duì)無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)中灌裝機(jī)發(fā)生碎瓶的事件未進(jìn)行偏差記錄、調(diào)查和處理。

2.5 真空冷凍干燥機(jī)

用于生物制品的冷凍干燥。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容：（1）針對(duì)預(yù)凍、一次干燥（升華）和二次干燥（解吸附）等凍干程序的關(guān)鍵功能、關(guān)鍵參數(shù)和關(guān)鍵指標(biāo)的確認(rèn)，如真空泄漏量、擱板升降溫速率、擱板溫度均勻性和控溫精度、冷凝器降溫性能和捕水能力、波紋管完整性測(cè)試、抽真空能力和真空控制測(cè)試、在線清洗覆蓋率、在線滅菌效力、凍干曲線以及產(chǎn)品均勻性、外觀、水分、溶液濁度、裝量差異、復(fù)溶效果等；（2）污染控制措施和潛在風(fēng)險(xiǎn)，包括在線滅菌（SIP）和在線清洗（CIP）的確認(rèn)和實(shí)際應(yīng)用、進(jìn)出料系統(tǒng)或操作、潔凈環(huán)境和布局、與其余關(guān)聯(lián)設(shè)備的交互邏輯功能、凍干與SIP/CIP 計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)和電子數(shù)據(jù)管控情況等。參考缺陷：針對(duì)真空冷凍干燥機(jī)使用前的SIP，未能提供可靠數(shù)據(jù)和實(shí)際執(zhí)行證據(jù)；現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)凍干機(jī)軟件按時(shí)區(qū)顯示時(shí)間為17:34，而不是實(shí)際的11:34，導(dǎo)致產(chǎn)生的數(shù)據(jù)與產(chǎn)品實(shí)際冷凍干燥活動(dòng)時(shí)間不一致；規(guī)定每2 年對(duì)凍干機(jī)進(jìn)行一次再確認(rèn)（包括蒸汽滅菌、溫度分布等項(xiàng)目），缺少文件證明和合理理由；凍干機(jī)確認(rèn)未顯包括探頭位置的證據(jù)來(lái)證明生產(chǎn)中使用的負(fù)載模式的有效滅菌，確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)中未考慮平衡時(shí)間。

2.6 軋蓋機(jī)

用于西林瓶包裝生物制品最終的無(wú)菌密封操作。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備是否包括軋蓋前后剔廢（如缺塞、翹塞、膠塞高度異常、無(wú)蓋、掛蓋異常等）、負(fù)壓抽風(fēng)捕塵等功能，設(shè)備確認(rèn)是否包括軋蓋頭壓力范圍、軋蓋速度等關(guān)鍵參數(shù)、是否包括自動(dòng)掛蓋成功率、爆瓶率、剔廢功能和剔廢成功率、軋蓋缺陷率、密封完整性測(cè)試等項(xiàng)目，并能證明符合預(yù)期用途；（2）污染控制措施是否進(jìn)行了針對(duì)性的評(píng)估和設(shè)計(jì)，如振蕩盤(pán)的清潔消毒方式，環(huán)境監(jiān)測(cè)位置、項(xiàng)目和頻次。參考缺陷：除軋蓋速度外，其他關(guān)鍵參數(shù)未經(jīng)過(guò)確認(rèn)和評(píng)估；西林瓶軋蓋機(jī)的再確認(rèn)中未對(duì)膠塞位置檢測(cè)和剔除功能進(jìn)行確認(rèn)；扭矩測(cè)試儀確認(rèn)報(bào)告中未將西林瓶軋蓋后扭矩檢測(cè)數(shù)值標(biāo)準(zhǔn)與微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)或軋蓋壓力衰減試驗(yàn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)，也未與軋蓋機(jī)“刀頭”數(shù)量進(jìn)行關(guān)聯(lián)。

2.7 自動(dòng)燈檢機(jī)

主要用于無(wú)菌密封后生物制品的可見(jiàn)異物、外觀缺陷、容器完整性檢測(cè)。針對(duì)目前常見(jiàn)的無(wú)菌生物制品包裝方式預(yù)灌封注射器和玻璃瓶-膠塞-鋁蓋包裝，使用自動(dòng)燈檢設(shè)備時(shí)，重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認(rèn)是否能證明其等同于或優(yōu)于人工檢查（KNAPP 測(cè)試大于或等于100%[11]），對(duì)于同時(shí)負(fù)責(zé)完整性檢測(cè)的設(shè)備（如高壓檢漏）還需關(guān)注其適用性確認(rèn)（注意包括陽(yáng)性對(duì)照樣品孔徑、制作方式）；（2）設(shè)備使用階段，關(guān)注是否在設(shè)備啟動(dòng)之前進(jìn)行確認(rèn)，是否使用代表性缺陷樣品挑戰(zhàn)設(shè)備的性能，注意對(duì)代表性缺陷樣品的管控、設(shè)備燈檢不合格產(chǎn)品的處置、各類燈檢缺陷限度標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定等。參考缺陷：對(duì)于首次燈檢不符合的小瓶再次復(fù)檢的操作在性能確認(rèn)報(bào)告中缺少對(duì)應(yīng)支持性數(shù)據(jù)，設(shè)備檢測(cè)的準(zhǔn)確性存疑；性能確認(rèn)參數(shù)不完整，如未包括設(shè)備配備的攝像頭數(shù)量和分辨率、分辨率傳感器格式和數(shù)據(jù)存儲(chǔ)等；使用從人工燈檢發(fā)現(xiàn)的缺陷樣品對(duì)自動(dòng)燈檢機(jī)進(jìn)行校準(zhǔn)，但沒(méi)有關(guān)于所選缺陷樣品類型的規(guī)范，以更好地控制自動(dòng)目視檢查的拒收水平。

2.8 脈動(dòng)真空滅菌柜

生物制品生產(chǎn)過(guò)程中極少使用濕熱滅菌的方式對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行滅菌操作，但對(duì)生產(chǎn)中有關(guān)工器具、潔凈服、緩沖液、稀釋劑等的滅菌仍是主要的滅菌設(shè)備，對(duì)于脈動(dòng)真空滅菌通常包括預(yù)熱、脈動(dòng)、升溫、滅菌、干燥和冷卻等環(huán)節(jié)。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認(rèn)的充分性和有效性、與實(shí)際滅菌操作的一致性[12]；（2）使用和維護(hù)中，重點(diǎn)包括對(duì)滅菌物品裝載方式、滅菌關(guān)鍵參數(shù)監(jiān)測(cè)、滅菌效果監(jiān)測(cè)項(xiàng)目和頻次（如BD 測(cè)試、化學(xué)指示卡）、關(guān)鍵維護(hù)項(xiàng)目和頻次等內(nèi)容。參考缺陷：分裝車間脈動(dòng)真空滅菌柜確認(rèn)中溫度探頭、生物指示劑未放在蒸汽較難穿透的硅膠管內(nèi)中間位置，確認(rèn)報(bào)告中顯示裝載方式與分裝車間現(xiàn)場(chǎng)的裝載方式示意圖不一致，現(xiàn)場(chǎng)滅菌裝載規(guī)定不完善（如未明確分裝工器具在不銹鋼桶內(nèi)的具體擺放位置、硅膠管纏繞方式等）；企業(yè)共14 種脈動(dòng)真空滅菌裝載方式，但針對(duì)每種具體的裝載方式未根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果確定確認(rèn)時(shí)溫度探頭和生物指示劑的位置；規(guī)定BD 測(cè)試每年隨驗(yàn)證做1 次，未基于有效風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確認(rèn)該測(cè)試頻次的合理性；確認(rèn)用生物指示劑，未確認(rèn)或評(píng)估其孢子數(shù)量。

3 一次性使用系統(tǒng)檢查分析

一次性使用系統(tǒng)是一種生產(chǎn)工藝設(shè)備解決方案，通常由聚合材料組件裝配而成。近年來(lái)，隨著單克隆抗體、疫苗等生物制品的持續(xù)發(fā)展，一次性使用系統(tǒng)技術(shù)也迅速升級(jí)，在生物制藥領(lǐng)域（包括單克隆抗體藥物、疫苗、血液制品、細(xì)胞治療產(chǎn)品等）已經(jīng)有了較廣泛的應(yīng)用，如細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵、收獲、離心、純化、混合、儲(chǔ)存、冷凍、解凍、濾過(guò)等生物制造工序中?；谝淮涡允褂孟到y(tǒng)的特殊性[13-14]，檢查中需要重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容主要包括一次性使用系統(tǒng)對(duì)生物制品和對(duì)應(yīng)工藝的適用性驗(yàn)證和評(píng)估（如工藝驗(yàn)證、產(chǎn)品兼容性、吸附、顆粒物、可提取物、可浸出物等）、針對(duì)供應(yīng)商發(fā)起變更對(duì)生物處理系統(tǒng)及其驗(yàn)證狀態(tài)影響的變更控制程序和執(zhí)行情況（包括必要的再驗(yàn)證）、供應(yīng)商資質(zhì)確認(rèn)（包括無(wú)菌保證能力）和質(zhì)量協(xié)議、一次性使用系統(tǒng)接收質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和使用前檢查標(biāo)準(zhǔn)、使用過(guò)程中與使用前后一次性使用系統(tǒng)完整性檢查、在極端條件和復(fù)雜操作下（如凍融、熱合、機(jī)械密封、組裝、人工搬運(yùn)、取樣等）的完整性和對(duì)產(chǎn)品的影響。

在生物制品生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查中涉及一次性使用系統(tǒng)的一些典型問(wèn)題：（1）企業(yè)未基于工藝需求和實(shí)際使用情況對(duì)一次性使用系統(tǒng)袋子和組件的完整性測(cè)試方法進(jìn)行充分的確認(rèn)，在缺少合理理由和證明的情況下僅按供應(yīng)商提供的信息進(jìn)行測(cè)試；（2）關(guān)于一次性使用系統(tǒng)組裝的泄漏檢測(cè)限值和標(biāo)準(zhǔn)缺少記錄和證明；（3）未基于無(wú)菌連接設(shè)備的預(yù)期用途進(jìn)行充分驗(yàn)證，沒(méi)有適當(dāng)?shù)拇胧﹣?lái)確保無(wú)菌連接中使用組件的完整性，盡管生產(chǎn)中對(duì)所用一次性使用系統(tǒng)儲(chǔ)液袋使用后進(jìn)行了完整性測(cè)試，然而對(duì)一次性使用系統(tǒng)未按照預(yù)期用途進(jìn)行測(cè)試；（4）原液一次性使用系統(tǒng)儲(chǔ)液袋未進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，未開(kāi)展供應(yīng)商現(xiàn)場(chǎng)審計(jì)，也未制定入廠檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)并開(kāi)展入廠檢驗(yàn)，進(jìn)廠時(shí)僅核對(duì)生產(chǎn)商提供的合格證書(shū)，使用后未進(jìn)行必要的完整性檢測(cè)，針對(duì)可浸出性研究?jī)H進(jìn)行了12 個(gè)月（低于原液儲(chǔ)存時(shí)間18 個(gè)月）；（5）對(duì)于一次性使用系統(tǒng)儲(chǔ)液袋泄漏的偏差調(diào)查處理未能找到根本原因并制定有效控制措施。

4 結(jié)語(yǔ)

當(dāng)前，生物醫(yī)藥已成為全球新一輪科技變革中科技含量高、創(chuàng)新密集、投資最活躍的領(lǐng)域，生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的創(chuàng)新發(fā)展是落實(shí)創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)發(fā)展戰(zhàn)略的重要組成部分，是健康中國(guó)建設(shè)的重要基礎(chǔ)[15]。生物制品不僅僅成為保護(hù)人類健康的產(chǎn)品，也成為出國(guó)家間科技、經(jīng)濟(jì)和綜合實(shí)力角逐的體現(xiàn)[16]。生物制品生產(chǎn)設(shè)備作為生物制品生產(chǎn)關(guān)鍵要素之一，在實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品、確保質(zhì)量、提高生產(chǎn)效率、保障安全和追溯性等方面都具有不可或缺的重要作用。除生物技術(shù)外，生物制品生產(chǎn)設(shè)備還涉及藥機(jī)工程行業(yè)，屬于多技術(shù)、多專業(yè)的交叉科學(xué)，技術(shù)專業(yè)性和復(fù)雜性較高。本研究從檢查視角，基于“污染控制策略”中設(shè)備、組件部分的內(nèi)容[17]，結(jié)合近年來(lái)國(guó)內(nèi)外生物制品檢查發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題、趨勢(shì)、風(fēng)險(xiǎn)等因素對(duì)無(wú)菌生物制品常見(jiàn)生產(chǎn)設(shè)備檢查的重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容進(jìn)行探討，希望為檢查員在對(duì)設(shè)備系統(tǒng)的檢查中提供借鑒，從“系統(tǒng)性”和“專業(yè)性”兩方面進(jìn)一步提高檢查實(shí)效，更好地助力我國(guó)生物制品行業(yè)的健康發(fā)展。生物制品生產(chǎn)企業(yè)可參考關(guān)于生產(chǎn)設(shè)備的重點(diǎn)內(nèi)容和問(wèn)題分析，結(jié)合法規(guī)指南要求、產(chǎn)品和工藝特點(diǎn)進(jìn)一步優(yōu)化完善生物制品生產(chǎn)設(shè)備的生命周期管理，盡可能在設(shè)計(jì)選型階段最大限度地降低可能的問(wèn)題和潛在風(fēng)險(xiǎn)，更好地保證產(chǎn)品質(zhì)量。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突