秦皮甲素和秦皮乙素的藥理研究進(jìn)展

儲正達(dá)，蔡彬（南京中醫(yī)藥大學(xué)無錫附屬醫(yī)院，江蘇無錫 214071）

秦皮始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，其味苦、澀，性寒，歸肝、膽、大腸經(jīng)，具有清熱燥濕、收澀止痢、止帶、明目的功效。2020 年版《中國藥典》收載秦皮為木犀科植物苦櫪白蠟樹FraxinusrhynchophyllaHance、白蠟樹FraxinuschinensisRoxb.、尖葉白蠟樹FraxinusszaboanaLingelsh. 或宿柱白蠟樹Fraxinus stylosaLingelsh.的干燥枝皮或干皮，主產(chǎn)于陜西、遼寧、吉林、河北等省[1]。秦皮是一種臨床常用的中藥，常與白頭翁、黃連、黃柏等藥同用，主治熱毒血痢，里急后重；秦皮亦可治療赤白帶下，《本草匯言》記載：“治婦人赤白帶下，及血崩不止：秦皮三兩，丹皮二兩，當(dāng)歸身一兩，俱酒洗，炒研為末，煉蜜為丸梧桐子大，每早服五錢，白湯下”；秦皮還能用于肝經(jīng)郁火所致目赤腫痛、目生翳膜之癥，可單用亦可配伍梔子、淡竹葉共用，如《外臺秘要》云：“赤眼生翳：秦皮一兩，水一升半，煮七合，澄清，日日溫洗”。藥理研究[2-3]表明，秦皮具有抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗氧化等作用，而秦皮中的香豆素類成分則被認(rèn)為是其主要的活性物質(zhì)，包括秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷等，其中秦皮甲素和秦皮乙素是被研究報道最多的兩個成分。本文通過查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，對中藥秦皮中的主要活性成分秦皮甲素和秦皮乙素的藥理學(xué)研究做一綜述，以期為其研究提供參考，同時為秦皮的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 秦皮甲素

秦皮甲素又名七葉苷、七葉樹苷、馬粟樹皮苷、七葉靈，作為中藥秦皮中含量最高的香豆素類化合物，其在人體內(nèi)主要由小腸上部吸收，可被水解生成秦皮乙素和葡萄糖。同時，秦皮甲素與秦皮乙素的總含量通常被用作秦皮藥材質(zhì)量的評價指標(biāo)[1]。

1.1 抗炎作用 秦皮甲素對潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）[4]、關(guān)節(jié)炎[5]、急性肺損傷（acute lung injury，ALI）[6]、急性腎損傷（acute kidney injury，AKI）[7]等疾病引起的炎癥反應(yīng)均具有抑制作用。翁閃凡等[8]研究發(fā)現(xiàn)秦皮甲素（100 mg·kg-1）灌胃給藥可以顯著抑制UC 大鼠結(jié)腸黏膜中促炎細(xì)胞因子腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）的表達(dá)，上調(diào)抗炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素10（interleukin 10，IL-10）的表達(dá)，從而減輕大鼠結(jié)腸炎癥反應(yīng)。Tian等[4]報道秦皮甲素可以促進(jìn)過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）在硫酸葡聚糖（Dextran sulphate sodium，DSS）誘導(dǎo)的UC 小鼠直腸組織中的核定位，下調(diào)核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）信號通路，從而抑制UC 小鼠腸道組織中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、IL-1β、TNF-α 等炎癥因子的表達(dá)。在對角叉菜膠誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型大鼠研究中發(fā)現(xiàn)，秦皮甲素（100 mg·kg-1）灌胃給藥同樣可以降低大鼠血漿中IL-1β 和TNF-α的表達(dá)水平，從而減輕關(guān)節(jié)炎性反應(yīng)[5]。Cheng 等[7]研究發(fā)現(xiàn)秦皮甲素（25～100 mg·kg-1）能夠下調(diào)脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的AKI 小鼠腎臟組織中TNF-α、IL-1β、IL-6、單核細(xì)胞趨化蛋白1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）以及細(xì)胞間黏附分子1（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1）的表達(dá)水平，從而改善LPS引起的腎臟炎性反應(yīng)，并且上述調(diào)控作用可能與其下調(diào)嘌呤能配體門控離子通道7（purinergic ligand-gated ion channel 7，P2X7）和高遷移率族蛋白B1（high mobility group box 1， HMGB1）/Toll 樣受體4（Toll-like receptor 4，TLR4）/髓分化因子88（Myeloid Differentiation Factor 88，MyD88）炎癥通路有關(guān)。此外，有研究顯示，LPS 誘導(dǎo)的ALI 小鼠給予秦皮甲素（25～100 mg·kg-1）灌胃給藥后， ALI 小鼠肺臟組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1和ICAM-1的表達(dá)量顯著降低，研究認(rèn)為秦皮甲素減輕ALI小鼠肺部炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制可能與其下調(diào)HMGB1/TLR4 炎癥通路相關(guān)[6]。Zhang等[9]報道秦皮甲素（20～40 mg·kg-1）可以通過抑制TLR/NF-κB 信號通路下調(diào)ALI 小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6的表達(dá)，減少肺泡灌洗液內(nèi)中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞的數(shù)量，從而達(dá)到緩解ALI炎癥反應(yīng)的作用。上述結(jié)果表明秦皮甲素主要通過調(diào)控NF-κB 信號通路以及抑制IL-1β、IL-6、TNF-α 等細(xì)胞因子的表達(dá)，從而起到抗炎作用。

1.2 抗腫瘤作用 許多研究[10-11]發(fā)現(xiàn)秦皮甲素可以通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制遷移、侵襲和增殖等方式發(fā)揮抗腫瘤作用。Sumorek-Wiadro 等[10]在體外實驗中發(fā)現(xiàn)秦皮甲素可以促使大約15%的人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（T98G）和間變性星形細(xì)胞瘤細(xì)胞（MOGGCCM）發(fā)生凋亡。沈永華等[11]報道秦皮甲素（0.2～1.8 mmol·L-1）能夠以濃度依賴性的方式降低鼻咽癌細(xì)胞（HNE-3）的存活率，并且可以通過降低丙酮酸激酶和己糖激酶活性的方式抑制細(xì)胞糖酵解，從而抑制HNE-3 的增殖。此外，秦皮甲素還能夠通過降低基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）和MMP-9蛋白水平，抑制HNE-3 的遷移及侵襲。研究還發(fā)現(xiàn)秦皮甲素的上述作用與其抑制circ-ZNF609 的表達(dá)有關(guān)。莫淼等[12]報道秦皮甲素可以通過轉(zhuǎn)錄因子人類免疫缺陷病毒短轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)物連接因子1（factor that binds to the inducer of short transcripts of human immunodeficiency virus-1，F(xiàn)BI-1）調(diào)控p53/p21 通路介導(dǎo)的細(xì)胞周期，影響DNA 復(fù)制，從而抑制三陰性乳腺癌細(xì)胞（MDA-MB-231）的增殖。王晶[13]將秦皮甲素作用于人肺癌細(xì)胞（A549），結(jié)果發(fā)現(xiàn)秦皮甲素可以顯著升高細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cysteinyl aspartate specfic protease，caspase-3）和caspase-9的表達(dá)，同時通過抑制Kirsten 大鼠肉瘤病毒癌基因同源物基因（Kirsten rat sarcoma viral oncogenehomolog，K-Ras）的表達(dá)和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2（extracellular regulating kinase 1/2，ERK1/2）的磷酸化水平，從而誘導(dǎo)A549 細(xì)胞凋亡。周盛斌等[14]利用秦皮甲素干預(yù)舌鱗癌干細(xì)胞（ALDH br），結(jié)果發(fā)現(xiàn)秦皮甲素能使ALDH br 細(xì)胞的遷移與侵襲減弱，同時使細(xì)胞凋亡率升高，其作用機(jī)制可能是通過抑制p21蛋白激活激酶1（p21-Activated kinase 1，PAK1）/ LIM激酶1（LIM kinase 1，LIMK1）/絲切蛋白（cofilin）信號通路的激活?，F(xiàn)階段關(guān)于秦皮甲素抗腫瘤作用的研究主要集中在體外細(xì)胞實驗上，需要更多體內(nèi)實驗研究對其作用機(jī)制進(jìn)行更深入的探討。

1.3 抗氧化作用 人體內(nèi)存在一些高活性分子如活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）包括超氧陰離子自由基（O2·-）、過氧化氫（H2O2）、羥自由基（·OH）等，以及活性氮自由基（reactive nitrogen species，RNS）包括一氧化氮（NO）、氧亞硝基陰離子（ONOO-）、亞硝酸根離子（NO2-）等，當(dāng)這些高活性分子生成或者積聚過多，會引起氧化和抗氧化失衡，導(dǎo)致機(jī)體或細(xì)胞氧化損傷[15]。Witaicenis等[16]研究發(fā)現(xiàn)秦皮甲素可以降低2，4，6-三硝基苯磺酸（2，4，6-trinitrobenzene sulfonic acid，TNBS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織中髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）的活性。MPO 是一種強(qiáng)效氧化酶，能夠在體內(nèi)促進(jìn)氧化應(yīng)激的發(fā)生。DPPH 自由基清除實驗進(jìn)一步證實秦皮甲素具備高效的自由基清除能力。Zhao等[17]發(fā)現(xiàn)秦皮甲素可以降低由多巴胺刺激引起的人類神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SH-SY5Y）中氧自由基的水平，并且可以提高SH-SY5Y 細(xì)胞中超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）活性及谷胱甘肽（glutathione，GSH）水平。SOD和GSH都被認(rèn)為具有抗氧化作用[18]。陳韻之等[19]發(fā)現(xiàn)秦皮甲素可以通過降低UC 小鼠腸道組織中iNOS 的表達(dá)，減輕腸黏膜的氧化損傷。iNOS 在體內(nèi)主要負(fù)責(zé)催化生成強(qiáng)活性的NO，從而促進(jìn)氧化損傷[18]。此外，秦皮甲素在保護(hù)心肌損傷[20]、急性酒精性胃損傷[21]、糖尿病腎臟損傷[22]的相關(guān)研究中均表現(xiàn)出抗氧化能力。秦皮甲素的抗氧化作用機(jī)制可能來源于其自身的直接抗氧化能力以及調(diào)控氧化應(yīng)激相關(guān)酶的活性，最終展現(xiàn)出抗氧化功能。

1.4 抗菌作用 秦皮甲素具有一定的抗菌能力。Mokdad-Bzeouich 等[23]通過體外實驗發(fā)現(xiàn)，秦皮甲素對革蘭氏陽性菌Staphylococcusaureus、Enterococcus faecalis，革蘭氏陰性菌Escherichiacoli、Salmonella enteritidis、Salmonellatyphimurium，以及多種大腸桿菌多重耐藥變異株具有抑菌作用。賈敏一[24]發(fā)現(xiàn)秦皮甲素可以縮短沙門氏菌的遲緩期，降低對數(shù)期細(xì)菌濃度，有效抑制沙門氏菌的生長。此外，秦皮甲素對部分真菌同樣具有抑制作用，其抑菌能力可能來自于秦皮甲素水解釋放的抗真菌苷元[25]。值得注意的是，Rehman 等[26]通過實驗計算得出秦皮甲素的口服生物利用度僅為0.62%，這一低值表明秦皮甲素可能存在非常高的首過效應(yīng)。秦皮甲素的主要藥理學(xué)活性研究成果見圖1。

圖1 秦皮甲素的藥理活性Figure 1 Pharmacological activities of aesculin

2 秦皮乙素

秦皮乙素又名七葉亭、6，7-二羥基香豆素、6，7-二羥苯并氧芑酮，是結(jié)構(gòu)最簡單的香豆素類化合物之一，其分子結(jié)構(gòu)第6，7 碳原子上有兩個羥基，機(jī)體內(nèi)秦皮乙素可由秦皮甲素去糖基化生成[27]。秦皮乙素在體內(nèi)的平均口服生物利用度為19%，明顯高于秦皮甲素[28]。

2.1 抗腫瘤作用 研究發(fā)現(xiàn)[29]秦皮乙素可使腎透明細(xì)胞癌（786-O 和SN12-PM6）的細(xì)胞周期停滯在G0/G1期和G2/M 期，并且通過下調(diào)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白Cyclin D1、周期蛋白依賴性激酶4（cyclin-dependent kinases 4，CDK4）、CDK6、c-Myc 的表達(dá)，抑制786-O 和SN12-PM6 的細(xì)胞增殖。萬新立等[30]利用秦皮乙素干預(yù)體外培養(yǎng)的人肺癌細(xì)胞（H460），結(jié)果發(fā)現(xiàn)秦皮乙素能夠使H460 細(xì)胞周期阻滯于S 期，從而抑制腫瘤細(xì)胞增殖。Turkekul 等[31]在體外實驗中發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以顯著降低人前列腺癌細(xì)胞（PC3、DU145 和LNCaP）的存活率，并且上調(diào)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白p21 和p27 表達(dá)，同時下調(diào)CDK2、CDK4 和cyclin D1 的表達(dá)，促使癌細(xì)胞的細(xì)胞周期停滯在G1期，并且研究還發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以抑制PC3細(xì)胞的遷移能力。

秦皮乙素還可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。王姣等[32]在體外實驗中發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以降低卵巢癌細(xì)胞（SKOV3）線粒體膜電位，上調(diào)caspase-3 和caspase-9活性，并且降低B 淋巴細(xì)胞瘤2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）/Bcl-2 關(guān)聯(lián)X 蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）比值，從而促進(jìn)SKOV3 細(xì)胞凋亡。Bcl-2 和Bax是一對調(diào)控細(xì)胞凋亡的同源基因，Bcl-2 表達(dá)升高可以抑制細(xì)胞凋亡，而Bax 則可以拮抗Bcl-2 的上述作用，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡[33]。Li 等[34]發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以借助胰島素樣生長因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）/磷酸肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）通路調(diào)控的線粒體途徑促進(jìn)人肝細(xì)胞癌細(xì)胞（SMMC-7721）凋亡，研究同樣顯示秦皮乙素能夠提高caspase-3 和caspase-9 的活性，升高Bax 的表達(dá)，降低Bcl-2 表達(dá)，引發(fā)線粒體膜電位崩潰，促使線粒體內(nèi)部細(xì)胞色素C 的泄露釋放，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Jeon 等[35]發(fā)現(xiàn)秦皮乙素能夠抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞（HN22 和HSC2）的生長，引起核固縮，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，并且認(rèn)為秦皮乙素對表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）/PI3K/Akt 信號通路的抑制作用在其誘導(dǎo)HN22和HSC2細(xì)胞凋亡中起重要作用。

王麗紅等[36]對肝癌皮下移植瘤模型小鼠給予秦皮乙素（200、400、700 mg·kg-1）腹腔注射，結(jié)果發(fā)現(xiàn)秦皮乙素對模型小鼠腫瘤生長具有抑制作用，其機(jī)制可能與上調(diào)Bax、下調(diào)Bcl-2 基因的表達(dá)有關(guān)。邢德君等[37]對Lewis 肺癌模型小鼠給予秦皮乙素（50、100 mg·kg-1）灌胃給藥，結(jié)果顯示秦皮乙素可以降低Lewis 肺癌小鼠的瘤質(zhì)量，提高腫瘤細(xì)胞的凋亡率，上調(diào)caspase-3、caspase-8 和caspase-9 的表達(dá)。Zhu等[38]同樣發(fā)現(xiàn)秦皮乙素能夠顯著降低肺癌模型小鼠腫瘤的大小和質(zhì)量，并且認(rèn)為秦皮乙素的抑瘤作用與其抑制NF-κB 信號通路有關(guān)。此外，還有研究報道秦皮乙素可以通過調(diào)節(jié)Lewis 肺癌小鼠的免疫功能，降低IL-6、γ-干擾素（Interferon-γ，IFN-γ）、TNF-α蛋白的表達(dá)水平，抑制CD4+CD25+Treg 細(xì)胞分化，從而發(fā)揮抗腫瘤作用[39]。綜合上述研究結(jié)果，秦皮乙素可以通過調(diào)控細(xì)胞周期，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)免疫功能等多種方式發(fā)揮抗腫瘤作用，具有重要的潛在開發(fā)價值。

2.2 抗氧化作用 自由基是獨立存在于體內(nèi)的單個未配對電子，能夠?qū)NA、蛋白質(zhì)和碳水化合物造成氧化損傷。秦皮乙素分子結(jié)構(gòu)中的兩個羥基被認(rèn)為是其抗氧化的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，研究發(fā)現(xiàn)香豆素類化合物中羥基的數(shù)量與其抑制ROS 的效果有直接的關(guān)系，羧基的存在能夠顯著提高抗氧化活性[40]。體外細(xì)胞實驗發(fā)現(xiàn)秦皮乙素能夠抑制H2O2誘導(dǎo)的成肌細(xì)胞（C2C12）中DNA 的氧化損傷，并認(rèn)為其抗氧化作用機(jī)制可能與調(diào)控核因子E2 相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）/醌氧化還原酶1[NAD（P）H：quinone oxidoreductase1，NQO1]信號通路相關(guān)[41]。Zhang 等[42]報道在H2O2處理的人類角膜上皮細(xì)胞中，秦皮乙素能夠通過Nrf2 信號通路上調(diào)抗氧化基因血紅素加氧酶1（heme oxygenase，HO-1）、NQO1、SOD1 和SOD2 的mRNA 表達(dá)水平，從而發(fā)揮抗氧化作用。Kim 等[43]將秦皮乙素作用于H2O2誘導(dǎo)的中國倉鼠肺成纖維細(xì)胞（V79-4），結(jié)果發(fā)現(xiàn)秦皮乙素對細(xì)胞內(nèi)的ROS具有清除活性，并且對ROS的清除力隨著濃度的升高而增強(qiáng)，濃度為10 μg·mL-1秦皮乙素的ROS 清除力達(dá)到75%。體內(nèi)實驗同樣證實秦皮乙素具有抗氧化作用，Mohamadi-Zarch 等[44]報道秦皮乙素可以降低急性肝損傷小鼠肝臟組織中MDA、NO2-、ROS 的水平，同時升高SOD 的活性和Nrf2 的表達(dá)。Tien 等[45]研究發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以顯著提高大鼠肝臟中抗氧化酶的活性，包括谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase， GPX）、 過氧化氫酶（Catalase，CAT）和SOD 的水平。值得注意的是，秦皮乙素的抗氧化能力與其抗腫瘤、抗炎等功能之間存在協(xié)同關(guān)系。

2.3 抗炎作用 秦皮乙素在體外細(xì)胞實驗中的抗炎作用被廣泛報道，秦皮乙素可以下調(diào)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞（RAW264.7）中環(huán)氧化酶2（cyclooxygenase- 2，COX-2）的表達(dá)，從而降低前列腺素E2（Prostaglandin E2，PGE2）的水平，此外還能夠通過調(diào)控NF-κB信號通路抑制促炎細(xì)胞因子TNF-α 和IL-1β 的表達(dá)[46]。程雯等[47]報道秦皮乙素制備的納米結(jié)晶能夠下調(diào)LPS 誘導(dǎo)的RAW264.7 細(xì)胞中促炎細(xì)胞因子TNF-α和IL-8 的水平，同時上調(diào)抑炎細(xì)胞因子IL-4 水平。Cheng 等[48]研究發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以降低LPS 誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中IL-6、IL-1β、趨化因子CC 配體2（chemokine C-C motif ligand 2，CCL2）和iNOS 的表達(dá)水平，并且通過抑制p65 的入核，進(jìn)而調(diào)控NF-κB 信號通路，最終發(fā)揮抑制炎癥的作用。此外，秦皮乙素能夠通過抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子1（signal transducerandactivatoroftranscription 1，STAT1）/STAT3信號通路，對膿毒癥小鼠早期的炎癥性損傷起到保護(hù)作用。體內(nèi)實驗同樣證實秦皮乙素的抗炎作用。Lee等[49]報道秦皮乙素可以減輕LPS 誘導(dǎo)的ALI 小鼠肺部炎癥細(xì)胞的浸潤，降低小鼠肺組織中IL-6、IL-1β、TNF-α 的表達(dá)水平，并且通過抑制Akt/ERK/NF-κB和維甲酸受體相關(guān)孤兒受體γt（ROR gamma T protein，RORγt）/IL-17 信號通路發(fā)揮抗炎作用。在急性肝損傷小鼠模型中同樣發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以減輕肝臟炎癥，降低IL-6、IL-1β、TNF-α 和TLR4 的表達(dá)[44]。此外，秦皮乙素對TNBS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎大鼠同樣具有抗炎作用，可以減輕結(jié)腸炎癥損傷程度，縮小病變范圍[50]，并且還能夠減少結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織中COX-2、iNOS 和中性粒細(xì)胞趨化因子3（cytokine-induced neutrophil chemoattractant-3，CINC-3）的表達(dá)[51]。上述研究結(jié)果顯示秦皮乙素能夠在多種炎癥性疾病中發(fā)揮抗炎作用。

2.4 免疫調(diào)節(jié)作用 秦皮乙素能夠?qū)C(jī)體免疫，包括體液免疫和細(xì)胞免疫起到調(diào)節(jié)作用。Chen 等[52]發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以降低銀屑病小鼠淋巴結(jié)及脾臟中CD8+T細(xì)胞（CD44 高、CD62 低）的比例，并且增加CD4+Foxp3+Treg 細(xì)胞的比例，以及促進(jìn)CD4+CD25-T 細(xì)胞向CD4+Foxp3+Treg 細(xì)胞轉(zhuǎn)化。同時還發(fā)現(xiàn)秦皮乙素能夠顯著降低銀屑病小鼠皮膚組織中IL-6、IL-17A、IL-22、IL-23、TNF-α 和IFN-γ 的mRNA 水平。Long等[53]發(fā)現(xiàn)秦皮乙素能夠降低哮喘模型小鼠血清中免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）的水平，下調(diào)小鼠肺泡灌洗液中IL-17A 的水平以及輔助性T 細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）細(xì)胞的比例，此外還能夠減少肺組織中GATA 結(jié)合蛋白3（GATA binding protein 3，GATA-3）和RORγt 的蛋白表達(dá)水平。Jeong 等[54]發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以使特應(yīng)性皮炎小鼠血清中IgE、IgG2a和組胺水平降低，并且抑制Th1、Th2和Th17相關(guān)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，如TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-13、IL-31 和IL-17。體內(nèi)實驗還發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以誘導(dǎo)脾臟淋巴因子活化殺傷細(xì)胞（lymphokine activated killer cells，LAK）的活性[55]。因此，有理由相信秦皮乙素具備成為免疫相關(guān)性疾病治療藥物的潛在開發(fā)價值。

2.5 抗血管粥樣硬化 血管內(nèi)膜損傷引起的血管平滑肌細(xì)胞（Vascular Smooth Muscle Cell，VSMC）增殖被認(rèn)為是動脈粥樣硬化、再狹窄等血管增生性疾病的重要病因。Pan 等[56]研究發(fā)現(xiàn)秦皮乙素可以通過調(diào)控細(xì)胞生長相關(guān)的Ras通路，抑制大鼠球囊血管損傷后血管內(nèi)膜增生。Yun 等[57]利用秦皮乙素干預(yù)體外培養(yǎng)的VSMC，結(jié)果顯示秦皮乙素可使VSMC 周期阻滯于G1 期，導(dǎo)致VSMC 的細(xì)胞生長以及DNA 合成受到抑制，并且其抑制作用呈濃度相關(guān)性。研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)p38 絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號通絡(luò)的激活在其中扮演關(guān)鍵角色，而秦皮乙素則被認(rèn)為具有潛在的預(yù)防和治療動脈粥樣硬化的作用。Karnewar 等[58]合成了一種線粒體靶向的秦皮乙素并作用于Apoe-/-小鼠，結(jié)果顯示秦皮乙素可以通過延緩血管衰老和降低促炎細(xì)胞因子的水平，改善主動脈組織中線粒體生物合成及功能，抑制主動脈內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)制，從而緩解衰老過程中的動脈粥樣硬化。另有研究[59]報道秦皮乙素可以通過降低血液中甘油三酯水平，阻止血管平滑肌細(xì)胞的增殖以及MMP-9 的產(chǎn)生，抑制黏附因子和趨化因子的分泌，降低氧化修飾的低密度脂蛋白的水平，提升高密度脂蛋白膽固醇的水平等多種方式發(fā)揮抗血管粥樣硬化的作用[59]。秦皮乙素的藥理學(xué)活性見圖2。

圖2 秦皮乙素的藥理活性Figure 2 Pharmacological activities of aesculetin

3 討論

秦皮作為一種資源豐富、價格較低廉的傳統(tǒng)中藥，自古被運用于目疾、下痢、崩帶、遺精、驚癇等病癥，其臨床應(yīng)用范圍廣泛?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)香豆素類化合物是秦皮的主要活性成分，其中秦皮甲素與秦皮乙素是目前被研究最為深入的兩種成分，在體外細(xì)胞實驗以及體內(nèi)動物實驗中展現(xiàn)出抗炎、抗腫瘤、抗菌、抗氧化等豐富的藥理活性。其中，秦皮甲素和秦皮乙素突出的抗氧化能力尤其值得關(guān)注，其發(fā)揮抗氧化作用的關(guān)鍵在于提高清除自由基的能力以及調(diào)控Nrf2 信號通路。眾所周知，氧化應(yīng)激是許多疾病的誘發(fā)因素，因此，秦皮甲素和秦皮乙素的抗氧化活性在其抗腫瘤、抗炎等過程中起重要作用。此外，大量體外研究報道秦皮甲素和秦皮乙素可以通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞周期、抑制細(xì)胞增殖和遷移，以及促進(jìn)線粒體途徑的細(xì)胞凋亡等形式發(fā)揮抗腫瘤作用。然而，目前相關(guān)研究大多停留于體外細(xì)胞實驗階段，后續(xù)需要更多的體內(nèi)實驗來進(jìn)一步證實其抗腫瘤活性，同時探索其作用機(jī)制。秦皮甲素和秦皮乙素的抗炎作用同樣被廣泛報道，其中對NF-κB 信號通路的抑制作用可能是其抗炎活性的基礎(chǔ)，此外與炎癥相關(guān)的STAT1/STAT3和COX-2/PEG2通路同樣值得關(guān)注。秦皮甲素對部分革蘭氏陽性/陰性菌和真菌的抗菌活性已被證實，但受限于首過效應(yīng)，后續(xù)如何提高其口服生物利用度是發(fā)揮其抗菌作用的重要研究方向。隨著近年來免疫相關(guān)性疾病的發(fā)生率逐步升高，秦皮乙素在體液免疫和細(xì)胞免疫中的調(diào)節(jié)作用逐漸受到研究者的重視，特別是其對CD4+T 細(xì)胞分化（如Th17 和Treg）以及相關(guān)細(xì)胞因子釋放的調(diào)控作用使其在炎癥性腸病、特異性皮炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等多種自身免疫性疾病的治療中擁有廣闊的應(yīng)用前景。經(jīng)前期基礎(chǔ)研究的不斷積累發(fā)現(xiàn)，可以進(jìn)一步開展秦皮甲素和秦皮乙素的臨床試驗，特別是在癌癥、免疫相關(guān)性炎癥以及氧化應(yīng)激損傷方面進(jìn)行深入探討，為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。