法醫(yī)物證DNA 檢驗(yàn)中遇到的性反轉(zhuǎn)案例的應(yīng)用思考

楊 琪

安徽省全誠(chéng)司法鑒定中心，安徽 合肥 230041

一、法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展歷程

法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)技術(shù)自1985 年英國(guó)遺傳學(xué)家Alec Jeffreys 首次發(fā)現(xiàn)“DNA 指紋”以來(lái)，經(jīng)歷了三十多年的歷史，先后由DNA 指紋圖技術(shù)、擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（以下簡(jiǎn)稱“AMP-FLP”）分析技術(shù)、線粒體DNA 檢測(cè)技術(shù)三大技術(shù)革命組成。目前適用的DNA 檢驗(yàn)技術(shù)主要有：多基因座短串聯(lián)重復(fù)片段（以下簡(jiǎn)稱“STR”）復(fù)合擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)、線粒體DNA 檢測(cè)技術(shù)和單核苷酸多態(tài)性（以下簡(jiǎn)稱“SNP”）分析技術(shù)。

早期的DNA 指紋技術(shù)雖然可以應(yīng)用于案件的偵查，但是由于方法繁雜、周期長(zhǎng)、實(shí)驗(yàn)條件要求高等因素的制約，使得DNA 指紋技術(shù)無(wú)法滿足司法鑒定的要求，沒有得到更廣泛的發(fā)展，這就有了后來(lái)的基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（以下簡(jiǎn)稱“PCR”）技術(shù)發(fā)展起來(lái)的AMP-FLP 分析技術(shù)。該技術(shù)既具有基因組VNTR 基因座多態(tài)性又能迅速、高效進(jìn)行擴(kuò)增。AMP-FLP 分析是DNA 指紋技術(shù)的重大突破，其需要的DNA 的量少，檢測(cè)效率高，也能處理陳舊、腐敗的檢材，可進(jìn)行多個(gè)基因座復(fù)合擴(kuò)增。該技術(shù)試驗(yàn)周期短、可靠性高、操作簡(jiǎn)單。但是AMP-FLP 分析靈敏度不及STR 高，如果DNA 降解嚴(yán)重，較大的等位基因不容易擴(kuò)增出來(lái)。

為了克服AMP-FLP 分析技術(shù)的缺陷，1988 年，Saiki 等人首次提出短串聯(lián)重復(fù)片段（STR），并且將其應(yīng)用于PCR 擴(kuò)增，伴隨著先進(jìn)的DNA 測(cè)序儀的發(fā)明，熒光標(biāo)記多基因座STR 復(fù)合擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)生了。STR 復(fù)合擴(kuò)增分析方法簡(jiǎn)便，分型圖譜簡(jiǎn)單，有利于實(shí)現(xiàn)DNA 大數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)和檢索。STR技術(shù)也是目前使用頻率最高的DNA 分型技術(shù)。

自20 世紀(jì)90 年代中期，線粒體DNA 序列分析得到了飛速的發(fā)展，線粒體DNA 測(cè)序用于確認(rèn)家族中母系親屬之間的親緣關(guān)系，其出現(xiàn)主要為解決毛干等無(wú)核生物組織或者極微量檢材的DNA鑒定難題。伴隨著DNA 測(cè)序技術(shù)及儀器的升級(jí)，線粒體DNA 測(cè)序分析技術(shù)得到廣泛的推廣和應(yīng)用，使法醫(yī)DNA 鑒定的應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大，可以對(duì)來(lái)自人體的全部生物樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，尤其適用于毛干和指甲等特殊生物檢材的DNA 分析。檢測(cè)的靈敏度要比核DNA 高，適用于微量、陳舊和高度降解的生物檢材的鑒定。

SNP 分析技術(shù)，指在基因組上單個(gè)核苷酸的變異形成的遺傳變異，從而導(dǎo)致核酸序列多態(tài)性。隨著分子生物學(xué)與生物信息學(xué)的相關(guān)理論的飛速發(fā)展，通過(guò)建立相應(yīng)的遺傳標(biāo)記與特定的表型之間對(duì)應(yīng)關(guān)系，法醫(yī)DNA 表型刻畫（以下簡(jiǎn)稱“FDP”）推斷研究應(yīng)運(yùn)而生［1］。FDP 推斷通過(guò)對(duì)犯罪嫌疑人的DNA 進(jìn)行分析，從而推斷出其人體表征的一系列特征，包括容貌、身高、發(fā)色、膚色等，克服了模擬畫像中的某些失真缺點(diǎn)，能夠?yàn)閭刹槠瓢柑峁┲匾€索。

二、法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值

（一）法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)技術(shù)在刑事案件中偵破的重要價(jià)值

眾所周知，刑事案件的偵破需要第一時(shí)間獲得完整、有效的證據(jù)，但是由于受各種人為和客觀因素的影響，常出現(xiàn)證據(jù)鏈缺失，影響了案件的及時(shí)偵破。在DNA 檢驗(yàn)技術(shù)飛速發(fā)展的今天，法醫(yī)物證鑒定將DNA 技術(shù)應(yīng)用得淋漓盡致，使得其在刑事案件的偵破中發(fā)揮了越來(lái)越重要的作用?？梢該Q句話說(shuō)，法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)技術(shù)使得許多應(yīng)用其他技術(shù)無(wú)法攻破的“死案”得以偵破成為可能。

（二）法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)技術(shù)在司法鑒定中的重要價(jià)值

法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)技術(shù)在司法鑒定中的重要價(jià)值主要體現(xiàn)在解決個(gè)體識(shí)別和親子鑒定案件。司法鑒定中的個(gè)體識(shí)別案件，以交通事故案件居多，對(duì)事故現(xiàn)場(chǎng)的現(xiàn)場(chǎng)遺留的生物檢材進(jìn)行DNA 檢測(cè)，進(jìn)而確定案件現(xiàn)場(chǎng)遺留的生物檢材是否為交通事故的受害者所留。司法鑒定中的親子鑒定是通過(guò)人類遺傳標(biāo)記進(jìn)行DNA 檢測(cè)，通過(guò)遺傳分析，對(duì)有爭(zhēng)議的父母和子女進(jìn)行血緣關(guān)系鑒定，由此來(lái)解決非婚生子女入戶、補(bǔ)辦醫(yī)學(xué)出生證明、早年失散孩子的認(rèn)親、離婚案例中孩子撫養(yǎng)權(quán)糾紛、孩子出國(guó)留學(xué)、財(cái)產(chǎn)繼承及公證等一系列問(wèn)題。

三、法醫(yī)DNA 檢驗(yàn)遇到的特殊案例

（一）性反轉(zhuǎn)案例一

楊某的妻子陳某，因與丈夫感情不和，家庭矛盾繁瑣，孤身一人從四川老家到常州市武進(jìn)區(qū)與王某一起生活。2019 年3 月5 日，楊某乘火車從重慶來(lái)到常州市尋找妻子陳某。2019 年3 月6 日，楊某在一出租房?jī)?nèi)找到王某與妻子，遂向王某提出要求，要妻子和他一起回老家生活。王某拒絕，三人發(fā)生言語(yǔ)沖突，楊某持隨身攜帶的水果刀向王某刺去。結(jié)果，楊某卻誤將自己的妻子當(dāng)場(chǎng)刺死。

案發(fā)后，當(dāng)?shù)毓矙C(jī)關(guān)立即參與調(diào)查，并從案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)提取了楊某刺死陳某用的水果刀、現(xiàn)場(chǎng)陳某衣物上的可疑血跡及現(xiàn)場(chǎng)房間地面上滴落的可疑血跡等相關(guān)的DNA 物證檢材，送往當(dāng)?shù)毓簿址ㄡt(yī)物證DNA 實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)。為鎖定案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)的物證，早日攻破該命案做好準(zhǔn)備。

DNA 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果顯示，該現(xiàn)場(chǎng)生物檢材遺留者是一位男性個(gè)體。

隨后，辦案機(jī)關(guān)接到當(dāng)?shù)毓簿址ㄡt(yī)物證DNA實(shí)驗(yàn)室的鑒定報(bào)告，所有案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)提取的物證檢材上均檢出相同男性DNA 分型。這樣的檢驗(yàn)結(jié)果讓這些辦案民警困惑了，明明案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)死亡的是一名女性受害者，并且別的在場(chǎng)男性人員沒有留下血跡，怎么會(huì)所有現(xiàn)場(chǎng)物證檢材均檢出男性DNA 分型呢？隨后，他們與當(dāng)?shù)毓簿址ㄡt(yī)物證DNA 實(shí)驗(yàn)室的工作人員進(jìn)行溝通。為了慎重起見，DNA 實(shí)驗(yàn)室工作人員又將所有的送檢檢材重新檢驗(yàn)了一遍。并且，在第二次檢驗(yàn)中，還要求辦案民警對(duì)案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)三名當(dāng)事人重新提取樣本，以確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。

檢測(cè)結(jié)果依舊與之前的檢測(cè)結(jié)果相同，所有現(xiàn)場(chǎng)檢材均檢測(cè)出男性DNA 分型，并且與比對(duì)樣本中的死者的DNA 分型相同。由此，檢測(cè)人員推測(cè)該受害者是否就是一個(gè)染色體基因型是XY，但是社會(huì)性別是女性的個(gè)體。

通過(guò)AGCU X19 STR 熒光檢測(cè)試劑盒檢測(cè)該特別樣本的基因型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示所有X19 試劑盒基因位點(diǎn)上均出單峰，沒有檢測(cè)到一個(gè)位點(diǎn)出雙峰。經(jīng)分析這個(gè)樣本的出峰情況，可以理解為這個(gè)樣本從其父母那里遺傳得來(lái)的X 染色體上所有已檢測(cè)的19 個(gè)STR 基因位點(diǎn)上，均檢測(cè)出純合子的現(xiàn)象，而這一現(xiàn)象發(fā)生在一個(gè)正常女性樣本檢測(cè)結(jié)果中的概率基本上為零。提示這個(gè)樣本可能就是不同于正常女性個(gè)體的特殊樣本。

其后，鑒定人員通過(guò)AGCU Y24 STR 熒光檢測(cè)試劑盒進(jìn)一步檢測(cè)該特別樣本的基因型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示所檢基因型與正常男性個(gè)體檢測(cè)出的基因分型出峰情況相同，且能夠檢測(cè)出與這個(gè)試劑盒陽(yáng)性控制樣本9948 在所列的Y 染色體24 個(gè)STR 基因座上出現(xiàn)的峰值情況——幾乎所有Y24試劑盒基因位點(diǎn)上（除DYS527a/b、DYS385a/b上出雙峰）均出單峰，與這個(gè)試劑盒的陽(yáng)性樣本Control DNA 9948 出峰狀況完全相同，也就是說(shuō)這個(gè)樣本不是一個(gè)女性樣本STR 檢測(cè)出的陰性結(jié)果，而是與正常男性樣本檢測(cè)的結(jié)果出峰情況是一致的。

上述一系列實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果，均顯示該名社會(huì)性別為女性的受害者，DNA 分型的確檢測(cè)出染色體核型為46XY 的男性分型特征?；卦L當(dāng)事人親屬，了解到該“女性”就是因?yàn)榇嬖谌旧w性別與表型性別反轉(zhuǎn)的疾病，所以才導(dǎo)致其夫妻倆一直未能夠正常生育出孩子，夫妻倆感情矛盾日益凸顯。

（二）性反轉(zhuǎn)案例二

2020 年4 月5 日，丈夫王某和妻子張某帶著孩子王某來(lái)到我司法鑒定中心要求做親子鑒定，用于后期辦理孩子入戶。鑒定中心的工作人員仔細(xì)核實(shí)了他們所提供的材料，按照司法鑒定程序受理了這個(gè)案件，并像往常一樣開展實(shí)驗(yàn)。經(jīng)分析被鑒定人DNA 基因圖譜，發(fā)現(xiàn)孩子的母親張某的DNA 圖譜的性別峰值顯示出男性的XY 特征。鑒定中心的工作人員帶著對(duì)其實(shí)驗(yàn)結(jié)果的疑問(wèn)，反復(fù)重新做了幾次實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)結(jié)果仍然與之前的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同。后來(lái)，為了驗(yàn)證這個(gè)個(gè)體的真正性別，仍然，做了用AGCU X19 STR 熒光檢測(cè)試劑盒、AGCU Database Y24 熒光檢測(cè)試劑盒對(duì)這個(gè)樣本進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)，這個(gè)母親的樣本確實(shí)表現(xiàn)出男性個(gè)體的基因型。

后來(lái)，從側(cè)面走訪打聽到，被鑒定人就是因?yàn)闆]有生育能力，夫妻倆才決定收養(yǎng)一個(gè)小孩。而他們來(lái)司法鑒定中心做親子鑒定的目的就是辦理領(lǐng)養(yǎng)手續(xù)。

（三）性反轉(zhuǎn)案例三

2023 年4 月15 日，我司法鑒定中心為客戶上門出診一個(gè)親子鑒定的案例，一對(duì)夫婦要求和自己的孩子做親子鑒定，用于落實(shí)后期孩子需要申報(bào)戶口的事情。在履行司法鑒定程序時(shí)鑒定人員問(wèn)起：“被鑒定當(dāng)事人（即指這對(duì)父母和孩子）有沒有做過(guò)骨髓移植手術(shù)及有沒有輸血史時(shí)？”孩子父母回答，這個(gè)孩子有白血病病史，成功完成了骨髓移植手術(shù)。但是手術(shù)過(guò)去已有約3 年時(shí)間了。針對(duì)這種特殊的情形，我們對(duì)孩子除了采集了血樣樣本，還采集了毛發(fā)，口腔擦拭物，而父母親的樣本我們只采集了血樣。經(jīng)過(guò)對(duì)此案例中的三個(gè)樣本進(jìn)行DNA 檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，孩子的血樣樣本與孩子父母親的血樣樣本的DNA 分型不符合親子血緣關(guān)系特征，并且這個(gè)孩子的血樣樣本所檢出的DNA 分型與其性別基因型不匹配，這個(gè)孩子原本是個(gè)女性卻檢測(cè)出來(lái)是個(gè)男性個(gè)體。但是后來(lái)，鑒定人員又通過(guò)對(duì)孩子的毛發(fā)、口腔擦拭物進(jìn)行DNA 檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)他們?nèi)说臉颖臼欠嫌H生血緣關(guān)系特征的。

四、性反轉(zhuǎn)案例所引發(fā)的思考

第一，染色體核型為46XY 的女性是存在一種性分化疾病的非正常女性。這種疾病也可稱作性逆轉(zhuǎn)綜合征［2］，是一種由于性別決定和分化異常導(dǎo)致的兩性畸形，其主要特征是患者的染色體核型與臨床表型相反。這種疾病的發(fā)病率臨床表型為1∶100000。［3］

第二，染色體核型為46XY 的女性若發(fā)育成為正常的男性個(gè)體，需要睪丸決定因子和雄激素。睪丸決定因子促使睪丸的形成，而后分泌苗勒管抑制因子和雄激素。單純性腺發(fā)育不全由于某些因素影響，導(dǎo)致性腺在胚胎早期發(fā)育不正常，不能正常產(chǎn)生苗勒管抑制因子和雄激素，因而輸卵管和子宮的發(fā)育不能夠受到抑制，男性外生殖器也不能夠正常發(fā)育，造成性腺發(fā)育異常。

第三，染色體核型為46XY 的女性是單純性腺發(fā)育不全患者，在早期成長(zhǎng)中一般沒有特別的異常，只是到了青春期會(huì)出現(xiàn)第二性別特征不明顯，并且伴有原發(fā)性或者繼發(fā)性的閉經(jīng)現(xiàn)象。

第四，染色體核型為46XY 的女性（或是染色體核型為46XX 的男性），是日常檢案中出現(xiàn)的特別案例，已經(jīng)陸續(xù)有文獻(xiàn)報(bào)道。由此也應(yīng)該引起鑒定人員對(duì)其有更深層次的認(rèn)識(shí)。這些性別異常樣本的檢出結(jié)果有可能將案件的偵查引入錯(cuò)誤的方向。試想下，如果某案件的嫌疑人是染色體核型為46XX 的男性個(gè)體，其遺留在某案發(fā)犯罪現(xiàn)場(chǎng)的生物檢材經(jīng)DNA 檢驗(yàn)后，則會(huì)因其染色體性腺性別為女性，而將偵查方向錯(cuò)誤指向女性群體，真正的犯罪嫌疑人卻得以逍遙法外。所以法醫(yī)鑒定人員對(duì)性發(fā)育異常的性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象應(yīng)該有一定的認(rèn)識(shí)，在平時(shí)的檢案中，如遇到檢測(cè)DNA性別信息與其他證據(jù)提示的性別信息不符時(shí)，應(yīng)考慮可能存在性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象，并且將其線索提供給案件偵查人員。

第五，在做完骨髓移植手術(shù)之后，受體的血樣所檢出的DNA 分型發(fā)生性反轉(zhuǎn)的現(xiàn)象，近些年陸續(xù)有許多報(bào)道。其原因在于，骨髓干細(xì)胞是負(fù)責(zé)造血的，試想下，如果骨髓移植手術(shù)的供體是位男性，但是接受骨髓移植手術(shù)的患者是位女性，那么在骨髓移植手術(shù)結(jié)束后，該位女性個(gè)體的造血功能仍然由該位男性個(gè)體的骨髓干細(xì)胞在執(zhí)行，所以術(shù)后通過(guò)DNA 檢測(cè)能夠發(fā)現(xiàn)，該女性患者的染色體核型有時(shí)就會(huì)發(fā)生性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象。因此，臨床上不乏存在得了白血病的人通過(guò)骨髓移植手術(shù)后（供體和自己的血型不一致），自己的血型會(huì)發(fā)生改變的情況?；谶@一點(diǎn)，對(duì)于涉及案件現(xiàn)場(chǎng)的物證，如果發(fā)現(xiàn)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)當(dāng)事人性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象，鑒定人員可以通過(guò)走訪該名當(dāng)事人，了解他（她）既往病史以及有無(wú)做過(guò)骨髓移植手術(shù)等情況，旨在為偵查案件的人員提供一些新的思路，不至于使案件的偵破走進(jìn)“死胡同”。

第六，在法醫(yī)物證親子、親緣關(guān)系鑒定中，如果遇到經(jīng)過(guò)Amelogenin 基因座檢測(cè)得出的性別信息與被檢測(cè)人員的性別信息不一致的情況，尤其需要注意被檢測(cè)人員是未成年人群體時(shí)，可以告知其監(jiān)護(hù)人盡快去醫(yī)院做進(jìn)一步檢查，提前進(jìn)行醫(yī)療干預(yù)，避免為出現(xiàn)異常結(jié)果的被鑒定人日后生活帶來(lái)麻煩。