乳雙歧桿菌Probio-M8發(fā)酵乳緩解便秘的作用

李培培，李樹(shù)森，孫二娜，王月嬌，劉巨龍*

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)乳品生物技術(shù)與工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018；2.蒙牛高科乳制品（北京）有限責(zé)任公司，北京 101107）

便秘是常見(jiàn)的消化道疾病，主要表現(xiàn)為糞便干結(jié)、排便困難和排便次數(shù)少等，常見(jiàn)于兒童和老年人。兒童的腸胃功能尚未發(fā)育完全，容易受到環(huán)境、飲食和腸道菌群失調(diào)等因素的影響[1]；而老年人是由于身體機(jī)能退化、腸道功能降低、飲食結(jié)構(gòu)不均衡、缺乏運(yùn)動(dòng)和飲水量減少等原因[2]，成為便秘的高發(fā)人群。便秘會(huì)降低患者的生活質(zhì)量，嚴(yán)重時(shí)會(huì)威脅患者的健康，引起炎癥反應(yīng)，破壞腸黏膜[3]，導(dǎo)致腹痛、腹脹、肛裂、痔瘡和腸穿孔，甚至?xí)T發(fā)高血壓、心血管疾病和結(jié)腸癌等[2，4]，同時(shí)由于排便壓力，部分人會(huì)患上不同程度的精神疾病[5]。目前便秘的治療方式主要有藥物、非藥物和手術(shù)治療3 種，藥物治療通常伴隨著副作用，長(zhǎng)期使用會(huì)使患者的耐藥性增加，治療效果不佳[6]。腸道微生態(tài)失調(diào)是形成便秘的一種原因[7]，腸道菌群紊亂會(huì)導(dǎo)致膽汁酸代謝失調(diào)，引起近端結(jié)腸蠕動(dòng)障礙，從而導(dǎo)致便秘的發(fā)生。益生菌可調(diào)節(jié)宿主腸道微生物的組成，改善腸道環(huán)境，被廣泛應(yīng)用于緩解便秘的研究中，因其具有無(wú)副作用、可緩解腸道炎癥和促進(jìn)腸道蠕動(dòng)等優(yōu)點(diǎn)，受到了廣泛的關(guān)注。雙歧桿菌是目前應(yīng)用較多的益生菌，對(duì)便秘有很好的緩解效果。張琪等[8]通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人群實(shí)驗(yàn)探究乳雙歧桿菌IU-100 對(duì)便秘的緩解作用，發(fā)現(xiàn)小鼠和受試者飲用IU-100 菌株發(fā)酵乳后，排便次數(shù)、時(shí)間和狀況等均得到改善。李亦漢等[3]使用兩歧雙歧桿菌CCFM1167 干預(yù)便秘小鼠，發(fā)現(xiàn)CCFM1167 可以通過(guò)減輕腸道炎癥達(dá)到緩解小鼠便秘的目的。綜上，諸多研究已經(jīng)證實(shí)雙歧桿菌部分菌株對(duì)便秘存在緩解作用。

乳雙歧桿菌Probio-M8（BifidobacteriumlactisProbio-M8，Probio-M8）是從中國(guó)健康婦女母乳中篩選分離出的一株具有益生特性的菌株，研究發(fā)現(xiàn)Probio-M8菌株具有較高的膽鹽和胃腸液耐受性[9]，可以改善宿主體內(nèi)炎癥因子水平，調(diào)節(jié)腸道菌群，并可緩解腹瀉的癥狀[10]。本研究通過(guò)動(dòng)態(tài)體外仿生消化系統(tǒng)評(píng)價(jià)發(fā)酵乳中Probio-M8 菌株的胃腸液耐受性，并招募35 名便秘患者，開(kāi)展28 d 的Probio-M8發(fā)酵乳干預(yù)實(shí)驗(yàn)，探究Probio-M8發(fā)酵乳對(duì)便秘的緩解作用，以期為雙歧桿菌在便秘中的應(yīng)用研究提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 菌株與材料

乳雙歧桿菌Probio-M8（BifidobacteriumlactisProbio-M8，Probio-M8）：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)乳品生物技術(shù)與工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；商業(yè)基礎(chǔ)發(fā)酵劑PYS-010（由唾液鏈球菌嗜熱亞種和德氏乳桿菌保加利亞亞種組成）：北京科拓恒通生物技術(shù)股份有限公司。

生牛乳：蒙牛高科乳制品（北京）有限責(zé)任公司；白砂糖：中糧糖業(yè)有限公司；MRS 固體培養(yǎng)基：英國(guó)Oxoid 公司；L-半胱氨酸鹽酸鹽（分析純）：青島海博生物技術(shù)有限公司；體外仿生胃腸模擬液粉劑（胃液模擬液粉劑、腸液模擬液粉劑）、CaCl2（分析純）、MgCl2（分析純）、胃蛋白酶（2 000 U/mL）、胰蛋白酶（100 U/mL）、膽鹽（10 mmol/L）：曉東宜?。ㄌK州）儀器設(shè)備有限公司；NaCl、NaHCO3、HCl（均為分析純）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備

pHS-3C 型pH 計(jì)：上海雷磁技術(shù)有限公司；HWS28 型恒溫水浴鍋：上海智城分析儀器有限公司；SRH 60-70 型均質(zhì)機(jī)：上海申鹿均質(zhì)機(jī)有限公司；GNP-9080 型恒溫培養(yǎng)箱：天津市中環(huán)實(shí)驗(yàn)電爐有限公司；HA-300MII1 型全自動(dòng)高壓蒸汽滅菌鍋：日本HIRAYAMA 公司；CP2202C 型分析天平：奧豪斯儀器有限公司；DHSI-Ⅳ型動(dòng)態(tài)人胃腸體外仿生消化設(shè)備：曉東宜?。ㄌK州）儀器設(shè)備有限公司。

1.2 方法

1.2.1 益生菌發(fā)酵乳制備

將生牛乳預(yù)熱至45 ℃，添加白砂糖混合均勻，化料15 min 后升溫至60 ℃進(jìn)行均質(zhì)，均質(zhì)壓力為20 MPa，隨后在95 ℃條件下殺菌5 min，殺菌完畢冷卻至37 ℃后接種商業(yè)基礎(chǔ)發(fā)酵劑（接種量為0.03‰）和Probio-M8 菌株（接種量為6×106CFU/mL），置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵至pH4.60 時(shí)停止，破乳攪拌隨后灌裝，置于4 ℃冷藏后熟。

1.2.2 益生菌發(fā)酵乳活菌數(shù)測(cè)定

采用GB 4789.34—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)雙歧桿菌檢驗(yàn)》對(duì)Probio-M8發(fā)酵乳進(jìn)行活菌數(shù)測(cè)定。

1.2.3 動(dòng)態(tài)體外仿生消化系統(tǒng)菌株存活率測(cè)定

1.2.3.1 模擬液的配制

模擬液包括胃液模擬液（simulated gastric fluid，SGF）和腸液模擬液（simulated intestinal fluid，SIF）。SGF 的制備方法[11]：以配制100 mL 的SGF 為例，取80 mL 胃電解質(zhì)儲(chǔ)備液（SGF 粉劑、0.825 mL MgCl2、3.25 mL 6 mol/L HCl）與50 μL CaCl2和18.5 mL 去離子水混合，用6 mol/L HCl 調(diào)節(jié)pH1.5，加入胃蛋白酶，調(diào)至胃蛋白酶的終濃度為800 U/mL，充分溶解后用0.22 μm 的無(wú)菌過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌，最后置于室溫陰涼處待用。SIF 的制備方法[11]：以配制100 mL 的SIF為例，取80 mL 腸電解質(zhì)儲(chǔ)備液（SIF 粉劑、2.75 mL MgCl2、1.75 mL 6 mol/L HCl）與200 μL CaCl2和19 mL去離子水混合，用6 mol/L HCl 調(diào)節(jié)pH6.5，加入胰蛋白酶和膽鹽，調(diào)至胰蛋白酶和膽鹽的終濃度分別為200 U/mL 和20 mmol/L，充分溶解后用0.22 μm 的無(wú)菌過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌，最后放置室溫陰涼處待用。

1.2.3.2 動(dòng)態(tài)體外仿生消化

動(dòng)態(tài)體外仿生胃腸道消化設(shè)備主要由模擬食管、3D 仿生人胃、十二指腸、四節(jié)小腸和大腸過(guò)濾裝置組成，其已經(jīng)被證實(shí)可以有效模擬發(fā)酵乳在胃腸道的消化過(guò)程[12]。試驗(yàn)期間先打開(kāi)設(shè)備電源，啟動(dòng)并進(jìn)行預(yù)熱，胃腸液的溫度控制在37 ℃左右，并根據(jù)成人胃腸道消化環(huán)境設(shè)定儀器各項(xiàng)參數(shù)（如胃腸消化液分泌速率、食道開(kāi)放速率、胃和小腸蠕動(dòng)頻率等）。設(shè)定好設(shè)備后，將發(fā)酵乳從進(jìn)樣口倒入，分別在消化60 min 和120 min時(shí)從胃和腸道末端吸取4 mL 食糜進(jìn)行活菌數(shù)測(cè)定。

1.2.3.3 發(fā)酵乳中益生菌活菌數(shù)測(cè)定與存活率計(jì)算

參考伍鵬等[11]的方法，分別測(cè)定Probio-M8發(fā)酵乳貯藏1 d 和28 d 時(shí)經(jīng)過(guò)模擬胃腸道消化后的活菌數(shù)。當(dāng)消化60 min 和120 min 時(shí)，分別在胃和腸道末端收集消化食糜，振蕩均勻后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。將經(jīng)過(guò)消化0、60 min 和120 min 樣品的活菌數(shù)以N0、N60、N120（CFU/mL）表示，計(jì)算經(jīng)消化60 min 和120 min 時(shí)菌株的存活率。消化60 min 時(shí)菌株在胃和腸道中的存活率按式（1）和（2）進(jìn)行計(jì)算；消化120 min 時(shí)菌株在胃和腸道中的存活率按式（3）和（4）進(jìn)行計(jì)算。

式中：S60min、S120min分別為發(fā)酵乳在胃中消化60、120 min 后Probio-M8 菌株的存活率，%；I60min、I120min分別為發(fā)酵乳在腸道中消化60、120 min 后Probio-M8 菌株的存活率，%；C0為發(fā)酵乳未經(jīng)消化的Probio-M8 菌株活菌數(shù)，CFU/mL；CG60、CG120分別為胃內(nèi)消化60、120 min 時(shí)Probio-M8發(fā)酵乳的活菌數(shù)，CFU/mL；V0為樣品體積，120 mL；V1、V11分別為消化60、120 min 胃中進(jìn)入的模擬胃液總體積（含HCl），mL；CI60、CI120分別為腸道消化60、120 min 時(shí)Probio-M8發(fā)酵乳的活菌數(shù)，CFU/mL；V2、V22分別為消化60、120 min 腸道中進(jìn)入的模擬腸液總體積（含NaHCO3），mL；4 為60 min 時(shí)從胃內(nèi)取出的樣品體積，mL。

1.2.4 人群實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1）篩選標(biāo)準(zhǔn)。年齡20～50 歲；參考美國(guó)胃腸道委員會(huì)制定的羅馬Ⅳ臨床便秘診斷標(biāo)準(zhǔn)[13]，受試者應(yīng)至少符合以下兩項(xiàng)癥狀：每4 次排便至少有1 次排便費(fèi)力；每4 次排便至少有1 次排便類型為Bristol 糞便性狀分型中的1 型；每4 次排便至少有1 次有排便不盡、肛門(mén)阻塞感；每周排便次數(shù)少于3 次。

2）排除標(biāo)準(zhǔn)。15 d 前服用過(guò)抗生素、精神類藥物；確診患有腸道器質(zhì)性疾病；妊娠或哺乳期婦女；對(duì)樣品成分過(guò)敏；拒絕簽署知情同意書(shū)。

3）干預(yù)措施。對(duì)符合篩選標(biāo)準(zhǔn)的35 名便秘患者進(jìn)行7 d 排空期后，進(jìn)行28 d 飲用期的臨床實(shí)驗(yàn)，受試者每日飲用一瓶200 g 的Probio-M8發(fā)酵乳，活菌數(shù)為1×1010CFU/瓶。飲用期間，每周從排便頻次、排便類型和排便用力程度3 個(gè)方面對(duì)受試者便秘情況進(jìn)行評(píng)價(jià)，每周進(jìn)行詢問(wèn)并記錄評(píng)分。排便類型評(píng)價(jià)參照Bristol 糞便性狀分型進(jìn)行評(píng)分[14]，標(biāo)準(zhǔn)如表1所示。排便用力程度評(píng)分范圍為0～3[15-16]，分?jǐn)?shù)增加表示排便用力程度增加。

表1 Bristol 糞便性狀分型評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Bristol stool scoring scale

4）改善有效率計(jì)算。根據(jù)受試者對(duì)排便類型和排便用力程度的評(píng)分計(jì)算改善有效率[13，15]，并按照不同年齡段進(jìn)行分析。改善有效率計(jì)算公式如下。

式中：C為改善有效率，%；W1為療效評(píng)估結(jié)果是痊愈、顯效和有效的人數(shù)；W0為總?cè)藬?shù)。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。顯著性水平為p＜0.05。由Origin Lab 2021 軟件進(jìn)行作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵乳活菌數(shù)

足量的活菌數(shù)對(duì)于益生菌發(fā)揮益生功效極其重要，益生菌在進(jìn)入體內(nèi)后，會(huì)受到胃酸、膽鹽和各種消化酶等不利因素的影響，只有較高的活菌數(shù)才能抵御胃部的惡劣環(huán)境，保證一定數(shù)量的活菌到達(dá)腸道，并對(duì)宿主健康產(chǎn)生積極影響[17]。由此可知，Probio-M8發(fā)酵乳只有達(dá)到一定的活菌數(shù)才能更好地發(fā)揮菌株的益生功效。發(fā)酵結(jié)束后，對(duì)發(fā)酵乳中Probio-M8 進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，結(jié)果為1.0×108CFU/g。根據(jù)GB 19302—2010《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵乳》規(guī)定，發(fā)酵乳中的乳酸菌活菌數(shù)應(yīng)達(dá)到106CFU/g 以上，Probio-M8發(fā)酵乳符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。此外，試驗(yàn)期間對(duì)Probio-M8 菌株進(jìn)行活菌數(shù)測(cè)定，發(fā)現(xiàn)整個(gè)試驗(yàn)期間樣品的活菌數(shù)均可達(dá)107CFU/g 以上，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 發(fā)酵乳中Probio-M8 菌株存活率變化情況

動(dòng)態(tài)體外仿生胃腸道消化設(shè)備可以模擬人體動(dòng)態(tài)消化過(guò)程，較為真實(shí)地反映Probio-M8發(fā)酵乳經(jīng)過(guò)人體消化后Probio-M8 菌株的存活率。貯藏1 d 和28 d的Probio-M8發(fā)酵乳經(jīng)過(guò)動(dòng)態(tài)體外仿生消化后，Probio-M8 菌株在胃內(nèi)存活率變化情況如圖1所示。

圖1 貯藏1 d 和28 d 的發(fā)酵乳胃內(nèi)Probio-M8 存活率Fig.1 Gastric survival rates of Probio-M8 in the fermented milk stored for 1 day and 28 days

由圖1 可知，在體外仿生胃內(nèi)消化60 min 時(shí)，貯藏1 d 和28 d 的Probio-M8發(fā)酵乳中Probio-M8 菌株的存活率分別為82.3% 和74.3%；消化120 min 時(shí)，貯藏1 d 和28 d 的Probio-M8發(fā)酵乳中Probio-M8 菌株的存活率分別為46.9% 和42.1%。綜上，整個(gè)試驗(yàn)期間的Probio-M8發(fā)酵乳在體外仿生胃內(nèi)消化60 min后，Probio-M8 菌株的存活率可高達(dá)70% 以上；消化120 min 后，存活率仍可保持在40%以上。

貯藏1 d 和28 d 的Probio-M8發(fā)酵乳在體外仿生腸道內(nèi)消化后，Probio-M8 菌株存活率變化情況如圖2所示。

圖2 貯藏1 d 和28 d 的發(fā)酵乳腸道內(nèi)Probio-M8 存活率Fig.2 Intestinal survival rates of Probio-M8 in the fermented milk stored for 1 day and 28 days

由圖2 可知，在體外仿生腸道內(nèi)消化60 min 時(shí)，貯藏1 d 和28 d 的Probio-M8發(fā)酵乳中Probio-M8 菌株的存活率分別為47.6% 和43.7%，消化結(jié)束后（120 min），貯藏1 d 和28 d 的Probio-M8發(fā)酵乳中Probio-M8 菌株的存活率分別為22.1% 和18.8%。綜上，整個(gè)試驗(yàn)期間的發(fā)酵乳在體外仿生腸道內(nèi)消化60 min 后，Probio-M8 菌株存活率可達(dá)40%以上；消化結(jié)束（120 min）時(shí)，仍保留20%左右的存活率。

綜上可知，貯藏1 d 和28 d 的Probio-M8發(fā)酵乳經(jīng)過(guò)體外仿生胃腸道消化120 min 后，Probio-M8 菌株存活率可保持在18%以上，試驗(yàn)初始和結(jié)束時(shí)Probio-M8 菌株存活率無(wú)明顯差異。表明Probio-M8 菌株具有較好的胃腸液耐受能力，在整個(gè)試驗(yàn)期間都可維持一定的存活率，能夠在宿主胃腸道中大量存活，可發(fā)揮相應(yīng)的健康功效。

2.3 人均排便頻次變化情況

排便次數(shù)少是便秘的一種癥狀表現(xiàn)，經(jīng)研究可知，正常人的排便頻次應(yīng)為每周3 次以上[18]。本研究受試者飲用發(fā)酵乳后人均排便頻次改變情況如圖3所示。

圖3 人均排便頻次Fig.3 Per capita defecation frequency

由圖3 可知，排空期受試者人均排便2.27 次，飲用Probio-M8發(fā)酵乳1 周后，受試者的人均排便頻次為3.87 次，到達(dá)了正常的排便頻次，與排空期存在顯著差異（p＜0.05）。第2 周受試者的人均排便頻次達(dá)到5.20 次，并且直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束每周人均排便頻次穩(wěn)定在5 次以上。第4 周時(shí)，受試者人均排便頻次比排空期增加148%。結(jié)果表明，飲用Probio-M8發(fā)酵乳可以增加排便次數(shù)，縮短腸道運(yùn)輸時(shí)間，使得腸道蠕動(dòng)頻率恢復(fù)正常，從而改善便秘。

2.4 排便類型變化情況

以Bristol 糞便性狀分型為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)糞便進(jìn)行評(píng)價(jià)，受試者飲用Probio-M8發(fā)酵乳后，人均排便類型評(píng)分變化情況如圖4所示，排便類型改善有效率如表2所示。

圖4 人均排便類型評(píng)分Fig.4 Per capita stool scale score

表2 排便類型改善有效率Table 2 Stool scale improvement rate%

由圖4 可知，受試者飲用Probio-M8發(fā)酵乳后，人均排便類型評(píng)分明顯降低，第4 周評(píng)分較排空期顯著降低了63.67%（p＜0.05）。由表2 可知，不同年齡段的受試者在飲用發(fā)酵乳后，排便類型均得到了不同程度的改善。40～50 歲的受試者在飲用發(fā)酵乳3 周后改善有效率達(dá)到了100.00%，糞便表現(xiàn)為光滑柔軟、容易排出。20～30 歲的受試者在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后排便類型改善有效率為81.02%，30～40 歲受試者在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后排便類型改善有效率為77.46%，排便類型均得到了明顯改善，趨于正常狀態(tài)。糞便的性狀是便秘的直觀表現(xiàn)形式，堅(jiān)硬的糞便會(huì)增加排便難度和延長(zhǎng)排便時(shí)間。結(jié)果表明，Probio-M8發(fā)酵乳可以改善便秘患者的排便類型，減少水分吸收，使得糞便更易排出，改善便秘患者的生活質(zhì)量。

2.5 排便用力程度變化情況

受試者飲用Probio-M8發(fā)酵乳后，排便用力程度評(píng)分變化情況如圖5所示，排便用力程度改善有效率如表3所示。

圖5 人均排便用力程度Fig.5 Per capita bowel movement effort

表3 排便用力程度改善有效率Table 3 Improvement rate of bowel movement effort%

由圖5 可知，在排空期內(nèi)受試者均表現(xiàn)為排便困難，需要十分用力排出糞便，飲用Probio-M8發(fā)酵乳后，人均排便用力程度評(píng)分顯著降低（p＜0.05），飲用4周后人均排便用力程度評(píng)分降低了48.34%。由表3可知，不同年齡段的受試者飲用Probio-M8發(fā)酵乳后，排便用力程度改善有效率表現(xiàn)出了差別，40～50 歲的受試者第3 周的改善有效率達(dá)到了100.00%，效果明顯，表現(xiàn)為排便順暢。20～30 歲的受試者在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)排便用力程度改善有效率達(dá)到了87.50%。

3 討論

近年來(lái)隨著生活習(xí)慣的改變和社會(huì)壓力的增加，便秘患病率逐年增加，影響患者的健康及生活質(zhì)量。越來(lái)越多的研究證明益生菌可以改善便秘，并已被投入便秘的輔助治療中。本研究發(fā)現(xiàn)Probio-M8發(fā)酵乳經(jīng)過(guò)120 min 體外仿生消化后，Probio-M8 菌株存活率可保持20%左右，具有良好的耐胃腸液能力。人群實(shí)驗(yàn)中，受試者在飲用Probio-M8發(fā)酵乳后，排便頻次增加、排便類型趨于正常、排便用力程度顯著降低，與相關(guān)研究人員對(duì)益生菌緩解便秘作用的研究結(jié)果一致[19]，具有緩解便秘的功效，未來(lái)可被廣泛應(yīng)用到便秘的輔助治療中，用于改善便秘癥狀和提升患者的生活質(zhì)量。本研究中Probio-M8發(fā)酵乳對(duì)不同年齡段受試者的排便類型和排便用力程度改善有效率呈現(xiàn)差異，30～40 歲的受試者改善有效率最低，可能與其在工作和生活方面的壓力較大有關(guān)，已有研究證實(shí)精神和心理因素是引起便秘的重要原因之一[20]。

關(guān)于益生菌干預(yù)便秘的研究中發(fā)現(xiàn)，益生菌可通過(guò)多種途徑改善便秘。白曉曄[21]發(fā)現(xiàn)便秘志愿者在食用益生菌發(fā)酵乳后，體內(nèi)炎癥因子水平明顯下降，血液中炎癥因子C-反應(yīng)因子和脂多糖顯著降低，抗炎因子脂多糖結(jié)合蛋白和白細(xì)胞介素-10 顯著增加，推測(cè)益生菌發(fā)酵乳可減輕炎癥，改善腸動(dòng)力，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)。劉文君[18]對(duì)比了實(shí)驗(yàn)期間益生菌組和安慰劑組的腸道菌群組成，結(jié)果發(fā)現(xiàn)相比于安慰劑組，攝入植物乳植桿菌P9 后，便秘患者腸道內(nèi)植物乳植桿菌和雙歧桿菌等有益菌株含量顯著升高，糞擬桿菌和芬氏別樣桿菌等菌株豐度下降，表明益生菌可以改變腸道菌群組成，以此對(duì)便秘產(chǎn)生影響。李亦漢[7]利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探究雙歧桿菌緩解便秘的機(jī)制，發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌可以下調(diào)與腸道水分重吸收相關(guān)蛋白質(zhì)的基因水平，以此改善排便類型。另外，雙歧桿菌還可以通過(guò)上調(diào)部分次級(jí)膽汁酸和下調(diào)部分初級(jí)膽汁酸的含量，影響膽汁酸代謝。膽汁酸受體的激活可以恢復(fù)免疫平衡、提高糞便的含水量和促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，以此實(shí)現(xiàn)便秘的改善。綜上，推測(cè)Probio-M8發(fā)酵乳可能通過(guò)降低患者體內(nèi)的炎癥水平、調(diào)節(jié)腸道菌群的組成和影響膽汁酸代謝等途徑，改善受試者的便秘癥狀。由于便秘成因復(fù)雜，實(shí)驗(yàn)中不同年齡段的便秘患者對(duì)于Probio-M8發(fā)酵乳應(yīng)答情況有所不同，具體成因還需要增加受試人群規(guī)模，完善整個(gè)實(shí)驗(yàn)，并通過(guò)多組學(xué)聯(lián)用共同進(jìn)行解析并深入研究。

4 結(jié)論

本研究通過(guò)動(dòng)態(tài)體外仿生消化系統(tǒng)測(cè)試和人群實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，乳雙歧桿菌Probio-M8發(fā)酵乳中益生菌Probio-M8 具有良好的耐胃腸液能力，能以活菌狀態(tài)到達(dá)腸道發(fā)揮益生功效，并且可以通過(guò)改善排便類型、增加排便頻次和降低排便用力程度緩解便秘癥狀。