李曉晨,李天嬌, 2, 3,包永睿, 2, 3,王 帥, 2, 3,孟憲生, 2, 3*
基于“質(zhì)-量”雙標(biāo)的當(dāng)歸質(zhì)量分析方法研究
李曉晨1,李天嬌1, 2, 3,包永睿1, 2, 3,王 帥1, 2, 3,孟憲生1, 2, 3*
1. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,遼寧 大連 116600 2. 遼寧省中藥多維分析專業(yè)創(chuàng)新技術(shù)中心,遼寧 大連 116600 3. 遼寧省現(xiàn)代中藥研究工程實(shí)驗(yàn)室,遼寧 大連 116600
建立以對(duì)照藥材為基準(zhǔn)物質(zhì)定性和不完全依賴對(duì)照品定量的當(dāng)歸藥材“質(zhì)-量”雙標(biāo)控制方法。采用HPLC技術(shù)建立當(dāng)歸對(duì)照藥材的特征圖譜,將其與供試藥材圖譜進(jìn)行比對(duì)來辨別藥材的真?zhèn)?,即“質(zhì)”;采用內(nèi)標(biāo)物質(zhì)對(duì)特征峰化學(xué)成分進(jìn)行相對(duì)定量來區(qū)分藥材的優(yōu)劣,即“量”。建立的當(dāng)歸藥材“質(zhì)-量”分析方法符合方法學(xué)考察要求,各供試藥材與對(duì)照藥材的相似度均大于0.98;規(guī)定了當(dāng)歸藥材特征峰化學(xué)成分相對(duì)含量下限。該方法不依賴多種對(duì)照品,能清晰、快速地判斷藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣,彌補(bǔ)目前當(dāng)歸藥材質(zhì)量控制的不足,完善中藥材質(zhì)量控制體系,降低中藥材(飲片)檢測(cè)成本,減輕中藥企業(yè)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),以期推動(dòng)中醫(yī)藥事業(yè)可持續(xù)發(fā)展。
當(dāng)歸;對(duì)照藥材;質(zhì)量控制;特征圖譜;綠原酸;阿魏酸;洋川芎內(nèi)酯Ⅰ;藁本內(nèi)酯
當(dāng)歸藥材來源于傘形科當(dāng)歸屬植物(Oliv.) Diels的干燥根,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,又名干歸、馬尾當(dāng)歸、秦哪、馬尾歸、云歸、山民歸等,是我國臨床最常用中藥之一,具補(bǔ)血活血和調(diào)經(jīng)止痛的功效,有“血中之氣藥”“補(bǔ)血之要藥”“婦科之良藥”等稱號(hào),主要含有揮發(fā)油、有機(jī)酸、多糖、核苷類、氨基酸等多種類型的化合物,藥用歷史悠久,許多經(jīng)典名方以其入藥[1-6]。由文獻(xiàn)可知[7-9],甘肅作為當(dāng)歸道地產(chǎn)區(qū)歷史悠久,南北朝時(shí)期,醫(yī)書記載當(dāng)歸產(chǎn)于隴西(今甘肅隴西至蘭州一帶)、黑水(今甘肅定西)、西川(今四川西部)。近年來,隨著當(dāng)歸市場(chǎng)需求量的增加,種植面積在不斷擴(kuò)大,隨著全球氣候變暖、氣溫升高的大環(huán)境,當(dāng)歸傳統(tǒng)主產(chǎn)區(qū)出現(xiàn)一定的變化,正在逐漸向西遷移,種苗質(zhì)量良莠不齊,影響了當(dāng)歸藥材生產(chǎn)健康發(fā)展。當(dāng)歸的栽培歷時(shí)長(zhǎng),優(yōu)質(zhì)種質(zhì)的收集、選育工作相對(duì)滯后,品種退化嚴(yán)重,以上都可能是影響藥材品質(zhì)的重要因素。傳統(tǒng)的中藥材及飲片鑒別主要依靠性狀鑒別、顯微鑒別和理化方法,由于這些傳統(tǒng)技術(shù)受制于檢驗(yàn)人員的專業(yè)知識(shí)和從業(yè)人員經(jīng)驗(yàn),主觀判斷存在很大的局限性,且中藥復(fù)雜體系質(zhì)量評(píng)控技術(shù)難度和高額成本給中藥企業(yè)帶來了巨大的壓力,因而對(duì)中藥臨床合理用藥和臨床療效提升的指導(dǎo)和支持作用一直難以體現(xiàn)。
本實(shí)驗(yàn)針對(duì)上述問題提出了基于“質(zhì)-量”雙標(biāo)的當(dāng)歸質(zhì)量分析方法。首先,本課題組以對(duì)照藥材為基準(zhǔn),構(gòu)建了特征圖譜,選取可代表當(dāng)歸藥效的有限個(gè)代表性成分作為特征峰,并通過評(píng)價(jià)對(duì)照藥材和供試藥材特征峰的相似度,實(shí)現(xiàn)對(duì)當(dāng)歸真?zhèn)蔚呐袛?。其次,本?shí)驗(yàn)選擇了保留時(shí)間穩(wěn)定、價(jià)格低廉且易于獲得的內(nèi)標(biāo)物質(zhì),作為定量評(píng)價(jià)的指標(biāo)?;趦?nèi)標(biāo)物質(zhì),進(jìn)行了特征峰化學(xué)成分的相對(duì)定量研究,通過內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的化學(xué)成分準(zhǔn)確量化,計(jì)算供試藥材特征峰化學(xué)成分的相對(duì)含量,從而評(píng)價(jià)當(dāng)歸的優(yōu)劣。這種基于“質(zhì)-量”雙標(biāo)的當(dāng)歸質(zhì)量分析方法有效地克服了當(dāng)歸有效成分的快速測(cè)定和中藥復(fù)雜體系質(zhì)量評(píng)控成本高的難題。
Agilent-1260Ⅱ高效液相色譜儀;Agilent 6550 Q-TOF-MS質(zhì)譜儀(美國安捷倫科技有限公司)。
當(dāng)歸對(duì)照藥材(批號(hào)120927-201617,中國食品藥品檢定研究所);當(dāng)歸藥材信息見表1,經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)張慧教授鑒定為傘形科當(dāng)歸屬植物(Oliv.) Diels的干燥根。對(duì)照品阿魏酸(批號(hào)wkq17022303),購自四川省維克奇生物科技有限公司;對(duì)照品洋川芎內(nèi)酯I(批號(hào)150213),購自成都普菲德生物技術(shù)有限公司;對(duì)照品藁本內(nèi)酯(批號(hào)111737-201910)、綠原酸對(duì)照品(批號(hào)110753-201415)均由中國食品藥品檢定研究院提供;所有對(duì)照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于98%;乙腈(質(zhì)譜級(jí),德國Merck公司);水(娃哈哈純凈水)。
表1 當(dāng)歸來源信息
2.1.1 對(duì)照藥材溶液的制備 取當(dāng)歸對(duì)照藥材粉末2.0 g,精密稱定, 置具塞錐形瓶中,精密加入70%甲醇25 mL,稱定質(zhì)量,超聲提取30 min(頻率40 kHz),放冷,加甲醇補(bǔ)足減失質(zhì)量,搖勻,過0.22 μm微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液,作為參照物溶液。
2.1.2 供試品溶液的制備 精密稱取供試品粉末(過4號(hào)篩)2.0 g,按上述方法制成供試品溶液。
2.1.3 混合對(duì)照品溶液的制備 取適量阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯I、藁本內(nèi)酯、綠原酸對(duì)照品精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入50%甲醇,搖勻,作為混合對(duì)照品溶液。
2.1.4 色譜條件 色譜柱:Agilent poroshell 120 SB-C18色譜柱(100 mm×4.6 mm,2.7 μm);流動(dòng)相:0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),進(jìn)行梯度洗脫:0~15 min,5%~40% B;15~17 min,40%~60% B;17~25 min,60%~75% B,25~31 min,75%~87% B;31~35 min,87%~95% B;體積流量:0.6 mL/min;柱溫30 ℃;DAD檢測(cè)器波長(zhǎng)254 nm;進(jìn)樣量5 μL。
2.1.5 特征圖譜的建立 將對(duì)照品溶液和供試品溶液,每份樣品平行2次,按色譜條件依次進(jìn)樣檢測(cè),將254 nm波長(zhǎng)下的圖譜數(shù)據(jù)由分析檢測(cè)儀器中導(dǎo)入中國藥典委員會(huì)“中藥指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件”(2012.130727版本),獲得當(dāng)歸藥材的HPLC特征圖譜,見圖1。以當(dāng)歸對(duì)照藥材的圖譜為參照譜圖,使用中位數(shù)進(jìn)行自動(dòng)匹配,加以多點(diǎn)校正,共標(biāo)定15個(gè)共有峰,共有峰面積占特征圖譜的75%以上,其中6號(hào)峰穩(wěn)定性、重復(fù)性、分離度好、位置居中,故以其為參照峰(S);將共有模式與對(duì)照藥材特征圖譜進(jìn)行比對(duì),見圖2;供試品色譜中應(yīng)呈現(xiàn)15個(gè)特征峰,并應(yīng)與對(duì)照藥材色譜圖中的15個(gè)特征峰保留時(shí)間相對(duì)應(yīng),見表2。
2.2.1 專屬性試驗(yàn) 分別取混合對(duì)照品溶液、供試品溶液進(jìn)行測(cè)定,各主峰與雜質(zhì)峰分離度良好,專屬性強(qiáng),見圖3。
2.2.2 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液5 μL,按“2.1.4”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定,連續(xù)進(jìn)樣6次,測(cè)定各色譜峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。各色譜峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積RSD值均小于1.0%,表明儀器精密度良好。
圖1 8批供試藥材的HPLC疊加圖譜
圖2 對(duì)照藥材特征圖譜及供試藥材共有模式
表2 特征峰保留時(shí)間及相對(duì)保留時(shí)間
4-綠原酸 6-阿魏酸 7-洋川芎內(nèi)酯Ⅰ 14-藁本內(nèi)酯
2.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液5 μL,按“2.1.4”項(xiàng)下色譜條件,分別在0、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣6次檢測(cè),測(cè)定各色譜峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。各色譜峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積RSD值均小于2.4%,表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。
2.2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 按供試品溶液制備方法制備6份供試樣品,按“2.1.4”項(xiàng)下色譜條件,分別進(jìn)樣檢測(cè),測(cè)定各色譜峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。各色譜峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積RSD值均小于2.0%,表明方法重復(fù)性良好。
采用中國藥典委員會(huì)“中藥指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件”(2012.130727版本)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,該軟件利用夾角余弦法計(jì)算每個(gè)色譜圖與對(duì)照藥材圖譜相比較的相似度。以當(dāng)歸對(duì)照藥材和供試藥材特征峰的相似度明確當(dāng)歸藥材真?zhèn)?。?dāng)歸供試藥材與當(dāng)歸對(duì)照藥材的相似度均大于0.98,說明所收集的當(dāng)歸供試藥材的特征峰化學(xué)成分基本一致,質(zhì)量相對(duì)穩(wěn)定。相似度計(jì)算結(jié)果見表3。
表3 供試藥材相似度評(píng)價(jià)結(jié)果
在初步采用Agilent-1260 II高效液相色譜儀利用相對(duì)保留時(shí)間與對(duì)照品比對(duì)的基礎(chǔ)上,采用Agilent 6550Q-TOF-MS質(zhì)譜儀,進(jìn)行質(zhì)譜分析,運(yùn)用Agilent MassHunter Qualitative Analysis軟件,通過對(duì)照品比對(duì)的方法對(duì)正、負(fù)離子模式進(jìn)行化學(xué)成分解析,進(jìn)一步明確特征峰的化學(xué)成分。
2.4.1 色譜條件 色譜柱:Agilent poroshell 120 SB-C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,2.7 μm);流動(dòng)相為0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脫:0~30 min,5%~95% B;體積流量0.4 mL/min;柱溫30 ℃;進(jìn)樣量1.5 μL。
2.4.2 質(zhì)譜分析條件 電噴霧離子源(Dual AJS ESI),正、負(fù)離子模式,毛細(xì)管電壓(Vcap)為3 500 V,干燥氣體體積流量(drying gas flow)為11 L/min,干燥氣體溫度(drying gas temp)為150 ℃,霧化器壓力(neulizer pressure)為172.4 kPa,鞘氣溫度(sheath gas temp)為350 ℃,鞘氣體積流量(sheath gas flow)為10 L/min,質(zhì)量掃描范圍(mass range)為/100~1000。采用auto MS/MS模式,利用對(duì)照品比對(duì)及數(shù)據(jù)庫查詢等方法對(duì)特征峰化學(xué)成分進(jìn)行解析。正、負(fù)離子模式鑒定出了15個(gè)特征峰中的4個(gè)化學(xué)成分,見圖4。其中,4號(hào)峰為綠原酸、6號(hào)峰為阿魏酸、7號(hào)峰為洋川芎內(nèi)酯I、14號(hào)峰為藁本內(nèi)酯,鑒定結(jié)果見表4。
4-綠原酸 6-阿魏酸 7-洋川芎內(nèi)酯I 14-藁本內(nèi)酯
S該化合物是由對(duì)照品進(jìn)行指認(rèn)
SThis compound was identified using reference standards
2.5.1 線性關(guān)系考察 配制阿魏酸的6個(gè)質(zhì)量濃度溶液,按色譜條件,分別進(jìn)樣檢測(cè),以質(zhì)量為橫坐標(biāo)(),峰面積為縱坐標(biāo)(),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸,得到線性回歸方程(=0.702 1+0.770 3)、相關(guān)系數(shù)(=0.999 1)和線性范圍(0.051 0~0.202 0 mg)。結(jié)果表明進(jìn)樣量范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。
2.5.2 精密度試驗(yàn) 同“2.2.2”項(xiàng)下方法,計(jì)算阿魏酸相對(duì)峰面積RSD值均小于1.80 %,表明儀器精密度良好。
2.5.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 同“2.2.3”項(xiàng)下方法,計(jì)算阿魏酸相對(duì)峰面積RSD值均小于1.90%,表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。
2.5.4 重復(fù)性試驗(yàn) 同“2.2.4”項(xiàng)下方法,計(jì)算阿魏酸相對(duì)峰面積RSD值均小于2.10%,表明方法重復(fù)性良好。
2.5.5 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱定當(dāng)歸藥材粉末6 份,分別精密加入阿魏酸對(duì)照品適量,按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按“2.1.4”項(xiàng)下色譜條件,分別進(jìn)樣檢測(cè),計(jì)算得到阿魏酸的平均加樣回收率為99.80%,RSD為1.88%。
2.5.6 含量測(cè)定 根據(jù)《中國藥典》2020版當(dāng)歸“含量測(cè)定”項(xiàng)下方法檢測(cè),8批產(chǎn)地供試品中,供試品均能符合藥典規(guī)定(含阿魏酸不得少于0.05%)。6號(hào)峰“阿魏酸”為《中國藥典》2020年版中當(dāng)歸“含量測(cè)定”項(xiàng)下的指標(biāo)之一,該峰分離效果好、保留時(shí)間穩(wěn)定居中、對(duì)照品價(jià)格低廉,故以其作為內(nèi)標(biāo)物質(zhì),開展基于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的特征峰化學(xué)成分相對(duì)定量研究。取供試品藥材,按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按“2.1.4”項(xiàng)下色譜條件分析測(cè)定阿魏酸含量,每個(gè)供試品平行2份,結(jié)果見表5。計(jì)算每個(gè)供試品中特征峰化學(xué)成分的相對(duì)含量[特征峰化學(xué)成分相對(duì)含量=特征峰峰面積×(阿魏酸含量/阿魏酸峰面積)],結(jié)果見表6。取“平均數(shù)-標(biāo)準(zhǔn)差”作為特征峰化學(xué)成分相對(duì)于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)化學(xué)成分的相對(duì)含量下限,供試藥材根據(jù)此方法測(cè)得的特征峰相對(duì)含量不低于該含量下限[10]。
中藥材是中醫(yī)藥的源頭,中藥質(zhì)量的提升必須對(duì)藥材質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格把控。目前,《中國藥典》2020年版中質(zhì)量控制項(xiàng)對(duì)多成分指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定的中藥品種已有上百種,且有些對(duì)照品價(jià)格昂貴,加大了企業(yè)生產(chǎn)和民眾的用藥成本。
表5 內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的準(zhǔn)確定量結(jié)果(n=2)
表6 基于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的特征峰相對(duì)定量結(jié)果
當(dāng)歸為我國中藥材十大出口品種之一,出口量在2 723.98 t,出口額2 539.53萬美元,出口金額占比為2.23%[11]。由于市場(chǎng)需求劇增中藥材種植區(qū)域的不斷擴(kuò)大和盲目引種,造成中藥材質(zhì)量問題日益突出,影響中藥當(dāng)歸的臨床合理使用[12]。中藥材(飲片)質(zhì)量控制方法主要包括單指標(biāo)含量測(cè)定法、多指標(biāo)含量測(cè)定法和指紋圖譜與含量測(cè)定結(jié)合法,以上方法雖能夠?yàn)榭刂浦兴幉模嬈┵|(zhì)量提供量化數(shù)據(jù),但存在著單一指標(biāo)不能反映藥材整體特征、多指標(biāo)含量測(cè)定依賴于多種對(duì)照品且某些指標(biāo)成分不能反映藥效、指紋圖譜只能模糊地評(píng)價(jià)藥材相似性不能清晰地判斷供試品真?zhèn)蝺?yōu)劣的不足。為解決以上問題,本研究創(chuàng)新研究思路,不依賴多種對(duì)照品,建立了以價(jià)格低廉易獲得的對(duì)照藥材為基準(zhǔn)物質(zhì)的定性和不依賴多種對(duì)照品定量的當(dāng)歸藥材“質(zhì)-量”雙標(biāo)控制方法。通過構(gòu)建當(dāng)歸對(duì)照藥材及8個(gè)不同產(chǎn)地當(dāng)歸供試藥材的特征圖譜,以對(duì)照藥材為基準(zhǔn)物質(zhì),評(píng)價(jià)對(duì)照藥材和供試藥材特征峰的相似度,可以用于判斷當(dāng)歸藥材的真?zhèn)?,即“質(zhì)”;同時(shí)準(zhǔn)確定量1種內(nèi)標(biāo)物質(zhì)化學(xué)成分,計(jì)算當(dāng)歸藥材其余各特征峰的相對(duì)含量,確定的各特征峰相對(duì)含量的下限能夠區(qū)分當(dāng)歸藥材優(yōu)劣,即“量”。本研究所提出的當(dāng)歸藥材的“質(zhì)-量”控制方法能夠有效判斷藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣,形成科學(xué)、可控的中藥質(zhì)量控制體系,旨在為中藥質(zhì)量控制和中藥產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展提供探索性解決方案。
本研究將與對(duì)照藥材相似度好、信噪比大于10、分離度大于1.5的特征峰作為定量分析指標(biāo)成分。其中,綠原酸具有保肝、利膽、抗腫瘤、抗病毒等廣泛的藥理活性[13-14],苯酞類化合物包括藁本內(nèi)酯、洋川芎內(nèi)酯I等,是當(dāng)歸揮發(fā)油的主要成分,其中藁本內(nèi)酯的含有量最高,該類化合物具有抗腫瘤、抗氧化、抑制血管生成、消炎解痛等多種藥理作用[15-18]。說明本方法選擇的當(dāng)歸定性分析的指標(biāo)能夠較為科學(xué)地反映當(dāng)歸藥材的藥效,能全面科學(xué)地反映當(dāng)歸的內(nèi)在質(zhì)量。
本實(shí)驗(yàn)所收集的市面所售不同產(chǎn)地供試品,旨在建立基于“質(zhì)-量”雙標(biāo)的當(dāng)歸質(zhì)量分析方法,所收集的當(dāng)歸供試藥材與當(dāng)歸對(duì)照藥材的相似度均大于0.90[19],說明所收集的當(dāng)歸供試藥材的特征峰化學(xué)成分基本一致,但僅采用8批不同產(chǎn)地的藥材規(guī)定特征峰相對(duì)含量下限,缺乏全面性,因此,需要更進(jìn)一步大量收集不同產(chǎn)地、不同批次的藥材,完善該套方法,以期有效判斷藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣,形成一個(gè)科學(xué)、可控的中藥質(zhì)量控制體系,在滿足藥材多項(xiàng)質(zhì)量控制項(xiàng)的同時(shí)減輕企業(yè)需大量購買對(duì)照品的經(jīng)濟(jì)壓力,推動(dòng)中醫(yī)藥事業(yè)可持續(xù)發(fā)展。
利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突
[1] 中國藥典[S]. 一部. 2020: 139.
[2] 鄔雪妹. 當(dāng)歸的藥理作用研究進(jìn)展[J]. 東方藥膳, 2021(8): 289.
[3] 何樹苗, 陳元堃, 曾奧, 等. 藁本內(nèi)酯藥理作用及機(jī)制研究進(jìn)展 [J]. 廣東藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2021, 37(2): 152-156.
[4] 陳華梅, 黃楓, 申震, 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療骨質(zhì)疏松癥的分子作用機(jī)制 [J]. 中國骨質(zhì)疏松雜志, 2021, 27(4): 526-532.
[5] 毛文點(diǎn), 庹玲玲, 齊文續(xù), 等. 黃芪-當(dāng)歸不同配伍對(duì)其6種主要有效成分溶出的影響 [J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2021, 41(3): 350-354.
[6] 張清清, 馮媛, 楊貴雅, 等. 基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的當(dāng)歸提取物化學(xué)成分研究 [J]. 廣東化工, 2021, 48(5): 175-178.
[7] 翁倩倩, 趙佳琛, 金艷, 等. 經(jīng)典名方中當(dāng)歸的本草考證 [J]. 中國現(xiàn)代中藥, 2021, 23(2): 218-227.
[8] 李勇. 當(dāng)歸及其常見偽品的性狀鑒別[J]. 康頤, 2021(20): 246-247.
[9] 楊燕, 于春強(qiáng), 郭子?jì)? 等. 2基于HPLC指紋圖譜及多指標(biāo)成分定量分析的不同產(chǎn)地當(dāng)歸質(zhì)量特征研究 [J]. 中草藥, 2021, 52(15): 4666-4674.
[10] 楚剛輝, 木合塔爾·吐爾洪, 尹學(xué)博, 等. 基于牛舌草指紋圖譜的多指標(biāo)成分相對(duì)定量與鑒別方法 [J]. 色譜, 2016, 34(9): 901-905.
[11] 中華人民共和國商務(wù)部. 2017年度中藥材流通市場(chǎng)分析報(bào)告[N]. 中國中醫(yī)藥報(bào), 2018-06-28(5).
[12] 郭蘭萍, 張澤坤, 張小波, 等. 中藥資源評(píng)估的背景及總體設(shè)計(jì) [J]. 中國中藥雜志, 2018, 43(14): 2845-2849.
[13] 嚴(yán)永旺, 肖蘭, 周旭, 等. 綠原酸的藥理作用及藥用研發(fā)對(duì)策 [J]. 中國藥房, 2017, 28(19): 2729-2732.
[14] 黃偉暉, 宋純清. 當(dāng)歸的化學(xué)和藥理學(xué)研究進(jìn)展 [J]. 中國中藥雜志, 2001, 26(3): 147-151.
[15] 劉露絲, 彭成, 熊亮. 當(dāng)歸苯酞類化合物的研究進(jìn)展 [J]. 世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2015, 17(5): 958-962.
[16] 王敏, Hideki Hayashi, 劉建勛, 等. 藁本內(nèi)酯對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞/祖細(xì)胞的增殖作用及機(jī)制研究[J]. 中草藥, 2021, 52(20): 6261-6267.
[17] 姚淞允, 張開霞, 馬強(qiáng), 等. 藁本內(nèi)酯的臨床前研究進(jìn)展 [J]. 藥學(xué)服務(wù)與研究, 2019, 19(2): 106-110.
[18] 孫敏, 馬清林, 劉峰林, 等. 當(dāng)歸揮發(fā)油研究新進(jìn)展 [J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘, 2019, 19(16): 56-58.
[19] 張智, 龍華, 曾羅, 等. 不同產(chǎn)地杜仲雄花指紋圖譜的建立及其化學(xué)模式識(shí)別研究 [J]. 中草藥, 2022, 53(22): 7207-7213.
Research on quality analysis method ofbased on “quality-quantity” double standard
LI Xiao-chen1, LI Tian-jiao1, 2, 3, BAO Yong-rui1, 2, 3, WANG Shuai1, 2, 3, MENG Xian-sheng1, 2, 3
1. College of Pharmacy, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China 2. Liaoning Multi-dimensional Analysis of Traditional Chinese Medicine Technical Innovation Center, Dalian 116600, China 3. Liaoning Modern Traditional Chinese Medicine Research and Engineering Laboratory, Dalian 116600, China
To establish a “quality-quantity” double standard control method for,which is qualitative based on the reference traditional Chinese medicinal materials (TCMM) as standard substances and quantitative without relying on multiple reference substances.HPLC technology was used to establish the characteristic chromatogram of the TCMM of, which was compared with the chromatogram of the tested TCMM to identify the authenticity of the medicinal materials, that is, “quality”. The internal standard substance was used to relatively quantify the chemical composition of characteristic peaks to distinguish the quality of medicinal materials, that is, “quantity”.The established “quality-quantity” analysis method ofmet the requirements of methodology investigation, and the similarity between the tested TCMM and the reference TCMM was greater than 0.98. The lower limit of relative content of chemical components of characteristic peaks ofwas defined.This method can judge the authenticity of medicinal materials clearly and quickly without many reference substances, make up for the shortage of quality control ofat present, improve the quality control system of TCMM, reduce the testing cost of TCMM (decoction pieces), reduce the economic burden of traditional Chinese medicine enterprises, and promote the sustainable development of traditional Chinese medicine.
(Oliv.) Diels; reference traditional Chinese medicinal materials; quality control; characteristic chromatogram; chlorogenic acid; ferulic acid; senkyunolide I; ligustilide
R286
A
0253 - 2670(2023)22 - 7313 - 06
10.7501/j.issn.0253-2670.2023.22.006
2023-05-06
遼寧省教育廳創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(LT2017015)
李曉晨,女,碩士研究生,主要從事藥物分析研究。Tel: 13644936393 E-mail: 215153259@qq.com
通信作者:孟憲生,男,博士生導(dǎo)師,主要從事藥效物質(zhì)組學(xué)和作用機(jī)制整合研究。E-mail: mxsvvv@126.com
[責(zé)任編輯 時(shí)圣明]