外周血Hcy、CD28、CD152水平對兒童中樞神經系統(tǒng)血管炎的診斷及預后評估中的價值*

門欣怡,王 蕾,季 輝,王秀霞,田曉瑜,張祥建△

河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院:1.兒科;2.神經內科,河北石家莊 050000

中樞神經系統(tǒng)血管炎(CNSV)是一種中樞神經系統(tǒng)炎性疾病,累及小血管、軟腦膜,主要表現(xiàn)為頭痛、失語、視力障礙、認知功能障礙等神經功能缺損癥狀,嚴重威脅患兒的健康發(fā)育[1-3]。CNSV發(fā)病原因尚不明確,臨床認為可能與病毒感染或自身免疫有關[4]。同型半胱氨酸(Hcy)與多種免疫相關性疾病、炎癥反應、神經退行性病變有關,可產生氧自由基,誘導脂質過氧化、活性氧簇級聯(lián),損傷大腦血管內皮功能[5-6]。Hcy是腦血管疾病病情及預后評估的常用指標,對腦神經、腦血管損傷特異性較高[7]。有研究表明,T淋巴細胞的活化、增殖在機體免疫防御機制中具有重要作用,CD28與CD152表達于T淋巴細胞表面,是機體免疫防御啟動階段所必需的協(xié)同刺激信號分子[8]。而臨床尚缺乏CD28、CD152與CNSV關系的相關研究。本研究分析外周血Hcy、CD28、CD152水平對兒童CNSV的診斷及預后評估中的應用價值,旨在為該疾病早期診斷及預后預測提供準確可靠的臨床指標?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2022年1月本院60例CNSV患兒作為觀察組,其中男35例,女25例,年齡2～13歲,平均(6.71±2.19)歲,體質量13～31 kg,平均(22.03±4.38)kg。另選取同期體檢健康者60例作為對照組,觀察組男37例,女23例,年齡2～12歲,平均(6.48±2.23)歲,體質量13～32 kg,平均(21.85±4.17)kg。兩組性別、年齡、體質量比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。觀察組病程3～19個月,平均(10.97±3.82)個月;原發(fā)性CNSV 4例,繼發(fā)性CNSV 56例;首發(fā)癥狀:頭痛38例,肢體無力16例,言語不清6例;疾病分期:活動期18例,非活動期42例。納入標準:(1)經病理診斷確診為CNSV;(2)近期無免疫抑制劑用藥史;(3)依從性較好,可配合完成本研究。排除標準:(1)伴有先天性心臟病;(2)存在重要臟器病變;(3)存在血液系統(tǒng)疾病;(4)伴有急性感染;(5)存在過敏反應。本研究獲得本院倫理委員會研究通過,獲得患兒家屬簽字同意。

1.2方法

1.2.1治療方案 給予潑尼松(河北常山生化藥業(yè)股份有限公司,批號:H13022946)口服1 mg/(kg·d),急性發(fā)病者可給予甲潑尼龍(南光化學制藥股份有限公司,批號:HC20150042),1 000 mg/d,3～5 d。若用藥有反應,潑尼松緩慢減量;若用藥無反應或反應差,與家屬商議后給予環(huán)磷酰胺(廣州白云山光華制藥股份有限公司,批號:H44020383)或嗎替麥考酚酯(昆明貝克諾頓制藥有限公司,批號:H20130024)治療。治療6個月,治療結束后統(tǒng)計6個月隨訪期間的復發(fā)情況,對再次出現(xiàn)頭痛、視力障礙、認知障礙等神經功能缺損癥狀、體征患兒進行臨床及影像學診斷確診。

1.2.2外周血Hcy、CD28、CD152檢測 入組后第2天采集患兒3 mL空腹靜脈血,采用流式細胞儀[廠家:艾森生物(杭州)有限公司,型號:NovoCyte D1040]檢測外周血CD28、CD152水平,采用全自動生化分析儀(德國西門子公司,型號:ADVI-A2400)檢測外周血Hcy水平。

1.3觀察指標 (1)比較兩組外周血Hcy、CD28、CD152水平。(2)分析外周血Hcy、CD28、CD152對兒童CNSV的診斷價值。(3)比較復發(fā)與未復發(fā)患兒臨床資料及治療期間外周血Hcy、CD28、CD152水平。(4)分析兒童CNSV復發(fā)的影響因素。(5)分析外周血Hcy與CD28、CD152交互效應對兒童CNSV復發(fā)的影響。

2 結 果

2.1兩組外周血Hcy、CD28、CD152水平比較 觀察組外周血Hcy、CD28、CD152水平均高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組外周血Hcy、CD28、CD152水平比較

2.2外周血Hcy、CD28、CD152對兒童CNSV的診斷價值 以觀察組為陽性,對照組為陰性,繪制ROC曲線分析可知,外周血Hcy、CD28、CD152診斷兒童CNSV的曲線下面積(AUC)分別為0.782、0.786、0.708,選擇外周血Hcy、CD28、CD152為模型參數(shù),建立三項指標聯(lián)合診斷的Logistic模型,使數(shù)據(jù)集得到相應標簽的概率最大,結果顯示,外周血Hcy、CD28、CD152聯(lián)合診斷的AUC為0.912,進一步對各診斷方案診斷價值比較顯示,外周血Hcy、CD28、CD152聯(lián)合診斷兒童CNSV的AUC明顯較單獨指標高(P<0.05)。見圖1,表2、3。

圖1 外周血Hcy、CD28、CD152診斷兒童CNSV的ROC曲線

表2 外周血Hcy、CD28、CD152對兒童CNSV的診斷價值

表3 外周血Hcy、CD28、CD152聯(lián)合診斷與單一診斷價值比較

2.3復發(fā)與未復發(fā)患兒臨床資料及治療期間外周血Hcy、CD28、CD152水平比較 復發(fā)與未復發(fā)患兒性別、年齡、病程、體質量、首發(fā)癥狀、疾病類型及治療前、治療1個月、3個月外周血Hcy、CD28、CD152水平比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);復發(fā)患兒疾病分期為活動期比例及治療6個月后外周血Hcy、CD28、CD152水平均高于未復發(fā)患兒,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 復發(fā)與未復發(fā)患兒臨床資料及治療期間外周血Hcy、CD28、CD152水平比較[n(%)或

2.4兒童CNSV復發(fā)影響因素的Logistic回歸分析 以兒童CNSV復發(fā)與否為因變量(未復發(fā)=0,復發(fā)=1),單因素分析篩選出的4個P<0.05的變量作為自變量(賦值見表5),進行多因素Logistic回歸分析,結果顯示,疾病分期、治療6個月外周血Hcy、CD28、CD152均為兒童CNSV復發(fā)的獨立危險因素(P<0.05)。見表6。

表5 Logistic回歸分析變量賦值量表

表6 兒童CNSV復發(fā)影響因素的Logistic回歸分析

2.5外周血Hcy與CD28、CD152交互效應對兒童CNSV復發(fā)的影響

2.5.1外周血Hcy與CD28、CD152對兒童CNSV復發(fā)的相乘交互效應 以兒童CNSV復發(fā)為因變量,將治療6個月外周血Hcy、CD28、CD152及Hcy與CD28乘積、Hcy與CD152乘積作為自變量納入Logistic回歸方程,構建模型1、模型2。校正混雜因素后發(fā)現(xiàn),治療6個月外周血Hcy與CD28、CD152均對兒童CNSV復發(fā)有影響(P<0.05);治療6個月Hcy與CD28、Hcy與CD152間并無相乘交互效應,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表7。

表7 相乘交互效應

2.5.2外周血Hcy與CD28、CD152對兒童CNSV復發(fā)的相加交互效應 以治療6個月外周血Hcy≥平均值、CD28≥平均值、CD152≥平均值為暴露,反之為非暴露。治療6個月Hcy與CD28同時暴露時復發(fā)風險是非暴露的6.535倍,治療6個月Hcy與CD152同時暴露時復發(fā)風險是非暴露的6.171倍。見表8。

表8 相加交互效應

3 討 論

兒童CNSV常常為急性或隱匿起病,多累及動脈及小動脈,主要以中樞神經系統(tǒng)血管非肉芽腫性、淋巴細胞性炎癥為特征,且易復發(fā)[9]。CNSV通常可表現(xiàn)為頭痛、腦神經功能障礙、癲癇發(fā)作、認知功能降低等神經功能缺陷;相比于成年人,兒童CNSV更多表現(xiàn)為發(fā)熱、癲癇、頭痛及嗜睡[10]。以發(fā)病機制分類,兒童CNSV主要包括免疫介導性、感染性,T淋巴細胞在機體免疫防御、炎癥反應機制中扮演重要角色,因此對CNSV患兒免疫細胞活化、增殖的研究意義重大[11-12]。

本研究顯示CNSV患兒外周血CD28、CD152水平異常升高,且治療6個月復發(fā)患兒T淋巴細胞協(xié)同刺激分子CD152、CD28水平均高于未復發(fā)患兒。經分析,CNSV復發(fā)過程中機體在抗原作用下為維持內環(huán)境穩(wěn)定,激活了細胞免疫,將T淋巴細胞活化、增殖為效應細胞,而效應細胞需雙信號作用協(xié)同刺激,因而CD152、CD28作為T淋巴細胞協(xié)同刺激信號分子出現(xiàn)順應性升高[13]。提示CD152、CD28參與患兒的CNSV復發(fā),監(jiān)測二者水平能在一定程度上評估CNSV患兒機體免疫功能及復發(fā)風險。ZHANG 等[14]學者研究中血管及大血管血管炎中致病性T細胞代謝,結果表明CD28刺激提供了中、大血管血管炎中致病效應中所需的代謝信號,阻斷CD28信號傳導對疾病有一定靶向治療作用。CD152能誘導Th1反應,對早期T細胞活化及CD28介導的Th2反應發(fā)揮抑制作用,進而穩(wěn)定免疫耐受性,維持機體內環(huán)境穩(wěn)態(tài)[15-17]。本研究結果表明疾病處于活動期、治療6個月外周血CD28、CD152異常表達是CNSV患兒復發(fā)的獨立危險因素;其主要原因可能在于CD152是表達于T殺傷細胞表面的跨膜糖蛋白,可結合抗原提呈細胞表面的協(xié)同刺激分子,傳遞T細胞活化信號,可發(fā)揮負調節(jié)作用。CD28作為T細胞輔助分子,可控制免疫性疾病的T細胞發(fā)育[18]。CD152、CD28對協(xié)同刺激信號具有正負調節(jié)功能,可促進細胞因子產生及T淋巴細胞生長分化[19]。因而,CNSV患兒CD152、CD28等協(xié)同刺激分子表達異常,可能是介導免疫抑制的關鍵,影響兒童CNSV復發(fā)。

Hcy是蛋氨酸代謝產物,是一種新型炎癥參數(shù)[20]。近年多項報道表明,Hcy與多種神經系統(tǒng)疾病有關。賈燕華等[21]研究中指出Hcy與血管源性輕度認知功能障礙有關,可發(fā)揮早期預測作用;王玉明[22]報道顯示,高Hcy水平可能促發(fā)中樞神經系統(tǒng)特發(fā)性炎性脫髓鞘疾病。本研究結果表明,觀察組外周血Hcy水平均高于對照組,治療6個月復發(fā)患兒外周血Hcy水平高于未復發(fā)患兒,是診斷CNSV發(fā)病及復發(fā)的重要影響因素。其機制可能為Hcy大量表達發(fā)生氧化,產生自由基及Hcy硫化物,對神經組織產生細胞毒性作用;同時可激活代謝型谷氨酸受體,傳遞谷氨酸能遞質,損傷血管內皮細胞,誘導神經細胞氧化應激與凋亡[23-24]。本研究嘗試分析兒童CNSV外周血Hcy、CD28、CD152水平狀況,聯(lián)合檢測結果顯示,三項指標聯(lián)合診斷兒童CNSV的AUC為0.912,具有較高診斷價值,且均為治療后復發(fā)的獨立危險因素。交互效應可分析與疾病發(fā)生機制有關的因素間客觀存在的交互效應關系,由于臨床關于CD28、CD152與CNSV的關系尚未明確,本研究進一步分析外周血Hcy、CD28、CD152交互效應對兒童CNSV復發(fā)的影響,發(fā)現(xiàn)Hcy與CD28、Hcy與CD152間無相乘交互效應,而Hcy與CD28、Hcy與CD152存在相加交互效應,即Hcy與CD28同時升高,或Hcy與CD152同時升高患兒的復發(fā)風險高于二者單獨作用之和,同時暴露時CNSV復發(fā)風險分別是非暴露的6.535倍、6.171倍,可見外周血Hcy、CD28、CD152有望成為兒童CNSV早期診斷及復發(fā)預測的可靠臨床指標。

綜上所述,外周血Hcy、CD28、CD152聯(lián)合診斷兒童CNSV的價值較高,且均為兒童CNSV復發(fā)的獨立危險因素,治療6個月Hcy與CD28、Hcy與CD152之間無相乘交互效應,但存在相加交互效應,同時暴露可增加兒童CNSV復發(fā)風險。