血清HIF-1α和CD44水平與妊娠期糖尿病產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系分析

李文亞,謝 程△,彭 莉

長(zhǎng)江大學(xué)附屬仙桃市第一人民醫(yī)院:1.婦產(chǎn)科 2.腎內(nèi)科,湖北仙桃 433000

妊娠期糖尿病(GDM)是一種常見的妊娠期并發(fā)癥。GDM在世界范圍內(nèi)的發(fā)生率為1%～20%,在我國(guó)的發(fā)生率為1%～5%,且呈上升趨勢(shì),GDM會(huì)對(duì)妊娠期女性和新生兒的健康造成不利的影響[1-2]。剖宮產(chǎn)是一種常用的可減輕產(chǎn)婦生產(chǎn)痛苦的技術(shù)手段,但剖宮產(chǎn)術(shù)是一種創(chuàng)傷性手術(shù),可帶來(lái)較多的術(shù)后并發(fā)癥。其中,剖宮產(chǎn)術(shù)后感染就是一種常見的術(shù)后并發(fā)癥,輕者可造成產(chǎn)婦發(fā)熱、切口感染、子宮內(nèi)膜炎及尿路系統(tǒng)感染,其中,切口感染最為常見[3];重者可引起產(chǎn)婦敗血癥、晚期產(chǎn)后出血、休克等,甚至危及生命[4]。GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染率高于未發(fā)生GDM的產(chǎn)婦,因此,尋找診斷GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染的有效指標(biāo)意義重大。缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)是機(jī)體對(duì)缺氧產(chǎn)生耐受和適應(yīng)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,可在哺乳動(dòng)物及人體各種組織細(xì)胞中廣泛表達(dá)。有研究表明HIF-1α在GDM小鼠中表達(dá)水平升高[5]。汪靜等[6]研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α表達(dá)水平在GDM患者中呈高表達(dá)。CD44是一種細(xì)胞表面的黏附分子,在細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)間的連接中起作用。在許多惡性腫瘤中呈高表達(dá)水平,可作為惡性腫瘤侵襲行為的指標(biāo)[7]。最近有研究表明,CD44在代謝中起作用,在調(diào)節(jié)糖脂穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮作用[8]。而關(guān)于HIF-1α、CD44在GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染中的研究還未見報(bào)道,因此,本研究通過(guò)檢測(cè)血清HIF-1α和CD44在GDM產(chǎn)婦中的表達(dá)水平,擬分析二者的表達(dá)水平與GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年2月至2022年2月在本院診治的GDM產(chǎn)婦90例,年齡23～36歲,平均(32.45±4.68)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)所有患者均符合GDM的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9];(2)在本院行剖宮產(chǎn)手術(shù);(3)一般臨床資料完整、有效;(4)產(chǎn)婦及家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)妊娠前已被確診為糖尿病者;(2)合并免疫系統(tǒng)疾病者;(3)合并心腦血管疾病者;(4)有精神病史者。根據(jù)感染標(biāo)準(zhǔn)[10]將行剖宮產(chǎn)術(shù)后的90例GDM產(chǎn)婦分為感染組(18例)和未感染組(72例),另外選取同期在本院因胎位不正行剖宮產(chǎn)的未發(fā)生GDM的產(chǎn)婦90例作為對(duì)照組,年齡23～36歲,平均(33.74±4.61)歲。

1.2儀器與試劑 酶標(biāo)儀(型號(hào):HSA-M1812)購(gòu)買于深圳海思安生物技術(shù)有限公司,全自動(dòng)生化分析儀(貨號(hào):Catalyst One)購(gòu)買于思科諾思生物科技(北京)有限公司。人HIF-1α酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒(貨號(hào):hz-H5545c)購(gòu)買自上海滬震實(shí)業(yè)有限公司,人CD44 ELISA試劑盒(貨號(hào):850570192)購(gòu)買自北京博蕾德生物科技有限公司。

1.3方法

1.3.1資料收集 收集GDM患者及對(duì)照組的年齡、體質(zhì)量指數(shù)、孕周、手術(shù)時(shí)間、切口長(zhǎng)度等一般資料。

1.3.2樣本采集 采集所有受試者行剖宮產(chǎn)前24 h的空腹肘靜脈血5 mL,4 000 r/min離心10 min,留取上清液,保存于-80 ℃冰箱中,待測(cè)。

1.3.3生化指標(biāo)檢測(cè) 血清空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血清清蛋白(ALB),血紅蛋白(Hb)均在受試者剖宮產(chǎn)前24 h采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。

1.3.4ELISA法測(cè)定血清HIF-1α和CD44表達(dá)水平 嚴(yán)格按照人HIF-1α ELISA試劑盒、人CD44 ELISA試劑盒說(shuō)明書,配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,采用酶標(biāo)儀測(cè)定。取適量血清樣本,解凍后,在相應(yīng)微孔板中分別加入100 μL血清樣本和標(biāo)準(zhǔn)品,按照試劑盒說(shuō)明書依次加入相應(yīng)試劑進(jìn)行孵育,最后使用酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm處的吸光度,繪制HIF-1α、CD44標(biāo)準(zhǔn)品曲線,計(jì)算血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平。

2 結(jié) 果

2.1GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染情況 90例GDM產(chǎn)婦剖宮術(shù)后感染18例(20.00%),其中切口感染10例(11.11%),肺部感染3例(3.33%),尿路感染5例(5.56%)。

2.23組產(chǎn)婦一般臨床資料比較 3組產(chǎn)婦在年齡、體質(zhì)量指數(shù)、孕周、切口長(zhǎng)度、手術(shù)時(shí)間及Hb水平方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);感染組和未感染組產(chǎn)婦的FPG、HbA1c水平顯著高于對(duì)照組,且感染組高于未感染組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);感染組產(chǎn)婦的ALB水平顯著低于對(duì)照組和未感染組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組產(chǎn)婦一般臨床資料比較

2.33組產(chǎn)婦的血清HIF-1α和CD44表達(dá)水平比較 與對(duì)照組比較,未感染組和感染組產(chǎn)婦血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平明顯升高,感染組產(chǎn)婦血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平顯著高于未感染組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組產(chǎn)婦血清HIF-1α和CD44水平比較

2.4多因素Logistic回歸分析GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的影響因素 以GDM產(chǎn)婦剖宮術(shù)后是否發(fā)生感染為因變量(是=1,否=0),以HIF-1α、CD44、FPG、HbA1c、ALB為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析,結(jié)果顯示,HIF-1α、CD44、HbA1c是GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(OR=1.501,1.487,1.468,P<0.05),ALB為獨(dú)立保護(hù)因素(OR=0.318,P<0.05),見表4。

表4 多因素Logistic回歸分析GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的影響因素

2.5血清HIF-1α和CD44對(duì)GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值 血清HIF-1α和CD44預(yù)測(cè)GDM產(chǎn)婦剖宮術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的AUC分別為0.868、0.859,最佳截?cái)嘀捣謩e是103.34 pg/mL、100.317 ng/mL,靈敏度分別為88.9%、77.8%,特異度分別為69.4%、70.8%。二者聯(lián)合預(yù)測(cè)后的AUC為0.966,優(yōu)于HIF-1α和CD44單獨(dú)預(yù)測(cè)(Z二者聯(lián)合預(yù)測(cè)-HIF-1α=2.189,P=0.029,Z二者聯(lián)合預(yù)測(cè)-CD44=2.087,P=0.037)。見表5和圖1。

圖1 血清HIF-1α和CD44對(duì)GDM產(chǎn)婦剖宮術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的ROC曲線

表5 血清HIF-1α和CD44對(duì)GDM產(chǎn)婦剖宮術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討 論

GDM是妊娠期常見的代謝并發(fā)癥,患有GDM的產(chǎn)婦增加圍產(chǎn)期發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn),并可引發(fā)不良妊娠結(jié)局[11]。一般患有產(chǎn)科指征的GDM的產(chǎn)婦會(huì)通過(guò)剖宮產(chǎn)手術(shù)來(lái)終止妊娠,以保護(hù)母體及胎兒的安全[12-13]。剖宮產(chǎn)屬于創(chuàng)傷性手術(shù),切口屬于Ⅱ類切口,會(huì)帶來(lái)較高的術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn),而患有GDM的產(chǎn)婦進(jìn)行剖宮產(chǎn)手術(shù)將會(huì)進(jìn)一步增加術(shù)后感染的風(fēng)險(xiǎn)。本研究中GDM產(chǎn)婦術(shù)后感染率為20.00%,說(shuō)明GDM產(chǎn)婦行剖宮產(chǎn)會(huì)帶來(lái)較高的術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)。因此,分析影響GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染的因素,對(duì)于預(yù)測(cè)臨床上GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)具有十分重要的意義。

HIF-1α廣泛表達(dá)于缺氧狀態(tài)下的組織細(xì)胞中,并且已有研究顯示,其可由妊娠后滋養(yǎng)層細(xì)胞及胎盤合成分泌并參與妊娠期間胎盤組織病理變化過(guò)程[14]。另外,HIF-1α可參與調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲和分化,在胚胎及胎盤血管的發(fā)生、發(fā)展中也發(fā)揮重要作用[15]。有研究顯示,高血糖會(huì)誘導(dǎo)GDM的胎盤處于長(zhǎng)期低氧的環(huán)境中,缺氧導(dǎo)致HIF-1α表達(dá)水平上調(diào)進(jìn)而誘導(dǎo)眾多炎癥細(xì)胞因子分泌炎性介質(zhì),引起缺氧組織炎癥反應(yīng),打破體內(nèi)免疫系統(tǒng)平衡狀態(tài),最終引發(fā)術(shù)后感染[16-17]。徐廣萍等[18]研究發(fā)現(xiàn),由于GDM孕婦體內(nèi)缺氧較為嚴(yán)重,導(dǎo)致GDM孕婦中的HIF-1α表達(dá)水平升高。CD44在多種細(xì)胞和組織中廣泛表達(dá),參與許多生理和病理過(guò)程,如器官的形成、造血和淋巴細(xì)胞活化及細(xì)胞死亡等[19]。CD44可以通過(guò)調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞活性、增強(qiáng)誘導(dǎo)對(duì)細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)作用來(lái)參與GDM的發(fā)生。此外,高血糖和缺氧狀態(tài)下會(huì)誘導(dǎo)CD44的表達(dá)水平,而CD44介導(dǎo)巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng),巨噬細(xì)胞在高糖環(huán)境下更易產(chǎn)生過(guò)量ROS,誘導(dǎo)創(chuàng)面異常炎癥反應(yīng),影響患者創(chuàng)面愈合,從而增加傷口感染風(fēng)險(xiǎn)[20]。也有研究顯示HIF-1α是缺氧條件下的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,其轉(zhuǎn)錄激活后會(huì)進(jìn)一步增加CD44的表達(dá),參與在缺氧條件下的細(xì)胞進(jìn)程[21]。本研究通過(guò)檢測(cè)HIF-1α、CD44水平,分析二者血清表達(dá)水平與GDM產(chǎn)婦行剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。研究結(jié)果顯示,術(shù)后感染組血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平顯著高于未感染組及對(duì)照組,未感染組血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平高于對(duì)照組,提示HIF-1α、CD44表達(dá)水平參與GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染的發(fā)生過(guò)程,推測(cè)其作用機(jī)制可能是由于GDM產(chǎn)婦體內(nèi)缺氧導(dǎo)致HIF-1α表達(dá)水平升高進(jìn)一步誘導(dǎo)CD44表達(dá)水平異常升高,引發(fā)組織異常炎癥反應(yīng),破壞體內(nèi)免疫系統(tǒng)平衡,最終引發(fā)術(shù)后感染。GDM產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的影響因素眾多,在本研究結(jié)果中,HIF-1α、CD44、HbA1c的表達(dá)水平是其獨(dú)立危險(xiǎn)因素,ALB是獨(dú)立保護(hù)因素。HbA1c是一種反映血糖的指標(biāo),患者若HbA1c水平過(guò)高,使得機(jī)體糖、脂肪等代謝紊亂,從而導(dǎo)致患者的抵抗力下降、傷口愈合慢。ALB水平與肝臟功能代謝、機(jī)體營(yíng)養(yǎng)、抵抗力水平密切相關(guān),GDM孕婦的ALB水平一般會(huì)低于健康孕婦[22]。所以HbA1c水平的增加與ALB水平的降低都會(huì)增加GDM產(chǎn)婦剖宮術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn),進(jìn)一步說(shuō)明了臨床上及時(shí)監(jiān)測(cè)GDM產(chǎn)婦的HbA1c、ALB水平的重要性,有利于及時(shí)給予患者應(yīng)對(duì)措施,以降低感染風(fēng)險(xiǎn)。血清HIF-1α和CD44預(yù)測(cè)GDM產(chǎn)婦剖宮術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)的AUC分別為0.868、0.859,提示二者對(duì)于預(yù)測(cè)GDM患者剖宮術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)具有較高的價(jià)值,二者聯(lián)合預(yù)測(cè)的AUC為0.966,其效果優(yōu)于二者單獨(dú)預(yù)測(cè)。

綜上所述,血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平在GDM產(chǎn)婦中呈高表達(dá),其表達(dá)水平的升高是GDM產(chǎn)婦行剖宮產(chǎn)后感染風(fēng)險(xiǎn)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,術(shù)前聯(lián)合檢測(cè)血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平對(duì)患者剖宮產(chǎn)術(shù)后感染有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值。而血清HIF-1α、CD44表達(dá)水平與GDM產(chǎn)婦術(shù)后感染發(fā)生過(guò)程的具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究。