陸地棉色素腺體與不同棉酚旋光體含量之間的相關(guān)性研究

劉慧，季靈艷，趙天倫，陳進(jìn)紅，祝水金

陸地棉色素腺體與不同棉酚旋光體含量之間的相關(guān)性研究

劉慧#，季靈艷#，趙天倫，陳進(jìn)紅，祝水金*

（浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，杭州310058）

【目的】研究不同基因型棉花不同器官的色素腺體與棉酚旋光體含量之間的相關(guān)性?！痉椒ā恳?個(gè)陸地棉材料中棉所12、中棉所12（無(wú)）、珂字棉312、珂字棉312（無(wú)）、IF11和冀棉14為對(duì)象，精確測(cè)定主要器官的色素腺體密度和大小，并采用柱前衍生拆旋方法進(jìn)行高效液相色譜分析，測(cè)定其相應(yīng)的棉酚旋光體含量，然后對(duì)色素腺體和棉酚旋光體含量進(jìn)行相關(guān)性分析?！窘Y(jié)果】低酚棉全株無(wú)色素腺體，但在各器官中仍能檢測(cè)到低于0.02%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的少量游離棉酚存在。有酚棉各器官均具有典型的色素腺體，其中棉仁的色素腺體最密，苞葉最??；色素腺體大小（直徑）以鈴殼最大，花瓣和棉仁最小。不同器官中，總棉酚含量以棉仁最高，苞葉最小；棉仁和花瓣的右旋棉酚含量大于左旋棉酚，而萼片、鈴殼、上部葉、中部葉和下部葉的左旋棉酚含量大于右旋棉酚。有酚棉的色素腺體密度與大小之間呈極顯著負(fù)相關(guān)；而總棉酚含量與不同棉酚旋光體含量之間，以及左右旋棉酚含量之間呈極顯著正相關(guān)。色素腺體密度與總棉酚含量以及不同棉酚旋光體含量之間呈極顯著的正相關(guān)，而色素腺體大小與右旋棉酚含量之間呈顯著的負(fù)相關(guān)?！窘Y(jié)論】棉仁與花瓣的總棉酚含量存在高度的相關(guān)性，因此，可以通過(guò)花瓣的棉酚含量來(lái)判斷棉仁的棉酚含量。

陸地棉；色素腺體密度；色素腺體大??；左旋棉酚；右旋棉酚；相關(guān)性分析

Abstract:[Objective]The aim of this study was to examine the correlation between pigment glands and(-)/(+)-gossypol contents in different organs of different upland cotton genotypes.[Method]Using upland cotton materials CCRI 12,CCRI 12(glandless),Coker 312,Coker 312(glandless),IF11 and Jimian 14,we accurately measured the density and sizeof thepigment glands,tested(-)/(+)-gossypol contents by pre-column derivatization-high performance liquid chromatography(HPLC),and then analyzed the correlation between pigment glands and(-)/(+)-gossypol contents.[Result]The whole plants of low gossypol cotton lines were without pigment glands,but free gossypol could still be detected in different organs at mass fractions less than 0.02%.The organs of glanded cotton all had typical pigment glands,the gland density was highest in the seed and lowest in the bract.The gland size(diameter)was largest in the boll shell and smallest in the petal and seed.Across different organs,the total gossypol content was highest in the seed and lowest in the bract.The contents of(+)-gossypol in the seed and petal were higher than(-)-gossypol.Conversely,the(-)-gossypol contents of the calyx,boll shell,upper leaf,middle leaf,and lower leaf were higher than(+)-gossypol.There was a significant negative correlation between the density and size of glands in glanded cotton.There were significant positive correlations between total gossypol content and(-)/(+)-gossypol contents,and between(+)-gossypol content and(-)-gossypol content.Gland density was positively correlated with total gossypol content and(-)/(+)-gossypol contents.Gland size was negatively correlated with(+)-gossypol content,and showed no significant correlation with(-)-gossypol content or total gossypol content.[Conclusion]Overall,the strong positive correlation between total gossypol content in the seed andpetal suggests that we can usethe petal gossypol content to infer the seed gossypol content.

Keywords:upland cotton;pigment gland density;pigment gland size;(-)-gossypol;(+)-gossypol;correlation analysis

棉花色素腺體通常呈褐色或黑褐色點(diǎn)狀，遍布棉株除花粉、種皮以外的絕大多數(shù)器官[1]。棉酚是棉花及其近緣植物所特有的多酚物質(zhì)，主要存在于色素腺體中[2]。棉酚具有旋光性，有左旋棉酚和右旋棉酚2種位阻光學(xué)異構(gòu)體，天然棉酚一般以外消旋體棉酚的混合形式存在[3]。棉酚及其衍生物對(duì)棉花的多種病原菌和害蟲(chóng)具有拮抗作用[4-6]。研究發(fā)現(xiàn)，左旋棉酚和右旋棉酚的藥理活性相差較大，左旋棉酚表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制精子產(chǎn)生和抗腫瘤作用，同時(shí)具有較強(qiáng)的毒副作用，而右旋棉酚幾乎無(wú)活性[7]。

棉酚及其衍生物約占色素腺體內(nèi)含物的30%～50%，棉酚含量與色素腺體數(shù)呈正相關(guān)[8-9]。棉酚由棉花根部合成，后向植株地上部分輸送并貯藏于棉花的色素腺體內(nèi)[10]。棉花有低酚棉和有酚棉2種不同類型，其植株各器官的棉酚含量，特別是棉酚旋光體的含量與其色素腺體之間的關(guān)系還鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究以6個(gè)陸地棉基因型為材料，精確測(cè)定主要器官的色素腺體密度和大小，并采用柱前衍生拆旋方法進(jìn)行高效液相色譜（High performance liquid chromatography，HPLC）分析，測(cè)定其相應(yīng)的棉酚旋光體含量，研究不同基因型棉花不同器官的色素腺體與棉酚旋光體含量之間的相關(guān)性，豐富棉花生物學(xué)數(shù)據(jù)，并為棉花遺傳育種提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為6份陸地棉品種 （系）：中棉所12、中棉所 12（無(wú)）、珂字棉 312、珂字棉 312（無(wú)）、IF11和冀棉14。其中：中棉所12（無(wú)）為顯性無(wú)色素腺體種質(zhì)系，是中棉所12的無(wú)色素腺體近等基因系；珂字棉312（無(wú)）為隱性無(wú)色素腺體種質(zhì)系，是珂字棉312的無(wú)色素腺體近等基因系；上述材料均由本實(shí)驗(yàn)室自交保存。IF11是轉(zhuǎn)iaaM基因的轉(zhuǎn)基因棉種質(zhì)系，表現(xiàn)為生長(zhǎng)素（Indole-3-acetic acid，IAA）適度上調(diào)，冀棉14為該種質(zhì)系的受體親本，兩者均由西南大學(xué)提供。所有材料均由本實(shí)驗(yàn)室自交多代保純。

試驗(yàn)材料種植在浙江省杭州市浙江大學(xué)實(shí)驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)，開(kāi)花期每份材料取長(zhǎng)勢(shì)一致的上部葉、中部葉、下部葉、花朵、開(kāi)花后5 d的棉鈴和成熟后的種子進(jìn)行色素腺體密度和大小的觀測(cè)。樣品經(jīng)色素腺體觀察后在35℃下烘干至質(zhì)量恒定，用于棉酚及其旋光體含量測(cè)定。

1.2 試劑

消旋棉酚 （HPLC級(jí)）標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自Sigma公司，左旋棉酚（HPLC級(jí)）標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自陜西慈緣生物技術(shù)有限公司，D-氨基丙醇購(gòu)自阿拉丁公司，乙腈為購(gòu)自永華化學(xué)科技有限公司的色譜純?cè)噭?，其余試劑均為?gòu)自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司的分析純?cè)噭?/p>

1.3 色素腺體觀察

樣品在體視顯微鏡下取不同視野拍照，用Image Pro Plus6.0軟件統(tǒng)計(jì)上部葉、中部葉、下部葉、棉仁及開(kāi)花當(dāng)天花朵各部位的色素腺體密度和大小，10個(gè)視野的平均值為每種材料的觀察值。其中色素腺體密度在1倍鏡下拍攝（取景框?yàn)?.19 mm ×6.86 mm=0.63 cm2），統(tǒng)計(jì)色素腺體數(shù)，再換算成單位面積的色素腺體數(shù)（如每平方厘米的色素腺體數(shù)為取景框內(nèi)的色素腺體數(shù)除以0.63的商）；色素腺體大小以色素腺體直徑表示，在6倍鏡下拍攝 （取景框?yàn)?.53 mm×1.14 mm），在軟件中直接測(cè)量色素腺體的長(zhǎng)軸直徑（mm），并進(jìn)行單位（μm）換算。

1.4 棉酚旋光體含量測(cè)定

1.4.1 樣品前處理。各材料烘干后磨粉，過(guò)孔徑0.178 mm（80目）篩，低溫避光保存?zhèn)溆?。精確稱取各樣品0.1 g，3次重復(fù)，置于10 mL離心管中，加入2 mL衍生化試劑，用封口膜封口，置于超聲波清洗機(jī)（30℃、240 W）中超聲30 min備用。

1.4.2 左右旋棉酚含量測(cè)定。衍生化試劑：2%（體積分?jǐn)?shù)）D-氨基丙醇、10%（體積分?jǐn)?shù)）冰醋酸、88%（體積分?jǐn)?shù)）乙腈。配制完成后置于－20℃冰箱中避光保存。

配制左旋棉酚和消旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱取0.01 g左旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)品和消旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)品，分別用乙腈溶解，定容至10 mL棕色容量瓶，為1 g·L－1的左旋棉酚和消旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于－20℃冰箱中避光保存。分別取已配好的左旋棉酚和消旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)溶液：0、5、10、20、50、100、200、500、800、1000、2000 μL，置于 10 mL 離心管中，加2 mL衍生化試劑，用封口膜封口，備用。

衍生化處理：將制備好待用的標(biāo)樣和樣品置于水浴鍋中進(jìn)行加熱衍生化（75℃，45 min）。衍生化結(jié)束后，標(biāo)樣用乙腈定容至10 mL，獲得質(zhì)量濃 度 梯 度 分 別 為 0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、80.0、100.0、200.0 mg·L－1的左旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)液和質(zhì)量濃度梯度分別為 0、0.25、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、25.0、40.0、50.0、100.0 mg·L－1的消旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)液。樣品則進(jìn)行低溫高速 （4℃、6000 r·min－1）離心 5 min，經(jīng) 0.45 μm 有機(jī)微孔濾膜抽濾至10 mL棕色容量瓶中，重復(fù)離心洗滌沉淀3次，用乙腈定容。于－20℃冰箱中避光保存。

1.4.3 HPLC分析條件。色譜條件：反向C18色譜柱（長(zhǎng)250 mm，內(nèi)徑4.6 mm，填料顆粒直徑5 μm），流動(dòng)相為體積比 80∶20的乙腈與 10 mmol·L－1KH2PO4（pH 3），流速 1.0 mL·min－1，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)238 nm，進(jìn)樣量10μL，柱溫25℃。

1.5 數(shù)據(jù)處理

利用MSExcel、SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、差異顯著性分析以及相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 色素腺體密度和大小

參試的6份陸地棉材料中，中棉所12（無(wú)）是由1對(duì)顯性基因控制的全株無(wú)色素腺體棉類型，珂字棉312（無(wú)）是由2對(duì)隱性基因控制的全株無(wú)色素腺體棉類型，兩者均為低酚棉類型。其他材料為典型的有色素腺體棉花類型，但不同材料之間、同一材料不同器官之間的色素腺體密度和大小存在差異（表1）。

表1 參試材料主要器官的色素腺體密度和大小Table 1 Density and size of the pigment glands in the main organs of the materials in the experiment cm－2，μm

從表1可以看出，4個(gè)色素腺體棉各器官均具有典型的色素腺體，植株各部位色素腺體密度均呈棉仁＞花瓣＞鈴殼＞萼片＞苞葉，上部葉＞中部葉＞下部葉的規(guī)律；而色素腺體的大小基本呈鈴殼＞萼片＞苞葉＞花瓣≈棉仁，下部葉＞中部葉＞上部葉的規(guī)律。

從不同器官來(lái)看，萼片、鈴殼、苞葉上的色素腺體密度較低，而色素腺體則較大?；ò旰拖虏咳~的色素腺體密度相差不大，上部葉的色素腺體密度明顯高于中部葉和下部葉，而棉仁的色素腺體密度最高。鈴殼的色素腺體最大，棉仁、花瓣和葉片的色素腺體大小相差不大。

不同基因型之間，萼片、鈴殼、苞葉上的色素腺體密度均為珂字棉312最大，IF11最小，中棉所12和冀棉14相近。而棉仁、上部葉和中部葉的色素腺體密度依次為IF11＞珂字棉312＞中棉所12＞冀棉14；下部葉則為珂字棉312＞中棉所12＞冀棉14＞IF11；花瓣為中棉所12＞冀棉14＞珂字棉312＞IF11。

不同基因型之間，花瓣和萼片的色素腺體大小為冀棉14＞珂字棉312＞IF11＞中棉所12；苞葉和上部葉為冀棉14＞IF11＞中棉所12＞珂字棉312；鈴殼為IF11＞珂字棉312＞冀棉14＞中棉所12；中部葉為珂字棉312＞IF11＞冀棉14＞中棉所12；棉仁和下部葉的色素腺體以中棉所12最大，IF11最小。

2.2 棉酚及其旋光體含量

2.2.1 HPLC色譜圖。分別取左旋棉酚、消旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)液和棉籽樣品，根據(jù)上述色譜條件進(jìn)樣分析，得到色譜圖（圖1）。色譜圖上雜質(zhì)峰較少，主峰清晰，左右旋棉酚拆分狀況良好，右旋棉酚衍生物先在9.99 min出峰，左旋棉酚在17.27 min出峰。

2.2.2 左右旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)曲線。將配制好的消旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)溶液在最佳色譜條件下上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)目的峰面積(y)與棉酚質(zhì)量濃度(x)進(jìn)行線性回歸，得到的左旋棉酚和右旋棉酚回歸曲線見(jiàn)圖2。二者的質(zhì)量濃度與峰面積均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

2.2.3 陸地棉主要器官的棉酚及其旋光體含量。6個(gè)不同棉花基因型的棉仁、花瓣、萼片、鈴殼、苞葉、上部葉、中部葉和下部葉樣品的左右旋棉酚含量結(jié)果（表2）表明，陸地棉的基因型不同，總棉酚含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，下同）及其旋光體含量與比例存在顯著差異。

2個(gè)低酚棉種質(zhì)各器官的總棉酚含量表現(xiàn)：棉仁＞花瓣≈萼片＞苞葉＞鈴殼，上部葉＞中部葉＞下部葉。除了鈴殼中檢測(cè)不到右旋棉酚以外，其他所有器官的右旋棉酚含量均大于左旋棉酚，低酚棉各器官中的左旋棉酚含量相對(duì)恒定，約為0.005%。

4個(gè)有酚棉品種 （系）中，總棉酚含量為棉仁＞花瓣＞鈴殼＞萼片＞苞葉，上部葉＞中部葉＞下部葉。棉仁和花瓣中右旋棉酚含量大于左旋棉酚，萼片、鈴殼、上部葉、中部葉和下部葉中的左旋棉酚含量大于右旋棉酚。除了中棉所12以外，苞葉中的左旋棉酚含量均大于右旋棉酚。

參試材料主要器官總棉酚含量間的相關(guān)性分析結(jié)果（表3）表明，棉仁與其他器官總棉酚含量間均為顯著或極顯著正相關(guān)，其中棉仁總棉酚含量與花瓣總棉酚含量間的相關(guān)性最強(qiáng)，相關(guān)系數(shù)達(dá)0.977。在所有器官之間，花瓣與苞葉、鈴殼與苞葉和花瓣與鈴殼之間的總棉酚含量的相關(guān)系數(shù)均較大，相關(guān)性達(dá)極顯著水平。

2.3 色素腺體和棉酚旋光體之間的相關(guān)性分析

由表4可知，4個(gè)有酚棉材料主要器官的色素腺體密度和色素腺體大小呈極顯著負(fù)相關(guān)，即色素腺體密度越大，色素腺體越小。左旋棉酚和右旋棉酚的含量呈極顯著正相關(guān)，左旋棉酚、右旋棉酚含量與總棉酚含量均呈極顯著正相關(guān)。色素腺體密度與總棉酚含量、左旋棉酚和右旋棉酚含量之間均呈極顯著的正相關(guān)；色素腺體大小與右旋棉酚含量呈顯著負(fù)相關(guān)，而與左旋棉酚含量和總棉酚含量的相關(guān)性未達(dá)顯著水平。

4個(gè)有酚棉材料棉仁的色素腺體密度與左旋棉酚含量呈顯著負(fù)相關(guān)（表5），花瓣色素腺體大小與左旋棉酚含量呈顯著正相關(guān)，上部葉色素腺體大小與右旋棉酚含量呈顯著正相關(guān)，中部葉色素腺體大小與左旋棉酚含量、總棉酚含量呈極顯著正相關(guān)，而其他器官的色素腺體密度、大小與總棉酚含量、左旋棉酚含量、右旋棉酚含量均無(wú)顯著的相關(guān)性。

圖1 HPLC色譜圖Fig.1 HPLC chromatograms

圖2 柱前衍生化-HPLC法獲得的左右旋棉酚標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2 Standard curves of(-)-and(+)-gossypol by pre-column derivatization-HPLC method

表2 參試材料的主要器官棉酚及其旋光體含量Table 2 (-)/(+)-gossypol contents in the main organs of the materials in the experiment

表3 參試材料主要器官總棉酚含量間的相關(guān)性分析Table 3 Correlation analysis between gossypol contents in the main organs of the materials in the experiment

表4 有酚棉色素腺體指標(biāo)和棉酚及其旋光體含量之間的相關(guān)性分析Table 4 Correlation analysis between pigment gland indicators and(-)/(+)-gossypol contents in the glanded cotton

3 討論與結(jié)論

棉酚含量低于國(guó)際衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)（0.04%）和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（0.02%）的無(wú)色素腺體棉花品種均為低酚棉[11]。本研究表明，不同基因型陸地棉主要器官的色素腺體密度和大小、棉酚及其旋光體含量不同。本研究中的色素腺體近等基因系（中棉所12與中棉所12（無(wú)）、珂字棉312與珂字棉312（無(wú)））在棉仁、花瓣、鈴殼這3個(gè)器官中的棉酚及其旋光體含量差異較大，而萼片、苞葉、上部葉、中部葉、下部葉這5個(gè)器官的棉酚含量差異較小。

有酚棉棉酚及其旋光體含量較高；在低酚棉各器官中也均能檢測(cè)到低于0.02%的少量游離棉酚存在。這是因?yàn)槊薹邮怯擅拗旮亢铣珊筝斔偷街仓旮髌鞴俨①A存在植株各器官的色素腺體內(nèi)[12-13]，低酚棉中無(wú)色素腺體，但其根部仍具有合成棉酚的能力，只是缺少了貯存棉酚的器官而已。有關(guān)研究表明，棉酚及其衍生物是1種抗生物質(zhì)，對(duì)某些害蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育具有一定的抑制作用[14]，且棉酚可能與棉花對(duì)枯萎病的抗性有關(guān)[15]，當(dāng)病蟲(chóng)危害發(fā)生時(shí)激發(fā)子可以誘導(dǎo)與棉酚的合成相關(guān)的基因的表達(dá)[16]，故棉酚對(duì)于植株的生長(zhǎng)發(fā)育具有非常重要的作用。低酚棉功能性器官存在一定含量的棉酚，可能具有增強(qiáng)植株抗逆性的作用。

表5 有酚棉主要器官色素腺體指標(biāo)與棉酚及其旋光體含量間的相關(guān)性分析Table 5 Correlation analysis between pigment gland indicators and(-)/(+)-gossypol contents in the main organs of the glanded cotton

棉酚由于結(jié)構(gòu)內(nèi)部化學(xué)鍵的旋轉(zhuǎn)引起的空間位阻而同時(shí)以2種對(duì)映異構(gòu)體存在，其中左旋棉酚比右旋棉酚表現(xiàn)出更高的生物活性，尤其其抗腫瘤效果日益受到重視[17]。然而，有關(guān)左、右旋棉酚對(duì)于棉花生長(zhǎng)發(fā)育的作用還未見(jiàn)報(bào)道。本研究結(jié)果表明，所有供試材料的各器官均含有左旋棉酚，而無(wú)色素腺體棉的鈴殼中均不含有右旋棉酚，說(shuō)明左旋棉酚在棉花生長(zhǎng)發(fā)育中更加重要。左旋棉酚是有生物活性的光學(xué)異構(gòu)體[18]，可能對(duì)于保持棉花正常生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的作用，筆者正在進(jìn)一步驗(yàn)證。此外，低酚棉各器官中的左旋棉酚含量非常接近，即0.005%左右。那么，微量左旋棉酚是否為低酚棉生長(zhǎng)發(fā)育所必需的？這還有待更多的試驗(yàn)來(lái)證明。

IF11為轉(zhuǎn)iaaM基因的IAA適度上調(diào)的轉(zhuǎn)基因棉花種質(zhì)系，轉(zhuǎn)iaaM基因可顯著提高種子表皮的纖維細(xì)胞的形成，而提高衣分和適度降低纖維細(xì)度，兼有提高產(chǎn)量和改善品質(zhì)的效果[19]。本研究結(jié)果表明，IF11與受體親本冀棉14之間，前者各器官的色素腺體密度、棉酚及其旋光體含量大多小于后者，其中左旋棉酚含量顯著低于后者。iaaM基因不同插入位點(diǎn)對(duì)于色素腺體、棉酚及其旋光體含量的影響一致（另文報(bào)道）。由此可見(jiàn)，IF11色素腺體和棉酚的降低并非是外源基因插入而影響棉酚合成、輸送和貯存或色素腺體形成，而可能與IAA上調(diào)有關(guān)，即IAA含量與色素腺體或棉酚合成有一定的相關(guān)性。但這還有待進(jìn)一步研究。

許多學(xué)者認(rèn)為，棉酚含量是色素腺體的生化指標(biāo)，植株各部位的棉酚含量與色素腺體的密度存在正相關(guān)[20]。本研究中各器官的色素腺體密度、大小與棉酚及其旋光體含量的相關(guān)分析結(jié)果表明，不同器官的色素腺體與棉酚含量之間的相關(guān)性差異很大，其中中部葉片的色素腺體大小與棉酚含量呈極顯著正相關(guān)，其他器官的色素腺體與棉酚含量的相關(guān)性并不密切。進(jìn)一步對(duì)有酚棉色素腺體與不同棉酚旋光體之間的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，左旋棉酚含量、右旋棉酚含量、總棉酚含量?jī)蓛砷g為極顯著正相關(guān)，色素腺體密度與左旋棉酚含量、右旋棉酚含量、總棉酚含量呈極顯著正相關(guān)，色素腺體大小與右旋棉酚含量呈顯著負(fù)相關(guān)，而與左旋棉酚含量和總棉酚含量沒(méi)有顯著的相關(guān)性。不同器官中，花瓣總棉酚含量與棉仁總棉酚含量相關(guān)性較高，故可以根據(jù)花瓣棉酚含量來(lái)判斷棉仁棉酚含量的高低，這對(duì)于選育低酚棉種具有非常重要的意義。

[1]邱志堅(jiān),劉文哲.棉花色素腺體研究進(jìn)展[J].魯東大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2008,24(2):162-167.

Qiu Zhijian,Liu Wenzhe.Advances in research on pigment gland of cotton[J].Ludong University Journal(Natural Science Edition),2008,24(2):162-167.

[2]季道藩.棉花知識(shí)百科[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2001:23-25.

Ji Daofan.Cotton knowledge encyclopedia[M].Beijing:China Agriculture Press,2001:23-25.

[3]姚軍,何曉文,李新霞,等.高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定棉籽仁中左旋和右旋棉酚含量[J].食品工業(yè)科技,2013,34(19):277-280.

Yao Jun,He Xiaowen,Li Xinxia,et al.Determination of(-)-and(+)-gossypol in cottonseed by high-performance liquid chromatography with mass spectrum[J].Science and Technology of Food Industry,2013,34(19):277-280.

[4]Adams R,Geissman T A,Edwards JD.Gossypol,a pigment of cottonseed[J].Chemical Reviews,1960,60(6):555-574.

[5]Bell A A.Formadtion of gossypol in infected or chemically irritated tissuesof Gossypium species[J].Phytopathology,1967,57:759-764.

[6]季道藩.棉花腺體的遺傳和育種[J].浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1980,6(1):32-45.

Ji Daofan.The genetic and breeding for cotton pigment glands[J].Journal of Zhejiang Agricultural University,1980,6(1):32-45.

[7]何曉文,李新霞,姚軍,等.柱前手性衍生化-高效液相色譜法測(cè)定棉籽仁中左旋和右旋棉酚含量[J].食品科學(xué),2013,34(12):125-128.

He Xiaowen,Li Xinxia,Yao Jun,et al.Determination of(-)and(+)-gossypols in cottonseed kernel by high-performance liquid chromatography with chiral pre-column derivatization[J].Food Science,2013,34(12):125-128.

[8]鄧德旺.棉花色素腺體的研究進(jìn)展[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1988,11(4):125-131.

Deng Dewang.Advance of research on thepigment gland of cotton[J].Journal of Agricultural University of Hebei,1988,11(4):125-131.

[9]沈仍愚,陳銘荻,王新其,等.估測(cè)棉仁中棉酚含量研究續(xù)報(bào)[J].中國(guó)棉花,1988(3):23-25.

Shen Rengyu,Chen Mingdi,Wang Xinqi,et al.Estimation of cottonseed gossypol contentsin theresearch report[J].China Cotton,1988(3):23-25.

[10]Smith FH.Determination of gossypol in leavesand flower buds of Gossypium[J].Journal of the American Oil Chemists Society,1967,44(4):267-269.

[11]朱四元,陳金湘.低酚棉育種研究進(jìn)展[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2006,18(4):18-23.

Zhu Siyuan,Chen Jinxiang.Advancesin breeding of low gossypol cotton[J].Acta Agriculturae Jiangxi,2006,18(4):18-23.

[12]張程程,吳燕民,唐益雄.棉酚及其衍生物合成途徑的研究進(jìn)展[J].生物技術(shù)進(jìn)展,2011,1(3):165-171.

Zhang Chengcheng,Wu Yanmin,Tang Yixiong.Progress on biosynthetic pathway of gossypol and its derivatives[J].Current Biotechnology,2011,1(3):165-171.

[13]唐愛(ài)民,萬(wàn)長(zhǎng)壽.棉株不同部位棉酚含量及其與表型的相關(guān)分析[J].中國(guó)棉花,1985(6):20-22.

Tang Aimin,Wan Changshou.Correlation analysis between gossypol content in different parts and phenotype of cotton[J].China Cotton,1985(6):20-22.

[14]狄佳春,陳旭升,吳巧娟,等.棉盲蝽對(duì)低酚棉和有酚棉為害的差異[J].中國(guó)棉花,2007,34(11):20-21.

Di Jiachun,Chen Xusheng,Wu Qiaojuan,et al.Damage differences of cotton fleahopper in glandless cotton and glanded cotton[J].China Cotton,2007,34(11):20-21.

[15]宋鳳鳴,鄭重.棉酚和單寧含量與棉花對(duì)枯萎病抗性之間的關(guān)系[J].浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1997,23(5):529-532.

Song Fengming,Zheng Zhong.Involvement of gossypol and tannin in the resistance of cotton seedlings to Fusarium wilt[J].Journal of Zhejiang Agricultural University,1997,23(5):529-532.

[16]朱美霞,李永起,戴小楓.棉酚腺體與棉酚生物合成及低酚棉分子育種[J].分子植物育種,2004,2(3):307-312.

Zhu Meixia,Li Yongqi,Dai Xiaofeng.Gossypol gland and gossypol biosynthesis and molecular breeding of low gossypol cotton[J].Molecular Plant Breeding,2004,2(3):307-312.

[17]代友彪,楊四濤,唐輝.左旋棉酚抗腫瘤作用的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥業(yè),2009,18(19):1-3.

Dai Youbiao,Yang Sitao,Tang Hui,Advances on anti-tumor research of(-)-gossypol[J].China Pharmaceutical,2009,18(19):1-3.

[18]雷海鵬.棉酚作為男用節(jié)育藥的前途[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1983,18(5):321-324.

Lei Haipeng.Gossypol used as a male contraceptive[J].Acta Pharmaceutica Sinica,1983,18(5):321-324.

[19]Zhang Mi,Zheng Xuelian,Song Shuiqing,et al.Spatiotemporal manipulation of auxin biosynthesis in cotton ovule epidermal cells enhancesfiber yield and quality[J].Nature Biotechnology,2011,29(5):453-458.

[20]Wilson F D,Smith J N.Some genetic relationships between gland density and gossypol content in Gossypium hirsutum L.[J].Crop Science,1976,16(6):830-832. ●

Analysis of the Correlation between Pigment Glands and(-)/(+)-Gossypol Contents in Upland Cotton

Liu Hui#,Ji Lingyan#,Zhao Tianlun,Chen Jinhong,Zhu Shuijin*
(College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)

S562.01

A

1002-7807（2017）05-0437-10

10.11963/1002-7807.lhzsj.20170818

2016-12-07 第一作者簡(jiǎn)介：劉慧（1991―），女，碩士研究生；﹟同等貢獻(xiàn)。*通信作者：shjzhu@zju.edu.cn

國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（2016YFD0101400）；國(guó)家自然科學(xué)基金（31501342）；國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系——棉花產(chǎn)業(yè)體系崗位科學(xué)家專項(xiàng)（CARS-18-25）；江蘇省現(xiàn)代作物生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心