探討溶血、脂血對生化檢驗的影響

劉紅梅（江蘇省蘇北人民醫(yī)院,江蘇 揚州 225001）

在臨床工作中，血液標(biāo)本溶血或是脂血的現(xiàn)象非常常見，樣本采集不順利、對樣本處理方式不當(dāng)、受檢者飲食情況及身心狀況等都極易造成樣本發(fā)生溶血或者脂血[1]。本研究旨在探討溶血、脂血標(biāo)本是否會對血液生化檢測結(jié)果產(chǎn)生影響，以及該影響是正向的還是負(fù)向的，幫助檢驗人員客觀分析檢驗結(jié)果能否真實反映患者的病理生理狀態(tài)。了解溶血和脂血的常見原因，對在標(biāo)本采集和處理過程中可能造成溶血、脂血的因素進(jìn)行有效規(guī)避。

臨床檢驗流程中，檢測結(jié)果會受到諸多因素的影響，如樣本采集順利與否、患者身體及心理狀態(tài)、標(biāo)本送檢前的保存與運輸、標(biāo)本周圍溫度等都會對生化檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響，檢驗中的環(huán)境溫度、儀器、試劑等因素也會對檢驗結(jié)果造成干擾和影響[2]。臨床工作中造成血液樣品發(fā)生變化的因素很多，以上諸因素中，溶血現(xiàn)象與脂血現(xiàn)象是常見和影響較大的因素，其中正常情況下，血液遭到破壞后樣本內(nèi)成分含量會發(fā)生明顯差異，溶血指標(biāo)的出現(xiàn)可以為相關(guān)疾病的診治提供循證醫(yī)學(xué)上的依據(jù)，體外溶血會造成檢驗數(shù)據(jù)產(chǎn)生變化，使檢驗結(jié)果產(chǎn)生誤差，無法客觀反映人體機能指標(biāo)，誤導(dǎo)疾病的診斷與治療。溶血時，樣本中的血細(xì)胞濃度會發(fā)生變化，尤其是紅細(xì)胞會高于血漿濃度，溶血情況下白細(xì)胞、血小板因為破壞也會釋放出某些成分，對生化檢驗造成嚴(yán)重影響[3]。陸建國[4]在研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)標(biāo)本發(fā)生溶血后，血液成分也會發(fā)生變化，其中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶等指標(biāo)會產(chǎn)生明顯變化，溶血對樣本的理化性質(zhì)產(chǎn)生影響，進(jìn)而導(dǎo)致指標(biāo)數(shù)據(jù)變化。因此，在臨床工作中要對操作的規(guī)范性嚴(yán)格要求，這樣能降低對檢驗結(jié)果的影響。有研究[5]指出，當(dāng)標(biāo)本溶血后樣本中的血清成分會產(chǎn)生明顯變化，對血清相關(guān)的成分等指標(biāo)產(chǎn)生影響，使指標(biāo)數(shù)據(jù)產(chǎn)生顯著變化，提高血液標(biāo)本采集、運輸以及保存和檢測質(zhì)量。避免血液破壞很重要，有利于提升檢驗結(jié)果的可靠性。脂血是指脂類物質(zhì)進(jìn)入到血液中，使血液樣本的指標(biāo)產(chǎn)生變化，患者生病、飲食結(jié)構(gòu)等因素均會造成脂血現(xiàn)象。學(xué)者李瑩[6]證實，脂血發(fā)生時，血清標(biāo)本的ALT水平顯著升高，臨床工作中發(fā)現(xiàn)脂血現(xiàn)象明顯影響生化檢驗結(jié)果；還有學(xué)者[7]在研究溶血和檢驗的關(guān)系時發(fā)現(xiàn)，輕中重度溶血會使血尿酸、乳酸脫氫酶以及血清肌酐等指標(biāo)產(chǎn)生明顯變化，嚴(yán)重溶血則會對檢驗結(jié)果造成不良影響，張竹俊[8]在溶血對生化檢驗結(jié)果的影響中證實了這個現(xiàn)象。

學(xué)者王燕[9]在工作中發(fā)現(xiàn)，破壞后的血液標(biāo)本在谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶指標(biāo)上高于非脂血標(biāo)本，因此在臨床檢驗中要有效控制相關(guān)影響因素，保證生化檢驗質(zhì)量。此外，血漿或是血清也會出現(xiàn)混濁現(xiàn)象，這是由血樣中的膽固醇、甘油三酯上升而導(dǎo)致的。朱維罡[10]指出，脂血是由于乳糜微粒堆積造成的，其散射光能夠?qū)瘜W(xué)反應(yīng)的吸光度和產(chǎn)物顏色產(chǎn)生疊加影響，因此在采用比濁法、比色法測定過程中往往受到嚴(yán)重干擾，并且這種干擾會隨著微粒直徑的增大不斷增加。

本文研究160例受檢者的溶血樣本、脂血樣本與正常樣本，分析溶血和脂血樣本的各項指標(biāo)的變化，用以探討溶血和脂血對生化檢測結(jié)果的影響。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 本研究選取我院健康體檢中心160例健康體檢者作為研究對象，其中男性82例，女性78例，年齡為20-45歲，平均年齡（34.31±2.51）歲。

1.2 儀器與試劑 所用儀器為邁瑞Mindray全自動生化分析儀BS-230，Microfuge系列臺式微量離心機；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、葡萄糖（GLU）、血尿素氮（BUN）、肌酸激酶（CK）、白蛋白（ALB）等試劑均購自上海透景生命科技股份有限公司。

1.3 方法 采集160例受檢者的血液樣本，分別裝置在三支真空采

血管里，并將其分為對照組、溶血組和脂血組，分別對三組標(biāo)本進(jìn)行臨床檢測，并對比三組樣本的生化檢驗結(jié)果。對照組的血液樣本采取嚴(yán)格措施保存；溶血樣本搗碎后以3065r/min的速度離心6分鐘，致樣本溶血，對其進(jìn)行標(biāo)記區(qū)分。脂血樣本以3065r/min的速度離心6分鐘提取血清樣本，留存制備脂血血清樣本。使用全自動生化分析儀及相關(guān)實驗試劑分別進(jìn)行各項指標(biāo)的檢驗，反復(fù)進(jìn)行6次，取平均值且準(zhǔn)確記錄檢驗數(shù)據(jù)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 所有檢測結(jié)果使用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用百分比（%）表示，統(tǒng)計學(xué)分析使用χ2檢驗，計量資料采用（±s）表示，使用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 溶血組與對照組生化檢驗結(jié)果比較 對比溶血組與對照組的生化檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，溶血組的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、血清肌酸激酶（CK）和血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）均高于對照組，葡萄糖（GLU）的水平低于對照組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），如表1所示。

表1 溶血組與對照組生化檢驗結(jié)果比較(±s)

組別例數(shù)ALT(U/L)GLU(mmol/L)ALB(g/L)BUN(mmol/L)AST(U/L)CK(U/L)溶血組16028.20±5.552.922±0.7241.66±6.146.01±1.6229.42±17.24165.18±76.16對照組16021.24±5.153.59±1.10844.67±5.846.35±1.2223.54±5.15104.16±47.15 P＜0.05＜0.05＞0.05＞0.05＜0.05＜0.05

2.2 脂血組與對照組生化檢驗結(jié)果比較 對比脂血組與對照組的生化檢驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，脂血組的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、血清肌酸激酶（CK）、血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和葡萄糖（GLU）水平均高于對照組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），如表2所示。

表2 脂血組與對照組生化檢驗結(jié)果比較(±s)

表2 脂血組與對照組生化檢驗結(jié)果比較(±s)

組別例數(shù)ALT(U/L)GLU(mmol/L)ALB(g/L)BUN(mmol/L)AST(U/L)CK(U/L)脂血組16049.52±4.368.32±1.1144.35±6.235.87±1.5924.42±5.87114.0±43.9對照組16019.34±4.984.30±1.0739.37±5.985.88±1.1921.81±5.33104.21±45.65 P＜0.05＜0.05＞0.05＞0.05＜0.05＜0.05

3 討論

3.1 溶血現(xiàn)象對生化檢驗結(jié)果影響的分析 溶血是檢驗科常見的標(biāo)本不合格原因，引起溶血的因素也有很多，大多與操作不規(guī)范有關(guān)，如穿刺不順利、抽血速度太慢、反復(fù)擠壓近端血管、組織損傷過多、混勻時用力過猛、血液存放時間過長、標(biāo)本在送檢時晃動幅度大、壓脈帶一直捆扎等因素均可引起溶血。臨床檢驗中最常見的溶血原因主要是采血不順利、真空管不合格以及血清的分離操作不規(guī)范。此外，血液標(biāo)本在不正確的運輸中也可能會造成溶血，如：運輸?shù)臅r間太長、溫度過高時也會引起溶血現(xiàn)象。溶血后，血細(xì)胞被破壞，會導(dǎo)致血細(xì)胞內(nèi)的成分溢出到細(xì)胞外液中，尤其是紅細(xì)胞的破壞造成的結(jié)果會更嚴(yán)重。因為各種化學(xué)成分在細(xì)胞內(nèi)外的濃度是不一樣的，從而使測定結(jié)果發(fā)生改變[11-12]。有些物質(zhì)的紅細(xì)胞內(nèi)濃度低于血清濃度，發(fā)生溶血后，血清相當(dāng)于被稀釋，這些物質(zhì)的檢測濃度就會偏低，這就是溶血時血清GLU、Mg、Na等的檢測結(jié)果偏低的原因。有些指標(biāo)在溶血后的血清濃度高于紅細(xì)胞內(nèi)濃度，如鉀離子濃度、轉(zhuǎn)氨酶濃度、乳酸脫氫酶濃度等，其血清檢測結(jié)果會偏高，但溶血對血清白蛋白ALB和尿素氮BUN水平影響不大，可能的原因是，雖然溶血會對血清這些指標(biāo)產(chǎn)生影響，但是溶血后，血清顏色會發(fā)生改變，而且血紅蛋白也會干擾這些物質(zhì)的檢測，兩種作用就會相互抵消，最終使得檢測結(jié)果與溶血前沒有太大改變。溶血后血液中的高濃度物質(zhì)析出，溶血的敏感度不明顯，使ALT、AST、CK的指標(biāo)均高于對照組。實驗中發(fā)現(xiàn)溶血后酶類物質(zhì)的濃度發(fā)生了明顯的變化，說明酶類物質(zhì)對于血液標(biāo)本的要求高于其他檢測項目，所以在發(fā)現(xiàn)溶血后，不建議對酶類物質(zhì)進(jìn)行檢測[13]。因此要嚴(yán)格按照血生化操作規(guī)范和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)予以血樣采集，確保采集器具干燥及干凈衛(wèi)生，建議用碘伏等消毒，以免發(fā)生溶血[14]。

3.2 脂血現(xiàn)象對生化檢驗結(jié)果影響的分析 臨床中出現(xiàn)脂血現(xiàn)象非常普遍，主要是因為血液中乳糜微粒增加，使血清呈現(xiàn)出渾濁的狀態(tài)。脂血常見的原因有：患者進(jìn)食高脂肪含量的食物；患者本身就存在脂代謝紊亂引起的高脂血癥；患者靜脈輸入脂類營養(yǎng)物質(zhì)。臨床工作中發(fā)現(xiàn)，膽紅素、血糖會受到脂血因素的影響。雖然稀釋標(biāo)本可以降低脂質(zhì)干擾，但同時也存在因稀釋不準(zhǔn)確而導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確的情況，通過本次研究發(fā)現(xiàn)，溶血和脂血會對生化檢測結(jié)果有影響，因此在生化檢測的各個環(huán)節(jié)要采取嚴(yán)格措施來避免溶血和脂血現(xiàn)象的發(fā)生。臨床生化檢測中，最常用的檢測原理是比濁法和比色法，因標(biāo)本渾濁會影響光的散射和透射，影響散射光和透射光的變化，從而影響檢測結(jié)果。一旦標(biāo)本出現(xiàn)脂血，無論使用連續(xù)監(jiān)測法還是終點法均無法消除脂質(zhì)對檢測結(jié)果的影響。乳糜微粒在堿性環(huán)境中也會使血清發(fā)生改變。此外，臨床中也常使用比色法檢驗，但脂血會對檢測產(chǎn)生一定的干擾。乙醚在該項處理中具有重要意義，使用乙醚處理能避免脂濁的干擾，但并非經(jīng)過乙醚處理都能排除干擾情況，部分檢測結(jié)果仍然會發(fā)生變異。乙醚處理可以部分消除脂血對ALT、AST等檢測指標(biāo)的影響，但不能消除對ALB、BUN、GLU、CK等指標(biāo)的干擾。生化檢驗是常用的檢測方式，同時也是身體檢查的重要方式，可對某種疾病進(jìn)行針對性的篩查與準(zhǔn)確檢驗，對于臨床診斷具有重要的意義[15]。因此，醫(yī)務(wù)人員要對影響溶血、脂血發(fā)生的可控因素進(jìn)行培訓(xùn)學(xué)習(xí)，對血液樣本采集、儲存和處理技術(shù)進(jìn)行保證，避免由于管理失當(dāng)、處理不規(guī)范使血液發(fā)生溶血、脂血現(xiàn)象，對生化檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響。