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    牛蛙皮主要成分測(cè)定及明膠提取工藝對(duì)比

    2023-10-25 02:34:25楊莉莉梁呂保蔡雯雯黃丹
    中國(guó)食品 2023年20期
    關(guān)鍵詞:瀝水牛蛙膠液

    楊莉莉 梁呂保 蔡雯雯 黃丹

    牛蛙憑借適應(yīng)性強(qiáng)、對(duì)養(yǎng)殖條件要求不高、耐運(yùn)輸、雜食、生長(zhǎng)快、個(gè)體大、易養(yǎng)殖、利潤(rùn)較高等特點(diǎn),養(yǎng)殖規(guī)模和養(yǎng)殖范圍均得到了較快的增長(zhǎng)。2021年全國(guó)多地引進(jìn)了牛蛙養(yǎng)殖,年產(chǎn)量已超50萬(wàn)噸,僅在粵東、閩南一帶年產(chǎn)量就可達(dá)到20多萬(wàn)噸,養(yǎng)殖區(qū)域出現(xiàn)由南向北擴(kuò)散的趨勢(shì)。目前牛蛙在中國(guó)各地均有大規(guī)模的養(yǎng)殖,已成為我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖動(dòng)物。

    牛蛙的皮膚組織重量約占其體量的5%,食用過(guò)程中常被丟棄,造成了大量生物資源的浪費(fèi)。從牛蛙皮膚組織中提取優(yōu)質(zhì)膠原,深入開發(fā)高附加值產(chǎn)品,既能夠解決廢棄物帶來(lái)的污染問(wèn)題,又推動(dòng)了生物質(zhì)資源的綜合開發(fā)與高值利用,可以創(chuàng)造良好的環(huán)境效益和經(jīng)濟(jì)效益。作為一種生物性高分子物質(zhì),膠原是動(dòng)物體內(nèi)含量最多、分布最廣的功能性蛋白,明膠則是膠原部分降解得到的產(chǎn)物,廣泛應(yīng)用于食品、化妝品及醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。基于此,本實(shí)驗(yàn)對(duì)牛蛙皮的主要成分進(jìn)行分析,并對(duì)比牛蛙皮經(jīng)過(guò)3種預(yù)處理工藝后的提膠得率、膠液在570nm的透過(guò)率(%)、膠液b值、粘度、凍力指標(biāo),以期為工業(yè)化利用牛蛙皮生產(chǎn)明膠提供參考。

    一、材料與設(shè)備

    1.材料與試劑。牛蛙皮,收集自當(dāng)?shù)剞r(nóng)貿(mào)市場(chǎng),置于鋁箔袋中密封,放置在冰箱的-18℃冷凍室內(nèi)凍結(jié)備用。鹽酸、硫酸、氫氧化鈉,均為分析純;食鹽、碳酸鈉,均為食品級(jí)。

    2.儀器與設(shè)備。101-1電熱恒溫干燥箱,上海博迅實(shí)業(yè)有限公司;SX2-4-10N箱式電阻爐,上海一恒科學(xué)儀器有限公司;DDS-307精密電導(dǎo)率儀,上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;PHS-3C型精密pH計(jì),上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;78-1磁力加熱攪拌,天津市歐諾儀器儀表有限公司;UV-1100紫外分光光度計(jì) 上海美譜達(dá)儀器有限公司;ZE6000分光測(cè)色儀,日本電色工業(yè)株式會(huì)社;PAL-1糖度計(jì),ATAGO(愛(ài)拓)株式會(huì)社;1000mL索式提取器,四川蜀玻(集團(tuán))有限責(zé)任公司;AR224CN電子分析天平,美國(guó)奧豪斯儀器(上海)有限公司;ND-1勃氏粘度測(cè)試儀,天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司;JS-2凍力測(cè)試儀,天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司。

    二、實(shí)驗(yàn)與方法

    1.樣品的預(yù)處理。按照1:3的料液比,將牛蛙皮用0.5%(w/w)氫氧化鈉溶液浸泡處理2h,再用三倍樣品量的水沖洗5次,加鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.5-8,然后用三倍樣品量的水沖洗3次,自然瀝水后制得樣品1。將牛蛙皮和自來(lái)水按照1:3的料液比混合,用硫酸調(diào)節(jié)pH至1左右,浸泡處理3h,再用三倍樣品量的水沖洗5次,自然瀝水后制得樣品2。將牛蛙皮和自來(lái)水按照1:3的料液比混合浸泡,然后水洗5次,自然瀝水后制得樣品3。

    2.膠原的提取。按照1:2的料液比向樣品中加入自來(lái)水,加硫酸調(diào)節(jié)pH至4.0-4.5,在水浴鍋中恒溫60℃提膠,提膠時(shí)間為3h。經(jīng)棉過(guò)濾得到膠液,再將膠液平攤在不銹鋼托盤上,置于電熱恒溫干燥箱中,在50℃條件下烘干得到干膠片。

    3.理化指標(biāo)的測(cè)定。(1)牛蛙皮水分測(cè)定。采用GB/T 5009.3-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定》中的直接干燥法。

    (2)牛蛙皮脂肪測(cè)定。采用GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》中的索氏抽提法。

    (3)牛蛙皮灰分測(cè)定。采用GB 5009.4-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測(cè)定》中的馬福爐灰化法。

    (4)牛蛙皮粗蛋白含量測(cè)定。采用GB 5009.5-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》中的凱氏定氮法。

    (5)牛蛙提膠收率測(cè)定。牛蛙皮加酸、熱水提膠,手持濃度計(jì)測(cè)定膠液濃度,按照如下公式計(jì)算收率,0.77為手持糖度計(jì)的校正系數(shù)。

    (6)明膠色度指數(shù)B值的測(cè)定。在30℃條件下,測(cè)定10%明膠溶液,用分光測(cè)色儀對(duì)膠液進(jìn)行檢測(cè),然后讀數(shù)記錄結(jié)果。

    (7)明膠透過(guò)率的測(cè)定。在45℃條件下,測(cè)定6.67%明膠溶液,用分光光度計(jì)于波長(zhǎng)570nm處對(duì)膠液進(jìn)行檢測(cè),然后讀數(shù)記錄結(jié)果。

    (8)透視度的測(cè)定。將牛蛙皮水洗后的清洗液體裝入底部帶有十字標(biāo)識(shí)、側(cè)面有高度標(biāo)識(shí)的量筒中,從上至下目視量筒底部的十字標(biāo)識(shí),通過(guò)排放管調(diào)整液位,當(dāng)視線透過(guò)液體量筒底部的十字標(biāo)識(shí)清晰可見(jiàn)時(shí),讀取量筒的高度,將其記錄為透視度。

    (9)明膠粘度的測(cè)定。在60℃條件下,測(cè)定100mL的6.67%明膠溶液流過(guò)標(biāo)準(zhǔn)毛細(xì)管所需要的時(shí)間。

    (10)明膠凍力的測(cè)定。將待測(cè)定的6.67%明膠溶液放入(10±0.1)℃低溫恒槽內(nèi)冷卻16-18h,然后將直徑為12.7mm的圓柱壓入6.67%明膠的膠凍表面以下4mm時(shí)所施加的力記為凍力,以B1oom g為單位。

    三、結(jié)果與分析

    1.牛蛙皮的主要成分含量。對(duì)自然瀝水后的牛蛙皮進(jìn)行水分、粗脂肪、灰分、粗蛋白含量測(cè)定,結(jié)果詳見(jiàn)表1。

    由表1可知,牛蛙皮的水分含量為68.50%、粗脂肪含量為1.93%、灰分含量為5.58%、粗蛋白含量為20.87%,與楊遠(yuǎn)帆等人的測(cè)定結(jié)果接近。與羅非魚皮相比,牛蛙皮的粗蛋白含量偏低,灰分含量較高,水分、脂肪含量較為接近,其脫脂預(yù)處理工藝可以參考羅非魚皮的預(yù)處理工藝,因此后期工業(yè)化生產(chǎn)時(shí)所使用的脫脂清洗設(shè)備也可能比較接近。牛蛙皮的脂肪含量為1.93%,遠(yuǎn)低于牛皮和豬皮的脂肪量(3%-30%),表明牛蛙皮更易于脫脂和浸提。另外,牛蛙皮的膠原蛋白含量約為13.8%,占總蛋白的74.39%,說(shuō)明牛蛙皮是提取和利用明膠的理想原料。

    2.不同預(yù)處理方法后牛蛙皮的理化指標(biāo)比較。根據(jù)采用不同預(yù)處理方法后牛蛙皮的理化指標(biāo)(表2)可以看出,樣品1的灰分最高,與預(yù)處理前的5.58%相比,灰分含量反而更高,可能是因?yàn)槭褂名}酸調(diào)整pH時(shí),鹽酸與氫氧化鈉發(fā)生了酸堿反應(yīng)生成了氯化鈉和水,然后由于水洗不夠充分,殘留的氯化鈉沒(méi)有被徹底洗出,反而使得灰分含量增加。樣品1經(jīng)過(guò)預(yù)處理后,電導(dǎo)率最低,可能是由于酸堿中和后溶液中的離子量減少而造成的。樣品1經(jīng)過(guò)預(yù)處理后,清洗溶液的透視度最低、收率也最低,可能與牛蛙皮進(jìn)行堿洗時(shí),部分雜蛋白、脂類等被去除有關(guān),另外水洗不夠充分,殘留的氯化鈉也會(huì)影響透視度。

    樣品2預(yù)處理后水分最高,收率最高,這是因?yàn)橄∷崛芤嚎梢杂行ё饔糜谀z原蛋白分子間的氫鍵,使膠原纖維膨脹展開,泡酸后牛蛙皮吸水發(fā)脹。經(jīng)泡酸預(yù)處理后,牛蛙皮的灰分最低,說(shuō)明樣品2預(yù)處理方法脫灰的效果最好,這與牛蛙皮內(nèi)的磷、鈣等無(wú)機(jī)成分與酸反應(yīng)產(chǎn)生可溶性的鹽,再經(jīng)水洗被去除有關(guān)。樣品2預(yù)處理后的電導(dǎo)率最高,可能是由于水洗不夠徹底,溶液中離子含量高所造成的,增加弱堿(例如碳酸鈉)進(jìn)行中和,再經(jīng)水洗就可解決這個(gè)問(wèn)題。

    樣品3只經(jīng)過(guò)3次水洗,預(yù)處理后的水分含量為79.61%,處理前則為68.50%,高了11.11%,這與自然瀝水的方法有很大關(guān)系,因?yàn)榕M芷ぷ匀粸r水時(shí)堆放過(guò)厚不容易瀝出水,水分含量就比較高。

    對(duì)比3個(gè)樣品可以看出,預(yù)處理后樣品2的灰分最低,與羅非魚皮的灰分接近。3個(gè)樣品經(jīng)過(guò)處理后,水分均較原始牛蛙皮的水分有所上升,因此原料采購(gòu)時(shí)需要在合同內(nèi)約定好原料的水分范圍,不能只以“自然瀝水至不滴水”為驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。

    3.不同預(yù)處理方法的牛蛙皮制得明膠理化指標(biāo)的比較。根據(jù)不同預(yù)處理方法的牛蛙皮制得明膠的理化指標(biāo)(表3)可以看出,經(jīng)過(guò)泡酸預(yù)處理的樣品2提取得到的膠液透過(guò)率最高,b值最低,顏色最淺。樣品3提取出的膠液透過(guò)率最低,b值最高,顏色最深,這是因?yàn)闃悠?的牛蛙皮只進(jìn)行了水洗,沒(méi)有經(jīng)過(guò)酸或堿除雜的處理,其中的脂肪極易氧化產(chǎn)生臭味,使膠原蛋白溶液變渾濁,此外也與雜蛋白、粘多糖、礦物質(zhì)等含量高有著直接的關(guān)系。樣品1的牛蛙皮在預(yù)處理時(shí)使用氫氧化鈉浸泡,水洗很難將其清洗干凈,殘留的氫氧化鈉在提取時(shí)又與硫酸反應(yīng)生成硫酸鈉,也會(huì)影響膠液的透過(guò)率與b值。

    經(jīng)過(guò)堿處理后,樣品1膠液的粘度與凍力最高;經(jīng)過(guò)酸處理后,樣品2膠液的粘度最低;只經(jīng)過(guò)水洗處理的樣品3收率最高,這一結(jié)果與牛蛙皮沒(méi)有經(jīng)過(guò)酸或堿除雜的處理,其中雜蛋白、粘多糖、礦物質(zhì)等含量高有關(guān)。

    對(duì)比3個(gè)樣品,從經(jīng)過(guò)堿洗預(yù)處理的牛蛙皮中提取得到的明膠凍力最高,但在工業(yè)化生產(chǎn)時(shí),不宜使用氫氧化鈉進(jìn)行堿洗,因?yàn)闅埩舻臍溲趸c很難清洗干凈,最終會(huì)影響到產(chǎn)品的品質(zhì)。從經(jīng)過(guò)酸洗預(yù)處理的牛蛙皮中提取得到的明膠感官指標(biāo)最好,但是凍力低,收率也最低。在酸法預(yù)處理中,泡酸會(huì)使牛蛙皮吸酸溶脹,明膠能夠更好地釋放出來(lái),但如果酸的濃度過(guò)低或處理時(shí)間不充足,牛蛙皮溶脹不完全,明膠析出量較少,產(chǎn)量就會(huì)較低。

    綜上所述,牛蛙肉質(zhì)細(xì)嫩鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富,但食用時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量的蛙皮副產(chǎn)物,因此有必要設(shè)計(jì)蛙皮明膠生產(chǎn)工藝,既可制備高品質(zhì)明膠,又可增加蛙皮附加值。2021年全國(guó)牛蛙年產(chǎn)量為50萬(wàn)噸,牛蛙皮比重按5%進(jìn)行計(jì)算,每年約可產(chǎn)出2.5萬(wàn)噸的牛蛙皮,約可產(chǎn)出0.25萬(wàn)噸明膠。隨著牛蛙逐漸形成產(chǎn)業(yè)化的養(yǎng)殖、加工、銷售規(guī)模,牛蛙皮在未來(lái)極有可能用于工業(yè)化生產(chǎn)明膠,作為水產(chǎn)動(dòng)物來(lái)源明膠的有力補(bǔ)充。

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