夾脊電針對脊髓損傷大鼠脊髓病理形態(tài)及死亡受體6表達(dá)的影響＊

梁雪松，閻路達(dá)，王舢澤，張 瑜，周 鵬，符文彬＊＊

（1. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院 廣州 510120；2. 深圳市寶安區(qū)中醫(yī)院 深圳 518100）

脊髓損傷（Spinal cord injury，SCI）是一種永久性的損傷，往往導(dǎo)致?lián)p傷節(jié)段以下的肢體癱瘓、大小便失禁及性功能障礙，給社會(huì)、家庭、個(gè)人帶來巨大負(fù)擔(dān)[1]。目前切實(shí)有效的靶向治療方法仍然難以找到。研究表明，夾脊電針能顯著改善SCI 大鼠肢體運(yùn)動(dòng)功能[2]，但作用機(jī)制仍待闡明，SCI 后脊髓微環(huán)境中發(fā)生一系列病理性改變，包括組織水腫缺血、興奮性氨基酸毒性、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)細(xì)胞凋亡、軸突再生障礙等機(jī)制。其中軸突髓鞘再生障礙是阻礙脊髓神經(jīng)細(xì)胞修復(fù)的重要因素，死亡受體6（DR6）是調(diào)控髓鞘再生神經(jīng)細(xì)胞-少突膠質(zhì)細(xì)胞（Oligodendrocytes，OL）的負(fù)性調(diào)控因子，抑制DR6 的功能會(huì)促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞成熟分化、髓鞘形成及再生。DR6 缺失的小鼠在兩種脫髓鞘模型中均表現(xiàn)出增強(qiáng)的再髓鞘形成[3]。本研究通過檢測SCI 后大鼠行為學(xué)、脊髓組織形態(tài)學(xué)、微環(huán)境中DR6 蛋白及mRNA 表達(dá)及少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白CNpase 蛋白變化，探討夾脊電針改善脊髓損傷的潛在作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

健康清潔級成年SD 雌性大鼠24 只，體質(zhì)量200-250 g，由遼寧長生生物技術(shù)有限公司，[SCXK（遼）2015-001]，在廣州中醫(yī)藥大學(xué)第七臨床醫(yī)學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物房（清潔級）適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，12 h白12 h黑，溫度22±1 ℃，濕度45%-55%，自由進(jìn)食飲水。整個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的過程中對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行的所有各種處理程序均遵照國家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國科技部2006 年最新頒布的有關(guān)動(dòng)物的使用說明及倫理學(xué)規(guī)定（動(dòng)物倫理批件號：KY-2019-002-01）。

采用隨機(jī)數(shù)字表將動(dòng)物隨機(jī)分為4 組，分別為假手術(shù)組、假手術(shù)+電針組、模型組、模型+電針組，每組6只。

1.2 主要儀器與試劑

石蠟切片機(jī)（RM2235，德國Leica公司），電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（QH01-9030A，上海精宏公司），超純水系統(tǒng)（NW10LVF，香港Heal Force 公司），顯微鏡（BX53，日本OLUMPUS 公司），電泳儀（DYY-7C，北京六一公司），超速冷凍離心機(jī)（H-2050R，湖南湘儀公司），酶標(biāo)儀（ELX-800，美國BIOTEK 公司），華佗牌針灸針，電熱恒溫培養(yǎng)箱（DH36001B，天津泰斯特公司），微量移液器（Proline，蘇州BIOHIT 公司），紫外分光光度計(jì)（NANO 2000，美國Thermo 公司），熒光定量PCR 儀（Exicycler 96，韓國BIONEER 公司）TRIpure（RP1001北京BioTeke 公司），BeyoRT II M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶（D7160L，上海碧云天生物技術(shù)公司），RNase inhibitor（RP5602，北京BioTeke 公司），蘇木精（H8070，中國Solarbio 公司），全蛋白提取試劑盒（WLA019，中國wanleibio 公司），SDS-PAGE 凝膠快速制備試劑盒（WLA013，中 國 wanleibio 公 司） ，PVDF 膜（IPVH00010，美國Millipore 公司），DR6（A7365，中國ABclonal公司）。

1.3 大鼠SCI模型建立

大鼠稱重后，按照3.5 mL·kg-1給予一定量的10%水合氯醛腹腔麻醉，麻醉生效后，大鼠俯臥位固定，常規(guī)消毒鋪巾，從上腹下位T13 肋骨下切口定位，確定T10 棘突的相對位置，術(shù)野備皮，碘伏酒精常規(guī)消毒，切開兩側(cè)皮膚間距至少在1.0 cm，分開切口兩側(cè)的皮下筋膜，沿椎棘突邊緣切口用止血鉗鈍性的結(jié)扎和分離椎棘突旁部的松弛肌肉，暴露棘突，眼科剪離法輕輕剪切割去椎間棘突的上側(cè)棘韌帶及椎上下棘突間段的棘韌帶，充分地剝離并顯露T9-T11 棘突；以血管鉗輕輕地夾住顯露的T9 棘突，輕輕地提起，咬去T10 棘突，暴露T10 椎板，輕柔地把T9-T10 椎板之間黃韌帶移去，精細(xì)地用咬骨鉗咬去T10 椎板，暴露硬脊膜。充分止血、夾鉗支持固定住脊髓動(dòng)脈瘤鉗夾，將張開瘤鉗夾緊后從脊髓第T10 節(jié)段的起始處垂直橫跨于脊膜，置入瘤夾（標(biāo)定力量為70 g）鉗，垂直完全橫跨至脊髓，松開夾鉗后可使脊髓瘤鉗夾鉗完全釋放，緊緊垂直完全夾住到脊髓，計(jì)時(shí)，持續(xù)約60 s，取出瘤夾。小方塊明膠海綿覆蓋脊膜，創(chuàng)面應(yīng)用青霉素液，分層縫合，術(shù)畢。皮膚再次嚴(yán)格消毒，不包扎切口。腹腔注射生理鹽水20 mL，補(bǔ)充水電解質(zhì)。假手術(shù)組僅打開椎板，不夾脊髓，其他干預(yù)措施也同模型組。術(shù)后，大鼠單籠飼養(yǎng)，皮下注射青霉素針量約10 萬單位，1 次/天，持續(xù)1 周。每日早晚定時(shí)進(jìn)行膀胱內(nèi)擠壓式排尿兩次，給予截癱護(hù)理。觀察皮膚有無壓瘡或感染，下肢有無潰爛。待大鼠蘇醒后BBB 評分為1-3 分及下腹部觸診膀胱脹大確認(rèn)造模成功[4]。

1.4 干預(yù)方法

假手術(shù)組：僅打開椎板，開椎板，不夾脊髓，同其他各組大鼠一同捆綁，常規(guī)飼養(yǎng)，不予任何處置。

假手術(shù)+電針組：僅打開椎板，開椎板，不夾脊髓，同其他各組大鼠一同捆綁，常規(guī)飼養(yǎng)，3 h 后給予夾脊電針干預(yù)[5]：選取0.35 mm×13 mm 華佗牌針灸針，經(jīng)常規(guī)穴位消毒后，直刺入T9、T11節(jié)段夾脊穴下4-5 mm，使針尖碰觸椎板，并將電針儀正負(fù)極接頭分別夾在同側(cè)兩針柄，正極在上、負(fù)極在下，調(diào)節(jié)計(jì)時(shí)器至30 min，調(diào)節(jié)電流輸出在1-2 mA，輸出頻率為100 Hz，見大鼠背部肌肉微弱抽動(dòng)未見劇烈掙扎表現(xiàn)為度，每天治療1次，1次30 min，連續(xù)治療7天[6]。

模型組：按照手術(shù)操作進(jìn)行造模，同其他各組大鼠一同捆綁，常規(guī)飼養(yǎng)。

模型組+電針組：按照手術(shù)操作進(jìn)行造模，同其他各組大鼠一同捆綁，常規(guī)飼養(yǎng)，3 h 后給予夾脊電針干預(yù)。

1.5 觀察指標(biāo)與檢測方法

一般狀況：觀察并記錄各組大鼠的精神狀態(tài)、體質(zhì)量變化、肢體活動(dòng)、外觀體征（毛發(fā)光澤及脫落情況）、排便情況等，觀察大鼠有無發(fā)生死亡。

BBB 評分：各組大鼠均于模型建立后第7 天運(yùn)用BBB 運(yùn)動(dòng)功能評分量表進(jìn)行行為學(xué)評定，BBB 評分量表是評價(jià)脊髓損傷大鼠肢體功能變化最客觀、應(yīng)用最廣的量表之一，能較細(xì)微的評定有效運(yùn)動(dòng)能力的變化[7-8]，評分由0-21 分，0 分代表后肢完全無活動(dòng)，21 分代表后肢體功能正常，評分越低提示后肢運(yùn)動(dòng)障礙越嚴(yán)重，內(nèi)容包含了運(yùn)動(dòng)情況、軀干穩(wěn)定性、步態(tài)、協(xié)調(diào)性及爪精細(xì)動(dòng)作等。觀察室將大鼠置于寬大的場地，讓其自由活動(dòng)，采用雙人雙盲法觀察后肢運(yùn)動(dòng)功能，評定至少4 min，取兩位評估者平均值作為每只大鼠的BBB評分。

肉眼觀察脊髓形態(tài)、HE 染色觀察各組大鼠脊髓組織病理變化：BBB 評分后，通過斷頭處死，打開椎管肉眼觀察脊髓形態(tài)是否正常、結(jié)構(gòu)是否完整，并拍照，取損傷段4 cm 脊髓組織置于冰盒上并在4%多聚甲醛緩沖液中固定，4℃冰箱存放使用。將組織置于二甲苯中澄清，置于二甲苯+石蠟中透蠟，包埋成硬蠟塊，切成5 μm 的片，置于培養(yǎng)箱中干燥。取出切片，在烘箱中烘烤30 min，而后分步置于二甲苯、二甲苯Ⅱ、無水乙醇、無水乙醇Ⅱ、95%，85%，75%乙醇及蒸餾水中，逐步脫蠟至水：分步置于蘇木精中、蒸餾水、1%鹽酸乙醇，浸泡、伊紅染料溶液，反復(fù)浸泡并沖洗相應(yīng)殘留物染色。再逐步脫水、透明、封片，室溫晾干，于200×鏡下觀察染色效果并拍照。

Western blot 檢測各組大鼠脊髓組織中DR6 蛋白及少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白CNpase的表達(dá)：將切好的脊髓組織加0.5 mL 裂解緩沖液，置于冰上靜置5 min，低溫冷凍離心機(jī)，12 000rpm，4℃，離心10 min，分離上清為所得的蛋白質(zhì)抽提物。100℃水浴鍋加熱10 min，以充分變性蛋白。SDS-PAGE 蛋白電泳、轉(zhuǎn)膜、漂洗，5%脫脂奶粉室溫封閉2h，加入DR6抗體（DR6 antibody一抗稀釋比例1∶1000）孵育，緩慢搖動(dòng)4℃過夜，浸入TBST 中，搖床搖動(dòng)5 min，共4 次。加入二抗（1∶5000），室溫孵育2 h，將PVDF 膜放置于保鮮膜上，避光配置顯色液并覆蓋PVDF 膜，均勻地灑上ECL 發(fā)光液，靜置反應(yīng)5 min，轉(zhuǎn)入暗盒中，在暗室空間里進(jìn)行曝光，將目標(biāo)膠片帶進(jìn)行掃描，用凝膠圖象處理系統(tǒng)（Gel-Pro-Analyzer 軟件）來進(jìn)行圖像分析并得到目標(biāo)條帶上的光密度值。

Real-time PCR 檢測各組大鼠脊髓組織DR6 mRNA 表達(dá)：研磨脊髓組織，加入裂解液，采用總RNA試劑盒提取RNA。提取RNA 后，檢測純度，通過紫外分光光度法檢測樣本中RNA 的濃度。取1 μL RNA，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，以得到對應(yīng)的cDNA。采用熒光定量試劑盒對DR6mRNA 相對表達(dá)水平進(jìn)行定量檢測，引物序列：DR6-F：5’-ACGCTCACAAGCATTTCG-3’；DR6-R：5’-GCCGTTGCGGTAGTAGATC-3’；β-actin-F：5’-GGAGATTACTGCCCTGGCTCCTAGC-3’；β-actin-R：5’-GGCCGGACTCATCGTACTCCTGCTT-3’，采用2-△△CT方法計(jì)算DR6 mRNA相對表達(dá)水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用單因素方差分析（One-way ANOVA）多組間均數(shù)比較；兩兩比較，若方差齊，采用LSD 法；方差不齊，則采用Dunnett's T3 法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠基本狀況

各組大鼠無死亡，取材前各組大鼠情況如下：

Sham 組與Sham+EA 組：實(shí)驗(yàn)全過程中所有大鼠精神反應(yīng)靈敏，活動(dòng)靈活，毛色白有光澤，進(jìn)食及排便未見異常，體質(zhì)量略有增長。

Model 組：大鼠出現(xiàn)精神欠佳，下肢活動(dòng)不能，上肢活動(dòng)正常，皮毛微黃無光澤，無壓瘡或感染，下肢有無潰爛，進(jìn)食量稍有減少，排便需人工促排，體質(zhì)量略有減輕。

Model+EA 組：大鼠精神尚可，下肢活動(dòng)逐漸恢復(fù)，上肢活動(dòng)正常，皮毛微黃無光澤，無壓瘡或感染，下肢有無潰爛，進(jìn)食量稍有減少，人工促排便次數(shù)減少，體質(zhì)量略有減輕。

2.2 各組大鼠BBB評分比較

7 天治療結(jié)束后，運(yùn)用BBB 評分對大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)行評分，Sham 組與Sham+EA 組均為滿分21分，假手術(shù)操作及電針治療并未對正常大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能產(chǎn)生影響；與Sham 組比較，Model 組大鼠BBB 評分顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與Model 組大鼠比較，Model+EA 組大鼠BBB 評分升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。以上結(jié)果表明脊髓損傷后大鼠出現(xiàn)了嚴(yán)重的肢體運(yùn)動(dòng)功能障礙，夾脊電針能顯著改善其運(yùn)動(dòng)功能（見圖1）。

圖1 各組大鼠BBB評分比較（，n=6）

2.3 脊髓形態(tài)及病理變化觀察

肉眼觀察脊髓形態(tài)顯示：肉眼可見Sham 組與Sham+EA 組脊髓外形呈現(xiàn)白素色，未見淤血現(xiàn)象，組織結(jié)構(gòu)完整。Model 組脊髓組織損傷段可見大面積淤血現(xiàn)象，組織結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重。Model+EA 組脊髓組織損傷段淤血面積及結(jié)構(gòu)破壞程度明顯輕于Model 組（見圖2）。

圖2 各組大鼠脊髓組織外觀肉眼觀測結(jié)果

HE 染色觀察大鼠脊髓病理形態(tài)學(xué)結(jié)果顯示：光鏡下Sham 組與Sham+EA 組脊髓組織切片均可見各結(jié)構(gòu)形態(tài)完整，排列緊密，灰白質(zhì)分界清晰，未見明顯出血，神經(jīng)元無胞體腫脹、胞核位于胞體中央、大而圓，未見固縮，著色淺，核仁清晰可見。Model 組脊髓組織疏松嚴(yán)重，灰白質(zhì)界限只能隱約可見，存在部分出血灶，大量炎癥浸潤，膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯，灰質(zhì)內(nèi)有神經(jīng)元?dú)埓?，核濃縮，體積變小甚至消失，白質(zhì)內(nèi)可見大量的小脂滴形成大量的空泡細(xì)胞。Model+EA 組脊髓組織損傷較Model組輕，出血點(diǎn)面積減少，淋巴細(xì)胞浸潤少于Model組，神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)修復(fù)現(xiàn)象，出現(xiàn)一定量髓鞘再生（見圖3）。

圖3 各組大鼠脊髓組織HE染色結(jié)果（200×）

2.4 脊髓組織DR6表達(dá)變化

Sham 組和Sham+EA 組大鼠脊髓組織中DR6 蛋白表達(dá)量維持在少量穩(wěn)定的低水平，假手術(shù)操作及電針治療并未對正常大鼠脊髓組織DR6 表達(dá)產(chǎn)生影響；Model 組大鼠脊髓組織DR6 蛋白表達(dá)顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明模型制備成功。經(jīng)夾脊電針治療7天后，Model+EA 組大鼠脊髓組織DR6蛋白表達(dá)低于Model 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（見圖4）。

圖4 各組大鼠脊髓組織DR6表達(dá)變化（n=6）

2.5 脊髓組織中少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白CNpase 的表達(dá)變化

Sham組和Sham+EA 組大鼠脊髓組織中CNpase蛋白表達(dá)量維持在穩(wěn)定水平，假手術(shù)操作及電針治療并未對正常大鼠脊髓組織CNpase 表達(dá)產(chǎn)生影響；Model組大鼠脊髓組織CNpase蛋白表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），經(jīng)夾脊電針治療7 天后，Model+EA 組大鼠脊髓組織CNpase 蛋白表達(dá)高于Model 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（見圖5）。

圖5 各組大鼠脊髓組織CNpase蛋白表達(dá)變化（n=6）

2.6 脊髓組織中DR6 mRNA表達(dá)水平變化

Sham 組和Sham+EA 組大鼠脊髓組織中DR6 mRNA 表達(dá)維持在少量穩(wěn)定的低水平，假手術(shù)操作及電針治療并未對正常大鼠脊髓組織DR6 表達(dá)產(chǎn)生影響；Model 組大鼠脊髓組織DR6 mRNA 表達(dá)水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明模型制備成功。經(jīng)夾脊電針治療7 天后，Model+EA 組大鼠脊髓組織DR6 mRNA 表達(dá)低于Model 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（見圖6）。

圖6 各組大鼠脊髓組織DR6 mRNA表達(dá)水平變化（n=6）

3 討論

脊髓損傷病理過程包括原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷兩個(gè)階段[9]，原發(fā)性損傷是不可逆的瞬間性的機(jī)械損傷包括撕裂傷、剪切傷、暴力傷等，繼發(fā)性損傷往往在原發(fā)性損傷基礎(chǔ)上數(shù)分鐘到數(shù)周微環(huán)境中發(fā)生一系列如組織水腫、局部缺血、脂質(zhì)過氧化、興奮性氨基酸毒性、離子紊亂、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)細(xì)胞凋亡等機(jī)制，產(chǎn)生一系列的級聯(lián)反應(yīng)導(dǎo)致自身破壞的過程，是最具破壞性的階段[10]，因此近年來，針對繼發(fā)性損傷后微環(huán)境的變化及調(diào)控成為了研究脊髓損傷的熱點(diǎn)。研究表明，針灸治療對于SCI 所造成截癱的恢復(fù)有肯定的促進(jìn)作用，同時(shí)改善二便功能、緩解肢體痙攣、減輕截癱性疼痛等并發(fā)癥、后遺癥等方面有較好的療效[11]。夾脊電針是在針刺夾脊穴后，將導(dǎo)線正負(fù)極交換通量以輸出脈沖電流，在脊髓損傷嚴(yán)重的脊髓組織及周圍組織針刺穴位后再提供電場的刺激，使與之相互作用直接而形成一種利于刺激軸突神經(jīng)細(xì)胞再生、促進(jìn)損傷神經(jīng)功能快速恢復(fù)功能的刺激環(huán)境之一[12]。

脊髓損傷后肢運(yùn)動(dòng)功能會(huì)嚴(yán)重減退，BBB 評分法是應(yīng)用最為廣泛，客觀性較強(qiáng)的評價(jià)動(dòng)物肢體運(yùn)動(dòng)功能量表[13]；本研究通過BBB 評分觀察大鼠肢體運(yùn)動(dòng)功能狀況，結(jié)果顯示Model 組大鼠造模后出現(xiàn)雙側(cè)后肢癱瘓，活動(dòng)明顯受限癥狀，同時(shí)觀察脊髓損傷后大鼠脊髓組織病理發(fā)現(xiàn)脊髓損傷后大鼠脊髓組織出現(xiàn)疏松，脊髓組織出現(xiàn)大量出血灶及淋巴細(xì)胞浸潤，神經(jīng)軸突因外傷、擠壓或缺血而受損，灰質(zhì)內(nèi)有神經(jīng)元?dú)埓妫藵饪s，體積變小甚至消失，白質(zhì)內(nèi)可見大量的小脂滴形成大量的空泡細(xì)胞。經(jīng)夾脊電針治療7 天后，大鼠BBB 評分升高，可活動(dòng)一定范圍。脊髓組織出血點(diǎn)面積減少，淋巴細(xì)胞浸潤減少，神經(jīng)元細(xì)胞出現(xiàn)修復(fù)現(xiàn)象，出現(xiàn)一定量髓鞘再生，表明夾脊電針能改善脊髓損傷大鼠脊髓組織病理性損傷，進(jìn)而改善大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能。這與課題組前期研究結(jié)果較為一致[14-15]。

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育髓鞘形成過程中，少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞（OPCs）增殖并遷移到最終目的地，最終分化為成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞，形成髓鞘軸突[16]。脊髓損傷后，髓鞘出現(xiàn)大量死亡，軸突脫髓鞘，進(jìn)而影響肢體功能，因此少突膠質(zhì)細(xì)胞的成熟活化在髓鞘再生中起到重要作用[17-19]。DR6 是少突膠質(zhì)細(xì)胞的一個(gè)負(fù)性調(diào)控因子，其在大腦及神經(jīng)細(xì)胞中有大量表達(dá)，且與神經(jīng)元細(xì)胞和神經(jīng)軸索的退化凋亡密切相關(guān)[20]。研究發(fā)現(xiàn)在少突膠質(zhì)細(xì)胞中過表達(dá)DR6 能導(dǎo)致神經(jīng)元的凋亡，但抑制DR6 表達(dá)可促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞成熟、髓鞘形成及再生，DR6 基因缺失的小鼠在兩種脫髓鞘模型中均表現(xiàn)出增強(qiáng)的再髓鞘形成[3]，因此調(diào)控DR6 表達(dá)對于少突膠質(zhì)細(xì)胞成熟活化，進(jìn)而改善髓鞘再生起到了關(guān)鍵的作用。本研究觀察了夾脊電針對脊髓損傷大鼠脊髓組織DR6 蛋白及DR6mRNA 表達(dá)的影響，同時(shí)通過檢測少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白CNpase 蛋白的表達(dá)，CNPase是一種在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中高水平存在的酶，是少突膠質(zhì)細(xì)胞的特異性標(biāo)記蛋白[21]。試圖闡明夾脊電針對少突膠質(zhì)細(xì)胞活化的調(diào)控作用，馬睿杰等[22]研究同樣發(fā)現(xiàn)電針可促進(jìn)脊髓損傷組織成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞的增殖分化，進(jìn)而促使脊髓損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)，與本研究發(fā)現(xiàn)電針促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞分化結(jié)果相一致。

總之，電針夾脊穴治療脊髓損傷的作用機(jī)制可能通過抑制脊髓組織中DR6 mRNA 及蛋白表達(dá)，促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞活化，改善損傷脊髓組織損傷微環(huán)境，促使髓鞘形成與再生，改善脊髓損傷，但在本課題中對DR6 與少突膠質(zhì)細(xì)胞之間具體調(diào)控機(jī)制尚未闡明，需進(jìn)一步的深入研究。