皇菊元?dú)獠璧臎_泡工藝與生物活性研究

邵繼寬，王媛婷，李鈺，田星，歐陽瑤力，劉石峰，彭彩云

〔摘要〕 目的 以金絲皇菊為主要原料，輔以玫瑰花、枸杞子、紅棗、桂圓，研制皇菊元?dú)獠?，確定最佳復(fù)配比例和最佳沖泡工藝，并評(píng)價(jià)其抗氧化和降血糖活性。方法 以茶湯的感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定最佳的復(fù)配比例；通過單因素和正交試驗(yàn)確定茶水比、沖泡溫度、沖泡時(shí)間對(duì)茶品質(zhì)的影響，以此獲得皇菊元?dú)獠璧淖罴褯_泡工藝。通過測(cè)定茶對(duì)DPPH、ABTS和超氧陰離子自由基的清除率以及α-葡萄糖苷酶的抑制率，評(píng)價(jià)其抗氧化和降血糖活性。結(jié)果 皇菊元?dú)獠璧母泄僭u(píng)價(jià)得分最高的原料配比為金絲皇菊0.9 g，玫瑰花0.8 g，紅棗1.0 g，枸杞子1.2 g，龍眼肉1.2 g。選用80 mL 90 ℃的蒸餾水沖泡皇菊元?dú)獠?5 min時(shí)，茶湯中黃酮、多酚等有效成分的含量最高，且對(duì)DPPH、ABTS和超氧陰離子的清除率分別為46.36%、44.44%、44.00%，對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率為40.00%。結(jié)論 優(yōu)化復(fù)配比例與沖泡工藝得到的黃菊元?dú)獠韪黜?xiàng)指標(biāo)最佳，具有一定的抗氧化和降血糖功效。

〔關(guān)鍵詞〕 皇菊元?dú)獠?；沖泡工藝；抗氧化活性；降血糖活性；金絲皇菊；菊科

〔中圖分類號(hào)〕R283.6? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ? 〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０23.07.011

Brewing technology and biological activity of Huangju Yuanqi Tea

SHAO Jikuan1， WANG Yuanting1， LI Yu1， TIAN Xing1， OUYANG Yaoli2， LIU Shifeng2， PENG Caiyun1*

1. TCM & Ethnomedicine Innovation & Development International Laboratory， School of Pharmacy， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 2. Hunan Kangdejia Forestry Technology Co.， Ltd， Yongzhou， Hunan 425600， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Objective To study the process of Huangju Yuanqi Tea with Huangju [Dendranthema morifolium （Ramat.） Tzvel.] as the main raw material， and Meiguihua （Rosa rugosa Thunb.）， Gouqizi （Lycium barbarum L.）， Hongzao （Ziziphus jujuba Mill.） and Guiyuan （Dimocarpus longan Lour.） as auxiliary materials， to determine the optimal ratio of those raw materials and brewing technology， and to evaluate the antioxidant effect and hypoglycemic activities of the tea. Methods The sensory evaluation score of the tea was taken as an index to determine the optimal ratio of the raw materials. The single factor and orthogonal test was carried out to explore the effects of tea-water ratio， brewing temperature and brewing time on the tea quality， so as to obtain the best brewing technology of Huangju Yuanqi Tea. The antioxidant and hypoglycemic activities of the tea were evaluated by measuring the scavenging rates of DPPH， ABTS and superoxide anion radicals and the inhibition rate of α-glucosidase. Results When the content of the raw materials of Huangju Yuanqi Tea was as follows： Huangju [Dendranthema morifolium （Ramat.） Tzvel.] 0.9 g， Meiguihua （Rosa rugosa Thunb.） 0.8 g， Hongzao （Ziziphus jujuba Mill.） 1.0 g， Gouqizi （Lycium barbarum L.） 1.2 g， and Longyanrou （Dimocarpus longan Lour.） 1.2 g， its sensory evaluation score was the highest. When the tea was brewed with 80 mL of distilled water at 90 ℃ for 15 min， the content of flavonoids， polyphenols and other effective ingredients in the tea reached the highest， and the scavenging rates of DPPH， ABTS and superoxide anion radicals were 46.36%， 44.44% and 44.00% respectively， and the inhibition rate of α-glucosidase was 40.00%. Conclusion Huangju Yuanqi Tea obtained through the above brewing process has the optimal indexes and has certain antioxidant and hypoglycemic effects.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 Huangju Yuanqi Tea; brewing technology; antioxidant activity; hypoglycemic activity; Huangju [Dendranthema morifolium （Ramat.） Tzvel.]; Compositae

當(dāng)今社會(huì)由于競(jìng)爭(zhēng)激烈、壓力過大、飲食不當(dāng)?shù)戎T多因素，導(dǎo)致許多人的身體都處于一種亞健康的狀態(tài)，長(zhǎng)此以往將會(huì)引起諸多疾病的發(fā)生。治未病作為中醫(yī)學(xué)的核心理念之一，是指通過合理飲食、適當(dāng)運(yùn)動(dòng)、規(guī)范作息及中草藥食療等多種措施，調(diào)養(yǎng)體質(zhì)，增強(qiáng)身體的抗病能力[1]。其中，花茶作為一種通過直接飲用“治未病”的天然藥食同源草本茶，具備取材便利、不良反應(yīng)小和價(jià)格實(shí)惠等優(yōu)勢(shì)，適合現(xiàn)代快節(jié)奏生活，也契合了年輕人的時(shí)尚消費(fèi)觀。

皇菊是菊科菊花[Dendranthema morifolium （Ramat.）Tzvel.]的傳統(tǒng)藥食兩用品種，又稱“金絲皇菊”，具有散風(fēng)清熱、平肝明目、清熱解毒的功效，可治療風(fēng)熱感冒、頭痛眩暈、目赤腫痛、眼目昏花、瘡癰腫毒等[2]?，F(xiàn)代科學(xué)研究結(jié)果表明，黃酮、多糖和多酚類化合物是菊花的主要活性成分[3-4]。菊花中的多糖和黃酮類化合物具有抗氧化、延緩衰老、降血糖和預(yù)防心血管疾病的作用[5]。多酚類化合物對(duì)自由基也有較強(qiáng)的清除活性，具有較好的抗氧化功效[6]。

皇菊元?dú)獠枰越鸾z皇菊為主要原料，輔以玫瑰花、枸杞子、紅棗和龍眼肉組方。其中，玫瑰花具有延緩衰老、抗腫瘤、降血脂的功能[7]；枸杞子具有抗衰老、提高免疫力、降糖降脂等功效[8]；紅棗可以抗衰老、調(diào)節(jié)免疫力[9]；龍眼肉能養(yǎng)心脾、補(bǔ)氣血、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老[10]。元?dú)鈱W(xué)說作為中醫(yī)理論體系的重要組成部分，在延緩衰老方面具有重要指導(dǎo)意義，且現(xiàn)代臨床諸如非酒精性脂肪肝、腦梗死、糖尿病、腫瘤、白血病、老年癡呆等疑難雜癥或危急重癥多存在元?dú)馓摀p[11]。皇菊元?dú)獠柚薪鸾z皇菊、枸杞子、紅棗等原料具有延緩衰老、提高免疫力、降糖、降脂、養(yǎng)心脾、補(bǔ)氣血等多種功效，故冠以“元?dú)狻敝?/p>

本研究以皇菊元?dú)獠璨铚卸喾?、黃酮的含量以及感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用單因素和正交試驗(yàn)確定茶水比、浸提溫度及浸提時(shí)間對(duì)茶品質(zhì)的影響，研究了皇菊元?dú)獠璧淖罴褯_泡工藝；通過茶包提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制率和DPPH、ABTS、超氧陰離子自由基清除率的測(cè)定，評(píng)價(jià)了皇菊元?dú)獠杞笛?、抗氧化等生物活性，為皇菊類養(yǎng)生茶的開發(fā)提供物質(zhì)和理論基礎(chǔ)。

1 材料

1.1? 藥材來源

皇菊元?dú)獠瑁航鸾z皇菊干花、玫瑰（Rosa rugosa Thunb.）花干花、枸杞子（Lycium barbarum L.）、紅棗（Ziziphus jujuba Mill.）、龍眼肉（Dimocarpus longan Lour.）。藥材均由湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院王煒教授鑒定，采自湖南省永州市康德佳林業(yè)科技有限責(zé)任公司；玉米纖維袋（蕪湖塔夫曼戶外用品銷售有限公司）。

1.2? 主要試劑與儀器

沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品（B20851-20 mg，純度≥98%），阿卡波糖（B20003-20 mg）、α-葡萄糖苷酶（S10050-100U）、對(duì)硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷PNPG（S101387-1 g）、2，2′-聯(lián)氨-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺鹽ABTS（S19198-1 g）、維生素C標(biāo)準(zhǔn)品（B21293-20 mg，純度≥99%）均購自上海源葉生物科技有限公司；DNS試劑（D7800-100 mL）、磷酸鹽緩沖液（P299405-500 mL）、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（SR8250-20 mg，純度≥98%）、Tris-HCl（三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽）緩沖液（T1150-500 mL）均購自北京索萊寶科技有限公司；2，2-二（4-叔辛基苯基）-1-苦肼基自由基DPPH [D195243-25 mg，阿拉丁試劑（上海）有限公司]，福林酚試劑（47641-50 mL，美國(guó)Sigma公司），過硫酸鉀、乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、鄰苯三酚、氫氧化鈉均為分析純。

752型紫外可見分光光度計(jì)（上海菁華科技儀器有限公司）；Mettler-Toledo AE100S型電子分析天平（梅特勒-托利多公司）；HH-21-6型恒溫水浴鍋（上?？缕顑x器設(shè)備有限公司）；Micro17R型高速冷凍離心機(jī)（賽默飛世爾科技有限公司）。

2 方法

2.1? 皇菊元?dú)獠铔_泡液的工藝流程

選取皇菊（干花）、玫瑰花（干花）、枸杞子、紅棗（切片）、龍眼肉進(jìn)行稱量，按照配比標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行復(fù)配，按質(zhì)量要求配好后放入小袋，封口處理，確保原料不會(huì)從封口處溢出。

2.2? 皇菊元?dú)獠枧浞絻?yōu)化

配方以干制金絲皇菊0.9 g為基準(zhǔn)，配以玫瑰花、紅棗、枸杞子、龍眼肉4種原料做成袋泡茶，進(jìn)行單因素試驗(yàn)。在水溫90 ℃，用水量140 mL，泡茶時(shí)間為10 min的條件下制得樣品溶液。在預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以感官評(píng)分為指標(biāo)，縮小配比范圍，確定輔料配比按照：玫瑰花用量（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g），紅棗用量（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g），枸杞子用量（1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 g），龍眼肉用量（1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 g）。綜合袋泡茶茶湯湯色、香氣、滋味和沖泡性的結(jié)果，以感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)確定各種原料最佳適用量。

感官評(píng)分表參照《茶葉感官評(píng)審方法》GB/T 23776—2018和《袋泡茶》GB/T 24690—2018制定，根據(jù)金絲皇菊（干花）、玫瑰花（干花）、枸杞子、紅棗（切片）、龍眼肉的特性進(jìn)行一些修改[12-13]。邀請(qǐng)10位食品專業(yè)的同學(xué)組建感官評(píng)價(jià)小組，品嘗不同處理制得的茶湯，并對(duì)其湯色、香氣、滋味3個(gè)方面進(jìn)行感官評(píng)分，以百分制計(jì)分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表1。

2.3? 皇菊元?dú)獠铔_泡工藝優(yōu)化

2.3.1? 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)? 取最佳配比下袋泡茶樣品，探究茶水比（1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35）、沖泡水溫（60、70、80、90、100 ℃）、沖泡時(shí)間（0、5、10、15、20 min）對(duì)茶湯中多酚、黃酮等主要有效成分的影響[14]。

2.3.1.1? 茶水比? 將復(fù)配的皇菊元?dú)獠璨璋謩e按茶水比為1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35注入100 ℃蒸餾水，沖泡10 min，趁熱過濾，進(jìn)行茶湯中多酚、黃酮含量的測(cè)定。

2.3.1.2? 沖泡時(shí)間? 將復(fù)配的皇菊元?dú)獠璨璋?，按照上一?shí)驗(yàn)結(jié)果的茶水比注入100 ℃蒸餾水，分別浸提0、5、10、15、20 min，檢測(cè)指標(biāo)同上。

2.3.1.3? 沖泡水溫? 將復(fù)配的皇菊元?dú)獠璨璋?，按照上述?shí)驗(yàn)結(jié)果的茶水比和沖泡時(shí)間，分別加入已預(yù)熱到相應(yīng)溫度的蒸餾水，在60、70、80、85、90 ℃的蒸餾水中進(jìn)行沖泡，檢測(cè)指標(biāo)同上。

2.3.2? 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)? 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取茶水比、沖泡水溫和沖泡時(shí)間為主要影響因素，以茶湯中多酚類和黃酮類物質(zhì)的含量為響應(yīng)值，進(jìn)行L9（33）的正交試驗(yàn)。按綜合評(píng)分=（試驗(yàn)測(cè)得總黃酮含量/試驗(yàn)測(cè)得總黃酮含量最大值）×30%+（試驗(yàn)測(cè)得總多酚含量/試驗(yàn)測(cè)得總多酚含量最大值）×30%+試驗(yàn)感官評(píng)分×40%，進(jìn)行綜合評(píng)定，確定最佳沖泡工藝參數(shù)。試驗(yàn)因素水平表見表2。

2.4? 理化指標(biāo)測(cè)定

根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)《茶水浸出物測(cè)定》（GB/T 8305—2013）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定》（GB 5009.3—2016）、《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測(cè)定》（GB 5009.4—2016）檢測(cè)皇菊元?dú)獠柚兴趾俊⒒曳趾亢退鑫锖俊?/p>

2.5? 活性成分含量測(cè)定

2.5.1? 多酚物質(zhì)測(cè)定? 參考紀(jì)鳳娣等[15]的實(shí)驗(yàn)方法，采用福林酚法進(jìn)行測(cè)定。

以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取制好的袋泡茶，加入200 mL 90 ℃蒸餾水浸提15 min，搖勻備用（8 000 r/min離心10 min，取上清液，離心半徑2.5 cm）。精密量取1.0 mL待測(cè)樣品溶液于10 mL棕色量瓶中，加入4 mL蒸餾水，混勻，靜置3～5 min，加福林-苯酚試劑1 mL，充分混勻后加入3 mL 75 g/L碳酸鈉溶液，振蕩搖勻，于75 ℃水浴中避光反應(yīng)30 min，在760 nm波長(zhǎng)下比色測(cè)定吸光度。計(jì)算袋泡茶中多酚的含量，計(jì)算公式如下。

c=■（1）

？棕=■（2）

式中：A—吸光度；c—樣品中多酚組分濃度（μg/mL）；C0—空白中多酚組分濃度（μg/mL）；D—稀釋倍數(shù)；V—樣品溶液消耗量（mL）；m—樣品質(zhì)量（g）。

2.5.2? 總黃酮類物質(zhì)的測(cè)定? 參考楊婧娟等[16]的實(shí)驗(yàn)方法，采用分光光度法進(jìn)行測(cè)定。

以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，采用硝酸鋁-亞硝酸鈉比色法測(cè)定總黃酮的含量，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取制好的袋泡茶，加入200 mL 90 ℃蒸餾水浸提15 min。取茶湯100 mL，以3000 r/min離心10 min，離心半徑2.5 cm，取上清液，加入亞硝酸鈉溶液（50 g/L）0.5 mL，搖勻，靜止5 min，加入硝酸鋁（100 g/L）0.5 mL，搖勻，靜置，加入氫氧化鈉溶液（40 g/L）2.0 mL，搖勻，靜置，用30%乙醇定容。在波長(zhǎng)為508 nm處測(cè)吸光度。計(jì)算袋泡茶中黃酮類化合物的含量，計(jì)算公式如下。

c=■（3）

？棕=■（4）

式中：A—吸光度；c—樣品中黃酮組分濃度（μg/mL）；C0—空白中黃酮組分濃度（μg/mL）；D—稀釋倍數(shù)；V—樣品溶液消耗量（mL）；m—樣品質(zhì)量（g）。

2.6? 抗氧化活性

2.6.1? DPPH自由基清除能力測(cè)定[17]? 取5 mg的DPPH溶于蒸餾水并定容至100 mL，超聲處理5 min，得到DPPH溶液，避光保存，有效期5 d。取100 mL茶湯以3 000 r/min離心10 min，離心半徑2.5 cm，取上清液作樣品溶液。取5 mL DPPH溶液，加入5 mL待測(cè)樣品溶液，混勻，避光處理30 min，在517 nm下測(cè)得吸光度記為A1，對(duì)照組以5 mL蒸餾水代替DPPH溶液測(cè)吸光度，記為A2，空白組以5 mL蒸餾水代替待測(cè)樣品溶液，測(cè)吸光度，記為A0。以維生素C為陽性對(duì)照，按照上述方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。按照下列公式計(jì)算DPPH 自由基清除率。

DPPH自由基清除率=（1-■）×100%（5）

2.6.2? 超氧陰離子自由基清除率測(cè)定[17]? 參照王炬等的實(shí)驗(yàn)方法并略做調(diào)整。取100 mL茶湯以3 000 r/min離心10 min，離心半徑2.5 cm，取上清液作樣品溶液。取5.7 mL 0.05 mol/L Tris-HCl（三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽）緩沖液（pH=8.20）、0.1 mL 6 mmol/L鄰苯三酚溶液，加入0.2 mL的待測(cè)樣品溶液，混勻，25 ℃水浴反應(yīng)6 min，在320 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度，記為A1，空白組以等體積的蒸餾水代替樣品提取液（Tris-HCl緩沖液）測(cè)定吸光度，記為A0，對(duì)照組以等體積的蒸餾水代替鄰苯三酚溶液測(cè)定吸光度，記為A2。以維生素C為陽性對(duì)照，按照上述方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。按照下列公式計(jì)算超氧陰離子自由基清除率。

超氧陰離子自由基清除率=（1-■）×100%（6）

2.6.3? ABTS自由基清除率測(cè)定[17]? 取100 mL茶湯以3 000 r/min離心10 min，離心半徑2.5 cm，取上清液作樣品溶液。將7 mmol/L ABTS溶液與2.45 mmol/L過硫酸鉀溶液按體積比1∶1混合，避光放置16 h以生成ABTS陽離子自由基（ABTS溶液現(xiàn)用現(xiàn)配），使用前用蒸餾水進(jìn)行稀釋。取2 mL ABTS稀釋液，加入0.5 mL的待測(cè)樣品溶液，混勻，37 ℃水浴反應(yīng)6 min，在734 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度，記為A1，空白組以蒸餾水代替不同濃度的待測(cè)樣品溶液測(cè)吸光度，記為A0。以維生素C為陽性對(duì)照，按照上述方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。按照下列公式計(jì)算ABTS自由基清除率。

ABTS自由基清除率=（■）×100%（7）

2.7? 體外降血糖活性測(cè)定[18]

取100 mL茶湯以3 000 r/min離心10 min，離心半徑2.5 cm，取上清液作樣品溶液。試驗(yàn)分為樣液反應(yīng)組、樣液對(duì)照組、空白組。于25 mL的具塞試管，先加入0.2 mL磷酸鹽緩沖液、待測(cè)樣品溶液2.5 mL和37 ℃水浴的酶液0.5 mL（0.5 U/mL），于37 ℃反應(yīng)15 min后取出；加入PNPG溶液0.25 mL（2.5 mmol/L），于37 ℃條件反應(yīng)25 min；最后加入Na2CO3溶液12.5 mL（1 mol/L）終止反應(yīng)。反應(yīng)終止后定容到25 mL，以阿卡波糖（0.02 mg/mL）作為陽性對(duì)照試驗(yàn)，于405 nm處測(cè)定吸光度。按照下列公式計(jì)算α-葡萄糖苷酶抑制率。

α-葡萄糖苷酶抑制率=（1-■）×100%（8）

3 結(jié)果與分析

3.1? 皇菊元?dú)獠枳罴言吓浔鹊拇_定

從表3可以看出，綜合袋泡茶茶湯湯色、香氣、滋味和感官評(píng)分的結(jié)果，確定原料配比為金絲皇菊0.9 g、玫瑰花0.8 g、紅棗1.0 g、枸杞子1.2 g、龍眼肉1.2 g時(shí)，產(chǎn)品感官評(píng)分最高。

3.2? 皇菊元?dú)獠枳罴褯_泡工藝參數(shù)的確定

3.2.1? 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析

3.2.1.1? 最佳茶水比的確定? 茶水比對(duì)皇菊元?dú)獠杩傸S酮和總多酚含量的影響見圖1—2。

由圖1和圖2可知，當(dāng)加水量為80 mL（茶水比為1∶15）時(shí)，得到的總黃酮含量和總多酚含量最高。通過單因素方差分析可知，茶水比對(duì)總黃酮和總多酚含量的影響并不顯著。加水量越多，得到的茶湯風(fēng)味越淡，總黃酮和總多酚含量越低，這可能是因?yàn)榧铀^多會(huì)沖淡茶湯的風(fēng)味和功能成分的含量。但加水量過少會(huì)使茶湯出現(xiàn)過于厚重的甜膩現(xiàn)象，故加水量為80～100 mL（茶水比為1∶15～1∶20）時(shí)較為適宜。

3.2.1.2? 最佳沖泡時(shí)間的確定? 皇菊元?dú)獠璧臎_泡時(shí)間<2 min時(shí)，由于時(shí)長(zhǎng)較短、總黃酮和總多酚等有效物質(zhì)溶出量較少、滋味平淡；而浸泡時(shí)間超出15 min時(shí)會(huì)使茶湯發(fā)生冷卻后渾濁現(xiàn)象，故選擇沖泡時(shí)間為3～15 min進(jìn)行單因素試驗(yàn)。不同沖泡時(shí)間對(duì)皇菊元?dú)獠杩傸S酮和總多酚含量的影響見圖3—4。

由圖3和圖4可知，隨著沖泡時(shí)間的增加，總黃酮的溶出率隨之升高，沖泡時(shí)間為5 min時(shí)總黃酮溶出率達(dá)到一個(gè)峰值后先下降后持續(xù)升高，10 min時(shí)超過第一個(gè)峰值并繼續(xù)升高；總多酚的溶出率隨著沖泡時(shí)間的增加逐漸升高，沖泡時(shí)間為10 min時(shí)總多酚的溶出率最高，之后隨著沖泡時(shí)間的延長(zhǎng)，總多酚溶出率開始降低，其原因也許是沖泡時(shí)間太長(zhǎng)，多酚類化合物被氧化所致。綜合以上結(jié)果，選擇最佳沖泡時(shí)間為15 min。

3.2.1.3? 最佳沖泡溫度的確定? 沖泡溫度過低，茶葉中的內(nèi)容物溶解速度過慢；而浸泡溫度超過100 ℃時(shí)，條件不易達(dá)到且溫度穩(wěn)定性難以控制。故選擇泡茶溫度在60～100 ℃進(jìn)行單因素試驗(yàn)。不同沖泡溫度皇菊元?dú)獠鑼?duì)總黃酮和總多酚含量的影響見圖5—6。

由圖5—6可知，隨著溫度的升高，總黃酮和總多酚的浸出量逐漸增加，到90 ℃時(shí)達(dá)到最高，之后隨著溫度升高，總黃酮和總多酚的含量逐漸降低。根據(jù)以上結(jié)果，選擇最佳沖泡溫度為90 ℃。

3.2.2? 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析? 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選取皇菊元?dú)獠铔_泡溫度、沖泡時(shí)間和茶水比3個(gè)因素進(jìn)行L9（33）正交試驗(yàn)，按綜合評(píng)分=（試驗(yàn)測(cè)得總黃酮含量/試驗(yàn)測(cè)得總黃酮含量最大值）×30%+（試驗(yàn)測(cè)得總多酚含量/試驗(yàn)測(cè)得總多酚含量最大值）×30%+（試驗(yàn)感官評(píng)分/試驗(yàn)感官評(píng)分最大值）×40%，進(jìn)行綜合評(píng)分，確定皇菊元?dú)獠枳罴褯_泡工藝參數(shù)。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果分析見表4。

由表4可知，影響元?dú)獠璐莶铔_泡條件各因素的主次順序?yàn)椋篈>C>B；最佳沖泡條件為A3B3C1，即沖泡水溫90 ℃、沖泡時(shí)間15 min、茶水比1∶15（加水量80 mL），此時(shí)綜合評(píng)分最高為95.6分。由表5方差分析可得，沖泡時(shí)間和茶水比為非顯著影響因子（P>0.05），對(duì)沖泡結(jié)果影響較小；沖泡溫度為顯著影響因子（P<0.05），在沖泡過程中起主導(dǎo)作用。

3.3? 理化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

皇菊元?dú)獠柚兴趾俊⒒曳趾亢退鑫锖糠謩e為6.57%±0.4%（≤7.5%）、3.84%±0.2%（≤7.5%）、37.5%±0.5%（≥32%），均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

3.4? 皇菊元?dú)獠杩寡趸钚栽u(píng)價(jià)結(jié)果與分析

在最佳沖泡工藝（用80 mL 90 ℃的蒸餾水沖泡皇菊元?dú)獠?5 min）和最佳原料配比（金絲皇菊0.9 g，玫瑰花0.8 g，紅棗1.0 g枸杞子1.2 g，龍眼肉1.2 g）條件下，測(cè)定皇菊元?dú)獠璧腄PPH、超氧陰離子和ABTS自由基清除率，與維生素C標(biāo)準(zhǔn)品的自由基清除率進(jìn)行比較。結(jié)果表明，本配方皇菊元?dú)獠鑼?duì)DPPH、超氧陰離子和ABTS自由基的清除率分別為46.36%、44.00%和44.44%，說明本配方皇菊元?dú)獠杈哂幸欢ǖ目寡趸π?。以維生素C標(biāo)準(zhǔn)品為陽性對(duì)照，測(cè)得維生素C標(biāo)準(zhǔn)品（0.05 mg/mL）的自由基清除率為89.75%，遠(yuǎn)高于本配方皇菊元?dú)獠鑼?duì)DPPH、超氧陰離子和ABTS自由基的清除率，這可能由于所有食材均已以飲片形式直接沖泡，沒有經(jīng)過粉碎，因此其浸出物濃度偏低，但是花茶經(jīng)過多次沖泡，應(yīng)該可以使其中的活性成分分批次溶于水中而被飲用攝取，達(dá)到較高的抗氧化效果。

3.5? 皇菊元?dú)獠杞笛腔钚栽u(píng)價(jià)結(jié)果與分析

在最佳沖泡工藝（用80 mL 90 ℃的蒸餾水沖泡皇菊元?dú)獠?5 min）和最佳原料配比（金絲皇菊0.9 g、玫瑰花0.8 g、紅棗1.0 g、枸杞子1.2 g、龍眼肉1.2 g）條件下，測(cè)定皇菊元?dú)獠瑁?.375 mg/mL）對(duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制率為40.0%，與阿卡波糖0.02 mg/mL對(duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制率39.83%對(duì)比，兩者抑制作用相當(dāng)（P>0.05），說明本配方皇菊元?dú)獠璐莶杈哂休^好的降血糖功效，可以作為具有日常降血糖保健作用的袋泡茶。

4 結(jié)論

以金絲皇菊為主要原料，輔以玫瑰花、枸杞子、紅棗、龍眼肉，研制皇菊元?dú)獠?。以感官評(píng)分為指標(biāo)，得出其最佳原料配比為金絲皇菊0.9 g，玫瑰花0.8 g，紅棗1.0 g、枸杞子1.2 g、龍眼肉1.2 g。通過單因素試驗(yàn)，研究了沖泡水溫、沖泡時(shí)間和茶水比對(duì)袋泡茶品質(zhì)的影響，確定了各因素的最佳水平；在此基礎(chǔ)上，通過正交試驗(yàn)對(duì)沖泡工藝進(jìn)行優(yōu)化，得到皇菊元?dú)獠璧淖罴褯_泡工藝參數(shù)為沖泡水溫90 ℃、沖泡時(shí)間15 min、加水量80 mL。此時(shí)，皇菊元?dú)獠鑼?duì)DPPH、超氧陰離子和ABTS自由基的清除率分別為46.36%、44.00%和44.44%，具有一定的抗氧化活性?；示赵?dú)獠鑼?duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制率為40.00%，表現(xiàn)了一定降血糖活性?；示赵?dú)獠璧难兄?，豐富了抗氧化及降血糖等功能性食品的選擇，市場(chǎng)前景廣闊，是一種理想的日常飲品。

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（本文編輯? 蘇? 維）