貴州鼠尾草化學(xué)成分研究

趙玉敏, 周謠, 劉翰飛, 李金玉, 婁華勇, 潘衛(wèi)東*

貴州鼠尾草化學(xué)成分研究

趙玉敏1,2, 周謠2,3, 劉翰飛2,3, 李金玉2,3, 婁華勇2,3, 潘衛(wèi)東2,3*

(1. 貴州中醫(yī)藥大學(xué)，貴陽(yáng) 550025；2. 貴州省天然產(chǎn)物研究中心，貴陽(yáng) 550014；3. 貴州醫(yī)科大學(xué)省部共建藥用植物功效與利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴陽(yáng) 550014)

為了解貴州鼠尾草()的化學(xué)成分，運(yùn)用色譜分離技術(shù)，從其95%乙醇提取物中分離得到16個(gè)化合物，經(jīng)波譜數(shù)據(jù)分析分別鑒定為：-倍半水芹烯(1)、6-(7,11-二甲基-10-乙烯亞基)-環(huán)己烯酮(2)、-沒藥烯(3)、-姜黃烯(4)、3,4-二羥基苯乙酸甲酯(5)、香草醛(6)、姜油酮 (7)、6-姜烯酚 (8)、阿魏酸十八烷酯(9)、維生素E醌 (10)、5-羥甲基-2-糠醛(11)、硫代乙酸酐(12)、吲唑(13)、棕櫚酸(14)、角鯊烯(15)和二十六烷(16)。其中，化合物2為新天然產(chǎn)物，除化合物3、4和6外，所有化合物均為首次從貴州鼠尾草中分離得到，此外，化合物2、5、9和12為首次從唇形科(Lamiaceae)植物中分離得到，化合物1和15為首次從鼠尾草屬植物中分離得到。

貴州鼠尾草；分離純化；結(jié)構(gòu)鑒定；化學(xué)成分

貴州鼠尾草()是唇形科(Lamia- ceae)鼠尾草屬一年生草本植物[1]，主要分布在四川、貴州以及云南等地，多生長(zhǎng)于多巖石的山坡、林下和水溝邊，海拔530～1 300 m的地區(qū)[2]。貴州鼠尾草在貴州全省廣泛分布，是一味典型的特色藥用植物，其味苦、辛，性寒，具有清熱解毒、涼血止血、活血消腫、利濕之功效，民間常以其全草入藥，用于治療瘡毒、吐血、咳血、血痢、濕熱泄痢、瘡癰腫痛及跌打損傷等[3]。相比于藥理活性的研究，貴州鼠尾草化學(xué)成分的研究報(bào)道相對(duì)較少，雖有學(xué)者研究了其他地方生長(zhǎng)的貴州鼠尾草的化學(xué)成分，從中報(bào)道了三萜、二萜、倍半萜及其苷類等[4]，但鮮有學(xué)者對(duì)貴州這一道地產(chǎn)區(qū)生長(zhǎng)的貴州鼠尾草的化學(xué)成分進(jìn)行研究，目前為止相關(guān)報(bào)道仍然較少, 主要從貴州興義生長(zhǎng)的貴州鼠尾草中報(bào)道了少量的三萜、甾體和長(zhǎng)鏈烷烴類化合物[5]。為了進(jìn)一步深入闡明不同地區(qū)生長(zhǎng)的貴州鼠尾草植物化學(xué)成分的差異性，本研究選取生長(zhǎng)于貴州遵義的貴州鼠尾草進(jìn)行系統(tǒng)研究，從其95%的乙醇提取物中獲得了16個(gè)單體化合物，包括倍半萜類化合物4個(gè)、酚酸類化合物6個(gè)、長(zhǎng)鏈烷烴類化合物3個(gè)以及其他類型結(jié)構(gòu)化合物3個(gè)。

1 材料和方法

1.1 材料

貴州鼠尾草植物于2020年8月采集于貴州省遵義市綏陽(yáng)縣寬闊鎮(zhèn)。標(biāo)本經(jīng)貴陽(yáng)市藥用植物園侯小琪副研究員鑒定為唇形科鼠尾草屬植物貴州鼠尾草()，標(biāo)本保存在貴州省中國(guó)科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(樣品號(hào)：20200802)。

柱色譜正相色譜硅膠為青島海洋化工有限公司產(chǎn)品(60～80、200～300、300～400目)；薄層色譜正相硅膠板為青島海洋化工有限公司產(chǎn)品；凝膠Sephadex LH-20為瑞典Amersham Biosciences公司生產(chǎn)。

1.2 儀器和試劑

美國(guó)安捷倫公司Agilent 1100高效液相色譜儀;江蘇漢邦科技有限公司NP7005C半制備液相色譜儀; 昆山市超聲儀器有限公司KQ5200DE型超聲清洗器；德國(guó)Heidolph公司Hei-VAP DigitalG3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；美國(guó)瓦里安公司INOVA-400MHz、WIPM 500MHz、INOVA-600MHz核磁共振儀；瑞士梅特勒-托利多公司ME204E/02電子分析天平；美國(guó)惠普公司HP-5973質(zhì)譜儀；上海力辰邦西儀器科技有限公司ZF-1三用紫外分析儀；鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司DLSB-5/20低溫冷卻液循環(huán)泵。

實(shí)驗(yàn)中所用試劑(無(wú)水乙醇、三氯甲烷、石油醚、甲醇、乙酸乙酯等)為重蒸處理后的工業(yè)試劑；氘帶甲醇為薩恩化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司生產(chǎn)；半制備-高效液相色譜所用試劑(甲醇、乙腈)為薩恩化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司生產(chǎn)，純度均為色譜純；超純水為杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司生產(chǎn)的飲用純凈水；顯色劑：5%硫酸乙醇溶液，5%磷鉬酸乙醇溶液。

1.3 提取和分離

貴州鼠尾草干燥全草樣品(20 kg)，粉碎成粗粉后用95%的乙醇冷浸提取2次，每次2 h，合并提取液，減壓濃縮后得浸膏(1.3 kg)。浸膏以甲醇溶劑溶解分散，加入60～80目硅膠拌樣，揮發(fā)干燥后, 經(jīng)硅膠柱色譜進(jìn)行分段純化，以二氯甲烷-甲醇(1:0～ 0:1)梯度洗脫，經(jīng)TLC薄層色譜檢測(cè)合并主點(diǎn)相同的組分后共得到7組分(Fr. A～Fr. G)，進(jìn)一步對(duì)每個(gè)組分進(jìn)行系統(tǒng)分離純化。

Fr.A (123.1 g)經(jīng)MCI柱層析脫色素處理，以50%～100%甲醇梯度洗脫，得到6個(gè)組分(Fr.A1～ Fr.A6)。其中，F(xiàn)r.A3有不溶物析出，洗滌不溶物后得純品為化合物14 (2.0 g)。Fr.A2先后經(jīng)正相硅膠柱層析分離純化(石油醚:丙酮=100:1～1:1)、凝膠柱層析純化(三氯甲烷:甲醇=1:1)后，進(jìn)一步經(jīng)半制備HPLC純化(甲醇:水=70:30)后得到化合物8 (保留時(shí)間R=46 min, 65.5 mg)。Fr.A6經(jīng)正相硅膠柱色譜分離，以石油醚:丙酮=80:1洗脫后，得到Fr.A6-1～ Fr.A6-12。Fr.A6-3有白色粉末析出，為化合物15(186.7 mg); Fr.A6-2經(jīng)半制備HPLC純化(甲醇:水= 90:10)后分別得到化合物1 (R=12 min, 20.1 mg)、2 (R=15 min, 23.2 mg)、3 (R=25 min, 7.9 mg)和4 (R= 32 min, 33.7 mg)；Fr.A6-12經(jīng)正相硅膠柱色譜梯度洗脫(石油醚:丙酮=80:1～1:1)后，得到Fr.A6-12-1～ Fr.A6-12-9。Fr.A6-12-9經(jīng)凝膠柱色譜純化(三氯甲烷:甲醇=1:1)后得到3部分(A6-12-9-1～Fr.A6-12-9-3),Fr.A6-12-9-2進(jìn)一步經(jīng)正相硅膠柱層析(石油醚:丙酮=60:1～1:1)純化后，再經(jīng)半制備HPLC分離純化(乙腈:水=90:10)，得到化合物10 (R=39 min, 51.3 mg); Fr.A6-12-9-3經(jīng)聚酰胺柱色譜純化，以50%～100%甲醇梯度洗脫后，有白色粉末析出得到化合物9 (12.1 mg)。

Fr.B (74.1 g)經(jīng)MCI柱色譜分離，以40%～100%甲醇梯度洗脫，利用TLC檢測(cè)合并主點(diǎn)相同的部分,得到5個(gè)組分(Fr.B1～Fr.B5)。Fr.B1經(jīng)正相硅膠柱層析(石油醚:丙酮=50:1～1:1)洗脫，再經(jīng)半制備HPLC純化(甲醇:水=48:52)后，分別得到化合物6 (R=28 min, 21.3 mg)和7 (R=32 min, 6.1 mg)。

Fr.C (103.5 g)經(jīng)反相硅膠柱層析分離，以40%～ 100%甲醇梯度洗脫，利用TLC檢測(cè)合并主點(diǎn)相同的部分，得到8個(gè)組分(Fr.C1～Fr.C8)。Fr.C1經(jīng)正相硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇(50:1～1:1)梯度洗脫，再經(jīng)HPLC純化(甲醇:水=90:10)后得化合物11 (R= 48 min, 3.9 mg)。此外，F(xiàn)r.C1-5進(jìn)一步經(jīng)LH-20柱層析后得到化合物12 (20 mg)。Fr.C2經(jīng)正相硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇(20:1～1:1)梯度洗脫，再經(jīng)HPLC純化(甲醇:水=39:61)后得化合物5 (R=15 min, 11 mg)。Fr.C3經(jīng)正相硅膠柱層析純化(三氯甲烷:甲醇=50:1～1:1)后，再經(jīng)凝膠LH-20洗脫(三氯甲烷:甲醇=1:1)，最后經(jīng)半制備HPLC純化(甲醇:水=65:35)后得到化合物13 (R=18 min, 2.7 mg)。Fr.C6經(jīng)硅膠柱層析洗脫(三氯甲烷:甲醇=50:1～1:1)后，再經(jīng)MCI柱色譜分離(60%～100%甲醇梯度洗脫)以及凝膠柱色譜純化后，得到化合物16 (8.1 mg)。

1.4 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 黃色油狀液體; []D20+9.5° (0.21 CHCl3), ESI-MS205.1 [M + H]+, 分子式C15H24;1H NMR (600 MHz, CDCl3):6.14 (1H, dd,= 10.0, 2.4 Hz, H-2), 5.68 (1H, d,= 10.0 Hz, H-1), 5.10 (1H, t,= 7.1 Hz, H-10), 4.74 (2H, d,= 10.8 Hz, H-15), 2.44 (1H, dt,= 15.0, 4.2 Hz, H-4a), 2.28 (1H, m, H-4b), 2.21 (1H, m, H-6), 2.03 (1H, m, H-9a), 1.93 (1H, m, H-9b), 1.71 (1H, m, H-5), 1.68 (3H, s, H-13), 1.61 (3H, s, H-12), 1.51～1.57 (1H, m, H-7), 1.39 (1H, m, H-5), 1.37 (1H, m, H-8a), 1.20 (1H, m, H-8b), 0.87 (3H, d,= 7.2 Hz, H-14);13C NMR (150 MHz, CDCl3):135.4 (C-1), 129.6 (C-2), 143.9 (C-3), 30.5 (C-4), 34.4 (C-5), 40.7 (C-6), 36.7 (C-7), 24.6 (C-8), 26.2 (C-9), 124.9 (C-10), 131.4 (C-11), 17.8 (C-12), 25.9 (C-13), 16.0 (C-14), 110.0 (C-15)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道一致，故鑒定為-倍半水芹烯。

化合物2 黃色油狀液體；ESI-MS: 207.3 [M + H]+，結(jié)合該化合物氫譜和碳譜確定其分子式為C14H22O (表1)，表明有4個(gè)不飽和度。核磁共振氫譜顯示有3個(gè)明顯的甲基信號(hào)[H1.69 (3H, s), 1.61 (3H, s)和0.89 (3H, d,= 7.2 Hz)]和3個(gè)雙鍵氫信號(hào)[H6.84 (1H, d,= 10.2 Hz), 6.01 (1H, dd,= 10.2, 2.4 Hz)和5.09 (1H, t,= 7.2 Hz)]，其中包括1個(gè)典型的異戊烯基基團(tuán)。此外，核磁共振碳譜結(jié)合DEPT譜顯示14個(gè)碳信號(hào)包括了3個(gè)甲基、4個(gè)亞甲基、5個(gè)次甲基以及2個(gè)季碳，其中有2個(gè)不飽和雙鍵和1個(gè)不飽和羰基信號(hào)(C200.4)。進(jìn)一步根據(jù)該化合物的不飽和度，推測(cè)該化合物另外還具有1個(gè)環(huán)系骨架結(jié)構(gòu)。將碳譜信息進(jìn)行微譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢索表明，與已知化合物6-(7,11-二甲基-10-乙烯亞基)-環(huán)己烯酮一致[7]。該已知化合物為Biyouyanagin A的全合成中間體，在合成過程中分別產(chǎn)生了6、7和6、7兩種構(gòu)型，但這兩種構(gòu)型其手性中心化學(xué)位移值差異性較明顯，而化合物2的波譜數(shù)據(jù)與6、7構(gòu)型的數(shù)據(jù)一致，進(jìn)一步根據(jù)其旋光值[]D20+27.4° (0.07 CHCl3)一致。故鑒定為6-(7, 11-二甲基-10-乙烯亞基)-環(huán)己烯酮。

化合物3 黃色油狀液體；[]D20-132.1° (0.05 MeOH), ESI-MS:205.4 [M + H]+, 分子式為C15H24;1H NMR (600 MHz, CDCl3):5.41 (1H, m, H-2), 5.13 (1H, m, H-10), 4.75 (2H, d,= 10.2 Hz, H-14), 2.15～1.78 (7H, m, H-4, 6, 8, 9), 1.69 (3H, s, H-13), 1.65 (3H, s, H-15), 1.61 (3H, s, H-12), 1.65～ 1.43 (2H, m, H-5);13C NMR (150 MHz, CDCl3):30.9 (C-1), 121.0 (C-2), 133.9 (C-3), 31.6 (C-4), 28.5 (C-5), 39.9 (C-6), 154.4 (C-7), 35.1 (C-8), 27.0 (C-9), 124.5 (C-10), 131.6 (C-11), 25.8 (C-12), 17.9 (C-13), 107.2 (C-14), 23.6 (C-15)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道一致，故鑒定為-沒藥烯。

化合物4 淡黃色油狀液體; []D20+61.7° (0.31 MeOH), ESI-MS: 203.5 [M + H]+, 分子式C15H22;1H NMR (600 MHz, CDCl3):7.08 (4H, m, H-1, 2, 4, 5), 5.09 (1H, t,= 7.2 Hz, H-10), 2.65 (1H, m, H-7), 2.31 (3H, s, H-15), 1.87 (2H, m, H-9), 1.67 (3H, s, H-13), 1.59 (2H, m, H-8), 1.52 (3H, s, H-12), 1.21 (3H, d,= 7.0 Hz, H-14);13C NMR (150 MHz, CDCl3):127.0 (C-1, 5), 129.1 (C-2, 4), 135.2 (C-3), 144.8 (C-6), 39.1 (C-7), 38.6 (C-8), 26.3 (C-9), 124.7 (C-10), 131.4 (C-11), 17.8 (C-12), 25.8 (C-13), 22.6 (C-14), 21.1 (C-15)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道一致, 故鑒定為-姜黃烯。

化合物5 白色粉末; ESI-MS: 205.2 [M +Na]+, 分子式C9H10O4;1H NMR (600 MHz, CD3OD):6.68 (1H, d,= 7.8 Hz, H-5), 6.68 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.54 (1H, dd,= 8.0, 2.4 Hz, H-6), 3.64 (3H, s, H-9), 3.44 (2H, s, H-7);13C NMR (150 MHz, CD3OD):126.9 (C-1), 117.3 (C-2), 146.3 (C-3), 145.5 (C-4), 116.3 (C-5), 121.6 (C-6), 41.2 (C-7), 174.6 (C-8), 52.4 (C-9)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道一致，故鑒定為3,4-二羥基苯乙酸甲酯。

圖1 化合物1～16的結(jié)構(gòu)

表1 化合物2的核磁共振氫譜和碳譜數(shù)據(jù)(CDCl3)

化合物6 黃色油狀液體; ESI-MS: 153.2 [M + H]+, 分子式為C8H8O3;1H NMR (600 MHz, CDCl3):9.65 (1H, s, H-7), 9.60 (1H, s, 4-OH), 6.82 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.71 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.68 (1H, dd,= 1.2, 8.0 Hz, H-6), 3.78 (3H, s, H-8);13C NMR (150 MHz, CDCl3):128.30 (C-1), 110.20 (C-2), 148.1 (C-3), 153.5 (C-4), 115.2 (C-5), 126.1 (C-6), 190.28 (C-7), 55.41 (C-8)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道一致，故鑒定為香草醛。

化合物7 黃色油狀液體; ESI-MS: 195.1 [M + H]+, 分子式為C11H14O3;1H NMR (600 MHz, CDCl3):6.85 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.72 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.69 (1H, dd,= 8.0, 1.8 Hz, H-6), 5.32 (1H, br s, 4-OH), 3.89 (3H, s, H-11), 2.85 (2H, t,= 7.8 Hz, H-8), 2.75 (2H, t,= 7.8 Hz, H-7), 2.16 (3H, s, H-10);13C NMR (150 MHz, CDCl3):133.1 (C-1), 111.2 (C-2), 146.5 (C-3), 144.0 (C-4), 114.5 (C-5), 120.9 (C-6), 29.6 (C-7), 45.7 (C-8), 208.4 (C-9), 30.3 (C-10), 56.0 (C-11)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道一致，故鑒定為姜油酮。

化合物8 黃色油狀液體; ESI-MS: 277.0 [M + H]+, 分子式C17H24O3;1H NMR (600 MHz, CDCl3):6.82 (1H, m, H-5), 6.82 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5′), 6.71 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2′), 6.68 (1H, dd,= 1.2, 8.0 Hz, H-6′), 6.09 (1H, d,= 15.6 Hz, H-4), 3.86 (3H, s, H-7′), 2.85 (4H, m, H-6, 7), 2.19 (2H, m, H-2), 1.44 (2H, m, H-1), 1.29 (4H, m, H-8, 9), 0.89 (3H, t,= 7.2 Hz, H-10);13C NMR (150 MHz, CDCl3):133.2 (C-1), 111.2 (C-2), 146.5 (C-3), 143.9 (C-4), 114.4 (C- 5), 120.8 (C-6), 31.1 (C-7), 42.0 (C-8), 200.0 (C-9), 130.3 (C-10), 148.0 (C-11), 32.5 (C-12), 27.8 (C-13), 29.9 (C-14), 22.4 (C-15), 14.0 (C-16), 55.9 (C-17)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道一致，故鑒定為6-姜烯酚。

化合物9 白色粉末; ESI MS: 445.6 [M - H]–, 分子式C28H46O4;1H NMR (600 MHz, CDCl3):7.61 (1H, d,= 15.6 Hz, H-3), 7.07 (1H, dd,= 8.4, 1.8 Hz, H-6′), 7.03 (1H, d,= 1.5 Hz, H-2′), 6.92 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5′), 6.29 (1H, d,= 15.6 Hz, H-2), 5.84 (1H, s, 4′-OH), 4.19 (2H, t,= 6.7 Hz, H-1′′), 3.93 (3H, s, H-7′), 1.69 (2H, m, H-2′′), 1.39 (2H, m, H-3′′), 1.26 (28H, m, H-4′′～H-17′′), 0.88 (3H, t,= 7.2 Hz, H-18′′);13C NMR (150 MHz, CDCl3):167.3 (C-1), 115.9 (C-2), 144.8 (C-3), 127.2 (C-1′), 109.4 (C-2′), 148.0 (C-3′), 146.9 (C-4′), 114.8 (C-5′), 123.2 (C-6′), 64.8 (C-1″), 28.9 (C-2′′), 26.2 (C-3′′), 29.8, 29.8, 29.7, 29.5, 29.5 (C-4′′?C-15′′), 32.1 (C-16″), 22.8 (C-17′′), 14.3 (C-18′′), 56.1 (3′-OMe)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道一致，故鑒定為阿魏酸十八烷酯。

化合物10 黃色油狀液體; ESI-MS: 447.2 [M + H]+, 分子式為C29H50O3;1H NMR (600 MHz, CDCl3):2.52 (2H, m, H-4), 2.01 (3H, s, H-5a), 1.98 (6H, s, H-7a, 8a), 1.21 (3H, s, H-2a), 1.52～1.00 (23H, m, H-3, 1′～12′), 0.84 (9H, d,= 6.6 Hz, H-4′a, 8′a, 12′a), 0.82 (3H, d,= 6.6 Hz, H-13′);13C NMR (150 MHz, CDCl3):72.7 (C-2) , 40.3 (C-3), 21.4 (C-4), 140.6 (C-5), 187.8 (C-6), 140.3 (C-7), 140.5 (C-8), 187.3 (C-9), 144.6(C-10), 42.4 (C-1′), 21.5 (C-2′), 37.7 (C-3′), 32.9 (C-4′), 37.5 (C-5′, 7′), 24.6 (C-6′), 32.9 (C-8′), 37.4 (C-9′), 24.9 (C-10′), 39.5 (C-11′), 28.1 (C-12′), 22.7 (C-13′), 26.7(C-2a), 12.06 (C-5a), 12.39 (C-7a), 12.47 (C-8a), 19.9 (C-4′a), 19.8 (C-8′a), 22.8 (C-12′a)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道一致，故鑒定為維生素E醌。

化合物11 棕色油狀液體; ESI-MS: 127.1 [M + H]+, 分子式C6H6O3;1H NMR (600 MHz, CD3OD):9.54 (1H, s, H-1), 7.39 (1H, d,= 3.6 Hz, H-3), 6.59 (1H, d,= 3.6 Hz, H-4), 4.62 (2H, s, H-6);13C NMR (150 MHz, CD3OD):179.4 (C-1), 163.2 (C-2), 124.9 (C-3), 110.9 (C-4), 153.9(C-5), 57.6 (C- 6)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[22]報(bào)道一致，故鑒定為5-羥甲基-2-糠醛。

化合物12 無(wú)色片狀晶體(甲醇)，mp 141 ℃～145 ℃; ESI-MS: 117.2 [M - H]–，分子式C4H6O2S;1H NMR (600 MHz, CD3OD):2.56 (6H, s, Me×2);13C NMR (150 MHz, CD3OD):179.2 (C=O×2), 29.8 (Me×2)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[23]報(bào)道一致，故鑒定為硫代乙酸酐。

化合物13 白色粉末; ESI-MS: 117.5 [M -H]–, 分子式為C7H6N2;1H NMR (600 MHz, CD3OD):8.06 (1H, dd,= 7.2, 1.8 Hz, H-4), 7.90 (1H, s, H-3), 7.40 (1H, dd,= 7.2, 1.2 Hz, H-7), 7.17～7.11 (2H, m, H-5, 6);13C NMR (150 MHz, CD3OD):133.2 (C-3), 122.3 (C-4), 122.1 (C-5), 127.6 (C-6), 112.8 (C-7), 138.2 (C-8), 123.5 (C-9)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[24]報(bào)道一致，故鑒定為吲唑。

化合物14 無(wú)色油狀; ESI-MS: 255.3 [M - H]–, 分子式C16H32O2;1H NMR (600 MHz, CDCl3):2.35 (2H, t,= 7.2 Hz, H-2), 1.63 (2H, m, H-15), 1.28 (22H, m, H-3～H-14), 0.88 (3H, t,= 7.2 Hz, H- 16);13C NMR (150 MHz, CDCl3):178.57 (C-1), 33.98, 32.15, 31.15, 29.92, 29.88, 29.86, 29.81, 29.66, 29.58, 29.46, 29.29, 24.92, 22.92, 14.34 (C-2～C-16)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[25]報(bào)道一致，故鑒定為棕櫚酸。

化合物15 無(wú)色油狀液體; ESI-MS: 413.4 [M + H]+, 分子式C30H50;1H NMR (600 MHz, CDCl3):5.23 (6H, m, H-3, 7, 11, 14, 18, 22), 2.05～ 2.22 (20H, m, H-4, 5, 8, 9, 12, 13, 16, 17, 20, 21), 1.78 (6H, s, H-1, 24), 1.71 (18H, s, Me×6);13C NMR (150 MHz, CDCl3):17.8 (C-1, 24), 131.1 (C-2, 23), 124.6 (C-3, 22), 27.0 (C-4, 21), 39.9 (C-5, 9, 16, 20), 134.9 (C-6, 19), 124.5 (C-7, 18), 26.8 (C-8, 17), 135.1 (C-10, 15), 124.5 (C-11, 14), 28.5 (C-12, 13), 25.8 (Me-2, 23), 16.1 (Me-6, 19), 16.1 (Me-10, 15)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[26]報(bào)道一致，故鑒定為角鯊烯。

化合物16 白色粉末; ESI-MS: 367.1 [M + H]+, 分子式C26H54;1H NMR (600 MHz, CDCl3):1.26 (48H, m, H-2～H-25), 0.88 (6H, t,= 7.2 Hz, H-1, 26);13C NMR (150 MHz, CDCl3):31.94, 29.71, 29.67, 29.38, 22.70 (C-2～C-25), 14.13 (C-1, 26)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[27]報(bào)道一致，故鑒定為二十六烷。

2 結(jié)果和討論

本研究從貴州鼠尾草95%乙醇提取物中分離得到了16個(gè)化合物，分別鑒定為：-倍半水芹烯 (1)、6-(7,11-二甲基-10-乙烯亞基)-環(huán)己烯酮 (2)、-沒藥烯 (3)、-姜黃烯 (4)、3,4-二羥基苯乙酸甲酯 (5)、香草醛 (6)、姜油酮 (7)、6-姜烯酚 (8)、阿魏酸十八烷酯 (9)、維生素E醌 (10)、5-羥甲基-2-糠醛(11)、硫代乙酸酐(12)、吲唑(13)、棕櫚酸 (14)、角鯊烯 (15)和二十六烷(16)。其中，化合物2為新天然產(chǎn)物。除化合物3、4和6外，所有化合物均為首次從貴州鼠尾草植物中分離得到，此外, 化合物2、5、9和12為首次從唇形科植物中分離得到，化合物1和15為首次從鼠尾草屬植物中分離得到。16個(gè)化合物結(jié)構(gòu)類型包括倍半萜類化合物4個(gè)、酚酸類化合物6個(gè)、長(zhǎng)鏈烷烴類化合物3個(gè)以及其他類型結(jié)構(gòu)化合物3個(gè)。本研究從貴州遵義生長(zhǎng)的貴州鼠尾草植物中獲得的化合物結(jié)構(gòu)類型, 與已報(bào)道的貴州其他產(chǎn)地以及分布于其他省份的同種植物中所含的結(jié)構(gòu)類型差異較大，進(jìn)一步表明該種藥用植物的次生代謝產(chǎn)物可能易受外界生長(zhǎng)環(huán)境影響。本研究結(jié)果為進(jìn)一步開展該植物的系統(tǒng)研究及其品質(zhì)評(píng)價(jià)提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

貴州鼠尾草的民間藥用多以清熱解毒、抗菌消炎等為主。本研究獲得的16個(gè)單體化合物中，化合物6～8、12、13和15均具有相關(guān)的藥用活性，初步推測(cè)這些化合物是貴州鼠尾草發(fā)揮清熱解毒以及抗菌消炎藥效的活性成分[22–24]。此外，據(jù)報(bào)道化合物1、6～11以及15均具有較好的抗氧化活性[24–27],且其中部分化合物含量相對(duì)較大。但貴州鼠尾草的藥理研究中關(guān)于抗氧化的報(bào)道較少，下一步的研究中可重點(diǎn)探索貴州鼠尾草的抗氧化活性，以進(jìn)一步深入開發(fā)利用該特色藥用植物。

[1] Editorial Committee of Chinese Flora, Chinese Academy of Sciences. Florae Republicae Popularis Sinicae, Tomus 66 [M]. Beijing: Science Press, 2004: 416. [中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì). 中國(guó)植物志, 第66卷 [M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2004: 416.]

[2] HE S Z, XU W F. Study on Resources of Chinese Herbal Medicine in Guizhou [M]. Guiyang: Guizhou Science and Technology Press, 2007: 582–590. [何順志, 徐文芬. 貴州中草藥資源研究 [M]. 貴陽(yáng): 貴州科技出版社, 2007: 582–590.]

[3] LI Y, ZHANG Y, ZHANG J J, et al. Guizhou nationality folk medicinalgenus plant [J]. J Med Pharm Chin Minor, 2019, 25(6): 65–67. [李毅, 張義, 張敬杰, 等. 貴州民族民間藥用的鼠尾草屬植物[J]. 中國(guó)民族醫(yī)藥雜志, 2019, 25(6): 65–67. doi: 10.16041/j.cnki.cn15- 1175.2019.06.035.]

[4] ZHANG M K. Study on chemical constituents and bioactivities of,and[D]. Wuhan: Huazhong University of Science and Technology, 2015. [張孟科. 照山白、貴州鼠尾草和新疆鼠尾草化學(xué)成分及生物活性研究 [D]. 武漢：華中科技大學(xué), 2015.]

[5] WANG H Y. Study on chemical constituents ofLévl andGapnep. [D]. Guiyang: Guizhou University, 2009. [王和英. 貴州鼠尾草、山豆根化學(xué)成分的研究[D].貴陽(yáng): 貴州大學(xué), 2009.]

[6] KHRIMIAN A, ZHANG A J, WEBER D C, et al. Discovery of the aggregation pheromone of the brown marmorated stink bug () through the creation of stereoisomeric libraries of 1? bisabolen-3-ols[J]. J Nat Prod, 2014, 77(7): 1708–1717. doi: 10.1021/ np5003753.

[7] NICOLAOU K C, WU T R, SARLAH D, et al. Total synthesis, revised structure, and biological evaluation of biyouyanagin A and analogues thereof [J]. J Am Chem Soc, 2008, 130 (33):11114–11121. doi: 10. 1021/ja802805c.

[8] TERIS A, GERRIT P L. Isolation and identification of the five major sesquiterpene hydrocarbons of ginger [J]. Phytochem Anal, 1991, 2(1): 26–34. doi: 10.1002/pca.2800020106.

[9] HASEGAWA T, NAKATANI K, FUJIHARA T, et al. Aroma of turmeric: Dependence on the combination of groups of several odor constituents [J]. Nat Prod Commun, 2015, 10(6): 1047–1050. doi: 10. 1177/1934578X1501000663.

[10] ZHANG Z Z, XIAO B H, CHEN Q, et al. Synthesis and biological evaluation of caffeic acid 3,4-dihydroxyphenethyl ester [J]. J Nat Prod, 2010, 73(2): 252–254. doi: 10.1021/np900519d.

[11] CHALLICE J S, LOEFFLER R S T, WILLIAMS A H. Structure of calleryanin and its benzylic esters fromand[J]. Phyto- chemistry, 1980, 19(11): 2435–2437. doi: 10.1016/s0031-9422(00)91 043-4.

[12] SANZ J F, BARBERA O, MARCOA J A. Sesquiterpene lactones from[J]. Phytochemistry, 1989, 28(8): 2163–2167. doi: 10.1016/s0031-9422(00) 97936-6.

[13] XIAO Y C. Study on chemical constituents of[D]. Yunnan: Kunming Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, 2003. [肖業(yè)成. 生姜植物的化學(xué)成分研究 [D]. 云南:中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所, 2003.]

[14] SONAR V P, FOIS B, DISTINTO S, et al. Ferulic acid esters and withanolides: In search ofGABAAreceptor modulators [J]. J Nat Prod, 2019, 82(5): 1250–1257. doi: 10.1021/acs. jnatprod.8b01023.

[15] CHO J G, LEE D Y, LEE J W, et al. Acyclic diterpenoids from the leaves of[J]. J Korean Soc Appl Biolo Chem, 2009, 52(2): 128–132. doi: 10.3839/jksabc.2009.024.

[16] ZHANG Z, WANG D, ZHAO Y, et al. Fructose-derived carbohydrates from[J]. Nat Prod Res, 2009, 23(11): 1013–1020. doi: 10.1080/14786410802391120.

[17] HU L, DING Z H, LIU J K. The chemical constituents of basidio- mycetes[J]. Acta Bot Yunnan, 2002, 24(5): 667–670. [胡琳, 丁智慧, 劉吉開. 灰黑擬牛肝菌的化學(xué)成分 [J]. 云南植物研究, 2002, 24(5): 667–670.]

[18] LUO P, SHU Y, ZHU L, et al. Secondary metabolites ofB10.2 fromKom. [J]. Nat Prod Res Dev, 2020, 32(6): 1000–1005. [羅萍, 舒燕, 朱麗, 等. 黃草烏內(nèi)生真菌接骨木鐮孢菌B10.2次生代謝產(chǎn)物研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2020, 32(6): 1000–1005. doi: 10.16333/j.1001-6880.2020.6.013.]

[19] REN R B, XIA B, LI W L, et al. Study on chemical constituents of(L.) Ching (Ⅱ) [J]. Chin Trad Herb Drug, 2009, 40(S1): 104–106. [任冰如, 夏冰, 李維林, 等. 烏韭的化學(xué)成分研究(Ⅱ) [J]. 中草藥, 2009, 40(S1): 104–106.]

[20] XU W Q, GONG X J, ZHOU X, et al. Chemical constituents from[J]. Chin Trad Herb Drug, 2010, 41(7): 1056–1060. [許文清, 龔小見, 周欣, 等. 馬蘭化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥, 2010, 41(7): 1056–1060.]

[21] YE F M, XIE Y G, ZHU Y, et al. Chemical constituents of branches and leaves ofA. C. Smith [J]. Nat Prod Res Dev, 2015, 27(4): 604–608. doi: 10.16333/j.1001-6880.2015.04.009.

[22] TANG L, CHEN Y C, JIANG Z B, et al. Phytochemical investigation of the marine alga[J]. Chem Nat Compoud, 2017, 53(4): 770–774. doi: 10.1007/s10600-017-2117-x.

[23] IMM J Y, ZHANG G D, CHAN L Y, et al. [6]-Dehydroshogaol, a minor component in ginger rhizome, exhibits quinone reductase inducing and anti-inflammatory activities that rival those of curcumin [J]. Food Res Inter, 2010, 43(8): 2208–2213. doi: 10.1016/j.foodres.2010.07.028.

[24] ZHAO X Y, WANG G, WANG Y, et al. Chemical constituents fromsubsp.(Sam.) Sam and their anti- inflammatory and antioxidant activities [J]. Nat Prod Res, 2018, 32(23): 2749–2755. doi: 10.1080/14786419.2017.1380024.

[25] ZHAO J, ZHANG J S, YANG B, et al. Free radical scavenging activity and characterization of sesquiterpenoids in four species ofusing a TLC bioautography assay and GC-MS analysis [J]. Molecules, 2010, 15(11): 7547–7557. doi: 10.3390/molecules15117547.

[26] DHANALAKSHMI C, JANAKIRAMAN U, MANIVASAGAM T, et al. Vanillin attenuated behavioural impairments, neurochemical deficts, oxidative stress and apoptosis against rotenone induced rat model of Parkinson’s disease [J]. Neuro Chem Res, 2016, 41(8): 1899–1910. doi: 10.1007/s11064-016-1901-5.

[27] MOLTKE A D, DURAND E, LAGUERRE M, et al. Antioxidant properties and efficacies of synthesized alkyl caffeates, ferulates, and coumarates [J]. J Agric Food Chem, 2014, 62: 12553?12562. doi: 10. 1021/jf500588s.

Chemical Constituents of

ZHAO Yumin1,2, ZHOU Yao2,3, LIU Hanfei2,3, LI Jinyu2,3, LOU Huayong2,3*, PAN Weidong2,3*

(1. Guizhou University of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550025, China; 2. Natural Products Research Center of Guizhou Province, Guiyang 550014, China; 3. State Key Laboratory of Functions and Applications of Medicinal Plants/School of Pharmaceutial Sciences, Guizhou Medcial University, Guiyang 550025, China)

The aim was to clarify the chemical constituents of. Sixteen compounds were isolated from the 95% ethanol extract by using chromatographic separation techniques, such as silica gel, LH-20, MCI, and HPLC methods. On the basis of spectral data, their structures were identified as-sesquiphellandrene (1), 6-(7,11-dimethyl-10-ethenylene)-cyclohexenone (2),-bisabolene (3),-curcumene (4), 3,4-dihydroxy- phenylacetic acid methyl ester (5), vanillin (6), zingerone (7), 6-shogaol (8), octadecyl ferulate (9), vitamin E quinone (10), 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde (11), thioacetic anhydride (12),3,4-dihydroxyphenylacetic indazole (13), hexadecanoic acid (14), squalene (15), and hexacosane (16). Among them, compound 2 is a new natural compound. Moreover, all compounds were obtained from this plant species for the first time except for compounds 3, 4 and 6. Accordingly, compounds 2, 5, 9 and 12 were isolated for the first time from Labiatae, compounds 1 and 15 were obtained fromgenus for the first time.

; Separation and purification; Structural identification; Chemical constituent

10.11926/jtsb.4632

2022-03-03

2022-05-19

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(32100322, U1812403, 32060100)；貴州省科技計(jì)劃項(xiàng)目(ZK[2021] 534)資助

This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (Grant No. U1812403, 32060100, 32100322), and the Project for Science and Technology in Guizhou (Grant No. ZK[2021]534).

趙玉敏(1996年生)，女，碩士研究生，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物化學(xué)。E-mail: 1668575104@qq.com

通訊作者 Corresponding author.E-mail: wdpan@163.com