獸用疫苗稀釋液的制備及其應(yīng)用

文│楊香芳 趙同淵 劉玉靜 劉召明* 吳太航 王翠菊（青島易邦生物工程有限公司）

獸用疫苗稀釋液是一類用于稀釋和調(diào)節(jié)動物疫苗劑量的液體。疫苗稀釋液的制備與應(yīng)用對保證疫苗接種效果、控制疾病傳播具有重要作用。獸用疫苗稀釋液是將高濃度的獸用疫苗制備成較低濃度的溶液，以便疫苗在接種過程中的使用。獸用疫苗稀釋液的成分可以因疫苗類型、動物種類等因素而有所不同，但通常包括生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、抗生素、甘露醇和其他添加劑等成分。需要注意的是，為確保疫苗的有效性，需要精確控制稀釋液的成分，同時需要符合相關(guān)法規(guī)。

一、影響獸用疫苗稀釋液制備的因素

1.疫苗的劑型和規(guī)格。制備獸用疫苗稀釋液時，首先要考慮疫苗的劑型和規(guī)格。不同類型的疫苗可能含有不同種類和濃度的抗原，所以需要使用不同的稀釋液配方和稀釋倍數(shù)進行稀釋。此外，不同規(guī)格的疫苗也需要使用不同的稀釋倍數(shù)，以滿足動物不同的體重、年齡和生理狀態(tài)。因此，在制備獸用疫苗稀釋液時，需要根據(jù)具體的疫苗劑型和規(guī)格確定合適的稀釋液配方和稀釋倍數(shù)。

2.動物種類和生理狀態(tài)。不同動物種類和生理狀態(tài)會影響疫苗的使用劑量和稀釋倍數(shù)。一般來說，體重較輕、年齡較小的動物需要使用較低劑量的疫苗，并且需要更高的稀釋倍數(shù)；而體重較重、年齡較大的動物則需要使用較高劑量的疫苗，并且需要較低的稀釋倍數(shù)。此外，一些特殊情況下（如妊娠、哺乳期、免疫抑制狀態(tài)等）也需要根據(jù)具體情況進行調(diào)整。

3.疫苗的保存條件和穩(wěn)定性。疫苗稀釋液的配方和pH值應(yīng)根據(jù)疫苗類型和成分特性進行選擇，以確保疫苗的穩(wěn)定性和有效性。如對于一些滅活疫苗，需要使用含有適當氨基酸和糖類的緩沖液來稀釋疫苗，并調(diào)整pH值以確保疫苗的穩(wěn)定性。同時，應(yīng)避免使用可能與疫苗成分相互作用的化學(xué)物質(zhì)，以免影響疫苗效果。

4.稀釋液的配方和pH值。疫苗的穩(wěn)定性和有效性取決于存儲條件。因此，在制備獸用疫苗稀釋液時，需要了解疫苗的保存條件和有效期，并確保稀釋液的保存條件相同。一般來說，稀釋液應(yīng)在室溫下保存，避免陽光直射和濕度過高，以確保穩(wěn)定性和質(zhì)量。此外，稀釋液的pH值應(yīng)該適中，以確保疫苗在稀釋液中的穩(wěn)定性。

5.稀釋液的無菌性和純度。稀釋液的無菌性和純度也是制備獸用疫苗稀釋液時需要考慮的因素之一。無菌性是指稀釋液中不能含有任何微生物，以免在稀釋過程中污染疫苗；純度則是指稀釋液中不能有任何雜質(zhì)或有害物質(zhì)，確保疫苗接種的安全性和有效性。因此，稀釋液的制備需要在無菌條件下進行，同時需要對稀釋液進行充分檢測和測試，確保其質(zhì)量符合要求。

二、獸用疫苗稀釋液的制備

1.準備工作。準備工作對獸用疫苗稀釋液的制備很重要，要確保操作臺、工具和試劑都是清潔消毒過的，以避免污染和交叉感染。操作人員也需要注意個人衛(wèi)生，佩戴干凈的防護衣、手套和口罩等防護用品，防止外界微生物污染樣品。同時，要準備所需的試劑和儀器，確保所有材料齊全，以便后續(xù)操作。

2.配制稀釋液。制備稀釋液除了使用無菌生理鹽水或PBS緩沖液外，也可以使用其他適合的無菌緩沖液作為稀釋液，如Tris緩沖液、Hepes緩沖液等。在選擇稀釋液時需要考慮疫苗特性和使用要求，以確保稀釋液與疫苗相容并能保持疫苗的穩(wěn)定性和有效性。同時，制備稀釋液時也需要注意，配制液體的pH值應(yīng)該控制在合適的范圍內(nèi)，以避免對疫苗產(chǎn)生不良影響。

3.稀釋疫苗。將制備好的稀釋液倒入消毒的容器中，再將高濃度的獸用疫苗緩慢倒入稀釋液中，輕輕攪拌混合，直至均勻分散。在稀釋疫苗的過程中需要保持無菌操作，防止污染影響疫苗質(zhì)量。同時，還要根據(jù)疫苗的稀釋倍數(shù)和動物的使用劑量進行計算和稀釋，以確保使用時劑量準確。

4.檢測疫苗稀釋液的質(zhì)量。為確保獸用疫苗稀釋液的質(zhì)量，通常需要進行以下檢測。

（1）無菌檢測。使用無菌技術(shù)對稀釋液進行無菌檢測，確保稀釋液不受污染。當前無菌檢測方法相對成熟，包括培養(yǎng)基接種法、濾膜法、試管法、PCR檢測法等。在進行無菌檢測前，應(yīng)使用無菌技術(shù)制備樣品，并采取適當?shù)姆雷o措施以防止對樣品的污染。如果檢測結(jié)果顯示稀釋液受到微生物污染，則應(yīng)重新制備稀釋液，確保其質(zhì)量符合要求。

（2）pH值檢測。檢測稀釋液的pH值是否符合要求可采用pH計等設(shè)備進行檢測。檢測之前對pH計進行校準，確保檢測結(jié)果的準確性。檢測時將pH計插入稀釋液中，穩(wěn)定一段時間后讀取pH值，并與要求進行比較。如果檢測結(jié)果不符合要求，可以根據(jù)需要進行適當調(diào)整。

（3）毒性測試。在制備獸用疫苗稀釋液的過程中確保使用無菌技術(shù)和無菌物料可以有效避免污染和不良反應(yīng)的發(fā)生。如果在疫苗制備過程中出現(xiàn)不良反應(yīng)，應(yīng)及時對其進行分析、處理。最后進行動物試驗，將稀釋液注射到動物體內(nèi)，觀察是否有不良反應(yīng)。

（4）稀釋效果檢測。使用已知濃度的疫苗進行稀釋，按照一定比例進行稀釋，再對稀釋后的疫苗進行檢測，以確定稀釋液的稀釋效果是否符合要求。常用的檢測方法如下。

滅活疫苗效價測定。將已知濃度的滅活疫苗進行逐級稀釋，與一定量的抗原混合后注射到動物體內(nèi)，觀察動物產(chǎn)生的抗體滴度，從而確定稀釋液的稀釋效果。

滅活疫苗的滴度測定。將已知濃度的活疫苗進行逐級稀釋，與一定量的宿主細胞混合后，按照一定的方法進行培養(yǎng)，觀察細胞的病毒感染情況，從而確定稀釋液的稀釋效果。

其他檢測方法。根據(jù)具體的疫苗類型和檢測要求還可以采用其他方法進行稀釋效果檢測，如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、免疫熒光試驗（IFA）等。

（5）保存條件檢測。將稀釋液保存在規(guī)定條件下，觀察其穩(wěn)定性和保存期限是否符合要求。

5.標注疫苗稀釋液信息。獸用疫苗稀釋液在標注信息時需要包括以下六點內(nèi)容。

（1）稀釋液名稱：標注疫苗稀釋液的名稱，以便于識別和辨認。

（2）稀釋倍數(shù)：標注疫苗稀釋液的稀釋倍數(shù)，以便于疫苗接種時準確計算使用劑量。

（3）生產(chǎn)日期和有效期：標注疫苗稀釋液的生產(chǎn)日期和有效期，以便于控制使用時間，保證疫苗接種效果。

（4）儲存條件：標注疫苗稀釋液的儲存條件，以便保證稀釋液的穩(wěn)定性和質(zhì)量。

（5）生產(chǎn)廠家：標注疫苗稀釋液的生產(chǎn)廠家，以便進行質(zhì)量追溯和聯(lián)系廠家處理問題。

（6）批號：標注疫苗稀釋液的批號，以便進行質(zhì)量追溯和區(qū)分不同批次的稀釋液。

以上信息應(yīng)該清晰、醒目地標注在獸用疫苗稀釋液的包裝上，便于使用者辨認和管理。

三、常見獸用疫苗稀釋液的優(yōu)劣勢分析

常見的獸用疫苗稀釋液包括生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、PBS緩沖液等。它們各自都有一些優(yōu)缺點，簡要分析如下。

1.生理鹽水。生理鹽水是一種滲透壓與體液相近的溶液，對細胞有很好的保護作用，稀釋后對動物的刺激較小，不會引起明顯的不良反應(yīng)。但生理鹽水對某些藥物不穩(wěn)定，容易降解，所以不能作為所有藥物的稀釋液。

2.磷酸鹽緩沖液。磷酸鹽緩沖液是一種pH值穩(wěn)定的緩沖液，對某些藥物有良好的穩(wěn)定性，可以在一定程度上保護藥物不被降解。但磷酸鹽緩沖液的濃度比較高，稀釋后仍然可能對動物有較大的刺激，容易引起一些不良反應(yīng)。

3.PBS緩沖液。PBS緩沖液是一種pH值穩(wěn)定、滲透壓適中的緩沖液，可以有效保護藥物活性和穩(wěn)定性，稀釋后對動物的刺激較小，不會引起明顯的不良反應(yīng)。但PBS緩沖液的價格較高，制備過程較為復(fù)雜。因此，在選擇獸用疫苗稀釋液時需要根據(jù)藥物性質(zhì)、動物敏感程度、實驗要求等因素進行綜合考慮，選擇合適的稀釋液。

4.液鋁膠鹽水稀釋液。鋁鹽作為佐劑可增強疫苗對動物體內(nèi)免疫反應(yīng)的激活效果，提高疫苗的免疫保護效果。鋁鹽可以吸附疫苗中的抗原，延長其在體內(nèi)的作用時間，從而增強其緩慢釋放的作用，提高其免疫效果。其次，安全性較高。鋁鹽是一種天然存在于環(huán)境中的無毒、無害物質(zhì)，它對動物的副作用較小，具有良好的安全性。但也具有儲存和運輸要求高、稀釋后不能長時間存放等缺點，容易引起注射局部反應(yīng)，鋁鹽在注射部位可以形成一定的局部腫脹，但這種反應(yīng)一般不影響動物的生理健康。

四、獸用疫苗稀釋液的應(yīng)用

獸用疫苗稀釋液主要用于將高濃度的疫苗制劑稀釋至所需的適宜濃度，以便進行疫苗接種。

1.動物疫苗的接種。在動物疫苗接種過程中，為確保接種效果，需要對疫苗進行適當稀釋。不同體重、年齡、品種、養(yǎng)殖環(huán)境等因素都會影響動物對疫苗的反應(yīng)，因此，需要按照規(guī)定的稀釋比例給動物接種適當劑量的疫苗。稀釋液要求純凈、無菌，以避免疫苗被污染或失效。接種后，動物需要被觀察一段時間，以確保疫苗接種的安全性和有效性。

2.人類疫苗的接種。獸用疫苗稀釋液不能直接用于人類疫苗，用于人類疫苗接種需經(jīng)過特殊的研究、開發(fā)和批準程序才能確保其安全性和有效性。在一些特殊情況下，如在動物疫情暴發(fā)時可能會考慮將獸用疫苗稀釋液用于人類疫苗接種，但這需要經(jīng)過專業(yè)機構(gòu)的評估和批準，并且需要特別注意劑量和接種方法等因素，以確保其安全性和有效性。一般情況下，人類疫苗都要經(jīng)過嚴格的臨床試驗和批準程序才能用于人類接種。

3.疫苗制劑質(zhì)量控制。疫苗制劑質(zhì)量的控制是確保疫苗有效性和安全性的關(guān)鍵步驟之一。在疫苗制造和檢測過程中，疫苗稀釋液可以用于確定疫苗中活性成分的含量、檢測疫苗中的雜質(zhì)和污染物，以及評估疫苗的穩(wěn)定性和保質(zhì)期等。疫苗制劑質(zhì)量的控制通常包括物理性質(zhì)、生化特性、微生物質(zhì)量、安全性、有效性和穩(wěn)定性等多方面的測試和評估。