基于方波伏安法的聚多巴胺@納米銀修飾玻碳電極測定畜禽肉中氯丙嗪

鄒玉婷，段寧馨，古飛燕，黃泓凱，趙曉娟，劉功良，羅忠潤

（仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院輕工食品學(xué)院，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部嶺南特色食品綠色加工與智能制造重點實驗室，廣東省嶺南特色食品科學(xué)與技術(shù)重點實驗室，廣東 廣州 510225）

氯丙嗪（chlorpromazine，CPZ）因具有鎮(zhèn)靜、催眠的功效而被不法商家廣泛用于食用動物的增質(zhì)量催肥[1]，人體長時間或較大劑量攝入有CPZ殘留的動物源食品會導(dǎo)致體質(zhì)量增加，嚴重時還會引發(fā)心律異常、昏迷和癲癇發(fā)作等，對人體健康有不容忽視的影響[2]。中國是動物源食品生產(chǎn)和消費大國，對CPZ進行檢測是保證動物源食品安全的一項重要舉措[3]。

動物源食品中CPZ的檢測主要以高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等高效、準確地確證分析方法為主[4-5]，而電化學(xué)傳感檢測法具有操作簡便、快速靈敏、儀器便捷和成本較低等優(yōu)勢[6-8]，在食品安全領(lǐng)域也備受研究關(guān)注。例如：Lu Zhiwei等[9]將氮摻雜氧化石墨烯量子點和金納米粒子共同沉積在修飾了NiS2納米粒子/碳基納米球的玻碳電極（glassy carbon electrode，GCE）上，以煙酰胺為功能單體，CPZ為模板制備分子印跡聚合物膜進行特異性識別，CPZ的檢出限為0.00025 μmol/L，可應(yīng)用于人體血清、尿液和藥品分析。Periyannan等[10]通過一步水熱法改變摻雜在鉍酸銅納米粒子中銦離子（In3＋）的濃度，CPZ的檢測限為0.0012 μmol/L。這些電化學(xué)檢測方法雖然具有較高的靈敏度，但修飾材料的制備往往需要在高溫高壓條件下進行，存在程序復(fù)雜和耗時長等問題，因此，探索新型綠色修飾材料和進一步降低制備難度，從而縮短制備時間和降低成本，對提高電化學(xué)傳感檢測方法在食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用價值具有重要意義[11]。

納米銀（sliver nanoparticles，AgNPs）材料具有導(dǎo)電性強、電子轉(zhuǎn)移速率快和催化活性高等獨特性質(zhì)，被廣泛用作電極修飾材料[12-14]。因多巴胺（dopamine，DA）分子中上含有易于被氧化的酚羥基和胺基，通過自聚反應(yīng)可在工作電極或各種材料表面形成聚多巴胺（polydopamine，PDA）膜，是一種高效綠色的修飾材料[15-16]。PDA具有還原性，將銀離子還原為AgNPs的同時，其結(jié)構(gòu)中未被氧化的酚羥基以及殘余的多巴胺醌與AgNPs可通過非共價鍵（如氫鍵、電荷轉(zhuǎn)移和π-π堆疊作用）結(jié)合，從而防止AgNPs團聚，促進AgNPs的電催化活性[17]。

如圖1所示，本實驗將GCE置于AgNPs和DA的混合溶液中，DA通過自聚反應(yīng)在AgNPs和電極表面形成PDA膜，制得修飾電極（PDA@AgNPs/GCE）。對該修飾電極的制備條件和CPZ的測定條件進行優(yōu)化，利用循環(huán)伏安（cyclic voltammetry，CV）法、電化學(xué)阻抗（electrochemical impedance，EIS）分析和掃描電子顯微鏡（scanning electron microscopy，SEM）對修飾電極進行表征。便可實現(xiàn)最后用PDA@AgNPs/GCE對畜禽肉中的CPZ含量的進行測定，并利用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，HPLC-MS/MS）法進行方法驗證。

圖1 PDA@AgNPs/GCE的制備過程Fig.1 Flow chart of the preparation process of PDA@AgNPs/GCE

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

豬肉、牛肉和雞肉 廣州海珠萬國超市；硝酸銀（≥99.8%） 廣東光華科技股份有限公司；鹽酸多巴胺（≥99.8%）、聚乙烯吡咯烷酮（58000，K30）上海麥克林生化科技有限公司；硼氫化鈉（≥98.0%）天津市福晨化工試劑廠；鹽酸氯丙嗪（≥99.0%，標準品）上海阿拉丁生化科技股份有限公司；三羥甲基氨基甲烷（≥99.9%） 美國西格瑪生物試劑公司。所用試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

CHI660E電化學(xué)分析儀 北京華科普天科技有限公司；工作電極為GCE（Φ3 mm），參比電極為Ag/AgCl電極，輔助電極為鉑絲電極、Vortex Mixer V6旋渦混勻器 上海辰華儀器有限公司；HR/T20M臺式高速冷凍離心機 湖南赫西儀器裝備有限公司；便攜式pH計 奧豪斯儀器（上海）有限公司。

1.3 方法

1.3.1 AgNPs溶液的制備

參考文獻[18]方法制備AgNPs溶液。移取4 mL 1 mg/mL聚乙烯吡咯烷酮溶液于裝有43.5 mL超純水的燒杯中，在電磁攪拌下加入1 mL 5 mmol/L硝酸銀溶液（換算成制備液中的濃度為1×10-4mol/L），逐滴加入1.5 mL 11.8 mg/mL硼氫化鈉溶液（現(xiàn)配現(xiàn)用），攪拌30 min，直至溶液變?yōu)橥该鞯牧咙S色，制備成AgNPs溶液于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 PDA@AgNPs/GCE的制備

GCE按參考文獻[8]方法進行預(yù)處理。

將適量的鹽酸多巴胺固體溶解于AgNPs溶液中，用0.1 mol/L Tris緩沖溶液調(diào)pH 8.5，最后得到1 mg/mL DA和AgNPs的混合溶液。將GCE置于該混合溶液中，在避光自聚2.5 h，取出電極用超純水淋洗后，即得到測定CPZ的修飾電極（PDA@AgNPs/GCE）。

1.3.3 樣品前處理

分別稱取去皮去骨的豬肉、牛肉和雞肉（2.00±0.01）g置于50 mL具塞離心管中，準確加入乙腈（含1%乙酸）10 mL，旋渦提取5 min，10000 r/min高速離心10 min后取上清液。重復(fù)提取1 次合并上清液。于30 ℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，加入5 mL磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）（含10%乙腈）溶解后待測。

1.3.4 電化學(xué)儀器條件

將三電極電化學(xué)系統(tǒng)置于含有鹽酸CPZ的pH 7.0 PBS中，靜置210 s后于電位0～1.0 V，電位增量為12 mV，方波振幅為60 mV，方波頻率為40 Hz條件下進行方波伏安（square wave voltammetry，SWV）掃描。

1.3.5 PDA@AgNPs/GCE的表征

CV法：將修飾電極置于5 mmol/L的K3Fe(CN)6溶液中，采用CV法在電位為-0.2～0.8 V，掃描速率為50 mV/s，對該工作電極進行表征，即可得到K3Fe(CN)6在該工作電極的電化學(xué)響應(yīng)情況。

EIS法：將修飾電極置于5 mmol/L的K3Fe(CN)6溶液中，采用EIS在振幅為5 mV，頻率范圍為0.1～100000 Hz下對該工作電極進行表征，即得到EIS交流阻抗譜圖，結(jié)合等效電路擬合便可用于分析電極與溶液界面處的反應(yīng)動力學(xué)參數(shù)。

SEM法：將掃描電鏡電極置于修飾物溶液自聚2.5 h，利用型號為VEGA 3 SBH的SEM對修飾物進行不同放大倍數(shù)的觀察與拍攝。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用Excel對實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計匯總和分析。用Origin 8.1軟件進行繪圖分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 修飾材料的選擇

CPZ容易發(fā)生氧化反應(yīng)，用GCE測定時出現(xiàn)了一個明顯的氧化峰，但GCE的選擇性較差。為了提高測試靈敏度和選擇性，需要對GCE進行修飾。將AgNPs溶液滴涂在GCE表面，或?qū)CE置于不含/含AgNPs的DA溶液中進行自聚反應(yīng)，得到AgNPs/GCE、PDA/GCE和PDA@AgNPs/GCE共3 種修飾電極。分別考察2×10-7mol/L和5×10-6mol/L CPZ在3 種電極上的電化學(xué)響應(yīng)，結(jié)果如圖2所示。雖然5×10-6mol/L CPZ在AgNPs/GCE表面的峰電流響應(yīng)值最大，但2×10-7mol/L CPZ僅產(chǎn)生了微弱的電流響應(yīng)。此外，在電極表面滴涂修飾的AgNPs的穩(wěn)定性較差，在淋洗和測定的過程中容易脫落，影響實驗的準確性和重現(xiàn)性[19]。與PDA/GCE相比，PDA@AgNPs/GCE對2×10-7mol/L、5×10-6mol/L CPZ均產(chǎn)生了靈敏的響應(yīng)，且峰形尖銳，可能是由于自聚在AgNPs和電極表面的PDA中含有大量的羥基（—OH）和氨基（—NH2）等活性基團[20]，不僅能使AgNPs均勻分散在電極表面，提高AgNPs的穩(wěn)定性，而且能與CPZ分子的吩噻環(huán)之間產(chǎn)生較強的氫鍵及靜電吸引作用力，從而有利于溶液中的CPZ吸附在修飾電極表面發(fā)生電化學(xué)反應(yīng)，提高測試靈敏度。故選用PDA@AgNPs對GCE進行修飾。

圖2 不同修飾電極對2×10－7 mol/L（A）和5×10－6 mol/L（B）CPZ的電化學(xué)響應(yīng)情況Fig.2 Electrochemical responses of different modified electrodes to 2 × 10-7 (A) and 5 × 10-6 mol/L (B) CPZ

2.2 硝酸銀和DA含量的選擇

將適量DA加入AgNPs溶液（AgNPs制備液中硝酸銀濃度分別為2×10-6、1×10-5、2×10-5、1×10-4、2×10-4mol/L）中，用0.1 mol/L Tris緩沖溶液調(diào)pH值為8.5，制成1 mg/mL DA和AgNPs的混合溶液，將GCE置于各溶液中避光自聚2.5 h，用各修飾電極對5×10-6mol/L CPZ的電化學(xué)響應(yīng)進行測定。如圖3A所示，隨著AgNPs制備液中硝酸銀濃度的增加，所制備的修飾電極對CPZ的峰電流值也隨之上升。盡管AgNPs制備液中硝酸銀的濃度為2×10-4mol/L時CPZ的峰電流值明顯增加，但氧化峰的峰形較為寬大，在測試實際樣品時容易受到基質(zhì)的干擾。此外，硝酸銀的濃度過高會使所制備的AgNPs的粒徑變大，影響電極表面AgNPs的穩(wěn)定性。故AgNPs制備液中硝酸銀的濃度選擇為1×10-4mol/L。

DA的濃度會直接影響其在材料表面的聚合速率和PDA膜的厚度。因此，分別配制質(zhì)量濃度為0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL的DA和AgNPs的混合溶液，其他制備步驟同上，并對5×10-6mol/L CPZ的電化學(xué)響應(yīng)進行測定，結(jié)果如圖3B所示。當DA質(zhì)量濃度低于1 mg/mL時，所制備的修飾電極對CPZ的響應(yīng)電流值隨著DA質(zhì)量濃度的增加而增大；當DA質(zhì)量濃度高于1 mg/mL時，CPZ的響應(yīng)電流值減小，可能是由于高質(zhì)量濃度的DA在AgNPs和GCE表面形成了較厚的自聚薄膜，測定時會影響CPZ向電極表面的電子傳遞，從而導(dǎo)致測定時靈敏度降低，故DA質(zhì)量濃度選擇以1 mg/mL為宜。

圖3 硝酸銀（A）和DA（B）質(zhì)量濃度對5×10－6 mol/LCPZ電化學(xué)響應(yīng)的影響Fig.3 Effects of different concentrations of silver nanoparticles (A) and dopamine (B) on the electrochemical response to 5×10-6 mol/L CPZ

2.3 自聚溶液反應(yīng)介質(zhì)和自聚時間的選擇

在有氧條件下，DA在弱堿性的水介質(zhì)中通過1,4-邁克爾加成反應(yīng)生成多巴醌，然后經(jīng)過重排形成PDA[21]。選擇不同弱堿性的水介質(zhì)會影響DA的聚合速率，進而改變PDA的形貌和粒徑，最終影響CPZ在PDA@AgNPs/GCE表面的電子轉(zhuǎn)移。因此分別用0.1 mol/L NaOH、PBS、氨水和Tris緩沖溶液調(diào)配1 mg/mL的DA與AgNPs的混合溶液（pH 8.5），將GCE置于各溶液中于室溫避光反應(yīng)2.5 h。由圖4可知，與Tris緩沖液相比，氨水作為反應(yīng)介質(zhì)時制備的修飾電極對CPZ的電流響應(yīng)值明顯較??；NaOH溶液或PBS作為反應(yīng)介質(zhì)時，電極對5×10-6mol/L CPZ的電流響應(yīng)值較高，但對2×10-7mol/L CPZ的測試效果明顯較差?？赡苁怯捎贒A在NaOH溶液中的氧化速率快，易于在AgNPs和電極表面形成PDA膜，但AgNPs表面聚合膜厚度的增加導(dǎo)致PDA起主體作用而抑制AgNPs對CPZ的電催化作用；PBS中的磷酸鹽離子與DA之間形成氫鍵，聚合時會產(chǎn)生阻聚作用[22]，影響PDA膜的生成速率，電極表面AgNPs的穩(wěn)定性較差；Tris緩沖液和氨水中均有氨基，可參與DA的自聚過程[23]，但DA的自聚反應(yīng)對溶液的pH值非常敏感，氨水作為反應(yīng)介質(zhì)時無法保持溶液pH值的穩(wěn)定，從而影響PDA膜的形成，而DA在Tris緩沖液中更易于在基材表面形成穩(wěn)定的PDA膜，使AgNPs均勻分散在電極表面，從而使CPZ產(chǎn)生良好的電化學(xué)響應(yīng)。綜合考慮，選擇Tris緩沖液作為自聚溶液的反應(yīng)介質(zhì)。

圖4 不同自聚溶液對PDA@AgNPs/GCE測定2×10－7 mol/L（A）和5×10－6 mol/L（B）CPZ的影響Fig.4 Influence of self-aggregation solutions on PDA@AgNPs/GCE detection of 2 × 10-7 (A) and 5 × 10-6 mol/L (B) CPZ

自聚時間影響PDA膜的厚度，從而影響修飾電極對CPZ的電化學(xué)響應(yīng)。將GCE置于1 mg/mL DA和AgNPs的混合溶液中，分別自聚0.5、1、2、2.5、3、4、6 h，考察不同自聚時間制備的PDA@AgNPs/GCE對5×10-6mol/L CPZ的電化學(xué)響應(yīng)，如圖5所示。隨著自聚時間的延長，CPZ的響應(yīng)電流值迅速增大；而當自聚時間大于2.5 h后，峰電流值便開始逐漸下降。由于自聚時間過長時，會使PDA修飾膜致密厚實，影響AgNPs對CPZ的電催化作用，也阻礙了CPZ在PDA@AgNPs/GCE表面的電子轉(zhuǎn)移，降低了電子遷移的效率，從而使CPZ的氧化峰電流值降低。根據(jù)響應(yīng)靈敏度和修飾電極的制備效率，DA的自聚時間確定為2.5 h。

圖5 自聚時間對PDA@AgNPs/GCE測定5×10－6 mol/L CPZ的影響Fig.5 Influence of self-aggregation time on PDA@AgNPs/GCE detection of 5×10-6 mol/L CPZ

2.4 測試底液的選擇

測試底液的種類和pH值通常會影響CPZ的分子結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性，從而影響CPZ在修飾電極表面的結(jié)合能力。分別以pH 4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0的PBS，pH 4.0、5.0、6.0、7.0、8.0的伯瑞坦-羅賓森（britton-robinson，BR）緩沖溶液和pH 4.0、5.0、6.0的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液（acetate buffer solution，ABS）配制5×10-6mol/L CPZ溶液，考察PDA@AgNPs/GCE在不同緩沖液配制的CPZ溶液中的電化學(xué)響應(yīng)，結(jié)果如圖6所示。用pH 7.0 PBS配制的CPZ在PDA@AgNPs/GCE上的峰電流值最大，且峰形最好。故選擇pH 7.0的PBS作為CPZ的最佳測試底液。

圖6 不同pH值的PBS、ABS和BR對5×10－6 mol/L CPZ測定效果的影響Fig.6 Effects of PBS,ABS and BR at different pH on the detection of 5×10-6 mol/L CPZ

2.5 富集時間

通過延長溶液與電極的接觸時間將待測物質(zhì)富集在電極表面，從而增加響應(yīng)電流?？疾旄患瘯r間分別為0、30、60、90、120、150、180、210、240、270、300 s時，5×10-6mol/L CPZ在PDA@AgNPs/GCE上的電化學(xué)影響，結(jié)果如圖7所示。當富集時間小于180 s時，峰電流值隨富集時間的延長而增大，而富集時間大于180 s后，峰電流值趨于穩(wěn)定，此時CPZ在PDA@AgNPs/GCE表面達到吸附平衡，故選擇180 s為最佳富集時間。

圖7 富集時間對5×10－6 mol/L CPZ的電化學(xué)響應(yīng)值的影響Fig.7 Effect of enrichment time on electrochemical response to 5×10-6 mol/L CPZ

2.6 PDA@AgNPs/GCE的表征

2.6.1 CV法

將GCE、AgNPs/GCE、PDA/ GCE和PDA@AgNPs/GCE置于5 mmol/L的K3Fe(CN)6溶液中，利用CV法對修飾電極進行表征，結(jié)果如圖8所示。K3Fe(CN)6在GCE、AgNPs/GCE、PDA/GCE和PDA@AgNPs/GCE表面均出現(xiàn)了明顯的氧化還原峰，4 種電極的峰電流分別為99、43、65 μA和79 μA。由于帶負電荷的AgNPs對鐵氰酸根陰離子的排斥作用，使K3Fe(CN)6在AgNPs/GCE上的峰電流遠小于GCE；PDA膜本身不導(dǎo)電，導(dǎo)致K3Fe(CN)6的響應(yīng)電流下降；當在GCE表面利用DA的自聚特性包裹和分散AgNPs時。由于PDA與AgNPs之間的協(xié)同作用，使K3Fe(CN)6的響應(yīng)電流進一步提高。上述實驗結(jié)果表明，利用PDA@AgNPs對電極進行修飾能提高電子轉(zhuǎn)移速率，增加電極過程的可逆性，同時也表明AgNPs與PDA均已成功地修飾在GCE表面。

圖8 GCE、AgNPs/GCE、PDA/ GCE和PDA@AgNPs/GCE在K3Fe(CN)6溶液中的CV圖Fig.8 CV curves of GCE,AgNPs/GCE,PDA/ GCE and PDA@AgNPs/GCE in K3Fe(CN)6 solution

2.6.2 EIS分析

利用EIS可以監(jiān)測PDA@AgNPs/GCE的制備過程，研究修飾電極界面發(fā)生的電子轉(zhuǎn)移和特性，得到相應(yīng)的Nyquist圖譜。高頻區(qū)半圓的直徑代表電子轉(zhuǎn)移阻抗（Rct），其大小反映鐵氰化鉀等氧化還原探針在電極表面的電子轉(zhuǎn)移動力學(xué)特性[24]。由圖9可知，與GCE相比，PDA@AgNPs/GCE、AgNPs/GCE和PDA/GCE在高頻區(qū)半圓的直徑及低頻區(qū)直線與實軸的截距均呈增大趨勢，說明AgNPs和PDA均已成功修飾到GCE表面，其過程受動力學(xué)和擴散聯(lián)合控制。

圖9 GCE、AgNPs/GCE、PDA/GCE和PDA@AgNPs/GCE在5 mmol/L K3Fe(CN)6溶液中的EIS圖Fig.9 EIS patterns of GCE,AgNPs/GCE,PDA/GCE and PDA@AgNPs/GCE in 5 mmol/L K3Fe(CN)6 solution

2.6.3 SEM觀察

利用SEM對AgNPs/GCE、PDA/GCE和PDA@AgNPs/GCE三種修飾電極的表面形貌特征進行表征，結(jié)果如圖10所示。由AgNPs/GCE（圖10A）的SEM圖可明顯地看到球形的AgNPs均勻地分散在電極表面，粒徑約為20～40 nm。可能是由于在電極表面形成了比較致密的PDA膜，在PDA/GCE的SEM圖（圖10B）中沒有觀察到PDA的膜結(jié)構(gòu)，與文獻[25]中PDA膜的SEM表征結(jié)果一致。在PDA/GCE的SEM圖中可明顯看到分布較為均勻的粒徑約為80～150 nm的微球。張弘弢等[26]研究表明，DA不僅可以在固體材料表面形成牢固黏附的涂層，還可通過自身組裝形成納米粒子，因此，將GCE置于DA溶液中時，一方面溶液中的DA會形成PDA納米微球，另一方面DA在GCE表面自聚成膜，同時將PDA納米微球修飾在電極表面。與AgNPs/GCE（圖10A）相比，PDA@AgNPs/GCE（圖10C）的SEM圖中電極表面的納米微球的粒徑增大，尺寸約為50～100 nm，表明在AgNPs的表面形成了PDA膜，同時AgNPs已經(jīng)均勻地分散在電極表面。

圖10 AgNPs/GCE（A）、PDA/ GCE（B）、PDA@AgNPs/GCE（C）修飾電極的掃描電鏡圖和粒徑分布圖Fig.10 SEM images and particle size distribution of AgNPs/GCE (A),PDA/GCE (B) and PDA@AgNPs/GCE (C)

2.7 性能測試

2.7.1 重復(fù)性

測試重復(fù)性：用同一支PDA@AgNPs/GCE對濃度為5×10-6mol/L的CPZ溶液，連續(xù)6 次掃描測定，測得CPZ響應(yīng)電流的相對標準偏差（relative standard deviation，RSD）為5.0%（n=6），表明PDA@AgNPs/GCE有較好的測試重復(fù)性。

制作重復(fù)性：按照相同條件制備6 支PDA@AgNPs/GCE，記錄測定5×10-6mol/L的CPZ溶液的響應(yīng)電流值，測得CPZ響應(yīng)電流的RSD為4.8%（n=6），表明PDA@AgNPs/GCE有良好的制作重復(fù)性。

2.7.2 穩(wěn)定性

制備3 支PDA@AgNPs/GCE，第1天測定濃度為5×10-6mol/L的CPZ溶液并記錄其峰電流值，然后置于4 ℃冰箱中避光保存7 d，測得CPZ的氧化峰電流值能達到初始值的90.8%，表明PDA@AgNPs/GCE在7 d內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7.3 干擾實驗

考察常見化合物和離子對5×10-6mol/L CPZ測定的干擾。100 倍濃度的葡萄糖，50 倍濃度的K＋、Na＋、Ca2＋、Mg2＋、Fe3＋、Cl-、、均不干擾CPZ的測定；但在考察其他酚噻嗪類藥物時發(fā)現(xiàn)，相同濃度的異丙嗪和奮乃靜均會在CPZ的氧化峰電位附近產(chǎn)生氧化峰，表明該電化學(xué)法可對樣品中是否含有此類酚噻嗪類藥物進行定性分析。當樣品中不含有這2 種物質(zhì)時，該電化學(xué)法可準確測定樣品中CPZ的含量；如果樣品中含有異丙嗪和奮乃靜，在樣品前處理時需排除才能得到CPZ的準確含量。

2.7.4 線性范圍和檢出限

在最優(yōu)條件下，考察不同濃度的C P Z 溶液在PDA@AgNPs/GCE上的電流響應(yīng)。結(jié)果如圖11所示，CPZ氧化峰的響應(yīng)電流值與物質(zhì)的濃度在5.0×10-8～1.0×10-5m o l/L 范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，線性方程為I=2.2528C-0.0082（R2=0.991），檢出限（RSN=3）為1.7×10-8mol/L。對文獻報道的CPZ電化學(xué)檢測方法進行比較，如表1所示，與其他方法相比，本SWV法修飾材料的制備條件溫和、簡單價廉，傳感器的制備時間短，檢出限較低。

圖11 PDA@AgNPs/GCE在不同濃度CPZ溶液中的SWV圖Fig.11 SWV plots of PDA@AgNPs/GCE in CPZ solutions of different concentrations

表1 CPZ電化學(xué)測定方法的比較Table 1 Comparation of different electrochemical sensors for CPZ detection

2.8 樣品分析與回收率的測定

取購于超市的豬肉、雞肉、牛肉樣品，按照1.3.3節(jié)進行前處理，在最優(yōu)條件下利用SWV法進行檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品溶液均未出現(xiàn)CPZ的特征氧化峰，表明所測樣品均不含CPZ。在以上各樣品中分別添加低、中、高3 個不同濃度的CPZ標準溶液，并用色譜方法進行驗證，結(jié)果如表2所示。豬肉、雞肉、牛肉樣品的加標回收率分別為84.9%～88.8%、79.8%～93.8%、80.6%～93.9%，RSD分別為4.0%～6.9%、1.9%～5.1%、3.9%～6.4%。根據(jù)GB/T 20763—2006《豬腎和肌肉組織中乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、咔唑心安殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》中液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對以上3 種畜禽肉中CPZ進行測定，結(jié)果與該電化學(xué)方法的測定結(jié)果一致，表明該電化學(xué)法具有良好的準確度和可信度。

表2 畜禽肉中CPZ回收率測試結(jié)果Table 2 Recoveries of chlorpromazine in spiked livestock and poultry meat

3 結(jié)論

基于DA的自聚反應(yīng)在AgNPs和GCE表面形成PDA膜，使AgNPs均勻分散在GCE表面，形成穩(wěn)定的復(fù)合修飾電極（PDA@AgNPs/GCE），建立了一種測定CPZ含量的SWV檢測方法。為了達到最佳測定效果，對電極修飾材料和修飾方法、CPZ的電化學(xué)測定方法及條件進行優(yōu)化，通過CV法、交流阻抗法和SEM對PDA@AgNPs/GCE進行表征，并對3 種畜禽肉中CPZ的殘留量進行測定。結(jié)果顯示，PDA@AgNPs/GCE具有良好的測試性能，且該修飾電極的制備方法簡單、便于批量制備，可用于畜禽肉中CPZ含量的檢測。